Metilensko modrilo za vježbanje i oporavak: što je zapravo izmjereno

U ožujku 2022. vrhunska maratonka objavila je sponzoriranu preporuku pastile s metilenskim modrilom, navodeći da ono „može pomoći poboljšati koncentraciju, izdržljivost i san” te da ga uzima prije napornih treninga. Istog su tjedna liječnici citirani u nacionalnom tisku širi trend opisali kao influencere koji uzimaju sredstvo za čišćenje akvarija. Nijedno stajalište ne odgovara na pitanje koje trkača zapravo zanima.

Je li itko ljudima dao metilensko modrilo i izmjerio koliko su daleko ili brzo trčali ili koliko su se dobro oporavili? Pretragama za ovaj članak nije pronađeno nijedno kontrolirano istraživanje na ljudima s ishodom vezanim uz izvedbu pri vježbanju ili oporavak. Trag citirane literature obuhvaća tri životinjske vrste, nekoliko laboratorijskih pripravaka i jedan spoj koji uopće nije metilensko modrilo.

Izdržljivost, oporavak i mehanizam različite su tvrdnje

Pokazatelj se može kretati u smjeru suprotnom od izvedbe ili se promijeniti bez ikakve promjene izvedbe. To nije tehnička sitnica: upravo je takav obrazac zabilježen u najčešće citiranom istraživanju metilenskog modrila pri vježbanju.

Istraživanje na psima koristilo je drugo bojilo

Rad koji se najčešće citira u vezi s metilenskim modrilom i vježbanjem jest istraživanje Imaija i suradnika iz 1986. na pokretnoj traci sa psima u budnom stanju. Ispitivalo se ovisi li porast minutnog volumena srca tijekom vježbanja o redoks-stanju tkiva, uz primjenu onoga što se u metodama opisuje kao „4 mg/kg novog metilenskog modrila 3,7-bis(etilamino)-2,8-dimetilfenazotonijev klorid, Eastman Kodak Company”. Novo metilensko modrilo zasebno je tiazinsko bojilo s dvije etilamino skupine na mjestima gdje metilensko modrilo ima dvije dimetilamino skupine, najpoznatije kao bojilo za retikulocite. Rezultat dobiven njime nije rezultat dobiven metilenskim modrilom.

Istraživanje je ipak važno jer najjasnije pokazuje da se pokazatelj i fiziologija mogu mijenjati neovisno jedno o drugome. Psi su trčali dvije dionice od 20 minuta, prvo pri 2.5, a zatim pri 5.0 mph, uz nagib od 6 posto. Vježbanje je u obje skupine udvostručilo minutni volumen srca i povećalo potrošnju kisika u cijelom tijelu tri do četiri puta. U skupini koja je primila fiziološku otopinu arterijski omjer laktata i piruvata porastao je s 6.0 na 9.97. U tretiranoj skupini nije porastao.

Nijedna funkcionalna mjera nije se razlikovala. Srčana frekvencija, arterijski tlak, kontraktilnost lijeve klijetke i katekolamini u plazmi porasli su jednako u obje skupine, a odnos između minutnog volumena srca i potrošnje kisika u cijelom tijelu nije se statistički razlikovao. Autori zaključuju da promjene omjera „nisu uzročno povezane sa stimulacijom cirkulacije koja se javlja tijekom blagog do umjerenog vježbanja”.

Taj je omjer slabiji dokaz nego što se čini. Pao je zato što je piruvat porastao s 0.14 na 0.38 mmol po litri, dok je i laktat porastao s 1.05 na 2.85 mmol po litri. U pasa koji su primili bojilo u mirovanju potrošnja kisika blago je porasla, arterijski pH porastao je, a ugljikov dioksid se smanjio; autori te promjene nazivaju „sličnima” promjenama koje izaziva 2,4-dinitrofenol, razdvajač mitohondrijske oksidativne fosforilacije. Brzina je bila određena protokolom, pa nijedan pas nije trčao do iscrpljenosti.

Istraživanje plivanja štakora i primijenjena doza

Najsnažniji rezultat o izvedbi životinja potječe iz pokusa Penga i suradnika iz 2025. objavljenog u časopisu Frontiers in Behavioral Neuroscience. Štakori su plivali deset uzastopnih noći s utezima jednakima 3 posto tjelesne mase vezanima za repove, najmanje dva sata po noći, do krajnje točke iscrpljenosti određene sustavom bodovanja. Nakon svakog plivanja jedna je skupina primila metilensko modrilo intranazalno, a druga fiziološku otopinu istim putem. Tretirani štakori plivali su dulje prije nego što su ispunili kriterije iscrpljenosti, sljedećeg su se dana više kretali u otvorenom polju, pokazivali manje ponašanja nalik anksioznosti te imali manji gubitak neurona, manje oštećenja mijelina i manje fragmentacije mitohondrija u hipokampusu i strijatumu.

Doza se redovito izostavlja u prepričavanjima. Otopina od 1 posto sadrži 10 mg/mL; u svaku je nosnicu dano deset mikrolitara, pa je ukupna količina iznosila oko 20 mikrolitara, odnosno 0.2 mg po štakoru nakon svakog plivanja. Intranazalna primjena odabire se kako bi tvar dospjela do mozga olfaktornim i trigeminalnim putovima, a autori navode da njihovo istraživanje „nije mjerilo oksidacijske reakcije, upalu ni razine hormona u mozgu i plazmi”. Kao sljedeći korak preporučuju istražiti „sveobuhvatne učinke suplementacije MB-om prije vježbanja”.

Upravo bi to trkač želio da se ispita. U ovom je protokolu spoj davan nakon napora kako bi se ograničilo oštećenje. Dulje plivanje sljedećeg dana u modelu iscrpljenih štakora nalaz je o oporavku, a ne nalaz o treniranom čovjeku koji uzima dozu prije treninga.

Odakle je došla riječ „izdržljivost”

Istraživanje na miševima koje se obično opisuje kao dokaz poboljšane izdržljivosti jest rad Gureeva i suradnika iz 2016. u časopisu Neuroscience Research. Miševi su 60 dana pili vodu koja je sadržavala metilensko modrilo u dozi od 15 mg/kg dnevno. „Tjelesna izdržljivost” odnosi se na test na užetu, odnosno vodoravnim prečkama, kojim se zajedno ocjenjuju snaga hvata, motorička koordinacija i ravnoteža. Netretirani miševi srednje dobi imali su rezultat 1.17; tretirani miševi 2.23, blizu razine odraslih miševa. Odrasli miševi nisu pokazali poboljšanje ni u čemu.

Potrošnja kisika u mirovanju porasla je oko 15 posto. Proizvodnja vodikova peroksida u mitohondrijima mozga porasla je s 94.9 na 176.7 pmol po minuti po miligramu proteina. Količina mitohondrijske DNA povećala se 2.3 puta. To je pojačana obnova mitohondrija u životinja koje stare, uz oksidacijsku signalizaciju koja je pokreće. To nije dokaz da bi zdrav sportaš bio brži.

Pokusi na stanicama i granice njihovih nalaza

Louters i suradnici izvijestili su 2005. da metilensko modrilo aktivira transport glukoze putem GLUT1 u fibroblastnim stanicama L929, i to do 800 posto pri koncentraciji od 50 mikromolara. Naknadno istraživanje iz 2008. pokazalo je da se metil-beta-ciklodekstrin izravno veže na metilensko modrilo i blokira taj učinak. To je nalaz na staničnoj liniji, koji nikada nije potvrđen u skeletnom mišiću.

I sam je mehanizam predmet rasprave

U istraživanju Trettera i suradnika iz 2014. na izoliranim mitohondrijima mozga zamoraca metilensko modrilo pri koncentracijama od 100 nanomolara do 1 mikromolara povećalo je potrošnju kisika u mirovanju, obnovilo membranski potencijal i proizvodnju ATP-a kada je kompleks I ili kompleks III bio inhibiran te povećalo proizvodnju vodikova peroksida. Ključno je da „MB nije utjecao na disanje stimulirano ADP-om ni s jednim od” ispitanih supstrata. Maksimalno disanje spregnuto sa sintezom ATP-a, na kojem se temelji tvrdnja o vježbanju, nije se povećalo.

U naknadnom istraživanju Gureeva i suradnika iz 2019. isti je laboratorij koji je dobio rezultat na miševima utvrdio da metilensko modrilo „ne uspijeva obnoviti membranski potencijal ni disanje inhibirano antimicinom” u mitohondrijima mozga miševa te zaključio da je akceptor elektrona mjesto Qo kompleksa III, a ne bilo što dalje niz lanac. Jednostavna predodžba prema kojoj bojilo prenosi elektrone mimo blokiranog respiracijskog lanca ne vrijedi u svakom pripravku.

Ništa od toga ne isključuje učinak na ljude. No to znači da argument koji se temelji samo na mehanizmu, u kojem se vjerodostojna mitohondrijska kemija tretira kao rezultat, ima probleme unutar samog mehanizma.

Dva problema ustroja koja bi ispitivanje na ljudima moralo riješiti

Kod metilenskog modrila teško je održati zaslijepljenost. Ono oboji mokraću plavozeleno, a ljudi to primijete. U ukriženom ispitivanju iz 2017. u osoba s bipolarnim poremećajem to je izravno navedeno: „Odabrali smo ovaj ustroj jer metilensko modrilo mijenja boju mokraće, pa nismo mogli koristiti tradicionalni placebo.” U tom se ispitivanju niska doza uspoređivala s visokom, a ne s inertnom tabletom.

Taj je problem u istraživanjima vježbanja izraženiji nego gotovo bilo gdje drugdje jer očekivanja snažno utječu na subjektivni napor i izvedbu u testu na vrijeme. Ispitivanje u kojem sudionici ne mogu biti zaslijepljeni mjeri uvjerenje jednako koliko i lijek.

Postoji dokumentirano rješenje. U randomiziranom ispitivanju snimanjem iz 2016. na 26 zdravih odraslih osoba davano je 280 mg metilenskog modrila kvalitete USP, oko 4 mg/kg, ili placebo od prehrambenog bojila FD&C blue no. 2 u jednakim neprozirnim kapsulama. Od sudionika se tražilo da mokre prije uzimanja doze, ali ne i ponovno nakon toga, „kako bi se izbjeglo narušavanje zaslijepljenosti zbog bilo kakvog obojenja mokraće”.

Drugi su problem doza i put primjene. Oralno primijenjeno metilensko modrilo djelomično se izlučuje mokraćom, a izloženost mozga nakon oralne primjene otprilike je upola manja nego nakon intravenske primjene, kako navodi Gureevljeva skupina citirajući farmakokinetički rad Petera i suradnika. Intranazalna primjena u štakora ne može se izravno preslikati na kapsulu, a raspon doza za ljude u objavljenim radovima iznosi od 0.5 do 4 mg/kg, pri čemu je u ispitivanju snimanjem iz 2016. zabilježen suprotan učinak iznad 10 mg/kg.

Istraživanja na ljudima mjere nešto drugo

U prepričavanjima ove teme pojavljuju se dva kontrolirana pokusa na ljudima, a nijedan nije mjerio vježbanje. U ispitivanju snimanjem iz 2016. vrijeme reakcije u testu budnosti nije pokazalo značajnu interakciju lijeka i vremena: uz placebo iznosilo je prvo 230, a zatim 220 milisekundi, dok je uz metilensko modrilo iznosilo prvo 230, a zatim 230 milisekundi, P = .43. U istraživanju intravenske primjene iz 2023. na osam zdravih žena protok krvi kroz mozak i stopa metabolizma kisika u mozgu smanjili su se, umjesto da porastu. Vodič kroz dokaze o energiji i umoru obrađuje oba istraživanja.

Ako ga ipak odlučite isprobati

Samostalni pokus neće dokazati učinkovitost, ali može se zabilježiti dovoljno dobro da izbjegnete samozavaravanje. Zabilježite proizvod i seriju, put primjene, vrijeme uzimanja prije treninga, točan trening s udaljenošću ili opterećenjem, subjektivni napor na brojčanoj ljestvici, san, kofein i sve lijekove te bolnost sljedećeg dana i izvedbu nakon 48 sati u istom tipu treninga. Zatim ponovite iste treninge bez njega.

Jedna osoba koja prati jednu varijablu ne može razdvojiti učinak lijeka od tjelesne spremnosti, motivacije, vremenskih uvjeta i uobičajenih oscilacija u treningu. Subjektivni dio najlakše može zavarati.

Metilensko modrilo nosi i rizike koji nemaju veze s izvedbom. Inhibira monoaminooksidazu A, što je važno pri istodobnoj primjeni propisanih antidepresiva i drugih serotonergičkih lijekova, a kontraindicirano je kod nedostatka G6PD-a zbog rizika od hemolitičke anemije. Vodič za sigurnost obrađuje obje teme, a vodič za interakcije s lijekovima razvrstava pitanja o lijekovima prema skupinama. Ako se natječete prema antidopinškim pravilima, provjerite pravila, umjesto da se oslanjate na tvrdnju prodavatelja.

Materijal je varijabla u svakom gore navedenom istraživanju

Svaka ovdje opisana doza bila je izmjerena količina točno određenog spoja. Bočica od neprovjerenog prodavatelja nije isto. Sukladnost s monografijom USP-a standard je koji kupac može provjeriti, a materijal koji nije sukladan vjerojatno je tekstilne kvalitete te može sadržavati organske nečistoće poput Azure B, ostatna otapala i teške metale u količinama koje farmaceutska specifikacija ograničava. Što oznaka USP potvrđuje, a što ne obrađuje kvalitetu, a metode ispitivanja nečistoća objašnjavaju što laboratorij traži.

Većina prodavatelja koji proizvod opisuju kao ispitan u neovisnom laboratoriju provjerava samo teške metale, a zatim taj jedan skup ispitivanja prikazuje kao da zadovoljava cijelu specifikaciju. Blupreme ispituje cjelokupnu specifikaciju USP-a: identitet, čistoću, organske nečistoće, ostatna otapala, elementarne nečistoće, ostatak nakon žarenja, mikrobiološke granice i bakterijske endotoksine. Svaka se serija isporučuje s certifikatom analize, a pravilno čitanje tog certifikata znači provjeriti odgovaraju li broj serije i laboratorij bočici koju držite.

Zaključak

Nijedno kontrolirano istraživanje na ljudima nije mjerilo učinak metilenskog modrila na izdržljivost, brzinu, snagu ili oporavak. Istraživanje na psima koje se citira zbog učinka na laktat koristilo je drugo bojilo i nije utvrdilo razliku u izvedbi. U istraživanju plivanja štakora primijenjeno je 0.2 mg intranazalno nakon napora. Istraživanje na miševima iz kojeg potječe riječ „izdržljivost” koristilo je test hvata i koordinacije u životinja koje stare, a mehanizam je predmet rasprave u literaturi o mitohondrijima.

Preostaju, dakle, vjerodostojan mehanizam, skup rezultata iz malih istraživanja na životinjama, jedan problem ustroja istraživanja s dokumentiranim rješenjem i nikakvi podaci o ljudskoj izvedbi. Pregled dokaza o koristima za ljude stavlja tvrdnje o vježbanju uz ostatak literature o ljudima, a istraživačka knjižnica popisuje istraživanja na kojima se temelji svaka tvrdnja.

Ako trenirate za neki cilj, varijabla s najsnažnijim dokazima jest sam trening.