Metilensko modrilo za vadbo in regeneracijo: kaj je bilo dejansko izmerjeno

Marca 2022 je vrhunska maratonka objavila sponzorirano priporočilo pastile z metilenskim modrilom. Navedla je, da »lahko pomaga izboljšati osredotočenost, vzdržljivost in spanec« ter da jo uporablja pred zahtevnimi treningi. Istega tedna so zdravniki, citirani v nacionalnih medijih, širši trend opisovali kot vplivneže, ki zaužijejo čistilo za akvarije. Nobeno od teh stališč ne odgovori na vprašanje, ki tekača dejansko zanima.

Ali je kdo ljudem dajal metilensko modrilo in meril, kako daleč ali hitro so zmogli oziroma kako dobro so se regenerirali? Pri iskanju za ta članek nismo našli niti ene kontrolirane študije pri ljudeh z izidom, povezanim z zmogljivostjo pri vadbi ali regeneracijo. Sled citatov vključuje tri živalske vrste, več laboratorijskih preparatov in eno spojino, ki sploh ni metilensko modrilo.

Vzdržljivost, regeneracija in mehanizem so različne trditve

Kazalnik se lahko spremeni v nasprotni smeri kot zmogljivost ali pa se spremeni, ne da bi se zmogljivost sploh spremenila. To ni zgolj tehnična podrobnost: prav tak vzorec je pokazala najpogosteje citirana študija metilenskega modrila in vadbe.

Študija na psih je uporabila drugo barvilo

Članek, ki ga najpogosteje navajajo v povezavi z metilenskim modrilom in vadbo, je študija Imaija in sodelavcev iz leta 1986 na budnih psih na tekalni stezi. Preverjali so, ali je povečanje minutnega volumna srca med vadbo odvisno od redoks stanja tkiv, pri čemer so uporabili snov, v metodah opisano kot »4 mg/kg novega metilenskega modrila 3,7-bis(etilamino)-2,8-dimetilfenazotonijev klorid, Eastman Kodak Company«. Novo metilensko modrilo je drugo tiazinsko barvilo z dvema etilamino skupinama na mestih, kjer ima metilensko modrilo dve dimetilamino skupini. Najbolj je znano kot barvilo za retikulocite. Rezultat, pridobljen z njim, ni rezultat, pridobljen z metilenskim modrilom.

Študija je kljub temu pomembna, saj najjasneje pokaže, da se kazalnik in fiziološki odziv lahko spreminjata ločeno. Psi so tekli v dveh 20-minutnih stopnjah pri hitrosti 2.5 in nato 5.0 mph na 6-odstotnem naklonu. Vadba je v obeh skupinah podvojila minutni volumen srca in povečala porabo kisika v celotnem telesu za tri- do štirikrat. V skupini, ki je prejemala fiziološko raztopino, se je arterijsko razmerje med laktatom in piruvatom povečalo s 6.0 na 9.97. V skupini, ki je prejemala barvilo, se ni povečalo.

Nobena funkcionalna meritev se ni razlikovala. Srčna frekvenca, arterijski tlak, kontraktilnost levega prekata in kateholamini v plazmi so se v obeh skupinah povečali enako, razmerje med minutnim volumnom srca in porabo kisika v celotnem telesu pa se statistično ni razlikovalo. Avtorji sklepajo, da spremembe razmerja »niso vzročno povezane s spodbujanjem krvnega obtoka med blago do zmerno vadbo«.

Razmerje je manj povedno, kot se zdi. Znižalo se je, ker se je piruvat povečal z 0.14 na 0.38 mmol na liter, medtem ko se je povečal tudi laktat, in sicer z 1.05 na 2.85 mmol na liter. Pri psih, ki so barvilo prejeli v mirovanju, se je poraba kisika rahlo povečala, arterijski pH se je zvišal, ogljikov dioksid pa se je zmanjšal. Avtorji te spremembe označujejo kot »podobne« učinkom 2,4-dinitrofenola, razklopnika mitohondrijske oksidativne fosforilacije. Hitrost je bila določena s protokolom, zato noben pes ni tekel do izčrpanosti.

Študija plavanja pri podganah in uporabljeni odmerek

Najmočnejši rezultat glede zmogljivosti pri živalih izhaja iz poskusa Penga in sodelavcev iz leta 2025 v reviji Frontiers in Behavioral Neuroscience. Podgane so deset zaporednih noči plavale z utežmi, pritrjenimi na repe, ki so tehtale 3 odstotke njihove telesne mase. Plavale so vsaj dve uri na noč, dokler niso dosegle izčrpanosti, določene po merilih ocenjevanja. Po vsaki vadbi je ena skupina intranazalno prejela metilensko modrilo, druga pa na enak način fiziološko raztopino. Podgane, ki so prejemale metilensko modrilo, so plavale dlje, preden so izpolnile merila izčrpanosti, naslednji dan so se več gibale v preizkusu odprtega polja, kazale so manj vedenja, podobnega tesnobi, ter imele manj izgube nevronov, poškodb mielina in fragmentacije mitohondrijev v hipokampusu in striatumu.

Pri povzemanju študije odmerek pogosto izpustijo. 1-odstotna raztopina vsebuje 10 mg/mL; v vsako nosnico so vnesli deset mikrolitrov, skupaj torej približno 20 mikrolitrov oziroma 0.2 mg na podgano po vsaki vadbi. Intranazalno dajanje izberejo zato, da snov doseže možgane po vohalnih poteh in poteh trigeminalnega živca. Avtorji navajajo, da njihova študija »ni merila oksidativnih reakcij, vnetja ali ravni hormonov v možganih in plazmi«. Kot naslednji korak priporočajo preučevanje »celovitih učinkov dodajanja MB pred vadbo«.

Prav to bi si tekač želel preveriti. V tem protokolu so spojino dajali po naporu, da bi omejili poškodbe. Daljše plavanje naslednji dan v modelu izčrpanih podgan je ugotovitev o regeneraciji, ne pa o treniranem človeku, ki odmerek vzame pred vadbo.

Od kod izvira beseda »vzdržljivost«

Študija na miših, ki jo navadno opisujejo kot dokaz izboljšane vzdržljivosti, je delo Gureeva in sodelavcev iz leta 2016 v reviji Neuroscience Research. Miši so 60 dni pile vodo z metilenskim modrilom v odmerku 15 mg/kg na dan. »Telesna vzdržljivost« je bila ocenjena s preizkusom na vrvici oziroma vodoravnih prečkah, ki skupaj ocenjuje moč prijema, motorično koordinacijo in ravnotežje. Miši srednje starosti, ki niso prejemale spojine, so dosegle oceno 1.17; tiste, ki so jo prejemale, pa 2.23, kar je blizu ravni odraslih miši. Pri odraslih miših ni bilo izboljšanja pri nobeni meritvi.

Poraba kisika v mirovanju se je povečala za približno 15 odstotkov. Nastajanje vodikovega peroksida v možganskih mitohondrijih se je povečalo s 94.9 na 176.7 pmol na minuto na miligram beljakovin. Količina mitohondrijske DNA se je povečala za 2.3-krat. To kaže na povečano obnavljanje mitohondrijev pri starajočih se živalih skupaj z oksidativnim signaliziranjem, ki ga spodbuja. Ne dokazuje pa, da bi zdrav športnik dosegel večjo hitrost.

Celični poskusi in njihove omejitve

Louters in sodelavci so leta 2005 poročali, da metilensko modrilo v fibroblastnih celicah L929 aktivira transport glukoze prek GLUT1, in sicer za do 800 odstotkov pri koncentraciji 50 mikromolar. Nadaljnja študija iz leta 2008 je pokazala, da se metil-beta-ciklodekstrin neposredno veže na metilensko modrilo in prepreči ta učinek. To je ugotovitev o celični liniji, ki v skeletnih mišicah ni bila nikoli potrjena.

Sporen je tudi sam mehanizem

V študiji Tretterja in sodelavcev iz leta 2014 na izoliranih mitohondrijih iz možganov morskih prašičkov je metilensko modrilo pri koncentracijah od 100 nanomolar do 1 mikromolar povečalo porabo kisika v mirovanju, obnovilo membranski potencial in nastajanje ATP ob zaviranju kompleksa I ali kompleksa III ter povečalo nastajanje vodikovega peroksida. Ključno pa je, da »MB pri nobenem od preizkušenih substratov ni vplival na dihanje, spodbujeno z ADP«. Največje dihanje, sklopljeno s tvorbo ATP, na katerem temeljijo trditve o vadbi, se ni povečalo.

V nadaljnji študiji Gureeva in sodelavcev iz leta 2019 je isti laboratorij, ki je izvedel študijo na miših, ugotovil, da metilensko modrilo v mitohondrijih mišjih možganov »ne obnovi membranskega potenciala in dihanja, zavrtih z antimicinom«. Sklenili so, da je sprejemnik elektronov mesto Qo kompleksa III, ne pa kateri od nadaljnjih členov verige. Preprosta predstava, da barvilo prenaša elektrone mimo blokiranega dela dihalne verige, ne velja za vsak preparat.

Nič od tega ne izključuje učinka pri ljudeh. Pomeni pa, da ima argument, ki temelji samo na mehanizmu in verjetno mitohondrijsko kemijo obravnava kot rezultat, težave že znotraj samega mehanizma.

Dve težavi pri zasnovi preskušanja pri ljudeh

Pri metilenskem modrilu je težko zagotoviti slepljenje. Urin obarva modro-zeleno in ljudje to opazijo. Navzkrižno preskušanje pri bipolarni motnji iz leta 2017 je to izrecno navedlo: »To zasnovo smo izbrali, ker metilensko modrilo obarva urin, zato nismo mogli uporabiti običajnega placeba.« V tem preskušanju so primerjali nizek odmerek z visokim, ne pa z inertno tableto.

Pri raziskavah vadbe je ta težava večja kot skoraj kjer koli drugje, saj pričakovanja močno vplivajo na zaznani napor in zmogljivost na kronometru. Preskušanje, ki pri udeležencih ne more zagotoviti slepljenja, v enaki meri kot zdravilo meri tudi prepričanje.

Obstaja dokumentirana rešitev. V randomiziranem preskušanju s slikovnimi preiskavami iz leta 2016 pri 26 zdravih odraslih so dali 280 mg metilenskega modrila kakovosti USP, približno 4 mg/kg, ali placebo iz živilskega barvila FD&C blue no. 2 v enakih neprozornih kapsulah. Udeležence so prosili, naj urinirajo pred odmerkom, nato pa ne več, »da morebitno obarvanje urina ne bi ogrozilo slepljenja«.

Druga težava sta odmerek in način dajanja. Peroralno zaužito metilensko modrilo se deloma izloča z urinom, izpostavljenost možganov po peroralnem dajanju pa je približno polovica izpostavljenosti po intravenskem dajanju, kot navaja Gureevova skupina ob citiranju farmakokinetičnega dela Petra in sodelavcev. Intranazalnega dajanja pri podgani ni mogoče enačiti s kapsulo. Razpon odmerkov pri ljudeh v objavljenih raziskavah je od 0.5 do 4 mg/kg, pri čemer preskušanje s slikovnimi preiskavami iz leta 2016 navaja nasproten učinek pri odmerkih nad 10 mg/kg.

Študije pri ljudeh merijo nekaj drugega

V povzetkih te teme se pojavljata dva kontrolirana poskusa pri ljudeh, vendar nobeden ni meril vadbe. V preskušanju s slikovnimi preiskavami iz leta 2016 reakcijski čas pri nalogi budnosti ni pokazal statistično značilne interakcije med zdravilom in časom: pri placebu je znašal najprej 230 in nato 220 milisekund, pri metilenskem modrilu pa najprej 230 in nato 230 milisekund, P = .43. V študiji intravenskega dajanja iz leta 2023 pri osmih zdravih ženskah sta se pretok krvi skozi možgane in možganska presnovna poraba kisika zmanjšala, ne povečala. Vodnik po dokazih o energiji in utrujenosti obravnava obe študiji.

Če se kljub temu odločite poskusiti

Poskus na sebi ne bo dokazal učinkovitosti, lahko pa ga zabeležite dovolj dobro, da se izognete zavajanju samega sebe. Zapišite izdelek in serijo, način uporabe, čas pred treningom, natančen potek vadbe z razdaljo ali obremenitvijo, zaznani napor na številčni lestvici, spanec, kofein in vsa zdravila ter mišično bolečino naslednji dan in zmogljivost po 48 urah pri enaki vrsti vadbe. Nato enake vadbe ponovite brez njega.

Ena oseba, ki spremlja eno spremenljivko, ne more ločiti učinka zdravila od telesne pripravljenosti, motivacije, vremena in običajnih nihanj pri treningu. Subjektivni del najverjetneje zavaja.

Metilensko modrilo ima tudi tveganja, ki niso povezana z zmogljivostjo. Zavira monoaminooksidazo A, zato je pomembno upoštevati sočasno uporabo predpisanih antidepresivov in drugih serotonergičnih zdravil. Pri pomanjkanju G6PD je kontraindicirano zaradi tveganja za hemolitično anemijo. Varnostni vodnik obravnava obe temi, vodnik po medsebojnem delovanju z zdravili pa vprašanja o zdravilih razvršča po skupinah. Če tekmujete po protidopinških pravilih, preverite pravila, ne pa trditve prodajalca.

Material je spremenljivka v vsaki od zgornjih študij

Vsak tukaj opisani odmerek je bil izmerjena količina določene spojine. Steklenička nepreverjenega prodajalca ni isto. Skladnost z monografijo USP je standard, ki ga kupec lahko preveri. Neskladen material je verjetno namenjen tekstilni uporabi in lahko vsebuje organske nečistote, kot je Azure B, ostanke topil in težke kovine v količinah, ki jih farmacevtska specifikacija omejuje. Kaj oznaka USP potrjuje in česa ne obravnava kakovostni razred, metode preskušanja nečistot pa pojasnjujejo, kaj laboratorij išče.

Večina prodajalcev, ki izdelek opisujejo kot preskušen pri neodvisnem izvajalcu, preverja le težke kovine, nato pa ta posamezni sklop preiskav predstavi, kot da izpolnjuje celotno specifikacijo. Blupreme preverja celotno specifikacijo USP: istovetnost, čistost, organske nečistote, ostanke topil, elementne nečistote, ostanek po žarenju, mikrobiološke mejne vrednosti in bakterijske endotoksine. Vsaka serija je dobavljena s certifikatom o analizi, pravilno branje certifikata pa pomeni preverjanje ujemanja številke serije in laboratorija s stekleničko, ki jo imate.

Bistvo

Nobena kontrolirana študija pri ljudeh ni merila vpliva metilenskega modrila na vzdržljivost, hitrost, moč ali regeneracijo. Študija na psih, ki jo navajajo zaradi učinka na laktat, je uporabila drugo barvilo in ni ugotovila razlike v zmogljivosti. V študiji plavanja pri podganah so po naporu intranazalno dali 0.2 mg. Študija na miših, iz katere izvira beseda »vzdržljivost«, je uporabila preizkus prijema in koordinacije pri starajočih se živalih, mehanizem pa je v literaturi o mitohondrijih sporen.

Ostajajo torej verjeten mehanizem, niz manjših študij na živalih, ena težava pri zasnovi študije z dokumentirano rešitvijo in nobeni podatki o zmogljivosti pri ljudeh. Pregled dokazov o koristih pri ljudeh umešča trditve o vadbi v kontekst preostale literature o ljudeh, raziskovalna knjižnica pa vsebuje kazalo študij, na katerih temelji posamezna trditev.

Če trenirate za določen cilj, je spremenljivka z najmočnejšimi dokazi sam trening.