Metileno urdina eta NAD+: mekanismoak, ebidentzia, konbinazioak

Metileno urdina eta NAD+ areagotzaile gisa saltzen diren osagarriak azaltzeko, mitokondrioak eta energia zelularra aipatzen dira. Bi deskribapen horietako bakar batek ere ez du esaten produktuak benetan zer egiten duen.

Bi ikuspegiek aldagai desberdinetan eragiten dute. Bata zure zelulek duten NAD+ kantitatea aldatzen saiatzen da. Besteak haren bi formen arteko erlazioa aldatzen du. Ez dira leku berera iristeko bi bide.

Beti nahasten diren bi zenbaki

NAD+ koentzima bat da. Elektroi-pare bat hartzen du, hidruro-ioi baten forman, eta NADH bihurtzen da. NADHk elektroi horiek beste bati ematen dizkionean, NAD+ bihurtzen da berriro. Zelulek etengabe erabiltzen dute ziklo hori: horrela iristen da elikagaietatik ateratako energia ATP sortzen duen proteina-makineriara.

NAD+ eta NADH molekula beraren bi egoera direnez, zelula batean bereizita jarraitu beharreko bi kantitate daude. Lehenengoa guztizko erreserba da: guztira zenbat NAD+ eta NADH dagoen. Bigarrena bien arteko erlazioa da, eta elektroi-garraiatzaileak une horretan zenbateraino kargatuta dauden adierazten du.

Urtegi batek argitzen du bereizketa. Presaren atzean dagoen bolumena erreserba da. Presatik gora atxikitako uraren eta beherantz askatutako uraren arteko banaketa erlazioa da. Erlazio hori handitu dezakezu litro bat ere gehitu gabe, uhate bat irekiz. Hori ez da metileno urdinak egiten duenaren metafora bat. Hitzez hitzeko deskribapen batetik hurbilago dago.

Horniduraren ikuspegia

NAD+ aitzindarien osagarriak —nikotinamida erribosidoa, nikotinamida mononukleotidoa eta nikotinamida, besteak beste— eraikuntza-materiala dira. Zelulek NAD+ osatzen dute berreskuratze-bidea izeneko birziklatze-bide baten bidez, eta aitzindariak bide horretan sartzen dira. Helburua erreserba handitzea da.

Animalietan, hori ondo finkatuta dago: eredu askotan, ehunetako NAD+ maila jaitsi egiten da adinarekin eta gaixotasun metabolikoekin, eta aitzindariak emateak maila hori igo ohi du. Gizakietan, ondorioak mugatuagoak dira. Gizakietan egindako saiakuntzek erakusten dute konposatu horiek odolean neurtutako NAD+ mailak igotzen dituztela. Ez dute, ordea, hobekuntza koherenterik eman emaitza kliniko batean; hau da, pertsona batek antzemango lukeen edo saiakuntza batek neurtzeko diseinatuta duen alderdi batean.

«NAD+ mailak handitu ziren» esateak gorputzaren barruko zerbait neurtzen du. Ez da norbait nola sentitu, mugitu edo suspertu zen azaltzen duen aurkikuntza.

Metileno urdinak, aldiz, zer egiten duen

Metileno urdina ez da aitzindari bat. Erredox tindagai bat da, medikuntzan mende bat baino askoz gehiagoz erabiltzeko bezain zaharra, eta haren baimendutako erabilerak ikerketako erabilerak baino mugatuagoak dira.

Zelula baten barruan, flabinaren mendeko entzimek forma koloregabe batera erreduzitzen dute, leukometileno urdinera; gero, forma hori berriro oxidatzen da. I konplexutik, arnas katearen lehen geltokitik, igaroko liratekeen elektroiak NADHtik atera daitezke metileno urdinaren bidez. NADH NAD+ bihurtzen da.

Erlazioa igo egiten da. Erreserba ez da handitzen.

Arratoiekin egindako bihotz diabetikoari buruzko ikerketa batek hori zuzenean neurtu zuen bihotzeko mitokondrio isolatuetan. Gantz-azidoen oxidazioan metileno urdina 6 eta 18 micromolar arteko kontzentrazioetan gehitzeak dosiaren araberako jaitsiera eragin zuen NADHn eta NADH/NAD+ erlazioan. NAD+ kantitate absolutua NADH baino askoz gutxiago aldatu zen; horixe espero liteke forma bat bestea bihurtzen duen konposatu batekin, bietako edozein gehiago sortu beharrean.

Elektroi horien helmugak garrantzia du. Garuneko mitokondrio isolatuetan, metileno urdinak, 100 nanomolar eta 1 micromolar artean, energia-ekoizpena hobetu zuen arnas katea inhibituta zegoenean, eta, aldi berean, hidrogeno peroxidoaren ekoizpena handitu eta haren ezabaketa murriztu zuen, probatutako baldintza guztietan. Egileen arabera, hidrogeno peroxidoa metileno urdin erreduzituak oxigenoa zuzenean erreduzitzetik dator. Bide horretatik NADH uzten duten elektroiak ez dira desagertzen. Oxigenora iristen dira.

Akilesen tendoiaren ehunari buruzko beste ikerketa batek argi azaltzen du kontua. Metileno urdinak NAD+/NADH oreka berrezarri eta ATP ekoizpena handitu zuen lesionatutako tenozitoetan eta arratoien tendinopatia-eredu batean; artikuluak jasotzen duenez, NADaren guztizko erreserbak ez zuen aldaketa esanguratsurik izan.

Ehunetako eta animalietako esperimentuek zer ezartzen duten

Lau hamarkadatan egindako lau esperimentuk ideia berari jarraitzen diote, eta haren muga behin eta berriz erakusten dute.

Arratoiei alkohola kronikoki emateari buruzko ikerketa batean, etanolak gibeleko NAD+/NADH erlazio zitosolikoa zein mitokondriala jaitsi zituen. Dietari metileno urdina gehitzeak aldaketa hori neurri handi batean eragotzi zuen. Ez zuen etanolak eragindako gibel gantzatsua murriztu. Erlazioa zuzentzeak ez zuen emaitza zuzendu. 1985eko emaitza hori gogoan hartzekoa da, erredox aldaketa bat onura baten atzean dagoen mekanismoa dela baieztatu aurretik.

Gibeleko zelulekin eta gantz ugariko dieta zuten saguekin egindako ikerketa batean, metileno urdinak NAD+/NADH erlazioa igo, SIRT1 handitu, PGC-1alpha-ren azetilazioa murriztu, AMPK aktibatu eta gibeleko gantz-metaketa murriztu zuen. Kasu honetan, emaitza erlazioarekin batera aldatu zen. Artikulu berak erakusten du efektua ez dela monotonikoa: eguneko eta kilogramoko hiru miligramok mitokondrioetako DNA edukia hamar miligramok baino eraginkorrago handitu zuten; oxigeno-kontsumoa eta AMPK seinaleztapena, berriz, dosiarekin batera igo ziren.

Bihotz diabetikoari buruzko ikerketan, hamaika astez edateko uretan emandako metileno urdinak bihotzeko mitokondrioetako NADH/NAD+ erlazioa jaitsi eta sirtuina 3ren jarduera handitu zuen. Lisinaren azetilazioa jaitsi egin zen 34 proteinatako 83 gunetan, bereziki gantz-azidoen garraioarekin eta oxidazioarekin lotutakoetan. Eiekzio-frakzioa hobetu zen. Baina I konplexuak sostengatutako arnasketa ez zen zuzendu. Eta genea inaktibatzeko esperimentu batek erraz nahas daitezkeen bi efektu bereizi zituen: erlazioaren aldaketa neurri handi batean sirtuina 3rik gabe gertatu zen; desazetilazioa, berriz, haren mende zegoen.

Tendoiari buruzko ikerketan, metileno urdina aplikatu zen I konplexua rotenonarekin kimikoki blokeatuta zegoela. Hala ere, NAD+ oreka berrezarri zuen, eta, hala ere, ez zuen estres oxidatiboa, matrizearen endekapena eta zelulen bideragarritasun-galera eragotzi. Erlazioa berrezartzea ez zen nahikoa izan ehuna suspertzeko.

Zer aldatzen den	NAD+ aitzindarietan oinarritutako ikuspegiak	Metileno urdina
NADaren guztizko kantitatea	Helburua da. Aitzindariek berreskuratze-bidea elikatzen dute, eta gizakietan egindako saiakuntzek odoleko NAD+ igotzen dela erakusten dute.	Ez da aldatu neurtu duten ereduetan, tendoiari buruzko ikerketa barne.
NAD+/NADH erlazioa	Gutxitan jakinarazten da emaitza gisa.	Zuzeneko efektua da. NADHk elektroiak galtzen ditu eta NAD+ igo egiten da, erreserba mantentzen den bitartean.
Emaitza klinikoak	Gizakietan egindako saiakuntzak badaude; emaitzak askotarikoak dira, eta efektuak oro har txikiak.	Animalien emaitzak aldatu egiten dira, baina ez erlazioarekin modu koherentean, eta I konplexuaren akatsak ez dira konpontzen.
Konbinazioari buruzko zuzeneko ebidentzia	Aurkitutako ikerketarik ez du biak batera probatzen.	Gauza bera.

Aipamen bibliografiko guztiak dituen orri inprimagarri batek errenkada berak erabiltzen ditu.

Zergatik sartzen diren sirtuinak eztabaidan

Sirtuinek proteinetatik azetilo taldeak kentzen dituzte, eta NAD+ kontsumitzen dute horretarako. Haien jarduerak NAD+ erabilgarritasunari erantzuten dio; beraz, erabilgarritasuna aldatzen duen edozein konposatuk sirtuinen jarduera aldatzen du ondoren.

Horixe da «metileno urdina NAD+erako» marketin gehienaren ardatza. Hor ere egiten du huts logikak. Erlazioa aldatzeak sirtuinen jarduera handitu dezake. Horrek ez du esan nahi produktuak NAD+ ematen duenik, ezta efektua aitzindari bat hartzearen baliokidea denik ere. Neurketa horien erredox interpretazioak bere zailtasunak ditu, eta komeni da horiei buruz irakurtzea bi ikuspegietako edozein onartu aurretik.

Zer probatu den gizakietan

Metileno urdinak hamarkadetako erabilera klinikoa du egoera akutu eta monitorizatuetan: metahemoglobinemian, ifosfamidarekin lotutako neurotoxikotasunean eta kirurgian gertatutako odol-presio oso baxuan. Aplikazio mugatu eta gainbegiratuak dira, ez errendimendua hobetzeko egunero ahoz erabiltzea babesten duen ebidentzia.

Artikulu honetarako egindako bilaketetan ez da aurkitu boluntario osasuntsuetan metileno urdina eman ondoren NAD+ metabolitoak neurtu dituen gizakien ikerketarik. Aurreko aurkikuntzak mitokondrio isolatuetatik, kultibatutako zeluletatik, arratoi-ehunetatik eta giza ehunen explanteetatik datoz. Gorputzetik ateratako eta plaka batean bizirik mantendutako tendoi bat aurrerapauso erabilgarria da zelula-lerro batekin alderatuta. Baina oraindik ez da pertsona bat.

Aitzindariei buruzko literatura benetan gizakietan oinarritzen da, eta haren emaitzak apalak dira. Odoleko NAD+ igo egiten da. Emaitza klinikoak askotarikoak dira, eta efektuak oro har txikiak.

Beraz, konbinazioari buruzko galdera bidezkoa da, baina erantzuna ez da gogobetegarria: artikulu honetarako aurkitutako argitaratutako ikerketa, saiakuntza edo kasu-serie batek ere ez du metileno urdina nikotinamida erribosidoarekin, nikotinamida mononukleotidoarekin edo NAD+ infusio batekin batera probatu. Konbinazioak oinarria duela edo sinergikoa dela esaten duen edonor bi ebidentzia-multzo bereizitatik estrapolatzen ari da.

Estrapolazioak bi norabideetan egin dezake huts. Baikorregia izan daiteke, erlazioa berrezarrita erreserba ez bada inoiz aldagai mugatzailea izan. Sinpleegia ere izan daiteke, metileno urdinaren dosi-erantzun kurbak norabidea aldatzen duelako. Ikertzaileek berek hormetiko gisa deskribatzen dute konposatua: kontzentrazio baxuagoek erredukzioa bultzatzen dute; kontzentrazio handiagoek, berriz, elektroiak arnas katetik desbideratzen dituzte, eta prooxidatzaile gisa joka dezakete. Substratu gehiago gehitzeak ez du kurba hori seguruago egiten.

NAD+ekin zerikusirik ez duten interakzio-arriskuak ere badaude. Metileno urdinak monoamina oxidasa A inhibitzen du; horregatik, serotoninarekin lotutako arriskua du zenbait antidepresiborekin batera erabiltzean. Jakinarazitako nerbio-sistema zentraleko toxikotasunaren berrikuspen batek aurkitu zuen 14 kasuetatik 13k serotoninaren toxikotasunerako Hunter irizpideak betetzen zituztela. Esposizio handietan metahemoglobinemia ere eragin dezake. Errezetazko botikak hartzen badituzu, konbinazioari buruz zure medikuari egin beharreko galdera bide horiei buruzkoa da, ez erredox orekari buruzkoa. Zorroztasun bera aplikatu behar zaie ohiko konbinazioei: metileno urdinarekin batera hartzen diren beste osagarriek beren ebidentzia-oinarria dute, neurri handi batean probatu gabea.

Zergatik erabakitzen duen purutasunak benetan zein esperimentu egiten ari zaren

Metileno urdinaren produktu bat nahaste bat da, laborategi batek kontrakoa frogatu arte. Hemen garrantzitsua den ezpurutasuna Azure B da, inertea ez den fenotiazina desmetilatu bat. Erredox jarduera duen tindagai bat da, eta oinarrizko elektrokimika bera du; beraz, Azure B kantitate esanguratsua duen produktu bat ez da esku-hartze beraren bertsio garbiago edo zikinago bat. Bide berean eragiten duen beste nahaste bat da, inork karakterizatu ez duen proportzio batean.

USP gradua da erosleak substantzia definitu bat eskuratzeko modua. USP gradukoa ez den produktu bat ehungintzarako tindagaia da ziurrenik, eta ehungintzako graduek kontsumorako desegoki bihurtzen dituzten ezpurutasunak dituzte, metal astunak eta disolbatzaile-hondarrak barne.

Aldea ez dago graduen artean soilik. USP betetzen dutela dioten saltzaile askok metal astunak soilik aztertzen dituzte, eta analisi-multzo bakar hori erabateko betetze gisa aurkezten dute. Zehaztapen osoak identitatea, purutasuna, ezpurutasun organikoak, disolbatzaile-hondarrak, ezpurutasun elementalak, errausketa-hondarra, muga mikrobiologikoak eta bakterio-endotoxinak hartzen ditu barne. Analisi-multzo partzial batek ezin du baztertzen dituen alderdiei buruzko informaziorik eman, eta baztertutakoen artean erlazionatutako substantziak eta disolbatzaile-hondarrak daude.

Blupremek metileno urdinaren fabrikatzaile farmazeutiko bati erosten dio, eta zehaztapen osoa hartzen duen analisi-ziurtagiri bat argitaratzen du; horrela, botilako substantzia ikerketak deskribatzen duen substantzia da. Erosi aurretik arrazoibidea zeuk egiaztatu nahi baduzu, metileno urdinari buruzko ikerketak nola irakurri artikuluak azaltzen du ikerketa mota bakoitzak zer erakuts dezakeen eta zer ez.

Azterketa zorrotzari eusten dion bereizketa

NAD+ aitzindari bat gehitzeak dagoen NAD+ kantitatea aldatzen du. Metileno urdinak lehendik dagoen NAD+ zer egiten ari den aldatzen du. Lehenengoa horniduraren auzia da; bigarrena, fluxuarena. Bata babesten duten esperimentuek ezer gutxi esaten dute besteari buruz.

Metileno urdinaren alde dagoena mekanismo koherente bat da, mitokondrio isolatuetan eta animalien ehunetan baieztatua, baina behin eta berriz agertzen den muga argi batekin: erlazioa aldatzea ez da ehuna konpontzea. Falta zaiona gizakietan NAD+ efektua neurtzen duten saiakuntzak dira. Bi kategorietako bakar batek ere ez daukana biak batera hartzea zuzenean probatzen duen azterketa da.

Bi kategoriek trataera bera merezi dute. Galdetu produktuak zein aldagai aldatzen duela dioen, eta gero galdetu gizakietan aldagai horretarako zer neurketa dauden. Erantzuna zelulen ikerketa bat, arratoi bat edo bide sinesgarri bat denean, horixe da. Ez da batera hartzeko konbinazio bat.