ميٿيلين بليو جي تاريخ: رنگ کان دوا ۽ تحقيق تائين

ميٿيلين بليو فارميسي تائين پهچڻ کان اڳ مريض تائين پهتو.

Paul Guttmann ۽ Paul Ehrlich جي 1891 واري رپورٽ، جنهن ۾ مليريا لاءِ هن رنگ جي استعمال جو ذڪر آهي، ۾ گرمي پد جا ٻه چارٽ آهن. ٻيو چارٽ 13 جولاءِ کان 5 آگسٽ تائين هلي ٿو، ۽ هر ڏينهن ڏنل علاج ڪناري تي لکيل آهي. 18 ۽ 19 جولاءِ وارين داخلائن ۾ "1 × 0,05 Methylenblau" لکيل آهي. ايندڙ ڏينهن ساڳئي مقدار جون پنج ۽ ست خوراکون درج آهن، ۽ 22 جولاءِ تائين رڪارڊ ۾ quinine جي ٿوري مقدار به شامل ٿي وڃي ٿي. بخار جي لڪير، جيڪا چارٽ جي پهرين اڌ ۾ 37 °C ۽ 39.5 °C جي وچ ۾ مٿي هيٺ ٿئي ٿي، رنگ جي ظاهر ٿيڻ کان پوءِ هموار ٿي وڃي ٿي ۽ باقي ٽن هفتن تائين لڳ ڀڳ 36 °C ۽ 37.5 °C جي وچ ۾ رهي ٿي.

مريض انهن ٻن ماڻهن مان هڪ هو، جن کي مقالي ۾ هڪ گهريلو نوڪر ۽ هڪ ملاح طور بيان ڪيو ويو آهي. جيڪو مرڪب هنن کي ڏنو ويو، اهو پندرهن سالن کان تجارتي ڪپڙي جو رنگ هو، ۽ اهي ٻئي انهن شروعاتي ماڻهن مان آهن جن بابت رڪارڊ موجود آهي ته کين ڪنهن مخصوص جاندار کي نشانو بڻائيندڙ مڪمل طور مصنوعي دوا سان علاج ڪيو ويو.

رنگ پهرين آيو

پهريون تجارتي طور ڪامياب مصنوعي رنگ William Henry Perkin 1856 ۾ تيار ڪيو. Perkin ارڙهن سالن جو هو، ايسٽر جي موڪل دوران گهر واري ليبارٽري ۾ ڪم ڪري رهيو هو، ۽ quinine ٺاهڻ جي ڪوشش ڪري رهيو هو. ان جي بدران کيس هڪ ڪارو رهجيو مليو، جنهن کي هن حل ڪيو ۽ هڪ اهڙو رنگ مليو جيڪو ريشم تي شاندار نموني چنبڙي ويو. هن آگسٽ 1856 ۾ ان جو پيٽنٽ ورتو ۽ 1857 جي آخر تائين سندس ڪارخانو لنڊن جي هڪ ريشم رنگڻ واري اداري کي فراهمي ڪري رهيو هو.

1875 ۾ Adolf von Baeyer هڪ ڳاڙهو رنگ تيار ڪيو ۽ ان جو نالو eosin رکيو، جيڪو يوناني لفظ Eos، يعني صبح جي روشني، مان ورتل هو. 1876 ۾ Heinrich Caro، جيڪو ان وقت Badische Anilin- und Soda-Fabrik جي ليبارٽري جو ڊائريڪٽر هو، Baeyer سان گڏ ميٿيلين بليو کي ڪپهه لاءِ aniline-بنياد رنگ طور تيار ڪيو. ان جي ڪيميائي بناوت لڳ ڀڳ نو سال پوءِ وڃي طئي ٿي.

اهو اصل اڄ به مادّي جي نالي مان نظر اچي ٿو. "Methylene blue" رنگن جي فهرست مان آيل هڪ تجارتي نالو آهي، ڪيميائي وضاحت نه. جنهن مرڪب ڏانهن اهو اشارو ڪري ٿو، اهو methylthioninium chloride آهي، ۽ نالي، لوڻ ۽ ان جي hydrates وچ ۾ فرق ان وقت اهم ٿي وڃن ٿا جڏهن ڪو به مادو تورڻ يا specification پڙهڻ شروع ڪري ٿو.

رنگڻ وارو عمل پل بڻيو

رنگن جي ڪارخاني کان اسپتال تائين رستو خوردبيني مان گذريو، ۽ اهو ميٿيلين بليو جي وجود کان اڳ شروع ٿيو. Wilhelm Erb پهريون شخص هو جنهن 1865 ۾ picric acid استعمال ڪندي رت تي مصنوعي رنگ لاڳو ڪيو، ۽ ڪجهه ڳاڙهن رت جي خلين اندر ڄاري جهڙي جوڙجڪ ڏٺائين.

Paul Ehrlich جي 1878 واري doctoral thesis ۾ histological staining کي ڪپڙي رنگڻ سان ڀيٽيو ويو ۽ دليل ڏنو ويو ته ٻئي ڪيميائي ردعمل آهن. Robert Koch جي ماتحت tubercle bacillus تي ڪم ڪندي، هن aniline رنگن کي acid ۽ basic طبقن ۾ ورهايو ۽ ثابت ڪيو ته هر طبقو خُلي جي مختلف حصن کي رنگين ڪري ٿو. 1880 ۾ هن ٻنهي کي گڏ ڪيو: methylene blue جو هڪ saturated محلول acid fuchsin ۾ وڌو ويو، جيستائين مٿيون محلول صاف ٿي ويو. نتيجي کي هن neutralen Farbkörper يا neutral stain سڏيو؛ ان هڪ بدران ٽي رنگ پيدا ڪيا، polymorphonuclear خلين ۾ اهي granules ظاهر ڪيا جيڪي اڳ نظر نه ايندا هئا، ۽ پهريون leukocyte differential count ممڪن بڻايو. ڇاڪاڻ ته انهن granules مرکب جا ٻئي جز جذب ڪيا، Ehrlich انهن کي کڻندڙ خلين لاءِ neutrophil لفظ ٺاهيو.

ٻه سال پوءِ Koch ميٿيلين بليو استعمال ڪري tubercle bacillus ڳولي لڌو، ۽ 1883 ۾ Ehrlich طريقي کي وڌيڪ بهتر ڪيو. 1886 ۾ هن هڪ مختلف قسم جو مشاهدو شايع ڪيو: هن زنده جانورن ۾ رنگ inject ڪيو ۽ ڀيٽيو ته هر عضوو ان کي ڪيتري شدت سان جذب ڪري ٿو، ۽ نتيجو ڪڍيو ته ان کي دماغ ۽ عصبي بافتن سان نمايان affinity آهي. هن اها affinity رنگ جي oxidation-reduction cycling سان منسوب ڪئي، جنهن کي هن گذريل سال ڏٺو هو. اها cycling ئي سبب آهي جو ميٿيلين بليو جو محلول جڏهن ان جو oxygen استعمال ٿي وڃي ٿو ته پنهنجو رنگ وڃائي ٿو، ۽ هوا موٽڻ تي ٻيهر رنگ حاصل ڪري ٿو. اهي تجربا جن پهريون ڀيرو ان cycling جي نتيجن کي ماپيو هڪ پوءِ واري ڏهاڪي سان تعلق رکن ٿا، ۽ mechanism پاڻ تاريخ کان الڳ موضوع آهي.

parasite ۽ واڱڻائي nucleus

Alphonse Laveran 1880 ۾ تازو، بغير رنگيل رت جو جائزو وٺندي مليريا جو parasite ڳولي لڌو. خشڪ smear ۾ ان کي باقاعدي ڏسڻ لاءِ stain گهربل هو، ۽ ان وقت جا stains رڳو ڳاڙهو ۽ نيرو رنگ پيدا ڪندا هئا.

1888 ۾ Polish pathologist Czesław Cheçinski acid fuchsin جي جاءِ eosin استعمال ڪيو، جنهن سان methylene blue ۽ eosin جو مرکب تيار ٿيو. سندس طريقي جي پويان ڪيس هڪ سپاهي جو هو، جيڪو 30 سيپٽمبر 1887 تي مليريا سبب مري ويو هو. رت جي فلمن ۾ Cheçinski نيري گل جهڙيون شڪليون ڏٺيون، جيڪي هاڻي Plasmodium malariae طور سڃاتيون وڃن ٿيون، ۽ ڏاٽي جهڙيون شڪليون، جيڪي هاڻي Plasmodium falciparum جي gametocytes طور سڃاتيون وڃن ٿيون. نتيجي بيماري بابت ٻن مقابلي وارين وضاحتن کي هڪ ئي وقت ختم ڪيو: miasma theory، ۽ Edwin Klebs ۽ Corrado Tommasi-Crudeli جي اها دعويٰ ته مليريا هڪ bacterium سبب ٿئي ٿي.

parasite نظر اچي رهيو هو. ان جو nucleus نظر نه اچي رهيو هو، تنهنڪري ان جي نوعيت کليل سوال رهي. Breslau جي physician Ernst Malachowski اهو مسئلو پهرين اتفاق سان ۽ پوءِ ڄاڻي واڻي حل ڪيو. 1889 ۾ هڪ preparation ۾ هن plasmodial nucleus جي differential staining ڏٺي، پر ان کي ٻيهر پيدا نه ڪري سگهيو. methylene blue کي acidifying ڪرڻ سان فائدو نه ٿيو. ان کي borax سان alkaline ڪرڻ سان هر ڀيري اثر پيدا ٿيو. هن 15 جون 1890 تي طريقي جو عوامي مظاهرو ڪيو ۽ ساڳئي سال ان کي شايع ڪيو، جڏهن ته وڌيڪ مڪمل طريقو آگسٽ 1891 ۾ شايع ٿيو.

Dmitri Romanowsky سيپٽمبر 1891 ۾ پنهنجو نسخو شايع ڪيو. سندس بهترين نتيجا methylene blue محلول جي هڪ وساريل، ڦڦوند لڳل بوتل مان آيا، جيڪا ٻن مهينن کان وڌيڪ پراڻي هئي. Malachowski جو بيان ڄاڻي واڻي تيار ڪيل هو ۽، سندس لفظن ۾، آسانيءَ سان ٻيهر پيدا ڪري سگهجندڙ هو؛ Romanowsky جو طريقو هڪ اهڙو بند رستو هو جيڪو هڪ ڀيرو ڪم ڪيو. ان جي باوجود نالو Romanowsky سان ڳنڍجي ويو، ۽ اهو تڪرار ته nucleus کي ظاهر ڪندڙ واڱڻائي رنگ پهريون ڪنهن تيار ڪيو پنهنجي دستاويزن سان هڪ الڳ ڪهاڻي آهي.

شڪل: Guttmann ۽ Ehrlich جي 1891 واري رپورٽ جو ٻيو گرمي پد چارٽ. مٿيون panel 13 کان 24 جولاءِ تائين ۽ هيٺيون panel 25 جولاءِ کان 5 آگسٽ تائين آهي؛ ڪناري وارين داخلائن ۾ ڏنل خوراکن جا نالا آهن، ۽ رڪارڊ جي آخري ٽن هفتن دوران گرمي پد معمول جي ويجهو رهي ٿو. Krafts, Hempelmann ۽ Skórska-Stania لاءِ scan ڪيل رپورٽ مان ٻيهر پيش ڪيل، Parasitology Research 111:1–6 (2012)، PMID 22411634.

ripening اصل ۾ demethylation نڪتو

1890ع واري ڏهاڪي ۾ شامل ڪنهن کي به خبر نه هئي ته "ripening" ميٿيلين بليو سان ڇا ڪندو هو. جواب صنعتي ڪيميا مان نڪتو. Heinrich August Bernthsen 1883 ۾ parent compound phenothiazine تيار ڪيو هو، 1885 ۾ ثابت ڪيو ته ميٿيلين بليو انهي خاندان سان تعلق رکي ٿو، ۽ ساڳئي دور ۾ ڏيکاريو ته alkaline حالتون رنگ مان methyl groups هٽائين ٿيون، جنهن سان اهي مرڪب ٺهن ٿا جن کي هاڻي azures سڏيو وڃي ٿو.

Bernard Nocht 1898 ۽ 1899 ۾ active fraction الڳ ڪيو ۽ ان کي رڳو Rot aus Methylenblau، يعني methylene blue مان ڳاڙهو، چئي سگهيو. Michaelis 1901 ۾ ان کي azure I طور سڃاتو. Jenner 1899 ۾ dye precipitate لاءِ solvent طور absolute methanol متعارف ڪرايو، جنهن رت جي فلمن کي heat-fix ڪرڻ جي ضرورت ختم ڪري ڇڏي؛ Leishman ۽ Reuter ٻنهي اڳڀرائين کي گڏ ڪيو؛ Wright 1902 ۾ هڪ سادو طريقو شايع ڪيو. Giemsa جو حصو، پڻ 1902 ۾، اهو هو ته randomly ripened solution تي ڀاڙڻ بند ڪيو وڃي ۽ ان جي بدران معلوم رنگن جون ماپيل مقدارون استعمال ڪيون وڃن. پوءِ هن اهو شايع ڪرڻ کان انڪار ڪيو ته هو pure methylene azure ڪيئن ٺاهيندو هو ۽ طريقو Dr. Grübler جي ليبارٽري کي وڪرو ڪيو، جنهن پيداوار کي azure I طور مارڪيٽ ڪيو ۽ دعويٰ ڪئي ته رڳو ان جو نسخو حقيقي Giemsa stain هو.

ٻن عالمي جنگين اتفاق سان اهو ڪم مڪمل ڪيو. جڏهن German رنگ دستياب نه رهيا، Lillie, Roe ۽ Wilcox American متبادلن تي ڪم ڪيو ۽ ڏٺائون ته بهترين staining ٽن الڳ ڪيل جزن مان ايندي هئي: pure methylene blue، ان جي breakdown product azure B، ۽ eosin. اهي ٽي اڄ به مليريا جي diagnosis لاءِ استعمال ٿيندڙ stain جا اهم جز آهن، اهڙي نالي هيٺ جيڪو هاڻي Malachowski، Wright ۽ Giemsa کي گڏ ڪري ٿو.

شڪل: انساني ڳاڙهن رت جي خلين ۾ Plasmodium falciparum جون ring forms، Romanowsky-type طريقي سان رنگيل. انگوزي اندر واڱڻائي جوڙجڪ اهو chromatin آهي جنهن کي Malachowski جي borax-treated methylene blue پهريون ڀيرو نظر اچڻ لائق بڻايو. تصوير Ernst Hempelmann جي، public domain ۾ جاري ڪيل.

هڪ نالو، ڪيترائي مواد

جن سالن انهن جزن کي هڪ ٻئي کان الڳ ڪيو، انهن هڪ اهڙو مسئلو ڇڏيو جيڪو ڪيميا کان به وڌيڪ عرصو برقرار رهيو. Ralph Lillie 1969 ۾ biological stains، جيڪي "manufactured to rigid specifications commensurate with their delicate and exacting uses" هئا، ۽ textile colouring لاءِ non-biological stains، جيڪي "require less rigorous and demanding manufacturing standards" هئا، جي وچ ۾ حد واضح ڪئي. ٻنهي قسمن جي پيداوار ساڳيو نالو کڻندي هئي، ۽ انهن جو فرق ڪڏهن به رڳو درجي جو فرق نه هو. ڪپهه لاءِ لکيل specification ۽ diagnostic reagent لاءِ لکيل specification هڪ ٻئي جي بدلي استعمال نٿا ٿي سگهن، ۽ textile specification مطابق تيار ڪيل مادو نگلڻ لاءِ ٺهيل نه هو.

Azure B سڀ کان واضح مثال آهي. اهو ميٿيلين بليو جو monodemethylated روپ آهي، ان جي پنهنجي ماپي سگهجندڙ pharmacological activity آهي، ۽ هڪ صدي کان وڌيڪ عرصي تائين clinical methylene blue preparations ۾ هڪ uncontrolled constituent طور موجود رهيو، ان کان اڳ جو ڪنهن انهن ٻنهي کي الڳ ڪيو. هڪ گروپ ڏٺو ته methylene blue administration کان پوءِ autopsy وقت ورتل انساني tissue ۾ 5 کان 14 سيڪڙو unchanged methylene blue ۽ 86 کان 95 سيڪڙو azure B موجود هو. ڪنهن مخصوص preparation ۾ azure B هجڻ گهرجي يا نه، ۽ ڪهڙي حد تائين، اهو specification جو سوال آهي، ۽ azure B کي impurity ۽ metabolite طور ڏسندڙ تحقيق اتان اڳتي وڌي ٿي.

عملي نتيجو پڻ specification ۾ ئي سمايل آهي. USP conformance مارڪيٽ ۾ موجود سڀ کان اعليٰ purity تائين پهچڻ جو رستو آهي، ڇاڪاڻ ته اهو هڪ واحد measurement بدران مڪمل published test standard آهي. ان ۾ identity، assay، organic impurities سميت azure dyes، residual solvents، elemental impurities، residue on ignition، microbial limits، ۽ bacterial endotoxins شامل آهن. اهڙو certificate جيڪو heavy-metal result رپورٽ ڪري ۽ ان کي USP compliance سڏي، ان فهرست مان رڳو هڪ قطار رپورٽ ڪئي آهي.

Blupreme پنهنجو methylene blue هڪ pharmaceutical manufacturer کان حاصل ڪري ٿو ۽ مڪمل certificate of analysis شايع ڪري ٿو، رڳو heavy metals بدران پوري USP specification جي testing ڪرائي ٿو. certificate of analysis پڙهڻ جي guide ۽ USP designation ڇا ثابت ڪري ٿي ۽ ڇا نه ٻڌائين ٿا ته document کي claim سان ڪيئن ڀيٽجي.

تاريخ ڇا جي اجازت ڏئي ٿي، ۽ ڇا جي نه

هي سلسلو حقيقي آهي، ۽ اڪثر product pages جي اشارن کان وڌيڪ ڊگهو آهي. Methylene blue 1891 ۾ malaria جي علاج لاءِ استعمال ٿيو، 1899 ۾ agitated psychosis ۾ sedative طور رپورٽ ٿيو، ۽ ان جي side chain quinacrine، chloroquine، promethazine ۽ chlorpromazine تائين وڃي ٿي. Ehrlich جي 1890 واري Arthur Leppmann سان گڏ paper ۾ neuralgic ۽ rheumatic pain ۾ آرام جو بيان ڪيو ويو، ۽ پوءِ mental illness ۾ رنگ کي test ڪرڻ تي غور ڪري اهو نه ڪرڻ جو فيصلو ڪيو ويو.

انهن مان ڪا به ڳالهه جديد استعمال کي ثابت نٿي ڪري. 1891 وارو malaria نتيجو ٻن مريضن ۽ هڪ گرمي پد جي چارٽ تي ٻڌل هو. ڪنهن molecule سان ڊگهي واقفيت ان جي مطالعي جو سبب ٿي سگهي ٿي، نتيجو نه. مرڪب جي دوا طور تاريخ ۽ malaria ۾ جديد trials انهن سوالن جا جواب ڏين ٿا جيڪي Ehrlich جي سوالن کان مختلف آهن، ۽ endpoints کي انهن جي پنهنجي شرطن تي پڙهڻو پوندو.

رڪارڊ ۾ هڪ تفصيل اهڙو آهي جيڪو ماضي بدران موجوده دور سان تعلق رکي ٿو. جڏهن محققن 2000ع واري ڏهاڪي ۾ Burkina Faso ۾ methylene blue malaria trials هلايا، ته کين pharmaceutical-grade material لاءِ مقابلو ڪرڻو پيو، ۽ هنن رپورٽ ڪيو ته raw material جي قيمت لڳ ڀڳ سئو ڀيرا وڌي وئي جڏهن ان سان GMP validation شامل ٿي. رنگ جو متبادل آڻي سگهجي پيو. دوا جو نه. Lillie 1969 ۾ جيڪو فرق بيان ڪيو هو، اهو ئي فرق اڄ به طئي ڪري ٿو ته بوتل اندر اصل ۾ ڇا آهي. :::