Knjižnica raziskav metilenskega modrila: preskušanja pri ljudeh in eksperimentalne študije

Iskanje metilenskega modrila vrne na tisoče člankov. Študija v laboratorijski posodici, študija na podganah in študija s šestindvajsetimi prostovoljci se pojavijo na istem seznamu in delujejo enako verodostojno. Niso zamenljive in razlike med njimi običajno odločijo, kakšen je odgovor na vprašanje, s katerim ste prišli.

Ta stran je kazalo, ne razsodba. Delovno knjižnico 130 člankov o metilenskem modrilu razvršča po štirih dejavnikih, ki vplivajo na to, kaj vam članek lahko pove: ravni, na kateri je bil izveden poskus, preučevani populaciji, načinu dajanja in odmerku ter uporabljeni obliki spojine. Ob tem članku je na voljo preglednica dokazov, ki omogoča filtriranje in temelji na isti knjižnici.

Kaj je dejansko v tej knjižnici

130 člankov zajema obdobje od 1928 do 2026. Devetnajst jih je izšlo pred letom 2000. V obdobju 2010–2019 jih je izšlo 59, od leta 2020 jih je bilo doslej dodanih 29, v obdobju 2000–2009 pa 23.

Sestava zbirke je pomembnejša od njene velikosti. Petdeset člankov opisuje študije na celih živalih. Štiriintrideset jih preučuje tkivo, celice ali kri zunaj telesa. Osem jih obravnava izolirane mitohondrije, pet molekularne ali biokemične teste, devetindvajset pa je preglednih člankov, komentarjev ali zgodovinskih prispevkov. V štirih metilensko modrilo dajejo ljudem. Vsaka od teh štirih študij preučuje metilensko modrilo pri zdravih prostovoljcih ali zdravih odraslih.

Ta številka ni argument, da metilenskega modrila nikoli niso preskušali pri bolnikih; odobreno zdravljenje methemoglobinemije in encefalopatije, povezane z ifosfamidom, temelji na klinični uporabi, ki jo ta knjižnica zajema le delno. Pove pa, kaj bo bralec našel tukaj, in vpliva na to, kako je treba brati preostanek zbirke. Obsežen nabor raziskav na živalih in celicah daje dobre dokaze o mehanizmu delovanja. Ne daje pa dokazov o tem, kaj se zgodi pri človeku, ki pogoltne kapsulo.

Štiri študije pri ljudeh, tudi tiste z rezultati v nasprotni smeri od pričakovane

Najmočnejše raziskave pri ljudeh v tej knjižnici izvirajo iz ene raziskovalne skupine, ki se ukvarja s slikanjem možganov.

Prospektivno, randomizirano, dvojno slepo, s placebom nadzorovano preskušanje je vključilo šestindvajset udeležencev, starih od 22 do 62 let, ki so prejeli en sam nizek peroralni odmerek metilenskega modrila ali placebo. Odziv pri funkcijskem slikanju z magnetno resonanco se je povečal v insularni skorji obeh hemisfer med nalogo vzdrževane pozornosti ter v prefrontalni, parietalni in okcipitalni skorji med nalogo kratkoročnega spomina. Delež pravilnih odgovorov pri priklicu iz spomina se je povečal za sedem odstotkov, navedena verjetnost pa je bila .01. Ista skupina je nato v drugi randomizirani, dvojno slepi, s placebom nadzorovani študiji pokazala, da je en sam nizek peroralni odmerek med vidno-motorično nalogo zmanjšal možganski krvni pretok v omrežju, povezanem z nalogo, hkrati pa okrepil povezanost v mirovanju v predelih, ki povezujejo zaznavanje in spomin. Objavljeni poročili sta PubMed 27351678 in PubMed 26961091.

Tretja študija je tista, ki bi jo povzetek neopazno izpustil. Raziskovalci na King's College London so uporabili dva intravenska odmerka: 0.5 in 1 mg na kilogram pri ljudeh ter 2 in 4 mg na kilogram pri podganah. Metilensko modrilo je zmanjšalo skupni možganski krvni pretok pri obeh vrstah, zmanjšalo stopnjo možganske presnove kisika pri ljudeh in stopnjo možganske presnove glukoze pri podganah. Avtorji so napovedali nasprotno. Njihova objavljena razlaga je, da so odmerki, čeprav klinično relevantni, morda na padajočem delu hormetične krivulje odmerka in odziva ter da je pri zdravih prostovoljcih z normalno možgansko presnovo malo prostora za izboljšanje. Zapis je na voljo na PubMed 36803299.

Četrta študija jasno pokaže razliko med vrstama. V podganjih hepatocitih in pri celih podganah je metilensko modrilo povečalo oksidacijo označenega etanola v ogljikov dioksid za 75 oziroma 30 odstotkov. Pri zdravih prostovoljcih, ki so prejeli odmerek po vzoru režima za zdravljenje ifosfamidne encefalopatije, ni povzročilo nobene merljive spremembe: farmakokinetika etanola je ostala nespremenjena, sprememba razmerja med laktatom in piruvatom, ki bi nakazovala premik v celičnem redoks stanju, pa se ni pojavila. Poskus na podganah in poskus pri ljudeh se ne ujemata, pri ljudeh pa učinka niso ugotovili. Glejte PubMed 11022014.

Polovica študij v tej knjižnici, v katerih so ljudem dajali metilensko modrilo, poroča o rezultatih, ki ne podpirajo splošno razširjene razlage. Prav zato je preskušanja spomina in zbranosti vredno prebrati v celoti, vprašanje, zakaj je pri teh preskušanjih težko zagotoviti slepljenje, pa je ločen problem.

"Človeško" zajema dve različni stvari

Poleg štirih študij z dajanjem odmerkov deset člankov obravnava človeški material zunaj telesa, povzetki pa jih pogosto združujejo v isto kategorijo.

Ena skupina je srčno-žilno maščobno tkivo, odvzeto petindvajsetim bolnikom med operacijo srca, štiriindvajset ur inkubirala z metilenskim modrilom pri koncentraciji 0.1 mikromola na liter. Izražanje encimov monoaminooksidaze se je zmanjšalo, prav tako označevalci oksidativnega stresa (PubMed 39167271). To je dober dokaz, da se človeško tkivo odziva na metilensko modrilo. Ni pa dokaz o tem, kaj odmerek naredi v živem človeku, saj v tem poskusu ni bilo kroženja po telesu, presnove ali izločanja.

Enako razlikovanje velja za kožo. Človeški kožni fibroblasti, odvzeti zdravim darovalcem in bolnikom s progerijo, so se na metilensko modrilo odzvali bolje kot na več drugih antioksidantov, tako pri proliferaciji kot pri odložitvi celičnega staranja, rekonstruiran tridimenzionalni model človeške kože pa ni pokazal draženja niti pri visokih koncentracijah (PubMed 28559565). To so resnično močni dokazi za formulacijo za lokalno uporabo, vendar še vedno ne gre za preskušanje pri ljudeh. Ob tem je vredno prebrati tudi, kje se dokazi za kožo končajo.

Kje si članki v tej knjižnici nasprotujejo

Dva skrbno izvedena poskusa se ne strinjata glede mehanizma, ki ga pogosto ponavljajo sekundarni viri.

Prvi poroča, da lahko metilensko modrilo še vedno reducira citokrom c in izboljša dihanje v mitohondrijih, obdelanih z zaviralci kompleksa III, kar so preverili na mitohondrijih podgan, miši in morskih prašičkov (PubMed 33669457). Drugi poroča, da metilensko modrilo ne obide blokade kompleksa III z antimicinom v mitohondrijih mišjih možganov (PubMed 30734287). Oba sta objavljena, oba sta metodološko tehtna in ta knjižnica njunega neskladja ne razreši. Vsaka razlaga, ki mehanizem obvoda predstavlja kot dokončno potrjen, zabriše še vedno odprto nesoglasje. Podrobnosti o mehanizmu sodijo v pregled tarč v celični biologiji.

Spojina in podrobnost, ki jo članki izpuščajo

Metilensko modrilo v tej literaturi ni ena sama stvar. Članki navajajo metilensko modrilo, metiltioninijev klorid, reducirani metiltioninij in fenotiazinske analoge, kot je toluidinsko modrilo, te štiri oblike pa v telesu niso zamenljive. Preskušanja pri Alzheimerjevi bolezni so najjasnejši primer tega, saj so v delu tega programa namesto oksidiranega barvila uporabili reducirano obliko z drugačnimi lastnostmi absorpcije.

Skoraj nobeden od 130 člankov ne navaja kakovostnega razreda uporabljenega materiala. Razdelki o metodah navedejo dobavitelja in se pri tem ustavijo. Histološko barvilo, laboratorijski reagent in učinkovina farmacevtske kakovosti so lahko na naročilnici vsi označeni kot metilensko modrilo, razlikujejo pa se prav po nečistotah, ki jih spremljajo. Med običajnimi so Azure B, težke kovine in ostanki topil, bralec, ki želi članek primerjati z izdelkom, pa te primerjave ne more opraviti brez analiznega certifikata. To je za bralca razlog, zakaj so kakovostni razredi pomembni, še preden se pojavi vprašanje okusa ali odmerka. Večina prodajalcev, ki zatrjujejo skladnost z monografijo USP, preverja le težke kovine in to obravnava kot celotno specifikacijo. Blupreme preverja celotno specifikacijo, ki zajema istovetnost, določanje vsebnosti, organske nečistote, ostanke topil, elementne nečistote, ostanek po žarenju, mikrobiološke mejne vrednosti in bakterijske endotoksine, ter objavlja rezultate.

Uporaba preglednice

Preglednica dokazov navaja vseh 130 člankov z letom objave, revijo, vrsto študije in dejansko uporabljenim materialom. Vrsta študije označuje raven, na kateri je potekal poskus, to pa je vidik, ki se med pomikanjem po preglednici najhitreje spreminja. Stolpec z materialom omogoča preverjanje razvrstitve, saj članki, ki združujejo več ravni, na primer test in vitro, ki mu sledi potrditev in vivo, dobijo le prevladujočo raven. Filtrirate lahko po vrsti študije, iščete po naslovih, revijah in vrstah organizmov ter razvrščate po letu ali naslovu. Datoteka CSV z istimi podatki je v isti mapi.

Ko izberete članek, je zahtevnejša veščina njegovo branje: prepoznavanje modela, primerjalne skupine, izida, časovnega poteka in negotovosti, ki jo avtorji priznavajo. To obravnava članek Kako brati posamezen članek o metilenskem modrilu, to kazalo pa se namenoma ustavi pred tem korakom.

Za pregled tega, kaj raziskave pri ljudeh podpirajo pri posameznih izidih, je boljše izhodišče pregled dokazov pri ljudeh. Ta stran odgovarja na ožje vprašanje: katere vrste študij obstajajo in koliko je posameznih vrst.