Istwa ble metilèn: soti nan koloran rive nan medikaman ak rechèch

Ble metilèn te rive jwenn yon pasyan anvan li te rive nan yon famasi.

Rapò Paul Guttmann ak Paul Ehrlich te pibliye an 1891 sou itilizasyon koloran an nan malarya gen de graf tanperati. Dezyèm nan kouvri soti 13 July rive 5 August, avèk tretman an ekri sou bò graf la jou apre jou. Antre pou 18 ak 19 July yo di "1 × 0,05 Methylenblau". Jou ki vin apre yo montre senk ak sèt dòz menm kantite a, epi rive 22 July, yon ti kantite kinin antre nan dosye a tou. Liy lafyèv la, ki monte-desann ant 37 °C ak 39.5 °C pandan premye mwatye graf la, vin prèske plat apre koloran an parèt epi li rete ant anviwon 36 °C ak 37.5 °C pandan twa semèn ki rete yo.

Pasyan an se te youn nan de moun yo, yo te dekri nan atik la kòm yon sèvitè kay ak yon maren. Konpoze yo te resevwa a te deja yon koloran tekstil komèsyal pandan kenz ane, epi de mesye sa yo fè pati premye moun ki anrejistre kòm moun yo te trete avèk yon medikaman konplètman sentetik ki te vize yon òganis espesifik.

Koloran an te vini an premye

William Henry Perkin te kreye premye koloran sentetik ki te reyisi komèsyalman an 1856. Perkin te gen dizwit ane, li t ap travay nan yon laboratwa lakay li pandan vakans Pak, epi li t ap eseye sentetize kinin. Olye de sa, li te jwenn yon rezidi nwa, li te fonn li, epi li te jwenn yon koulè ki te fikse briyan sou swa. Li te pran patant pou li an August 1856 epi, rive nan fen 1857, li te gen yon faktori ki t ap founi yon atelye koloran swa nan London.

An 1875 Adolf von Baeyer te sentetize yon koloran wouj epi li te rele li eosin, soti nan Eos, mo grèk pou douvanjou. An 1876 Heinrich Caro, ki te direktè laboratwa Badische Anilin- und Soda-Fabrik nan moman an, te devlope ble metilèn ansanm ak Baeyer kòm yon koloran ki baze sou anilin pou koton. Yo pa t etabli estrikti chimik li nèt jiskaske anviwon nèf ane apre.

Orijin sa a toujou vizib nan fason yo rele sibstans lan. "Methylene blue" se yon non komèsyal ki soti nan katalòg koloran an, se pa yon deskripsyon chimik. Konpoze non an refere a se methylthioninium chloride, epi diferans ki genyen ant non an, sèl la ak idrat li yo vin enpòtan depi nenpòt moun peze materyèl la oswa li yon spesifikasyon.

Kolorasyon te sèvi kòm pon an

Wout ki soti nan faktori koloran rive nan lopital te pase nan mikwoskòp la, epi li te kòmanse anvan ble metilèn te egziste. Wilhelm Erb te premye moun ki te aplike yon koloran sentetik sou san, lè li te itilize asid pikrik an 1865, epi li te wè yon modèl retikilè andedan kèk globil wouj.

Tèz doktora Paul Ehrlich an 1878 te konpare kolorasyon istolojik ak koloran tekstil epi li te soutni ke toude se te reyaksyon chimik. Pandan li t ap travay anba Robert Koch sou basilis tibèkiloz la, li te klase koloran anilin yo an gwoup asid ak bazik epi li te etabli ke chak gwoup kolore diferan pati nan yon selil. An 1880 li te melanje de gwoup yo ansanm: li te vide yon solisyon satire ble metilèn nan fuchsin asid jiskaske likid ki anlè a te vin klè. Rezilta a, ke li te rele neutralen Farbkörper oswa koloran net, te pwodui twa koulè olye de youn, li te revele granil nan selil polimòfonikleyè yo ki pa t vizib anvan, epi li te rann premye konte diferansyèl lekosit la posib. Paske granil sa yo te pran toude eleman melanj lan, Ehrlich te kreye mo neutrophil pou selil ki te pote yo.

De ane apre, Koch te itilize ble metilèn pou jwenn basilis tibèkiloz la, epi an 1883 Ehrlich te amelyore metòd la. An 1886 li te pibliye yon lòt kalite obsèvasyon: li te enjekte koloran an nan bèt vivan epi li te konpare fòs ak ki chak ògàn te absòbe li, epi li te konkli li te gen yon afinite remakab pou sèvo ak tisi nève. Li te atribye afinite sa a ak sik oksidasyon-rediksyon koloran an, yon fenomèn li te obsève ane anvan an. Sik sa a se rezon tou ki fè yon solisyon ble metilèn pèdi koulè li lè oksijèn li fin konsome epi li reprann li lè lè antre ankò. Eksperyans ki te mezire konsekans sik sa a pou premye fwa soti nan yon deseni ki vin apre, epi mekanis la menm se yon sijè apa de istwa a.

Parazit la ak nwayo koulè vyolèt la

Alphonse Laveran te jwenn parazit malarya a an 1880 lè li te egzamine san fre ki pa t kolore. Pou wè li regilyèman nan yon fwoti sèk, yo te bezwen yon koloran, epi koloran epòk la te sèlman pwodui wouj ak ble.

An 1888, patolojis polonè Czesław Cheçinski te ranplase fuchsin asid la ak eosin, sa ki te bay yon melanj ble metilèn ak eosin. Ka ki te dèyè metòd li a se te yon sòlda ki te mouri ak malarya sou 30 September 1887. Nan fim san yo, Cheçinski te wè fòm ble ki sanble ak flè margerit, yo rekonèt kounye a kòm Plasmodium malariae, ak fòm ki sanble ak digo, yo rekonèt kounye a kòm gametosit Plasmodium falciparum. Rezilta a te mete fen an menm tan ak de eksplikasyon konpetitè sou maladi a: teyori miasma a, ak deklarasyon Edwin Klebs ak Corrado Tommasi-Crudeli ki te di yon bakteri te lakòz malarya.

Parazit la te vizib. Nwayo li pa t vizib, sa ki te kite nati li ouvè pou kestyon. Ernst Malachowski, yon doktè nan Breslau, te rezoud pwoblèm sa a pa aksidan epi apre sa avèk entansyon. Li te remake yon kolorasyon diferansyèl nan nwayo plasmodial la nan yon preparasyon an 1889 epi li pa t kapab repwodui li. Fè ble metilèn nan pi asid pa t ede. Lè li te fè li pi alkalin avèk boraks, efè a te parèt chak fwa. Li te demontre teknik la an piblik sou 15 June 1890 epi li te pibliye li menm ane a, ak yon metòd pi konplè an August 1891.

Dmitri Romanowsky te pibliye pwòp vèsyon pa li an September 1891. Pi bon rezilta li yo te soti nan yon boutèy solisyon ble metilèn yo te neglije, ki te gen mwazi epi ki te gen plis pase de mwa. Metòd Malachowski a te fèt ak entansyon epi, dapre pawòl pa li, li te fasil pou repwodui; metòd Romanowsky a te yon chemen san sòti ki te mache yon sèl fwa. Malgre sa, non eponim lan te ale jwenn Romanowsky, epi diskisyon sou kiyès ki te pwodui koulè vyolèt ki te rann nwayo a vizib se yon lòt istwa ki gen pwòp dokiman pa li.

**

Figi:** dezyèm graf tanperati ki soti nan rapò Guttmann ak Ehrlich an 1891. Panèl anlè a kouvri 13 rive 24 July epi panèl anba a kouvri 25 July rive 5 August; antre nan maj yo bay non dòz yo te administre, epi tanperati a rete toupre nòmal pandan twa dènye semèn dosye a. Repwodui soti nan rapò a jan yo te eskane li pou Krafts, Hempelmann ak Skórska-Stania, Parasitology Research 111:1–6 (2012), PMID 22411634.

Yo te dekouvri ke matirasyon an se te demetilasyon

Pèsonn ki te patisipe nan ane 1890 yo pa t konnen ki sa "matirasyon" te fè ble metilèn. Repons lan te soti nan chimi endistriyèl. Heinrich August Bernthsen te sentetize konpoze paran phenothiazine an 1883, li te etabli an 1885 ke ble metilèn te fè pati fanmi sa a, epi nan menm peryòd la li te montre ke kondisyon alkalin retire gwoup metil nan koloran an, sa ki pwodui konpoze yo rele azures jodi a.

Bernard Nocht te ekstrè fraksyon aktif la an 1898 ak 1899 epi li te sèlman kapab rele li Rot aus Methylenblau, wouj ki soti nan ble metilèn. Michaelis te idantifye li kòm azure I an 1901. Jenner te entwodui metanòl absoli kòm sòlvan pou presipite koloran an an 1899, sa ki te retire nesesite pou fikse fim san yo ak chalè; Leishman ak Reuter te konbine toude avans yo; Wright te pibliye yon metòd senplifye an 1902. Kontribisyon Giemsa a, an 1902 tou, se te sispann depann de yon solisyon ki te matirite o aza epi pito itilize kantite mezire nan koloran yo te konnen. Apre sa, li te refize pibliye fason li te fabrike methylene azure pi epi li te vann metòd la bay laboratwa Dr. Grübler, ki te mete pwodwi a sou mache kòm azure I epi ki te deklare se sèlman vèsyon pa li ki te vrè koloran Giemsa.

De gè mondyal te fini travay la pa aksidan. Lè koloran alman yo te vin enposib pou jwenn, Lillie, Roe ak Wilcox te travay sou ranplasman ameriken yo epi yo te jwenn ke pi bon kolorasyon an te soti nan twa eleman separe: ble metilèn pi, pwodwi degradasyon li azure B, ak eosin. Twa eleman sa yo toujou rete prensipal konpozan koloran yo itilize pou dyagnostike malarya jodi a, anba yon non ki kounye a mete Malachowski, Wright ak Giemsa ansanm.

**

Figi:** fòm bag Plasmodium falciparum nan globil wouj imen, kolore avèk yon metòd kalite Romanowsky. Estrikti koulè vyolèt andedan bag la se kromatin ble metilèn Malachowski te trete ak boraks la te rann vizib pou premye fwa. Imaj pa Ernst Hempelmann, lage nan domèn piblik.

Yon sèl non, plizyè materyèl

Ane ki te separe eleman sa yo te kite yon pwoblèm ki te dire pi lontan pase chimi a. Ralph Lillie te trase liy lan an 1969 ant koloran biyolojik, "fabrike selon spesifikasyon strik ki koresponn ak itilizasyon delika ak egzijan yo", ak koloran ki pa biyolojik pou kolore tekstil, ki "mande estanda fabrikasyon mwens strik ak mwens egzijan". Toude kalite pwodwi yo te pote menm non an, epi diferans ki genyen ant yo pa t janm yon senp diferans nan degre. Yon spesifikasyon ki ekri pou koton ak yon spesifikasyon ki ekri pou yon reyaktif dyagnostik pa ka sèvi youn nan plas lòt, epi yon materyèl ki fabrike dapre spesifikasyon tekstil la pa t fèt pou vale.

Azure B se egzanp ki pi klè a. Li se fòm monodemetile ble metilèn, li gen aktivite famakolojik pa li ki mezurab, epi li te prezan kòm yon eleman san kontwòl nan preparasyon klinik ble metilèn pandan plis pase yon syèk anvan nenpòt moun te separe de yo. Yon gwoup te jwenn ke tisi imen yo te pran pandan otopsi apre administrasyon ble metilèn te gen 5 to 14 per cent ble metilèn ki pa t chanje ak 86 to 95 per cent azure B. Kesyon si yon preparasyon presi ta dwe gen azure B, epi nan ki limit, se yon kestyon spesifikasyon, epi rechèch sou azure B kòm yon enpurte ak yon metabolit kontinye sijè a depi la.

Se nan yon spesifikasyon tou konsekans pratik la ye. Konfòmite USP se chemen pou rive nan pi wo nivo pite mache a ofri, paske se yon estanda tès konplè ki pibliye olye de yon sèl mezi. Li kouvri idantite, assay, enpurte òganik ki gen ladan koloran azure yo, sòlvan rezidyèl, enpurte elemantè, rezidi apre ignisyon, limit mikwòb ak endotoksin bakteryèn. Yon sètifika ki rapòte yon rezilta metal lou epi ki rele sa konfòmite USP rapòte sèlman yon liy nan lis sa a.

Blupreme jwenn ble metilèn li nan men yon manifakti famasetik epi li pibliye tout sètifika analiz la, avèk tès sou tout spesifikasyon USP olye de metal lou sèlman. Gid pou li yon sètifika analiz ak sa deziyasyon USP la etabli ak sa li pa etabli esplike kijan pou verifye dokiman an kont deklarasyon an.

Sa istwa a pèmèt, ak sa li pa pèmèt

Liy istorik la reyèl, epi li pi long pase sa pifò paj pwodwi fè konprann. Yo te itilize ble metilèn pou trete malarya an 1891, yo te rapòte li kòm yon sedatif nan sikoz ak ajitasyon an 1899, epi branch chimik li pase atravè quinacrine, chloroquine, promethazine ak chlorpromazine. Atik Ehrlich te pibliye an 1890 avèk Arthur Leppmann te dekri soulajman doulè nevraljik ak rimatismal, epi apre sa li te konsidere itilizasyon koloran an nan maladi mantal men li te deside pa teste li.

Okenn nan sa pa etabli yon itilizasyon modèn. Rezilta malarya an 1891 la te baze sou de pasyan ak yon graf tanperati. Yon molekil ki byen konnen depi lontan bay yon rezon pou etidye li, li pa yon rezilta an li menm. Istwa konpoze an kòm yon medikaman ak esè modèn sou malarya reponn kestyon diferan ak sa Ehrlich t ap poze yo, epi fòk yo li kritè evalyasyon yo selon pwòp tèm pa yo.

Gen yon detay nan dosye a ki fè pati prezan an plis pase pase a. Lè chèchè yo te fè esè ble metilèn pou malarya nan Burkina Faso nan ane 2000 yo, yo te jwenn tèt yo ap konpetisyon pou materyèl kalite famasetik, epi yo te rapòte ke pri matyè premyè a te ogmante pa yon faktè anviwon yon santèn depi li te gen validasyon GMP. Yon koloran te kapab ranplase. Yon medikaman pa t kapab. Distenksyon Lillie te trase an 1969 la se menm distenksyon ki detèmine sa yon boutèy genyen jodi a.