Metilena biru dan dakwaan tentang virus herpes: luka herpes bibir, EBV, dan penyahaktifan virus

Satu perkataan membawa dua konsep dalam perdebatan ini, dan kedua-duanya memerlukan nama yang berasingan. Konsep pertama ialah penyahaktifan virion: pewarna, oksigen, dan cahaya bertemu dengan zarah virus dalam cecair lalu merosakkannya sehingga ia tidak dapat bereplikasi. Konsep kedua ialah rawatan jangkitan pada seseorang: kurang luka herpes bibir, penyembuhan lebih cepat, kurang pelepasan virus, atau beban virus Epstein-Barr yang lebih rendah. Konsep pertama telah ditunjukkan berulang kali bagi virus herpes simpleks di makmal. Konsep kedua belum ditunjukkan bagi metilena biru oral terhadap virus herpes simpleks mahupun virus Epstein-Barr. Setelah perbezaan itu jelas, bahan kajian mudah dikelaskan.

Satu lagi kekeliruan timbul bersama-sama dengannya. HSV dan EBV tergolong dalam keluarga virus besar yang sama tetapi menyebabkan penyakit berlainan pada tisu yang berlainan. Luka herpes bibir ialah lesi cetek dengan replikasi litik setempat: pewarna boleh disapu padanya dan cahaya boleh disuluh pada tempat yang sama. EBV kekal secara laten dalam takungan sel B yang tersebar dalam darah dan tisu limfoid, dan tiada pewarna topikal atau lampu merah dapat mencapai seluruh takungan itu. Hasil dalam satu keadaan tidak boleh digunakan untuk keadaan yang lain. Pembaca yang ingin mengetahui kaedah umum di sebalik pengelasan ini boleh merujuk panduan membaca penyelidikan metilena biru.

Fotopenyahaktifan di makmal: HSV di luar sel, cahaya diperlukan

Ujian langsung yang paling awal menggunakan isolat klinikal segar, bukannya satu strain makmal. Dalam kajian penyahaktifan fotodinamik herpesvirus hominis pada 1975, 37 isolat daripada lesi genital dan mulut dicampurkan dengan metilena biru pada 10 micromolar, dibiarkan selama satu jam dalam gelap, kemudian dibahagikan kepada dua bahagian: satu dikekalkan dalam gelap dan satu lagi didedahkan selama lima minit kepada dua tiub pendarfluor 15 watt pada jarak 15 cm. Daripada 37 isolat, 27 kehilangan keupayaan menjangkiti yang dapat dikesan hanya apabila terdedah kepada cahaya, dan 4 menunjukkan penurunan melebihi 100 kali ganda. Kawalan dalam gelap mengekalkan keupayaan menjangkiti: tanpa cahaya, kepekatan ini tidak mensterilkan sampel.

Kajian kemudian menunjukkan bahawa kesan pewarna biasa bersama cahaya boleh menjadi sederhana dalam sesetengah keadaan. Dalam eksperimen metilena biru, cahaya, dan elektrik terhadap HSV-1 dan HSV-2 pada 1979, pewarna 10 micromolar bersama cahaya pijar selama 180 saat mengurangkan HSV-1 yang berupaya menjangkiti sebanyak kira-kira 60 peratus, iaitu sekitar 0.4 log. Hanya penambahan arus terus kecil meningkatkan kehilangan keupayaan menjangkiti dalam sistem yang sama kepada lebih 99.99 peratus. Cahaya sahaja, arus sahaja, serta cahaya bersama arus tanpa pewarna memberi kesan yang kecil. Kesan besar itu memerlukan peralatan elektrik, maka makalah tersebut tidak patut dipetik sebagai bukti bahawa pewarna biasa bersama lampu lazimnya menghasilkan pemusnahan empat log.

Kajian mekanisme kemudian meneliti perkara yang masih dapat dilakukan oleh zarah yang telah dirawat. Satu kajian Journal of Clinical Investigation pada 1980 tentang mekanisme fotodinamik HSV menemui pemutusan untai tunggal pada DNA virus tanpa pemutusan untai berganda yang dominan: virion yang dirawat masih melekat pada sel dan memasukinya, tetapi proses pematangan terhenti. Satu kajian kitaran jangkitan selepas metilena biru dan cahaya pada 1997 mengesahkan hal ini menggunakan pewarna 1 micromolar dan cahaya merah: tiada pemusnahan ketara pada sampul virus, kemasukan dan pelepasan DNA kekal utuh, tetapi replikasi terhapus dengan penguraian DNA yang bergantung pada penyinaran. Satu perbandingan oksigen singlet pada 1995 menunjukkan penglibatan oksigen singlet, berkemungkinan bersama tindak balas kimia radikal tambahan. Perincian tentang cara metilena biru menyerap cahaya dan menghasilkan oksigen reaktif menjelaskan sebab pewarna, oksigen, dan foton mesti hadir serentak pada sasaran.

Bukti kuantitatif yang paling jelas datang daripada kajian produk darah, yang juga memberikan peringatan paling jelas agar hasil tidak ditafsirkan secara berlebihan. Dalam satu kajian pengurangan patogen dalam plasma pada 2013 menggunakan LED merah pada 627 nm, HSV yang ditambahkan ke dalam plasma menurun kira-kira 5.2 log pada 1 micromolar dan 6.0 log pada 10 micromolar selepas 60 minit. Itu ialah penyahcemaran cecair yang disinari, bukannya rawatan terhadap keadaan laten dalam neuron, dan ia tidak meramalkan tindakan larutan yang ditelan di dalam tubuh yang gelap.

Rawatan setempat pada lesi: kajian kecil, lama, dan hasil bercampur

Laporan rawatan setempat menggunakan pewarna yang disapu pada lesi lalu disinari, yang sekurang-kurangnya mengekalkan susunan ruang seperti di makmal. Laporan paling awal ialah laporan kes ekzema herpetikum, iaitu jangkitan HSV sekunder yang meluas pada ekzema. Laporan ekzema herpetikum pada 1975 tentang metilena biru dan cahaya menghuraikan penambahbaikan pesat selepas penggunaan pewarna setempat bersama cahaya, dengan pewarna 10 micromolar memusnahkan virus dalam cahaya tetapi bukan dalam gelap. Ulasan menyatakan bahawa larutan 0.1 peratus digunakan pada separuh kawasan sebagai perbandingan dalam pesakit yang sama. Sebagai bukti bagi luka herpes bibir, laporan itu ialah pemerhatian seorang pesakit dari era tersebut dengan dosimetri yang lemah.

Siri sejarah yang lebih besar melibatkan lesi genital. Dalam siri herpes genital pada 1975 yang melibatkan 56 pesakit, 36 menerima metilena biru, tetapi hanya 35 yang pertama diperuntukkan secara rawak antara tiga pewarna, maka kohort itu bukan percubaan yang direka dengan kemas. Kira-kira 70 peratus kes berulang yang dirawat dilaporkan bertambah baik dalam sekitar 48 jam, tetapi kekerapan berulang tidak berkurang dengan ketara. Penyinaran di rumah menggunakan cahaya pendarfluor atau cahaya matahari tidak dikawal. Penambahbaikan akut tanpa pengurangan kejadian berulang selaras dengan prosedur setempat yang mempengaruhi lesi semasa tetapi bukan takungan laten. Peringatan yang sama juga terpakai pada protokol terapi fotodinamik menggunakan metilena biru.

Percubaan moden bagi luka herpes bibir bersaiz kecil dan tidak memberikan hasil yang selaras. Satu siri pada 2009 yang melibatkan empat pesakit herpes labialis menggunakan pewarna 0.01 peratus dengan laser 660 nm pada 120 J per cm persegi dan melaporkan penyembuhan pesat, tetapi tiada kumpulan kawalan dan fotobiomodulasi diberikan selepas itu, seperti yang dihuraikan dalam siri kes fotodinamik herpes labialis pada 2009. Percubaan yang memperuntukkan 75 pesakit secara rawak kepada rawatan fotodinamik, asiklovir topikal, atau kedua-duanya mendapati tiada perbezaan dalam tempoh penyembuhan atau kesakitan, menurut percubaan terapi fotodinamik dan asiklovir pada 2021. Percubaan rawak terhadap 24 pesakit menggunakan qPCR HSV-1 mendapati tiada perbezaan dalam pemulihan atau kejadian berulang sepanjang satu tahun, seperti yang dihuraikan dalam percubaan rawak terapi fotodinamik antimikrob untuk herpes simpleks pada 2025. Percubaan pada 2025 terhadap 60 pesakit yang menggunakan gabungan rawatan, iaitu rawatan fotodinamik dengan pewarna bersama fotobiomodulasi dan penyaliran vesikel, melaporkan kelegaan kesakitan yang lebih cepat yang tidak dapat dikaitkan khusus dengan pewarna, menurut laporan gabungan fotodinamik dan fotobiomodulasi pada 2025.

Pelaporan kesan buruk dalam kajian ini terhad. Makalah pada 1975 tidak menggunakan kaedah pengesanan moden. Kajian kecil kemudian melaporkan sedikit atau tiada kesan akut, tetapi pewarnaan biru memang berlaku dan kerengsaan fototoksik setempat masih mungkin terjadi. Pewarnaan bersama lampu berbeza daripada menelan pewarna, sebab itulah rekod keselamatan metilena biru membincangkan laluan penggunaan secara berasingan.

EBV: tiada bukti langsung tentang metilena biru

Bagi EBV, carian tidak menemukan bukti langsung. Tiada eksperimen yang disemak rakan sebidang atau percubaan terkawal yang ditemukan untuk tinjauan ini menunjukkan bahawa metilena biru, dengan atau tanpa cahaya, mengurangkan keupayaan EBV menjangkiti, menekan pengaktifan semula, atau menurunkan beban virus pada manusia. Kajian sel karsinoma nasofaring positif EBV menggunakan bahan pemeka lain dan mengukur daya hidup tumor, bukannya penyingkiran virus oleh metilena biru. Ulasan menyenaraikan EBV sebagai antara virus yang memerlukan percubaan pada masa hadapan, bukan sebagai indikasi yang telah ditetapkan.

Biologi menjelaskan sebab hasil HSV dalam tabung uji tidak boleh digunakan untuk EBV. Rawatan luka herpes bibir menempatkan ketiga-tiga keperluan, iaitu pewarna, oksigen, dan foton, pada satu permukaan yang boleh dicapai. EBV laten berada terutamanya dalam sel B yang tersebar dalam darah dan tisu limfoid. Cahaya merah topikal tidak dapat menyinari takungan yang tersebar itu, dan pewarna yang ditelan tidak membekalkan cahaya bersasar di tempat tersebut. Membunuh sel tumor positif EBV dengan bahan pemeka lain ialah pembunuhan sel, bukannya bukti aktiviti antivirus. Jurang itu penting apabila meneliti cara beban virus dan penanda pengaktifan semula sebenarnya diukur.

Rawatan oral dan kekeliruan tentang tempoh bebas kejadian berulang

Tiada percubaan manusia terkawal yang ditemukan untuk tinjauan ini menunjukkan bahawa metilena biru sistemik atau oral mengurangkan kejadian berulang luka herpes bibir, memendekkan tempoh penyembuhan, mengurangkan pelepasan virus, atau mengubah mana-mana titik akhir EBV seperti salinan DNA dalam darah atau air liur, atau penanda litik yang ditakrifkan. Bahan kajian herpes pada manusia menggunakan pewarna topikal bersama cahaya setempat. Pemberian dos sistemik tanpa penyinaran bersasar ialah intervensi yang berbeza dan memerlukan percubaannya sendiri: rawak, dibutakan, dan dikawal plasebo, dengan kes berulang yang disahkan, tempoh awal pemerhatian untuk menentukan kadar asas, semakan pendedahan yang ditetapkan terlebih dahulu, susulan selama enam hingga dua belas bulan, pensampelan swab bersiri dengan qPCR, pencetus yang direkodkan, dan pemantauan keselamatan. Prinsip umum tentang pemberian dos oral dan penyerapan metilena biru tidak menggantikan titik akhir tersebut.

Di sinilah kisah yang lazim diceritakan menjadi lemah. Seseorang memulakan beberapa intervensi serentak, melaporkan tiada luka herpes bibir selama berbulan-bulan, lalu mengaitkan hasil itu dengan salah satu intervensi. Episod HSV berlaku secara berkelompok kemudian tidak muncul selama berbulan-bulan, tanpa virus dihapuskan daripada ganglion deria. Pencetus berubah, jangkaan mempengaruhi pelaporan, dan kebetulan sahaja boleh menghasilkan sela tanpa episod. Dengan beberapa perubahan serentak, tiada perbandingan kontrafaktual yang dapat mengaitkan sela itu dengan satu komponen. Siri herpes genital pada 1975 menunjukkan pola sebaliknya: penambahbaikan akut bersama kekerapan berulang yang tidak bertambah baik. Menyembuhkan episod ini bukan konsep yang sama dengan mencegah episod seterusnya.

Jadual bukti mengikut virus dan keadaan

Cara menggunakan bukti ini

Tanya empat soalan bagi setiap rujukan. Cahaya atau gelap, kerana pemusnahan fotodinamik tidak meramalkan pemusnahan melalui penggunaan sistemik. Virion bebas, lesi semasa, atau takungan laten, kerana hanya sasaran yang sepadan dapat menjawab dakwaan tersebut. Keupayaan menjangkiti, penyembuhan, kejadian berulang, atau beban virus, kerana angka keupayaan menjangkiti tidak dapat menjawab soalan tentang kejadian berulang. HSV atau EBV, kerana lesi yang boleh dicapai dan takungan sel B yang tersebar merupakan masalah yang berbeza. Rekod kajian menyokong satu pernyataan yang terhad: metilena biru boleh menghasilkan fotopenyahaktifan HSV yang kuat apabila virus di luar sel bertemu dengan pewarna, oksigen, dan cahaya yang sesuai. Bukti bagi rawatan lesi berulang yang penting dari segi klinikal adalah terhad dan bercampur, bukti bagi pencegahan secara oral tiada, dan bukti langsung bagi kesan anti-EBV juga tiada. Tempoh tanpa luka herpes bibir semasa rejimen berbilang rawatan tidak mengubah mana-mana kesimpulan itu.