మిథిలీన్ బ్లూ వర్సెస్ NAD+ విధానాలు: క్రియావిధానాలు, ఆధారాలు, కలిపి వాడటంపై వాదనలు

మిథిలీన్ బ్లూను, NAD+ బూస్టర్లుగా విక్రయించే సప్లిమెంట్లను వివరించేటప్పుడు మైటోకాండ్రియా, కణ శక్తి అనే పదాలను ఉపయోగిస్తారు. కానీ ఆ వివరణల్లో ఏదీ ఆ ఉత్పత్తి నిజంగా ఏమి చేస్తుందో చెప్పదు.

ఈ రెండు విధానాలు వేర్వేరు చరరాశులపై పనిచేస్తాయి. ఒకటి మీ కణాల్లో ఎంత NAD+ ఉందో మార్చడానికి ప్రయత్నిస్తుంది. మరొకటి దాని రెండు రూపాల మధ్య నిష్పత్తిని మారుస్తుంది. ఇవి ఒకే గమ్యానికి చేరే రెండు దారులు కావు.

ఎప్పుడూ కలగలిపే రెండు పరిమాణాలు

NAD+ ఒక సహఎంజైమ్. ఇది హైడ్రైడ్ అయాన్ రూపంలో ఒక జత ఎలక్ట్రాన్లను స్వీకరించి NADHగా మారుతుంది. NADH ఆ ఎలక్ట్రాన్లను ముందుకు అందించినప్పుడు, అది మళ్లీ NAD+గా మారుతుంది. కణాలు ఈ చక్రాన్ని నిరంతరం ఉపయోగిస్తాయి: ఆహారం నుంచి సంగ్రహించిన శక్తి, ATPను తయారుచేసే ప్రోటీన్ వ్యవస్థకు చేరేది ఇలాగే.

NAD+, NADH ఒకే అణువు యొక్క రెండు స్థితులు కాబట్టి, ఒక కణంలో విడివిడిగా గమనించాల్సిన రెండు పరిమాణాలు ఉంటాయి. మొదటిది మొత్తం నిల్వ: NAD+, NADH కలిపి ఎంత ఉన్నాయి అనేది. రెండవది వాటి మధ్య నిష్పత్తి; ప్రస్తుతం ఎలక్ట్రాన్ వాహకాలు ఎంతవరకు ఎలక్ట్రాన్లతో నిండి ఉన్నాయో అది వివరిస్తుంది.

ఒక జలాశయం ఈ తేడాను స్పష్టంగా చూపిస్తుంది. ఆనకట్ట వెనుక ఉన్న నీటి పరిమాణమే మొత్తం నిల్వ. ఎగువన నిలిపిన నీటికి, దిగువకు విడుదల చేసిన నీటికి మధ్య విభజనే నిష్పత్తి. గేటును తెరవడం ద్వారా, ఒక litre కూడా చేర్చకుండా ఆ నిష్పత్తిని పెంచవచ్చు. మిథిలీన్ బ్లూ చేసే పనికి ఇది కేవలం ఉపమానం కాదు. దాని వాస్తవ క్రియను వివరించడానికి ఇది మరింత దగ్గరగా ఉంటుంది.

సరఫరా విధానం

నికోటినమైడ్ రైబోసైడ్, నికోటినమైడ్ మోనోన్యూక్లియోటైడ్, నికోటినమైడ్ వంటి NAD+ పూర్వగామి సప్లిమెంట్లు నిర్మాణ ముడిపదార్థాలు. సాల్వేజ్ పాత్‌వే అనే పునర్వినియోగ మార్గం ద్వారా కణాలు NAD+ను తయారుచేస్తాయి; పూర్వగాములు ఆ మార్గానికి ముడిపదార్థాలను అందిస్తాయి. మొత్తం నిల్వను పెంచడమే లక్ష్యం.

జంతువుల్లో ఇది బాగా నిర్ధారించబడింది: అనేక నమూనాల్లో వయస్సు పెరగడం, జీవక్రియ సంబంధిత వ్యాధులతో కణజాల NAD+ తగ్గుతుంది; పూర్వగాములను అందించడం సాధారణంగా దానిని పెంచుతుంది. మనుషుల విషయంలో నిర్ధారణల పరిధి తగ్గుతుంది. ఈ సమ్మేళనాలు కొలిచిన రక్త NAD+ స్థాయులను పెంచుతాయని మానవ ప్రయోగాలు చూపిస్తున్నాయి. కానీ క్లినికల్ ఫలిత సూచికలో స్థిరమైన మెరుగుదలను అవి చూపలేదు. అంటే, వ్యక్తి గమనించగలిగే అంశాల్లో లేదా ప్రయోగం కొలవడానికి రూపొందించిన అంశాల్లో అటువంటి మెరుగుదల కనిపించలేదు.

"NAD+ స్థాయులు పెరిగాయి" అనేది శరీరం లోపల ఉన్న ఒక అంశాన్ని కొలుస్తుంది. ఒక వ్యక్తి ఎలా అనుభూతి చెందారు, కదిలారు లేదా కోలుకున్నారు అనే విషయంపై అది నిర్ధారణ కాదు.

దానికి బదులుగా మిథిలీన్ బ్లూ ఏమి చేస్తుంది

మిథిలీన్ బ్లూ పూర్వగామి కాదు. అది ఒక రెడాక్స్ రంగు పదార్థం. వైద్యంలో శతాబ్దానికి మించి ఉపయోగించబడినంత పాతది; దాని అనుమతించబడిన ఉపయోగాల పరిధి, పరిశోధనలో ఉన్న ఉపయోగాల కంటే పరిమితమైనది.

కణం లోపల, ఫ్లావిన్‌పై ఆధారపడే ఎంజైమ్‌లు దానిని రంగులేని ల్యూకోమిథిలీన్ బ్లూ రూపానికి క్షయీకరిస్తాయి; ఆ రూపం తర్వాత మళ్లీ ఆక్సీకరణం చెందుతుంది. శ్వాస గొలుసులో మొదటి కేంద్రం అయిన కాంప్లెక్స్ I గుండా వెళ్లాల్సిన ఎలక్ట్రాన్లు, దానికి బదులుగా మిథిలీన్ బ్లూ ద్వారా NADH నుంచి బయటకు వెళ్లవచ్చు. NADH, NAD+గా మారుతుంది.

నిష్పత్తి పెరుగుతుంది. మొత్తం నిల్వ పెరగదు.

మధుమేహం ఉన్న గుండెపై ఎలుకల్లో చేసిన ఒక అధ్యయనం, వేరుచేసిన గుండె మైటోకాండ్రియాలో దీనిని నేరుగా కొలిచింది. కొవ్వు ఆమ్లాల ఆక్సీకరణ సమయంలో 6 నుంచి 18 micromolar సాంద్రతల్లో మిథిలీన్ బ్లూను చేర్చడం వల్ల, మోతాదుకు అనుగుణంగా NADH, NADH-to-NAD+ నిష్పత్తి తగ్గాయి. NADHతో పోలిస్తే NAD+ యొక్క మొత్తం పరిమాణం చాలా తక్కువగా స్పందించింది. ఏ రూపాన్నీ మరింత తయారుచేయకుండా, ఒక రూపాన్ని మరొకటిగా మార్చే సమ్మేళనం నుంచి ఆశించదగినది ఇదే.

ఆ ఎలక్ట్రాన్లు ఎక్కడికి చేరతాయనేది ముఖ్యం. వేరుచేసిన మెదడు మైటోకాండ్రియాలో, శ్వాస గొలుసును నిరోధించినప్పుడు 100 nanomolar నుంచి 1 micromolar సాంద్రతలో మిథిలీన్ బ్లూ శక్తి ఉత్పత్తిని మెరుగుపరిచింది. అదే సమయంలో, పరీక్షించిన ప్రతి పరిస్థితిలో హైడ్రోజన్ పెరాక్సైడ్ ఉత్పత్తిని పెంచుతూ, దాని తొలగింపును తగ్గించింది. క్షయీకృత మిథిలీన్ బ్లూ నేరుగా ఆక్సిజన్‌ను క్షయీకరించడం వల్ల హైడ్రోజన్ పెరాక్సైడ్ ఏర్పడుతుందని రచయితలు గుర్తించారు. ఈ మార్గంలో NADH నుంచి బయటకు వెళ్లే ఎలక్ట్రాన్లు అదృశ్యం కావు. అవి ఆక్సిజన్‌కు చేరతాయి.

అకిలీస్ స్నాయువు కణజాలంలో చేసిన మరో అధ్యయనం ఈ విషయాన్ని స్పష్టంగా చెబుతుంది. గాయపడిన స్నాయువు కణాల్లో, ఎలుకల్లోని టెండినోపతి నమూనాలో మిథిలీన్ బ్లూ NAD+/NADH సమతుల్యతను పునరుద్ధరించి, ATP ఉత్పత్తిని పెంచింది. అయితే మొత్తం NAD నిల్వలో గణనీయమైన మార్పు లేదని ఆ పత్రం నమోదు చేసింది.

కణజాల, జంతు ప్రయోగాలు ఏమి నిర్ధారిస్తాయి

నాలుగు దశాబ్దాల్లో జరిగిన నాలుగు ప్రయోగాలు ఒకే భావనను అనుసరిస్తూ, దాని పరిమితిని పదేపదే చూపిస్తాయి.

ఎలుకలకు దీర్ఘకాలం ఆల్కహాల్ ఇచ్చిన ప్రయోగంలో, ఇథనాల్ కాలేయంలోని సైటోసోలిక్, మైటోకాండ్రియల్ NAD+/NADH నిష్పత్తులు రెండింటినీ తగ్గించింది. ఆహారంలో మిథిలీన్ బ్లూను చేర్చడం ఆ మార్పును చాలావరకు నివారించింది. కానీ ఇథనాల్ వల్ల ఏర్పడిన కొవ్వు కాలేయాన్ని అది తగ్గించలేదు. నిష్పత్తిని సరిచేయడం ఫలితాన్ని సరిచేయలేదు. రెడాక్స్ మార్పే ప్రయోజనానికి కారణమైన క్రియావిధానమని ఎవరైనా వాదించే ముందు, ఈ 1985 ఫలితాన్ని గుర్తుంచుకోవాలి.

కాలేయ కణాల్లో, అధిక కొవ్వు ఆహారం తీసుకున్న ఎలుకల్లో, మిథిలీన్ బ్లూ NAD+/NADH నిష్పత్తిని పెంచింది, SIRT1ను పెంచింది, PGC-1alpha ఎసిటైలేషన్‌ను తగ్గించింది, AMPKను క్రియాశీలం చేసింది, కాలేయంలో కొవ్వు చేరడాన్ని తగ్గించింది. ఇక్కడ నిష్పత్తితో పాటు ఫలితం కూడా మారింది. కానీ ప్రభావం మోతాదుతో ఒకే దిశలో పెరగదని అదే పత్రం చూపిస్తుంది: రోజుకు కిలోగ్రాముకు మూడు మిల్లీగ్రాములు ఇచ్చినప్పుడు, పది ఇచ్చినప్పటికంటే మైటోకాండ్రియల్ DNA పరిమాణం మరింత సమర్థంగా పెరిగింది. మరోవైపు, ఆక్సిజన్ వినియోగం, AMPK సంకేత ప్రసారం మోతాదుతో పాటు పెరిగాయి.

మధుమేహం ఉన్న గుండెలో, పదకొండు వారాల పాటు తాగునీటిలో మిథిలీన్ బ్లూను ఇవ్వడం వల్ల గుండె మైటోకాండ్రియాలో NADH-to-NAD+ నిష్పత్తి తగ్గి, సర్ట్యూయిన్ 3 క్రియాశీలత పెరిగింది. 34 ప్రోటీన్లలోని 83 స్థానాల్లో లైసిన్ ఎసిటైలేషన్ తగ్గింది; ఇవి ప్రధానంగా కొవ్వు ఆమ్లాల రవాణా, ఆక్సీకరణకు సంబంధించినవి. ఎజెక్షన్ ఫ్రాక్షన్ మెరుగుపడింది. కానీ కాంప్లెక్స్ I ఆధారిత శ్వాస సరిచేయబడలేదు. అంతేకాక, సులభంగా కలగలిపే రెండు ప్రభావాలను ఒక జీన్ నాకౌట్ ప్రయోగం వేరుచేసింది: నిష్పత్తి మార్పు చాలావరకు సర్ట్యూయిన్ 3 లేకుండానే జరిగింది; కానీ డీఎసిటైలేషన్ దానిపై ఆధారపడింది.

స్నాయువు అధ్యయనంలో, రోటెనోన్‌తో కాంప్లెక్స్ Iను రసాయనికంగా నిరోధించినప్పుడు మిథిలీన్ బ్లూను ఉపయోగించారు. అప్పటికీ అది NAD+ సమతుల్యతను పునరుద్ధరించింది. అయినప్పటికీ ఆక్సీకరణ ఒత్తిడి, మ్యాట్రిక్స్ క్షీణత, కణాలు జీవించి ఉండే సామర్థ్యం కోల్పోవడాన్ని నివారించలేకపోయింది. కణజాలం కోలుకోవడానికి నిష్పత్తిని పునరుద్ధరించడం మాత్రమే సరిపోలేదు.

పూర్తి మూల సూచనలతో ముద్రించుకోగల పత్రం కూడా ఇవే వరుసలను ఉపయోగిస్తుంది.

ఈ వాదనలోకి సర్ట్యూయిన్‌లను ఎందుకు తీసుకువస్తారు

సర్ట్యూయిన్‌లు ప్రోటీన్ల నుంచి ఎసిటైల్ సమూహాలను తొలగిస్తాయి; అలా చేయడానికి NAD+ను వినియోగిస్తాయి. వాటి క్రియాశీలత NAD+ లభ్యతకు స్పందిస్తుంది. కాబట్టి లభ్యతను మార్చే ఏ సమ్మేళనమైనా, తదనంతరం సర్ట్యూయిన్ క్రియాశీలతను మారుస్తుంది.

"NAD+ కోసం మిథిలీన్ బ్లూ" అనే మార్కెటింగ్‌లో ఎక్కువ భాగం ఈ అంశంపైనే ఆధారపడుతుంది. తర్కం తప్పుదారి పట్టేది కూడా ఇక్కడే. నిష్పత్తిని మార్చడం సర్ట్యూయిన్ క్రియాశీలతను పెంచవచ్చు. కానీ దానివల్ల ఉత్పత్తి NAD+ను సరఫరా చేస్తుందని తేలదు; ఆ ప్రభావం పూర్వగామిని తీసుకోవడంతో సమానమని కూడా తేలదు. ఏ వివరణనైనా అంగీకరించే ముందు, ఈ కొలతలను రెడాక్స్ దృక్కోణంలో అర్థం చేసుకోవడంలో ఉన్న ప్రత్యేక చిక్కుల గురించి చదవడం ఉపయోగకరం.

మనుషుల్లో ఏమి పరీక్షించారు

తీవ్రమైన పరిస్థితుల్లో, పర్యవేక్షణలో మిథిలీన్ బ్లూను దశాబ్దాలుగా వైద్యపరంగా ఉపయోగిస్తున్నారు: మెథీమోగ్లోబినీమియా, ఇఫోస్ఫమైడ్‌కు సంబంధించిన నాడీవిష ప్రభావం, శస్త్రచికిత్స సమయంలో తీవ్రమైన తక్కువ రక్తపోటు కోసం. అవి పరిమితమైన, పర్యవేక్షణతో కూడిన ఉపయోగాలు. పనితీరును పెంచే సాధనంగా ప్రతిరోజూ నోటి ద్వారా తీసుకోవడానికి అవి ఆధారాలు కావు.

ఈ వ్యాసం కోసం చేసిన శోధనల్లో, ఆరోగ్యవంతులైన స్వచ్ఛంద భాగస్వాములకు మిథిలీన్ బ్లూ ఇచ్చిన తర్వాత NAD+ జీవక్రియ ఉత్పన్నాలను కొలిచిన మానవ అధ్యయనం కనుగొనబడలేదు. పైన పేర్కొన్న ఫలితాలు వేరుచేసిన మైటోకాండ్రియా, పెంచిన కణాలు, ఎలుక కణజాలం, శరీరం నుంచి తీసిన మానవ కణజాల నమూనాల నుంచి వచ్చాయి. శరీరం నుంచి తీసి ప్రయోగ పాత్రలో సజీవంగా ఉంచిన స్నాయువు, కణ శ్రేణితో పోలిస్తే ఉపయోగకరమైన ముందడుగు. అయినప్పటికీ అది ఒక వ్యక్తి కాదు.

పూర్వగాములపై పరిశోధన నిజంగా మనుషుల్లో జరిగింది; దాని ఫలితాలు స్వల్పంగా ఉన్నాయి. రక్త NAD+ పెరుగుతుంది. క్లినికల్ ఫలిత సూచికలపై ప్రభావాలు మిశ్రమంగా, సాధారణంగా చిన్నవిగా ఉన్నాయి.

కాబట్టి కలిపి వాడటంపై వాదన ఒక సముచితమైన ప్రశ్నే, కానీ సమాధానం సంతృప్తికరంగా లేదు: ఈ వ్యాసం కోసం కనుగొన్న ప్రచురిత అధ్యయనం, ప్రయోగం లేదా కేసు శ్రేణి ఏదీ మిథిలీన్ బ్లూను నికోటినమైడ్ రైబోసైడ్, నికోటినమైడ్ మోనోన్యూక్లియోటైడ్ లేదా NAD+ ఇన్ఫ్యూషన్‌తో కలిపి పరీక్షించలేదు. ఈ కలయికకు ఆధారాలు ఉన్నాయని, లేదా అవి కలిసి పరస్పరం ప్రభావాన్ని పెంచుతాయని చెప్పేవారు, రెండు వేర్వేరు ఆధార సమూహాల నుంచి విస్తరించి ఊహిస్తున్నారు.

ఇలా విస్తరించి ఊహించడం రెండు విధాలా విఫలం కావచ్చు. నిష్పత్తిని పునరుద్ధరించిన తర్వాత మొత్తం నిల్వ అసలు పరిమితి విధించే చరరాశి కాకపోతే, ఆ ఊహ అతిగా ఆశావహంగా ఉండవచ్చు. అది అతిగా సరళీకరించినదీ కావచ్చు, ఎందుకంటే మిథిలీన్ బ్లూ మోతాదు–ప్రతిస్పందన సంబంధం ఒక దశలో దిశ మార్చుకుంటుంది. దాని పరిశోధకులే ఈ సమ్మేళనాన్ని హార్మెటిక్‌గా వర్ణిస్తారు: తక్కువ సాంద్రతలు క్షయీకరణానికి అనుకూలంగా ఉంటాయి; ఎక్కువ సాంద్రతలు ఎలక్ట్రాన్లను శ్వాస గొలుసు నుంచి మళ్లించి, ఆక్సీకరణాన్ని ప్రోత్సహించే పదార్థంలా పనిచేయవచ్చు. మరింత ముడిపదార్థాన్ని చేర్చడం ఆ వక్రరేఖను సురక్షితంగా మార్చదు.

NAD+తో సంబంధం లేని పరస్పర చర్యల ఆందోళనలు కూడా ఉన్నాయి. మిథిలీన్ బ్లూ మోనోఅమైన్ ఆక్సిడేజ్ Aను నిరోధిస్తుంది. అందుకే కొన్ని యాంటీడిప్రెసెంట్ మందులతో కలిపి వాడినప్పుడు సెరోటోనిన్‌కు సంబంధించిన ప్రమాదం ఉంటుంది; నివేదించిన కేంద్ర నాడీవ్యవస్థ విష ప్రభావాల సమీక్షలో, 14 కేసుల్లో 13 సెరోటోనిన్ విష ప్రభావానికి సంబంధించిన హంటర్ ప్రమాణాలకు సరిపోయాయని తేలింది. అధిక ఎక్స్‌పోజర్ వద్ద ఇది మెథీమోగ్లోబినీమియాకు కూడా కారణం కావచ్చు. మీరు ప్రిస్క్రిప్షన్ మందులు తీసుకుంటుంటే, కలిపి వాడటం గురించి మీ వైద్య నిపుణుడిని అడగాల్సిన ప్రశ్న ఆ మార్గాల గురించే, రెడాక్స్ సమతుల్యత గురించి కాదు. సాధారణ కలయికలకు కూడా ఇదే క్రమశిక్షణ వర్తిస్తుంది: మిథిలీన్ బ్లూతో పాటు తీసుకునే ఇతర సప్లిమెంట్లకు వాటి స్వంత ఆధారాలు ఉన్నాయి; వాటిలో ఎక్కువ భాగం పరీక్షించబడలేదు.

మీరు నిజంగా ఏ ప్రయోగం చేస్తున్నారో స్వచ్ఛత ఎందుకు నిర్ణయిస్తుంది

ప్రయోగశాల వేరుగా నిరూపించే వరకు, మిథిలీన్ బ్లూ ఉత్పత్తి ఒక మిశ్రమమే. ఇక్కడ ముఖ్యమైన మలినం Azure B. అది డీమిథైలేటెడ్ ఫీనోథయాజిన్; నిష్క్రియ పదార్థం కాదు. అదే ప్రాథమిక విద్యుత్‌రసాయన లక్షణాలను పంచుకునే రెడాక్స్-క్రియాశీల రంగు పదార్థం అది. కాబట్టి గణనీయమైన Azure B ఉన్న ఉత్పత్తి, అదే జోక్యానికి మరింత స్వచ్ఛమైన లేదా తక్కువ స్వచ్ఛమైన రూపం కాదు. ఎవరూ నిర్ధారించని నిష్పత్తిలో, అదే మార్గంపై పనిచేసే భిన్నమైన మిశ్రమం అది.

కొనుగోలుదారుడు నిర్వచిత పదార్థాన్ని పొందడానికి USP గ్రేడ్ ఒక మార్గం. USP గ్రేడ్ కాని ఉత్పత్తి చాలావరకు వస్త్రాలకు వాడే రంగు గ్రేడ్‌దై ఉంటుంది. వస్త్ర గ్రేడ్‌లలో భార లోహాలు, మిగిలిన ద్రావకాలు సహా, వాటిని వినియోగానికి అనర్హం చేసే మలినాలు ఉంటాయి.

అంతరం గ్రేడ్‌ల మధ్య మాత్రమే కాదు. USPకు అనుగుణంగా ఉన్నామని చెప్పే అనేక విక్రేతలు భార లోహాల కోసం మాత్రమే పరీక్షించి, ఆ ఒక్క పరీక్షల సమూహాన్నే పూర్తి అనుగుణ్యతగా చూపిస్తారు. పూర్తి నిర్దేశాల్లో గుర్తింపు, స్వచ్ఛత, సేంద్రీయ మలినాలు, మిగిలిన ద్రావకాలు, మూలక మలినాలు, దహనం తర్వాత మిగిలే అవశేషం, సూక్ష్మజీవ పరిమితులు, బ్యాక్టీరియా ఎండోటాక్సిన్‌లు ఉంటాయి. పాక్షిక పరీక్షల సమూహం, తాను పరీక్షించని అంశాల గురించి ఏమీ చెప్పలేదు. అలా వదిలేసిన అంశాల్లో సంబంధిత పదార్థాలు, ద్రావకాల అవశేషాలు ఉంటాయి.

Blupreme మిథిలీన్ బ్లూ ఔషధ తయారీదారు నుంచి కొనుగోలు చేస్తుంది; పూర్తి నిర్దేశాలను కవర్ చేసే విశ్లేషణ ధ్రువపత్రాన్ని ప్రచురిస్తుంది. తద్వారా సీసాలోని పదార్థం, పరిశోధన వివరించే పదార్థమే అవుతుంది. కొనుగోలు చేయడానికి ముందు ఈ తర్కాన్ని మీరే పరిశీలించాలనుకుంటే, మిథిలీన్ బ్లూ పరిశోధనను ఎలా చదవాలి అనే వ్యాసం ప్రతి అధ్యయన రకం ఏమి చూపగలదో, ఏమి చూపలేదో వివరిస్తుంది.

నిశిత పరిశీలనకూ నిలిచే తేడా

NAD+ పూర్వగామిని చేర్చడం ఎంత NAD+ ఉందో మారుస్తుంది. మిథిలీన్ బ్లూ ఇప్పటికే ఉన్న NAD+ ఏమి చేస్తోందో మారుస్తుంది. మొదటిది సరఫరాకు సంబంధించిన ప్రశ్న; రెండవది ప్రవాహానికి సంబంధించిన ప్రశ్న. ఒకదానికి మద్దతిచ్చే ప్రయోగాలు మరొకదాని గురించి చాలా తక్కువే చెబుతాయి.

మిథిలీన్ బ్లూకు మద్దతుగా ఉన్నది, వేరుచేసిన మైటోకాండ్రియాలో, జంతు కణజాలంలో నిర్ధారించిన ఒక పొందికైన క్రియావిధానం. దానికి స్పష్టమైన, పదేపదే కనిపించే పరిమితి ఉంది: నిష్పత్తిని మార్చడం, కణజాలాన్ని సరిచేయడంతో సమానం కాదు. దానికి లేనిది మనుషుల్లో NAD+ ప్రభావాన్ని కొలిచే మానవ ప్రయోగాలు. ఈ రెండు వర్గాల్లో దేనికీ లేనిది, రెండింటినీ కలిపి తీసుకోవడంపై ప్రత్యక్ష పరీక్ష.

రెండు వర్గాలనూ ఒకే ప్రమాణంతో చూడాలి. ఉత్పత్తి ఏ చరరాశిని మారుస్తుందని చెబుతుందో అడగండి; తర్వాత మనుషుల్లో ఆ చరరాశికి సంబంధించిన ఏ కొలతలు ఉన్నాయో అడగండి. సమాధానం ఒక కణ అధ్యయనం, ఒక ఎలుక ప్రయోగం లేదా సాధ్యమనిపించే జీవ మార్గం అయితే, అది అంతవరకే. అది కలిపి తీసుకునే సప్లిమెంట్ల సమూహానికి ఆధారం కాదు.