Metilensko plavilo u odnosu na NAD+ pristupe: mehanizmi, dokazi i tvrdnje o kombiniranju

Metilensko plavilo i dodaci prehrani koji se prodaju kao sredstva za povećanje NAD+ objašnjavaju se riječima mitohondrije i ćelijska energija. Nijedan od tih opisa ne govori šta proizvod zapravo radi.

Ta dva pristupa djeluju na različite varijable. Jedan nastoji promijeniti količinu NAD+ u vašim ćelijama. Drugi mijenja omjer između njegova dva oblika. To nisu dva puta do istog cilja.

Dvije veličine koje se stalno brkaju

NAD+ je koenzim. Prima par elektrona u obliku hidridnog iona i postaje NADH. Kada NADH preda te elektrone dalje, ponovo postaje NAD+. Ćelije stalno koriste ovaj ciklus: tako energija izdvojena iz hrane dolazi do proteinske mašinerije koja stvara ATP.

Budući da su NAD+ i NADH dva stanja iste molekule, u ćeliji postoje dvije odvojene veličine koje vrijedi pratiti. Prva je ukupna zaliha: koliko ukupno ima NAD+ i NADH. Druga je njihov omjer, koji opisuje koliko su nosači elektrona trenutno opterećeni.

Akumulacija vode čini tu razliku konkretnom. Zapremina vode iza brane predstavlja zalihu. Raspodjela između vode zadržane uzvodno i vode ispuštene nizvodno predstavlja omjer. Taj omjer možete povećati bez dodavanja litre vode, otvaranjem ustave. To nije metafora za ono što metilensko plavilo radi. Bliže je doslovnom opisu.

Pristup zasnovan na opskrbi

Dodaci prehrani s prekursorima NAD+, uključujući nikotinamid ribozid, nikotinamid mononukleotid i nikotinamid, predstavljaju građevni materijal. Ćelije stvaraju NAD+ putem recikliranja koji se naziva put ponovnog iskorištavanja, a prekursori ulaze u taj put. Cilj je povećati zalihu.

Kod životinja je to dobro utvrđeno: u mnogim modelima količina NAD+ u tkivima opada sa starenjem i metaboličkim bolestima, a unos prekursora obično je povećava. Kod ljudi je slika uža. Ispitivanja na ljudima zaista pokazuju da ovi spojevi povećavaju izmjerene nivoe NAD+ u krvi. Ono što nisu pokazala jeste dosljedno poboljšanje kliničkog ishoda, odnosno nečega što bi osoba primijetila ili što je ispitivanje osmišljeno da mjeri.

„Nivoi NAD+ su porasli“ opisuje mjerenje nečega unutar tijela. To nije nalaz o tome kako se neko osjećao, kretao ili oporavljao.

Šta metilensko plavilo radi umjesto toga

Metilensko plavilo nije prekursor. To je redoks boja koja se u medicini koristi znatno duže od jednog stoljeća, a njene odobrene primjene uže su od onih koje se istražuju.

Unutar ćelije, enzimi ovisni o flavinu reduciraju ga u bezbojni oblik, leukometilensko plavilo, koji se zatim ponovo oksidira. Elektroni koji bi prošli kroz kompleks I, prvu stanicu respiratornog lanca mogu se umjesto toga odvesti iz NADH putem metilenskog plavila. NADH postaje NAD+.

Omjer raste. Zaliha se ne povećava.

Studija na štakorima s dijabetičkim srcem to je direktno izmjerila u izoliranim srčanim mitohondrijama. Dodavanje metilenskog plavila u koncentracijama od 6 do 18 mikromolara tokom oksidacije masnih kiselina uzrokovalo je pad NADH i omjera NADH prema NAD+ ovisan o dozi. Apsolutna količina NAD+ reagirala je mnogo manje nego NADH, što biste i očekivali od spoja koji pretvara jedan oblik u drugi, umjesto da stvara više bilo kojeg od njih.

Važno je gdje ti elektroni završavaju. U izoliranim moždanim mitohondrijama, metilensko plavilo u koncentracijama od 100 nanomolara do 1 mikromolara poboljšalo je proizvodnju energije kada je respiratorni lanac bio inhibiran, a istovremeno je povećalo stvaranje vodikovog peroksida i smanjilo njegovo uklanjanje u svim ispitanim uslovima. Autori nastanak vodikovog peroksida pripisuju direktnoj redukciji kisika reduciranim metilenskim plavilom. Elektroni koji napuštaju NADH tim putem ne nestaju. Završavaju na kisiku.

Zasebna studija na tkivu Ahilove tetive jasno iznosi tu poentu. Metilensko plavilo obnovilo je ravnotežu NAD+/NADH i povećalo proizvodnju ATP-a u oštećenim tenocitima i u modelu tendinopatije kod štakora, a rad bilježi da ukupna zaliha NAD nije pokazala značajnu promjenu.

Šta potvrđuju eksperimenti na tkivima i životinjama

Četiri eksperimenta kroz četiri desetljeća prate istu ideju i iznova pokazuju njene granice.

Pri hroničnom davanju alkohola štakorima, etanol je snizio i citosolni i mitohondrijski omjer NAD+/NADH u jetri. Dodavanje metilenskog plavila u prehranu uglavnom je spriječilo tu promjenu. Nije smanjilo masnu jetru koju je etanol uzrokovao. Ispravljanje omjera nije ispravilo ishod. Taj rezultat iz 1985. vrijedi zapamtiti prije bilo kakve tvrdnje da je redoks promjena mehanizam koji stoji iza koristi.

U ćelijama jetre i miševima na prehrani bogatoj mastima, metilensko plavilo povećalo je omjer NAD+/NADH, povećalo SIRT1, smanjilo acetilaciju PGC-1alpha, aktiviralo AMPK i smanjilo nakupljanje masti u jetri. Ovdje se ishod zaista promijenio zajedno s omjerom. Isti rad pokazuje da učinak nije monoton: tri miligrama po kilogramu dnevno povećala su sadržaj mitohondrijske DNK učinkovitije nego deset, dok su potrošnja kisika i signalizacija AMPK rasle s dozom.

U dijabetičkom srcu, metilensko plavilo davano u vodi za piće tokom jedanaest sedmica snizilo je omjer NADH prema NAD+ u srčanim mitohondrijama i povećalo aktivnost sirtuina 3. Acetilacija lizina smanjila se na 83 mjesta u 34 proteina, pretežno povezana s transportom i oksidacijom masnih kiselina. Ejekcijska frakcija se poboljšala. Ali respiracija koju podržava kompleks I nije obnovljena. Eksperiment s isključenim genom razdvojio je dva učinka koja se lako poistovjećuju: promjena omjera uglavnom se odvijala bez sirtuina 3, dok je deacetilacija ovisila o njemu.

U studiji na tetivi, metilensko plavilo primijenjeno je dok je kompleks I bio hemijski blokiran rotenonom. I dalje je obnavljalo ravnotežu NAD+, ali i dalje nije spriječilo oksidativni stres, degeneraciju matriksa ni gubitak vijabilnosti ćelija. Obnavljanje omjera nije bilo dovoljno za oporavak tkiva.

List za štampanje s punim bibliografskim navodima koristi iste redove.

Zašto se sirtuini uključuju u raspravu

Sirtuini uklanjaju acetilne grupe s proteina i pritom troše NAD+. Njihova aktivnost reagira na dostupnost NAD+, pa svaki spoj koji mijenja dostupnost posljedično mijenja aktivnost sirtuina.

Na tome počiva većina marketinga „metilenskog plavila za NAD+“. Tu i logika posustaje. Promjena omjera može povećati aktivnost sirtuina. Iz toga ne slijedi da proizvod opskrbljuje ćelije NAD+, niti da je učinak jednak uzimanju prekursora. Redoks tumačenje ovih mjerenja ima vlastite zamke o kojima vrijedi pročitati prije nego što prihvatite bilo koje od tih tumačenja.

Šta je ispitano na ljudima

Metilensko plavilo ima desetljeća kliničke primjene u akutnim stanjima uz nadzor: methemoglobinemiji, neurotoksičnosti povezanoj s ifosfamidom i izrazito niskom krvnom pritisku tokom operacije. To su uske primjene pod nadzorom, a ne dokazi za svakodnevnu oralnu upotrebu radi poboljšanja sposobnosti.

Pretragama za ovaj članak nije pronađena studija na ljudima koja mjeri metabolite NAD+ nakon primjene metilenskog plavila kod zdravih dobrovoljaca. Gore navedeni nalazi potječu iz izoliranih mitohondrija, ćelijskih kultura, tkiva štakora i eksplantata ljudskog tkiva. Eksplantirana tetiva održavana živom u posudi koristan je korak dalje od ćelijske linije. I dalje nije čovjek.

Literatura o prekursorima zaista obuhvata istraživanja na ljudima, a rezultati su skromni. NAD+ u krvi raste. Klinički ishodi su neujednačeni, a učinci uglavnom mali.

Zato je tvrdnja o kombiniranju opravdano pitanje s nezadovoljavajućim odgovorom: nijedna objavljena studija, ispitivanje ni serija slučajeva pronađena za ovaj članak nije ispitala metilensko plavilo zajedno s nikotinamid ribozidom, nikotinamid mononukleotidom ili infuzijom NAD+. Svako ko opisuje tu kombinaciju kao potkrijepljenu dokazima ili sinergijsku ekstrapolira iz dva odvojena skupa dokaza.

Ekstrapolacija može zakazati u oba smjera. Može biti previše optimistična ako zaliha uopće nije bila ograničavajuća varijabla nakon obnavljanja omjera. Može biti i previše pojednostavljena jer metilensko plavilo ima odnos doze i odgovora koji nakon određene tačke mijenja smjer. I sami istraživači opisuju spoj kao hormetičan: niže koncentracije pogoduju redukciji, dok više koncentracije preusmjeravaju elektrone dalje od respiratornog lanca i mogu djelovati kao prooksidans. Dodavanje više supstrata ne čini tu krivulju sigurnijom.

Postoje i pitanja interakcija koja nemaju nikakve veze s NAD+. Metilensko plavilo inhibira monoamin oksidazu A, zbog čega uz određene antidepresive nosi rizik povezan sa serotoninom; pregled prijavljene toksičnosti centralnog nervnog sistema utvrdio je da je 13 od 14 slučajeva ispunjavalo Hunterove kriterije za serotoninsku toksičnost. Pri visokoj izloženosti može uzrokovati i methemoglobinemiju. Ako uzimate lijekove na recept, pitanje o kombiniranju koje trebate postaviti svom ljekaru odnosi se na te puteve, a ne na redoks ravnotežu. Isti pristup važi za uobičajene kombinacije: drugi dodaci prehrani koji se uzimaju uz metilensko plavilo imaju vlastitu, uglavnom neispitanu bazu dokaza.

Zašto čistoća određuje koji eksperiment zapravo provodite

Proizvod s metilenskim plavilom je smjesa dok laboratorij ne dokaže suprotno. Nečistoća koja je ovdje važna jeste Azure B, demetilirani fenotiazin koji nije inertan. To je redoks-aktivna boja s istom osnovnom elektrohemijom, pa proizvod koji sadrži značajnu količinu Azure B nije čišća ili nečistija verzija iste intervencije. To je drugačija smjesa koja djeluje na isti put, u omjeru koji niko nije okarakterizirao.

USP kvalitet je način na koji kupac dolazi do definirane supstance. Proizvod koji nije USP kvaliteta najvjerovatnije je boja tekstilnog kvaliteta, a takve boje sadrže nečistoće zbog kojih nisu prikladne za konzumaciju, uključujući teške metale i ostatke rastvarača.

Razlika nije samo između nivoa kvaliteta. Mnogi prodavači koji tvrde da su usklađeni s USP ispituju samo teške metale, a zatim taj jedan skup analiza predstavljaju kao potpunu usklađenost. Puna specifikacija obuhvata identitet, čistoću, organske nečistoće, ostatke rastvarača, elementarne nečistoće, ostatak nakon žarenja, mikrobiološke granice i bakterijske endotoksine. Djelimičan skup analiza ne može potvrditi ništa o onome što izostavlja, a među izostavljenim stavkama su srodne supstance i ostaci rastvarača.

Blupreme nabavlja metilensko plavilo od farmaceutskog proizvođača i objavljuje certifikat analize koji obuhvata punu specifikaciju, tako da je supstanca u bočici ona koju istraživanja opisuju. Ako prije kupovine želite sami provjeriti obrazloženje, članak kako čitati istraživanja o metilenskom plavilu objašnjava šta svaki tip studije može, a šta ne može pokazati.

Razlika koja ostaje nakon pomne provjere

Dodavanje prekursora NAD+ mijenja količinu NAD+ koja postoji. Metilensko plavilo mijenja ono što postojeći NAD+ radi. Prvo je pitanje opskrbe, drugo je pitanje toka, a eksperimenti koji potkrepljuju jedno govore malo o drugom.

Metilensko plavilo ima koherentan mehanizam, potvrđen u izoliranim mitohondrijama i životinjskom tkivu, uz jasno ograničenje koje se ponavlja: promjena omjera nije isto što i oporavak tkiva. Nedostaju mu ispitivanja na ljudima koja mjere učinak na NAD+ kod ljudi. Ono što nijedna kategorija nema jeste direktno ispitivanje zajedničke primjene.

Obje kategorije zaslužuju isti pristup. Pitajte koju varijablu proizvod navodno mijenja, a zatim pitajte koja mjerenja te varijable postoje kod ljudi. Kada je odgovor studija na ćelijama, štakor ili vjerovatan biološki put, to je upravo ono što imate. To nije ispitana kombinacija preparata.