Metilena biru untuk olahraga dan pemulihan: apa yang benar-benar telah diukur

Pada Maret 2022, seorang pelari maraton elite mengunggah dukungan bersponsor untuk pelega tenggorokan metilena biru, dengan mengatakan bahwa produk tersebut "dapat membantu meningkatkan fokus, daya tahan, dan tidur" serta bahwa ia menggunakannya sebelum latihan berat. Pada minggu yang sama, dokter yang dikutip media nasional menggambarkan tren yang lebih luas sebagai influencer yang menelan pembersih akuarium. Tidak satu pun posisi tersebut menjawab pertanyaan yang sebenarnya dimiliki seorang pelari.

Apakah ada yang pernah memberikan metilena biru kepada manusia dan mengukur seberapa jauh, seberapa cepat, atau seberapa baik mereka pulih? Penelusuran untuk artikel ini tidak menemukan satu pun studi terkontrol pada manusia dengan luaran performa olahraga atau pemulihan. Jejak sitasinya mencakup tiga spesies hewan, beberapa preparat laboratorium, dan satu senyawa yang sama sekali bukan metilena biru.

Daya tahan, pemulihan, dan mekanisme adalah klaim yang berbeda

Suatu penanda dapat bergerak ke arah yang berlawanan dari performa, atau berubah tanpa adanya perubahan performa sama sekali. Ini bukan sekadar persoalan teknis: pola persis seperti inilah yang terlihat dalam studi olahraga tentang metilena biru yang paling sering dikutip.

Studi pada anjing menggunakan pewarna yang berbeda

Makalah yang paling sering dikutip mengenai metilena biru dan olahraga adalah studi treadmill Imai dan rekan-rekan tahun 1986 pada anjing sadar. Studi tersebut menguji apakah peningkatan curah jantung selama olahraga bergantung pada keadaan redoks jaringan, dengan menggunakan apa yang dalam metode dijelaskan sebagai "4 mg/kg new methylene blue 3,7-bis(ethylamino)-2,8-dimethylphenazothonium chloride, Eastman Kodak Company". New methylene blue adalah pewarna tiazin yang berbeda, dengan dua gugus etilamino pada posisi tempat metilena biru memiliki dua gugus dimetilamino, dan paling dikenal sebagai pewarna retikulosit. Hasil yang diperoleh dengannya bukanlah hasil yang diperoleh dengan metilena biru.

Studi tersebut tetap penting karena merupakan demonstrasi paling jelas bahwa suatu penanda dan fisiologi dapat berubah secara terpisah. Anjing berlari dalam dua tahap masing-masing 20 menit pada 2.5 lalu 5.0 mph dengan kemiringan 6 persen. Olahraga menggandakan curah jantung dan meningkatkan konsumsi oksigen seluruh tubuh tiga hingga empat kali lipat pada kedua kelompok. Pada kelompok salin, rasio laktat terhadap piruvat arteri meningkat dari 6.0 menjadi 9.97. Pada kelompok perlakuan, rasio tersebut tidak meningkat.

Semua ukuran fungsional tidak berubah. Denyut jantung, tekanan arteri, kontraktilitas ventrikel kiri, dan katekolamin plasma meningkat secara identik pada kedua kelompok, dan hubungan antara curah jantung serta konsumsi oksigen seluruh tubuh secara statistik tidak dapat dibedakan. Para penulis menyimpulkan bahwa perubahan rasio tersebut "tidak berhubungan secara kausal dengan stimulasi sirkulasi yang terjadi selama olahraga ringan hingga sedang."

Rasio tersebut lebih lemah daripada yang terlihat. Nilainya turun karena piruvat meningkat, dari 0.14 menjadi 0.38 mmol per litre, sementara laktat juga meningkat, dari 1.05 menjadi 2.85 mmol per litre. Pada anjing yang diberi pewarna saat beristirahat, konsumsi oksigen sedikit meningkat, pH arteri meningkat, dan karbon dioksida menurun, perubahan yang oleh para penulis disebut "serupa" dengan perubahan akibat 2,4-dinitrophenol, suatu pemutus kopling mitokondria. Kecepatan ditetapkan oleh protokol, sehingga tidak ada anjing yang pernah dibuat berlari hingga kelelahan.

Studi berenang pada tikus, dan dosisnya

Hasil performa pada hewan yang paling kuat berasal dari eksperimen Peng dan rekan-rekan tahun 2025 di Frontiers in Behavioral Neuroscience. Tikus berenang selama sepuluh malam berturut-turut dengan beban setara 3 persen berat badan yang diikatkan pada ekornya, setidaknya dua jam per malam, hingga mencapai titik akhir kelelahan yang dinilai. Setelah setiap sesi, satu kelompok menerima metilena biru secara intranasal dan kelompok lainnya menerima salin dengan cara yang sama. Tikus yang diberi perlakuan berenang lebih lama sebelum memenuhi kriteria kelelahan, bergerak lebih banyak di arena terbuka pada hari berikutnya, menunjukkan lebih sedikit perilaku mirip kecemasan, serta mengalami lebih sedikit kehilangan neuron, gangguan mielin, dan fragmentasi mitokondria di hipokampus dan striatum.

Dosisnya secara rutin dihilangkan dalam penceritaan ulang. Larutan 1 persen adalah 10 mg/mL; sepuluh mikroliter dimasukkan ke setiap lubang hidung, sehingga totalnya sekitar 20 mikroliter, atau 0.2 mg per tikus per sesi. Pemberian intranasal dipilih untuk mencapai otak melalui jalur olfaktorius dan trigeminal, dan para penulis menyatakan bahwa studi mereka "tidak mengukur reaksi oksidatif, inflamasi, atau kadar hormon di otak dan plasma." Langkah berikutnya yang mereka rekomendasikan adalah mempelajari "efek menyeluruh suplementasi MB sebelum olahraga."

Itulah yang ingin diuji oleh seorang pelari. Protokol ini memberikan senyawa setelah aktivitas untuk membatasi cedera. Berenang lebih lama pada hari berikutnya dalam model tikus yang kelelahan adalah temuan tentang pemulihan, bukan temuan tentang manusia terlatih yang mengonsumsi dosis sebelum sesi.

Dari mana kata "daya tahan" berasal

Studi pada mencit yang biasanya digambarkan menunjukkan peningkatan daya tahan adalah penelitian Gureev dan rekan-rekan tahun 2016 di Neuroscience Research. Mencit minum air yang mengandung metilena biru sebesar 15 mg/kg per hari selama 60 hari. "Daya tahan fisik" yang dimaksud adalah string test, atau palang horizontal, yang menilai kekuatan genggaman, koordinasi motorik, dan keseimbangan secara bersamaan. Mencit paruh baya tanpa perlakuan mendapat skor 1.17; mencit yang diberi perlakuan mendapat skor 2.23, mendekati tingkat mencit dewasa. Mencit dewasa tidak mengalami peningkatan dalam ukuran apa pun.

Konsumsi oksigen saat istirahat meningkat sekitar 15 persen. Produksi hidrogen peroksida dalam mitokondria otak meningkat dari 94.9 menjadi 176.7 pmol per minute per milligram of protein. DNA mitokondria meningkat 2.3 kali lipat. Itu adalah peningkatan pergantian mitokondria pada hewan yang menua, disertai sinyal oksidatif yang mendorongnya. Itu bukan demonstrasi bahwa atlet sehat akan menjadi lebih cepat.

Eksperimen sel, dan batas kesimpulannya

Louters dan rekan-rekan melaporkan pada 2005 bahwa metilena biru mengaktifkan transport glukosa melalui GLUT1 pada sel fibroblas L929, hingga 800 persen pada 50 mikromolar. Sebuah studi lanjutan tahun 2008 menunjukkan bahwa methyl-beta-cyclodextrin berikatan langsung dengan metilena biru dan menghambat efek tersebut. Itu adalah temuan pada satu lini sel yang belum pernah ditunjukkan pada otot rangka.

Mekanismenya sendiri masih diperdebatkan

Dalam studi Tretter dan rekan-rekan tahun 2014 mengenai mitokondria otak marmut yang diisolasi, metilena biru pada 100 nanomolar hingga 1 mikromolar meningkatkan konsumsi oksigen saat istirahat, memulihkan potensial membran dan produksi ATP ketika Kompleks I atau Kompleks III dihambat, serta meningkatkan produksi hidrogen peroksida. Yang terpenting, "respirasi yang distimulasi ADP tidak terpengaruh oleh MB dengan substrat mana pun" yang diuji. Respirasi terkopel maksimal, yang menjadi dasar klaim terkait olahraga, tidak meningkat.

Dalam studi lanjutan Gureev dan rekan-rekan tahun 2019, laboratorium yang sama yang menghasilkan temuan pada mencit menemukan bahwa metilena biru "gagal memulihkan potensial membran dan respirasi yang dihambat oleh antimycin" pada mitokondria otak mencit, dan menyimpulkan bahwa penerima elektron adalah situs Qo pada Kompleks III, bukan bagian lain yang lebih hilir. Gambaran sederhana tentang pewarna yang membawa elektron melewati rantai respirasi yang terblokir tidak berlaku pada setiap preparat.

Tidak satu pun dari temuan ini menyingkirkan kemungkinan adanya efek pada manusia. Namun, temuan-temuan tersebut berarti bahwa argumen yang hanya mengandalkan mekanisme, dengan kimia mitokondria yang masuk akal diperlakukan sebagai suatu hasil, memiliki masalah di dalam mekanismenya sendiri.

Dua masalah desain yang harus diatasi oleh uji coba pada manusia

Metilena biru sulit dibutakan. Senyawa ini mengubah urin menjadi biru-hijau dan orang akan menyadarinya. Uji silang tahun 2017 pada gangguan bipolar menyatakannya secara langsung: "Kami memilih desain ini karena metilena biru mengubah warna urin, sehingga kami tidak dapat menggunakan plasebo tradisional." Uji tersebut membandingkan dosis rendah dengan dosis tinggi, bukan dengan pil inert.

Masalah ini lebih besar dalam penelitian olahraga daripada di hampir semua bidang lain, karena persepsi usaha dan performa uji waktu sangat responsif terhadap ekspektasi. Uji coba yang tidak dapat membutakan pesertanya telah mengukur keyakinan hampir sama besarnya dengan mengukur obat.

Ada solusi yang telah didokumentasikan. Uji pencitraan acak tahun 2016 pada 26 orang dewasa sehat memberikan 280 mg metilena biru berstandar USP, sekitar 4 mg/kg, atau plasebo berupa pewarna makanan FD&C blue no. 2 dalam kapsul buram yang identik, serta meminta peserta untuk buang air kecil sebelum pemberian dosis tetapi tidak lagi setelahnya, "untuk menghindari terganggunya pembutaan akibat perubahan warna urin."

Masalah kedua adalah dosis dan rute pemberian. Metilena biru oral sebagian diekskresikan dalam urin, dan paparan otak setelah pemberian oral kira-kira setengah dari paparan setelah pemberian intravena, sebagaimana dicatat kelompok Gureev ketika mengutip penelitian farmakokinetik Peter dan rekan-rekan. Pemberian intranasal pada tikus tidak dapat langsung diterjemahkan menjadi kapsul, dan rentang dosis manusia dalam penelitian yang dipublikasikan adalah 0.5 hingga 4 mg/kg, dengan uji pencitraan tahun 2016 mencatat efek yang berlawanan di atas 10 mg/kg.

Studi pada manusia mengukur hal lain

Dua eksperimen terkontrol pada manusia muncul dalam penceritaan ulang topik ini, dan tidak satu pun mengukur olahraga. Dalam uji pencitraan tahun 2016, waktu reaksi kewaspadaan tidak menunjukkan interaksi obat-berdasarkan-waktu yang signifikan, dengan plasebo pada 230 lalu 220 milidetik dan metilena biru pada 230 lalu 230 milidetik, P = .43. Dalam sebuah studi intravena tahun 2023 pada delapan perempuan sehat, aliran darah serebral dan laju metabolisme oksigen serebral keduanya justru menurun, bukan meningkat. Panduan bukti energi dan kelelahan membahas keduanya.

Jika Anda tetap memutuskan untuk mencobanya

Eksperimen pada diri sendiri tidak akan menetapkan efikasi, tetapi dapat dicatat dengan cukup baik agar Anda tidak menipu diri sendiri. Catat produk dan lot, rute pemberian, waktu sebelum latihan, sesi yang tepat beserta jarak atau beban, persepsi usaha pada skala bernomor, tidur, kafein dan obat apa pun, serta nyeri pada hari berikutnya dan performa 48 jam kemudian dalam jenis sesi yang sama. Lalu ulangi sesi yang sama tanpa metilena biru.

Satu orang yang melacak satu variabel tidak dapat memisahkan efek obat dari kebugaran, motivasi, cuaca, dan variasi normal latihan. Bagian subjektif adalah bagian yang paling mungkin menyesatkan.

Metilena biru juga memiliki risiko yang tidak berkaitan dengan performa. Senyawa ini menghambat monoamine oxidase A, sehingga relevan bila digunakan bersama antidepresan resep dan obat serotonergik lainnya, serta dikontraindikasikan pada defisiensi G6PD karena risiko anemia hemolitik. Panduan keamanan membahas keduanya, dan panduan interaksi obat mengelompokkan pertanyaan mengenai obat berdasarkan kelas. Jika Anda berkompetisi di bawah aturan antidoping, periksa aturannya dan jangan mengandalkan klaim peritel.

Bahan yang digunakan adalah variabel dalam setiap studi di atas

Setiap dosis yang dijelaskan di sini adalah jumlah terukur dari senyawa yang ditentukan dengan jelas. Sebotol produk dari penjual yang tidak terverifikasi bukanlah hal yang sama. Kesesuaian dengan monograf USP adalah standar yang dapat diperiksa pembeli, dan bahan yang tidak sesuai kemungkinan merupakan grade tekstil, yang dapat mengandung pengotor organik seperti Azure B, pelarut residu, dan logam berat pada kadar yang dibatasi oleh spesifikasi farmasi. Apa yang ditetapkan dan tidak ditetapkan oleh penunjukan USP membahas grade tersebut, dan metode pengujian pengotor membahas apa yang dicari laboratorium.

Sebagian besar penjual yang menggambarkan produk sebagai telah diuji pihak ketiga hanya melakukan skrining logam berat, lalu menampilkan satu panel tersebut seolah-olah memenuhi keseluruhan spesifikasi. Blupreme menguji keseluruhan spesifikasi USP: identitas, kemurnian, pengotor organik, pelarut residu, pengotor unsur, residu pemijaran, batas mikroba, dan endotoksin bakteri. Setiap lot dikirim dengan certificate of analysis, dan cara membacanya dengan benar berarti mencocokkan nomor lot serta laboratorium dengan botol yang Anda pegang.

Kesimpulan

Belum ada studi terkontrol pada manusia yang mengukur metilena biru terhadap daya tahan, kecepatan, kekuatan, atau pemulihan. Studi pada anjing yang dikutip terkait efek laktat menggunakan pewarna yang berbeda dan tidak menemukan perbedaan performa. Studi berenang pada tikus memberikan dosis 0.2 mg secara intranasal setelah aktivitas. Studi pada mencit yang menjadi dasar penggunaan kata "daya tahan" menggunakan tes genggaman dan koordinasi pada hewan yang menua, dan mekanismenya masih diperdebatkan dalam literatur mitokondria.

Yang tersisa adalah mekanisme yang masuk akal, sekumpulan hasil kecil pada hewan, satu masalah desain studi dengan solusi yang telah didokumentasikan, dan tidak adanya data performa pada manusia. Tinjauan bukti manfaat pada manusia menempatkan klaim olahraga berdampingan dengan literatur manusia lainnya, dan perpustakaan penelitian mengindeks studi yang mendasari setiap klaim.

Jika Anda sedang berlatih untuk suatu tujuan, variabel dengan dukungan bukti paling kuat adalah latihan itu sendiri.