Metilensko plavo naspram NAD+ pristupa: mehanizmi, dokazi i tvrdnje o kombinovanju

Metilensko plavo i suplementi koji se prodaju kao sredstva za povećanje NAD+ objašnjavaju se pomoću istih pojmova: mitohondrije i ćelijska energija. Nijedan od tih opisa ne govori vam šta proizvod zapravo radi.

Ova dva pristupa deluju na različite promenljive. Jedan pokušava da promeni količinu NAD+ u vašim ćelijama. Drugi menja odnos između njegova dva oblika. To nisu dva puta do istog cilja.

Dve veličine koje se stalno mešaju

NAD+ je koenzim. Prihvata par elektrona u obliku hidridnog jona i postaje NADH. Kada NADH preda te elektrone dalje, ponovo postaje NAD+. Ćelije neprestano koriste ovaj ciklus: tako energija izdvojena iz hrane dospeva do proteinske mašinerije koja stvara ATP.

Pošto su NAD+ i NADH dva stanja istog molekula, u ćeliji postoje dve zasebne veličine koje vredi pratiti. Prva je ukupna zaliha: koliko NAD+ i NADH postoji zajedno. Druga je odnos između njih, koji opisuje koliko su prenosioci elektrona trenutno opterećeni.

Akumulaciono jezero jasno pokazuje tu razliku. Zapremina vode iza brane predstavlja zalihu. Raspodela između vode zadržane uzvodno i vode ispuštene nizvodno predstavlja odnos. Taj odnos možete povećati bez dodavanja ijednog litra, otvaranjem ustave. To nije metafora za ono što metilensko plavo radi. Bliže je doslovnom opisu.

Pristup zasnovan na snabdevanju

Suplementi sa prekursorima NAD+, uključujući nikotinamid ribozid, nikotinamid mononukleotid i nikotinamid, predstavljaju gradivni materijal. Ćelije stvaraju NAD+ putem recikliranja, koji se naziva put ponovne upotrebe, a prekursori ulaze u taj put. Cilj je povećanje ukupne zalihe.

Kod životinja je to dobro utvrđeno: u mnogim modelima količina NAD+ u tkivima opada sa starenjem i metaboličkim bolestima, a davanje prekursora uglavnom je povećava. Kod ljudi su nalazi uži. Ispitivanja na ljudima zaista pokazuju da ova jedinjenja povećavaju izmerene nivoe NAD+ u krvi. Ono što nisu pokazala jeste dosledno poboljšanje nekog kliničkog ishoda, odnosno onoga što bi osoba primetila ili što je ispitivanje osmišljeno da meri.

„Nivoi NAD+ su porasli“ predstavlja merenje nečega unutar tela. To nije nalaz o tome kako se neko osećao, kretao ili oporavljao.

Šta metilensko plavo radi umesto toga

Metilensko plavo nije prekursor. To je redoks boja, dovoljno stara da se u medicini koristi znatno duže od jednog veka, a njene odobrene primene uže su od onih koje se istražuju.

Unutar ćelije, enzimi zavisni od flavina redukuju ga u bezbojni oblik, leukometilensko plavo, koji se zatim ponovo oksiduje. Elektroni koji bi prošli kroz kompleks I, prvu stanicu respiratornog lanca mogu se umesto toga preneti sa NADH preko metilenskog plavog. NADH postaje NAD+.

Odnos raste. Ukupna zaliha se ne povećava.

Studija na pacovima koja je ispitivala srce kod dijabetesa izmerila je to direktno u izolovanim srčanim mitohondrijama. Dodavanje metilenskog plavog u koncentracijama od 6 do 18 mikromola po litru tokom oksidacije masnih kiselina izazvalo je pad NADH i odnosa NADH prema NAD+ koji je zavisio od doze. Apsolutna količina NAD+ reagovala je znatno manje nego NADH, što biste i očekivali od jedinjenja koje jedan oblik pretvara u drugi, umesto da stvara dodatne količine bilo kog od njih.

Važno je gde ti elektroni završavaju. U izolovanim mitohondrijama mozga, metilensko plavo u koncentracijama od 100 nanomola po litru do 1 mikromola po litru poboljšalo je proizvodnju energije kada je respiratorni lanac bio inhibiran, a istovremeno je povećalo proizvodnju vodonik-peroksida i smanjilo njegovo uklanjanje u svim ispitanim uslovima. Autori nastanak vodonik-peroksida pripisuju direktnoj redukciji kiseonika redukovanim metilenskim plavim. Elektroni koji ovim putem napuštaju NADH ne nestaju. Završavaju na kiseoniku.

Zasebna studija na tkivu Ahilove tetive jasno navodi ovu razliku. Metilensko plavo je obnovilo ravnotežu NAD+/NADH i povećalo proizvodnju ATP u povređenim tenocitima i u modelu tendinopatije kod pacova, a rad beleži da ukupna zaliha NAD nije pokazala značajnu promenu.

Šta pokazuju eksperimenti na tkivima i životinjama

Četiri eksperimenta tokom četiri decenije prate istu ideju i iznova pokazuju njene granice.

U eksperimentu sa hroničnim davanjem alkohola pacovima, etanol je smanjio i citosolni i mitohondrijski odnos NAD+/NADH u jetri. Dodavanje metilenskog plavog u ishranu uglavnom je sprečilo tu promenu. Nije smanjilo masnu jetru koju je etanol izazvao. Ispravljanje odnosa nije ispravilo ishod. Taj rezultat iz 1985. vredi imati na umu pre bilo kakve tvrdnje da je promena redoks stanja mehanizam koji stoji iza koristi.

U ćelijama jetre i miševima na ishrani bogatoj mastima, metilensko plavo je povećalo odnos NAD+/NADH, povećalo SIRT1, smanjilo acetilaciju PGC-1alpha, aktiviralo AMPK i smanjilo nakupljanje masti u jetri. Ovde se ishod zaista menjao zajedno sa odnosom. Isti rad pokazuje da efekat nije monoton: tri miligrama po kilogramu dnevno povećala su sadržaj mitohondrijske DNK efikasnije nego deset, dok su potrošnja kiseonika i signalizacija preko AMPK rasle sa dozom.

U srcu kod dijabetesa, metilensko plavo davano u vodi za piće tokom jedanaest nedelja smanjilo je odnos NADH prema NAD+ u srčanim mitohondrijama i povećalo aktivnost sirtuina 3. Acetilacija lizina smanjila se na 83 mesta u 34 proteina, pretežno u onima povezanim sa transportom i oksidacijom masnih kiselina. Ejekciona frakcija se poboljšala. Ali respiracija koju podržava kompleks I nije obnovljena. Eksperiment sa isključenim genom razdvojio je dva efekta koja se lako poistovećuju: promena odnosa odvijala se uglavnom bez sirtuina 3, dok je deacetilacija zavisila od njega.

U studiji tetive, metilensko plavo je primenjeno dok je kompleks I bio hemijski blokiran rotenonom. I dalje je obnavljalo ravnotežu NAD+, ali i dalje nije sprečavalo oksidativni stres, degeneraciju matriksa i gubitak vijabilnosti ćelija. Obnavljanje odnosa nije bilo dovoljno da se tkivo oporavi.

List za štampanje sa punim referencama koristi iste redove.

Zašto se sirtuini uvode u ovu raspravu

Sirtuini uklanjaju acetil-grupe sa proteina i pri tome troše NAD+. Njihova aktivnost reaguje na dostupnost NAD+, pa svako jedinjenje koje menja tu dostupnost menja i aktivnost sirtuina kao posledicu.

Na tome se zasniva većina marketinga za „metilensko plavo za NAD+“. Tu se ujedno javlja i propust u logici. Promena odnosa može povećati aktivnost sirtuina. Iz toga ne sledi da proizvod obezbeđuje NAD+, niti da je efekat jednak uzimanju prekursora. Redoks tumačenje ovih merenja ima sopstvene zamke, o kojima vredi pročitati pre nego što prihvatite bilo koji od tih prikaza.

Šta je ispitano kod ljudi

Metilensko plavo se decenijama klinički koristi u akutnim stanjima uz nadzor: kod methemoglobinemije, neurotoksičnosti povezane sa ifosfamidom i izrazito niskog krvnog pritiska tokom operacije. To su uske primene pod nadzorom, a ne dokazi za svakodnevnu oralnu upotrebu radi poboljšanja sposobnosti.

Pretragama za ovaj članak nije pronađena studija na ljudima koja je merila metabolite NAD+ nakon primene metilenskog plavog kod zdravih dobrovoljaca. Navedeni nalazi potiču iz izolovanih mitohondrija, ćelija u kulturi, tkiva pacova i eksplantata ljudskog tkiva. Eksplantirana tetiva održavana u životu u laboratorijskoj posudi koristan je korak dalje od ćelijske linije. I dalje nije osoba.

Literatura o prekursorima zaista obuhvata ljude, a rezultati su skromni. NAD+ u krvi raste. Klinički ishodi su neujednačeni, a efekti uglavnom mali.

Zato je tvrdnja o kombinovanju opravdano pitanje sa nezadovoljavajućim odgovorom: nijedna objavljena studija, ispitivanje ili serija slučajeva pronađena za ovaj članak nije ispitala metilensko plavo zajedno sa nikotinamid ribozidom, nikotinamid mononukleotidom ili infuzijom NAD+. Svako ko tu kombinaciju opisuje kao potkrepljenu dokazima ili kao sinergističku izvodi zaključke iz dve zasebne grupe dokaza.

Ekstrapolacija može pogrešiti u oba smera. Može biti previše optimistična ako ukupna zaliha nije bila ograničavajuća promenljiva nakon što se odnos obnovi. Može biti i previše pojednostavljena, jer metilensko plavo ima odnos doze i odgovora koji menja smer. Sami istraživači opisuju ovo jedinjenje kao hormetičko: niže koncentracije pogoduju redukciji, dok više koncentracije preusmeravaju elektrone sa respiratornog lanca i mogu delovati kao prooksidans. Dodavanje više supstrata ne čini tu krivu bezbednijom.

Postoje i rizici od interakcija koji nemaju nikakve veze sa NAD+. Metilensko plavo inhibira monoamin-oksidazu A, zbog čega uz određene antidepresive nosi rizik povezan sa serotoninom; pregled prijavljene toksičnosti u centralnom nervnom sistemu ustanovio je da je 13 od 14 slučajeva ispunjavalo Hunter kriterijume za serotoninsku toksičnost. Pri visokoj izloženosti može izazvati i methemoglobinemiju. Ako uzimate lekove na recept, pitanje o kombinovanju koje treba da postavite svom lekaru odnosi se na te puteve, a ne na redoks ravnotežu. Ista pažnja važi i za uobičajene kombinacije: drugi suplementi koji se uzimaju uz metilensko plavo imaju sopstvenu, uglavnom neispitanu, bazu dokaza.

Zašto čistoća određuje koji eksperiment zapravo sprovodite

Proizvod sa metilenskim plavim predstavlja smešu dok laboratorija ne dokaže suprotno. Nečistoća koja je ovde važna jeste Azure B, demetilovani fenotiazin koji nije inertan. To je redoks-aktivna boja sa istom osnovnom elektrohemijom, pa proizvod koji sadrži značajnu količinu Azure B nije čistija ili manje čista verzija iste intervencije. To je drugačija smeša koja deluje na isti put, u odnosu koji niko nije okarakterisao.

USP kvalitet omogućava kupcu da dobije definisanu supstancu. Proizvod koji nije USP kvaliteta najverovatnije je boja tekstilnog kvaliteta, a takve boje sadrže nečistoće koje ih čine neprikladnim za konzumiranje, uključujući teške metale i rezidualne rastvarače.

Razlika nije samo između nivoa kvaliteta. Mnogi prodavci koji tvrde da su usklađeni sa USP ispituju samo teške metale, a zatim taj jedan skup analiza predstavljaju kao potpunu usklađenost. Puna specifikacija obuhvata identitet, čistoću, organske nečistoće, rezidualne rastvarače, elementarne nečistoće, ostatak nakon žarenja, mikrobiološke granice i bakterijske endotoksine. Delimičan skup analiza ne može dati informacije o onome što izostavlja, a među izostavljenim stavkama su srodne supstance i ostaci rastvarača.

Blupreme nabavlja metilensko plavo od farmaceutskog proizvođača i objavljuje sertifikat analize koji pokriva punu specifikaciju, tako da je supstanca u bočici ona koju istraživanja opisuju. Ako želite sami da proverite ovu logiku pre kupovine, članak kako čitati istraživanja o metilenskom plavom objašnjava šta svaka vrsta studije može, a šta ne može da pokaže.

Razlika koja opstaje pod proverom

Dodavanje prekursora NAD+ menja količinu NAD+ koja postoji. Metilensko plavo menja ono što postojeći NAD+ radi. Prvo je pitanje snabdevanja, drugo je pitanje toka, a eksperimenti koji podržavaju jedno govore malo o drugom.

Iza metilenskog plavog stoji koherentan mehanizam, potvrđen u izolovanim mitohondrijama i životinjskom tkivu, uz jasno i ponovljeno ograničenje: promena odnosa nije isto što i oporavak tkiva. Ono što nedostaje jesu ispitivanja na ljudima koja mere efekat na NAD+. Ono što nijedna kategorija nema jeste direktno ispitivanje zajedničke upotrebe.

Obe kategorije zaslužuju isti tretman. Pitajte koju promenljivu proizvod navodno menja, a zatim pitajte koja merenja te promenljive postoje kod ljudi. Kada je odgovor studija na ćelijama, pacov ili verovatan biološki put, to je upravo ono što imate. To nije potvrda za kombinovanje preparata.