Riset metilen biru: uji coba pada manusia dan studi eksperimental

Pencarian tentang metilen biru menghasilkan ribuan makalah. Studi dalam cawan, studi pada tikus, dan studi pada dua puluh enam sukarelawan muncul dalam daftar yang sama dan tampak sama-sama berwibawa. Ketiganya tidak dapat dipertukarkan, dan jarak di antara jenis bukti tersebut biasanya menentukan jawaban atas pertanyaan yang membawa Anda ke sini.

Halaman ini adalah indeks, bukan putusan akhir. Halaman ini menyusun pustaka kerja berisi 130 makalah tentang metilen biru berdasarkan empat hal yang mengubah apa yang dapat disimpulkan dari sebuah makalah: tingkat tempat eksperimen dilakukan, populasi yang diteliti, rute dan dosis, serta bentuk senyawa yang digunakan. Tabel bukti yang dapat difilter dan dibuat dari pustaka yang sama tersedia bersama artikel ini.

Apa yang sebenarnya ada dalam pustaka ini

Ke-130 makalah tersebut mencakup periode 1928 hingga 2026. Sembilan belas diterbitkan sebelum tahun 2000. Dekade 2010-an menyumbang 59, dekade 2020-an sejauh ini telah menambahkan 29, dan dekade 2000-an menambahkan 23.

Bentuk koleksi ini lebih penting daripada ukurannya. Lima puluh makalah merupakan studi pada hewan utuh. Tiga puluh empat meneliti jaringan, sel, atau darah di luar tubuh. Delapan menggunakan mitokondria terisolasi, lima merupakan uji molekuler atau biokimia, dan dua puluh sembilan merupakan ulasan, komentar, atau sejarah. Empat memberikan metilen biru kepada manusia. Keempat studi tersebut semuanya meneliti metilen biru pada sukarelawan sehat atau orang dewasa sehat.

Angka tersebut bukan argumen bahwa metilen biru belum pernah diuji pada pasien; penggunaan yang disetujui untuk pengobatan methemoglobinemia dan ensefalopati terkait ifosfamide bertumpu pada penggunaan klinis yang hanya tercakup sebagian dalam pustaka ini. Angka itu menjelaskan apa yang akan ditemukan pembaca di sini, dan hal tersebut mengubah cara koleksi lainnya harus dibaca. Kumpulan besar penelitian pada hewan dan sel merupakan bukti yang baik mengenai mekanisme. Itu bukan bukti mengenai apa yang terjadi pada seseorang yang menelan kapsul.

Empat studi pada manusia, termasuk yang hasilnya berlawanan arah

Penelitian pada manusia yang paling kuat dalam pustaka ini berasal dari satu kelompok riset yang bekerja di bidang pencitraan otak.

Sebuah uji prospektif, acak, tersamar ganda, dan terkontrol plasebo merekrut dua puluh enam subjek berusia 22 hingga 62 tahun dan memberikan satu dosis oral rendah metilen biru atau plasebo. Respons MRI fungsional meningkat di korteks insular bilateral selama tugas perhatian berkelanjutan, serta di korteks prefrontal, parietal, dan oksipital selama tugas memori jangka pendek. Jawaban benar selama pengambilan kembali memori meningkat tujuh persen, dengan probabilitas yang dilaporkan sebesar .01. Kelompok yang sama kemudian menunjukkan dalam studi acak, tersamar ganda, dan terkontrol plasebo kedua bahwa satu dosis oral rendah mengurangi aliran darah serebral dalam jaringan yang terkait dengan tugas selama tugas visuomotor, sekaligus memperkuat konektivitas keadaan istirahat di wilayah yang menghubungkan persepsi dan memori. Laporan yang dipublikasikan adalah PubMed 27351678 dan PubMed 26961091.

Studi ketiga adalah studi yang cenderung diam-diam dihilangkan dari sebuah halaman ringkasan. Peneliti di King's College London memberikan dua dosis intravena, 0.5 dan 1 mg per kilogram pada manusia serta 2 dan 4 mg per kilogram pada tikus. Metilen biru mengurangi aliran darah serebral global pada kedua spesies, mengurangi laju metabolik serebral oksigen pada manusia, dan mengurangi laju metabolik serebral glukosa pada tikus. Para penulis sebelumnya memperkirakan hasil yang berlawanan. Penjelasan yang mereka publikasikan adalah bahwa dosis tersebut, meskipun relevan secara klinis, mungkin berada pada bagian menurun dari kurva dosis-respons hormetik, dan bahwa sukarelawan sehat dengan metabolisme serebral normal hanya menyisakan sedikit ruang untuk perbaikan. Catatannya tersedia di PubMed 36803299.

Studi keempat menunjukkan perbedaan antarspesies yang jelas. Pada hepatosit tikus dan tikus utuh, metilen biru meningkatkan oksidasi etanol berlabel menjadi karbon dioksida masing-masing sebesar 75 persen dan 30 persen. Pada sukarelawan sehat, yang diberi dosis berdasarkan regimen yang digunakan untuk ensefalopati ifosfamide, tidak ada perubahan yang dapat diukur: farmakokinetik etanol tidak terpengaruh, dan perubahan rasio laktat terhadap piruvat yang akan menandakan pergeseran keadaan redoks seluler tidak muncul. Eksperimen pada tikus dan eksperimen pada manusia memberikan hasil yang berbeda, dan studi pada manusia memberikan hasil nol. Lihat PubMed 11022014.

Setengah dari studi pemberian dosis pada manusia dalam pustaka ini melaporkan hasil yang tidak mendukung gambaran populer. Uji memori dan fokus layak dibaca secara lengkap karena alasan tersebut, dan mengapa uji metilen biru sulit dibuat tersamar merupakan masalah tersendiri.

"Manusia" mencakup dua hal yang berbeda

Di luar empat studi pemberian dosis tersebut, sepuluh makalah meneliti bahan manusia di luar tubuh, dan ringkasan cenderung memasukkannya ke dalam kategori yang sama.

Satu kelompok menginkubasi jaringan adiposa kardiovaskular yang diambil dari dua puluh lima pasien selama operasi jantung dengan metilen biru pada 0.1 micromolar selama dua puluh empat jam. Ekspresi enzim monoamin oksidase menurun, begitu pula penanda stres oksidatif (PubMed 39167271). Ini merupakan bukti yang baik bahwa jaringan manusia merespons metilen biru. Ini bukan bukti tentang apa yang dilakukan suatu dosis pada manusia hidup, karena dalam eksperimen tersebut tidak ada zat yang diedarkan melalui sirkulasi, dimetabolisme, atau diekskresikan.

Perbedaan yang sama berlaku untuk kulit. Fibroblas kulit manusia yang diambil dari donor sehat dan dari pasien dengan progeria memberikan respons yang lebih baik terhadap metilen biru dibandingkan beberapa antioksidan lain, baik dalam proliferasi maupun penundaan penuaan seluler, dan model kulit manusia tiga dimensi yang direkonstruksi tidak menunjukkan iritasi bahkan pada konsentrasi tinggi (PubMed 28559565). Itu benar-benar merupakan bukti yang kuat untuk formulasi topikal, tetapi tetap bukan uji coba pada manusia. Batas bukti mengenai kulit layak dibaca bersama penelitian tersebut.

Bagian tempat makalah dalam pustaka ini saling bertentangan

Dua eksperimen yang dilakukan dengan cermat memberikan hasil berbeda mengenai sebuah mekanisme yang telah banyak diulang dalam tulisan sekunder.

Eksperimen pertama melaporkan bahwa metilen biru masih dapat mereduksi sitokrom c dan meningkatkan respirasi pada mitokondria yang diberi inhibitor kompleks III, yang diuji pada mitokondria tikus, mencit, dan marmot (PubMed 33669457). Eksperimen kedua melaporkan bahwa metilen biru tidak memintas blokade antimycin pada kompleks III di mitokondria otak mencit (PubMed 30734287). Keduanya dipublikasikan, keduanya serius secara metodologis, dan pustaka ini tidak menyelesaikan perbedaan tersebut. Penjelasan apa pun yang menyajikan mekanisme pemintasan tersebut sebagai sesuatu yang sudah pasti telah menghapus sebuah perbedaan pendapat yang masih terbuka. Peta target biologi sel adalah tempat untuk membahas rincian mekanistik tersebut.

Senyawa, dan rincian yang tidak dicantumkan dalam makalah

Metilen biru bukan satu hal tunggal dalam literatur ini. Makalah melaporkan metilen biru, metiltioninium klorida, metiltioninium tereduksi, dan analog fenotiazinium seperti toluidine blue, dan keempatnya tidak dapat saling dipertukarkan di dalam tubuh. Uji penyakit Alzheimer merupakan contoh paling jelas, karena sebagian dari program tersebut menggunakan bentuk tereduksi dengan perilaku absorpsi yang berbeda, bukan zat warna teroksidasi.

Hampir tidak ada dari 130 makalah tersebut yang menyatakan tingkat mutu bahan yang mereka gunakan. Bagian metode menyebutkan pemasok lalu berhenti di sana. Pewarna histologi, reagen laboratorium, dan bahan aktif tingkat farmasi semuanya dapat diberi label metilen biru dalam pesanan pembelian, dan perbedaannya justru terletak pada pengotor yang menyertainya. Azure B, logam berat, dan pelarut sisa merupakan pengotor yang umum, dan pembaca yang ingin membandingkan sebuah makalah dengan suatu produk tidak dapat melakukan perbandingan tersebut tanpa sertifikat analisis. Itulah alasan yang relevan bagi pembaca mengapa tingkat mutu penting, bahkan sebelum mempertimbangkan persoalan rasa atau dosis. Sebagian besar penjual yang mengklaim kesesuaian dengan monografi USP hanya menguji logam berat dan memperlakukannya sebagai keseluruhan spesifikasi. Blupreme menguji spesifikasi lengkap, yang mencakup identitas, penetapan kadar, pengotor organik, pelarut sisa, pengotor unsur, residu pemijaran, batas mikroba, dan endotoksin bakteri, serta mempublikasikan hasilnya.

Menggunakan tabel

Tabel bukti mencantumkan seluruh 130 makalah beserta tahun, jurnal, jenis studi, dan bahan yang benar-benar digunakan. Jenis studi mencatat tingkat tempat eksperimen dijalankan, yaitu sumbu yang paling cepat berubah saat Anda menggulir. Kolom bahan tersedia agar Anda dapat memeriksa klasifikasinya, karena makalah yang mencampurkan beberapa tingkat, seperti makalah yang menjalankan uji in vitro sebelum konfirmasi in vivo, hanya diberi tingkat yang dominan dan tidak lebih dari itu. Anda dapat memfilter berdasarkan jenis studi, mencari judul, jurnal, dan spesies, serta mengurutkan berdasarkan tahun atau judul. CSV berisi data yang sama tersedia di folder yang sama.

Setelah memilih sebuah makalah, keterampilan yang lebih sulit adalah membacanya: mengidentifikasi model, pembanding, titik akhir, waktu, dan ketidakpastian yang diakui oleh para penulis. Cara membaca satu makalah riset metilen biru membahas hal tersebut, dan indeks ini sengaja tidak membahas lebih jauh.

Untuk melihat berdasarkan masing-masing hasil mengenai apa yang didukung oleh penelitian pada manusia, ringkasan bukti pada manusia adalah titik awal yang lebih baik. Halaman ini menjawab pertanyaan yang lebih sempit: jenis studi apa saja yang ada, dan berapa banyak untuk masing-masing jenis.