Metilensko modrilo naspram pristupa s NAD+: mehanizmi, dokazi i tvrdnje o kombiniranju

Metilensko modrilo i dodaci prehrani koji se prodaju kao pojačivači NAD+ objašnjavaju se riječima mitohondriji i stanična energija. Nijedan od tih opisa ne govori vam što proizvod zapravo radi.

Ta dva pristupa djeluju na različite varijable. Jedan pokušava promijeniti količinu NAD+ u vašim stanicama. Drugi mijenja omjer njegovih dvaju oblika. To nisu dva puta do istog cilja.

Dvije veličine koje se stalno brkaju

NAD+ je koenzim. Prima par elektrona u obliku hidridnog iona i postaje NADH. Kada NADH preda te elektrone dalje, ponovno postaje NAD+. Stanice se neprestano služe tim ciklusom: tako energija dobivena iz hrane dolazi do proteinske mašinerije koja stvara ATP.

Budući da su NAD+ i NADH dva stanja iste molekule, u stanici postoje dvije zasebne veličine koje vrijedi pratiti. Prva je ukupna zaliha: koliko ukupno ima NAD+ i NADH. Druga je njihov omjer, koji opisuje koliko su prijenosnici elektrona trenutačno opterećeni elektronima.

Akumulacijsko jezero čini tu razliku opipljivom. Volumen iza brane predstavlja zalihu. Raspodjela između vode zadržane uzvodno i vode ispuštene nizvodno predstavlja omjer. Taj omjer možete povećati bez dodavanja litre vode, otvaranjem zapornice. To nije metafora za djelovanje metilenskog modrila. Bliže je doslovnom opisu.

Pristup opskrbom

Dodaci prehrani s prekursorima NAD+, uključujući nikotinamid ribozid, nikotinamid mononukleotid i nikotinamid, služe kao građevni materijal. Stanice stvaraju NAD+ reciklažnim putem koji se naziva put spašavanja, a prekursori ulaze u taj put. Cilj je povećati zalihu.

U životinja je to dobro utvrđeno: u mnogim modelima tkivni NAD+ opada sa starenjem i metaboličkim bolestima, a davanje prekursora uglavnom ga povećava. Kod ljudi je slika uža. Ispitivanja na ljudima doista pokazuju da ti spojevi povećavaju izmjerene razine NAD+ u krvi. Ono što nisu pokazala jest dosljedno poboljšanje kliničkog ishoda, odnosno onoga što bi osoba primijetila ili što je ispitivanje osmišljeno mjeriti.

„Razine NAD+ porasle su” opisuje mjerenje nečega unutar tijela. To nije nalaz o tome kako se netko osjećao, kretao ili oporavljao.

Što metilensko modrilo radi umjesto toga

Metilensko modrilo nije prekursor. Ono je redoks-bojilo koje se u medicini upotrebljava već znatno dulje od stoljeća, a njegove odobrene primjene uže su od onih koje se istražuju.

Unutar stanice enzimi ovisni o flavinu reduciraju ga u bezbojni oblik, leukometilensko modrilo, koji se zatim ponovno oksidira. Elektroni koji bi prošli kroz kompleks I, prvu postaju respiratornog lanca, mogu se umjesto toga odvesti iz NADH putem metilenskog modrila. NADH postaje NAD+.

Omjer raste. Zaliha se ne povećava.

Istraživanje na štakorima s dijabetičkim srcem to je izravno izmjerilo u izoliranim srčanim mitohondrijima. Dodavanje metilenskog modrila u koncentracijama od 6 do 18 mikromola po litri tijekom oksidacije masnih kiselina uzrokovalo je pad NADH i omjera NADH prema NAD+ ovisan o dozi. Apsolutna količina NAD+ mijenjala se mnogo manje nego količina NADH, što biste i očekivali od spoja koji pretvara jedan oblik u drugi, umjesto da stvara više bilo kojeg od njih.

Važno je kamo ti elektroni odlaze. U izoliranim moždanim mitohondrijima metilensko modrilo u koncentracijama od 100 nanomola po litri do 1 mikromola po litri poboljšalo je proizvodnju energije kada je respiratorni lanac bio inhibiran, a istodobno je povećalo proizvodnju vodikova peroksida i smanjilo njegovo uklanjanje u svim ispitanim uvjetima. Autori nastanak vodikova peroksida povezuju s izravnom redukcijom kisika reduciranim metilenskim modrilom. Elektroni koji tim putem napuštaju NADH ne nestaju. Završavaju na kisiku.

Zasebno istraživanje na tkivu Ahilove tetive jasno iznosi tu činjenicu. Metilensko modrilo obnovilo je ravnotežu NAD+/NADH i povećalo proizvodnju ATP-a u ozlijeđenim tenocitima i u štakorskom modelu tendinopatije, a rad bilježi da ukupna zaliha NAD nije pokazala značajnu promjenu.

Što utvrđuju pokusi na tkivima i životinjama

Četiri pokusa tijekom četiri desetljeća prate istu ideju i opetovano pokazuju njezine granice.

Pri kroničnom davanju alkohola štakorima etanol je smanjio i citosolni i mitohondrijski omjer NAD+/NADH u jetri. Dodavanje metilenskog modrila prehrani uglavnom je spriječilo taj pomak. Nije smanjilo zamašćenje jetre koje je etanol uzrokovao. Ispravljanje omjera nije ispravilo ishod. Taj rezultat iz 1985. vrijedi zapamtiti prije prihvaćanja bilo koje tvrdnje da je redoks-pomak mehanizam koji stoji iza koristi.

U jetrenim stanicama i miševima na prehrani bogatoj mastima metilensko modrilo povećalo je omjer NAD+/NADH, povećalo SIRT1, smanjilo acetilaciju PGC-1alpha, aktiviralo AMPK i smanjilo nakupljanje masti u jetri. Ovdje se ishod doista mijenjao zajedno s omjerom. Isti rad pokazuje da učinak nije monoton: tri miligrama po kilogramu dnevno povećala su sadržaj mitohondrijske DNA učinkovitije nego deset, dok su potrošnja kisika i signalizacija AMPK rasle s dozom.

U dijabetičkom srcu metilensko modrilo davano u vodi za piće tijekom jedanaest tjedana smanjilo je omjer NADH prema NAD+ u srčanim mitohondrijima i povećalo aktivnost sirtuina 3. Acetilacija lizina smanjila se na 83 mjesta u 34 proteina, pretežno onima uključenima u prijenos i oksidaciju masnih kiselina. Ejekcijska frakcija poboljšala se. No respiracija posredovana kompleksom I nije obnovljena. Pokus s isključivanjem gena razdvojio je dva učinka koja je lako poistovjetiti: promjena omjera odvijala se uglavnom bez sirtuina 3, dok je deacetilacija ovisila o njemu.

U istraživanju tetive metilensko modrilo primijenjeno je dok je kompleks I bio kemijski blokiran rotenonom. I dalje je obnavljalo ravnotežu NAD+, ali i dalje nije sprječavalo oksidacijski stres, degeneraciju matriksa i gubitak stanične vijabilnosti. Obnova omjera nije bila dovoljna da se tkivo oporavi.

List za ispis s potpunim bibliografskim navodima koristi iste retke.

Zašto se sirtuini uključuju u raspravu

Sirtuini uklanjaju acetilne skupine s proteina i pritom troše NAD+. Njihova aktivnost reagira na dostupnost NAD+, pa svaki spoj koji mijenja tu dostupnost posljedično mijenja aktivnost sirtuina.

To je okosnica većine marketinških tvrdnji o „metilenskom modrilu za NAD+”. Tu ujedno nastaje i pogreška u zaključivanju. Promjena omjera može povećati aktivnost sirtuina. Iz toga ne slijedi da proizvod opskrbljuje NAD+, niti da je učinak jednak uzimanju prekursora. Redoks-tumačenje tih mjerenja ima vlastiti skup zamki o kojima vrijedi pročitati prije prihvaćanja bilo kojeg od tih prikaza.

Što je ispitano na ljudima

Metilensko modrilo desetljećima se klinički primjenjuje u akutnim stanjima uz nadzor: kod methemoglobinemije, neurotoksičnosti povezane s ifosfamidom i izrazito niskog krvnog tlaka tijekom operacije. To su uske, nadzirane primjene, a ne dokazi za svakodnevnu oralnu uporabu radi poboljšanja performansi.

Pretraživanjima za ovaj članak nije pronađeno istraživanje na ljudima koje bi mjerilo metabolite NAD+ nakon primjene metilenskog modrila u zdravih dobrovoljaca. Gore navedeni nalazi potječu iz izoliranih mitohondrija, kultiviranih stanica, štakorskog tkiva i eksplantata ljudskog tkiva. Eksplantirana tetiva koja se održava živom u posudi koristan je korak naprijed u odnosu na staničnu liniju. I dalje nije čovjek.

Literatura o prekursorima doista uključuje istraživanja na ljudima, a rezultati su skromni. NAD+ u krvi raste. Klinički ishodi neujednačeni su, a učinci uglavnom mali.

Stoga je tvrdnja o kombiniranju opravdano pitanje s nezadovoljavajućim odgovorom: nijedno objavljeno istraživanje, ispitivanje ni serija slučajeva pronađena za ovaj članak nije ispitala metilensko modrilo zajedno s nikotinamid ribozidom, nikotinamid mononukleotidom ili infuzijom NAD+. Svatko tko tu kombinaciju opisuje kao potkrijepljenu dokazima ili kao sinergijsku ekstrapolira iz dvaju zasebnih skupova dokaza.

Ekstrapolacija može zakazati u oba smjera. Može biti previše optimistična ako zaliha, nakon obnove omjera, uopće nije bila ograničavajuća varijabla. Može biti i previše pojednostavljena jer metilensko modrilo ima odnos doze i učinka koji mijenja smjer. Sami istraživači opisuju taj spoj kao hormetičan: niže koncentracije pogoduju redukciji, dok više koncentracije preusmjeravaju elektrone izvan respiratornog lanca i mogu djelovati prooksidativno. Dodavanje više supstrata ne čini tu krivulju sigurnijom.

Postoje i rizici od interakcija koji nemaju veze s NAD+. Metilensko modrilo inhibira monoaminooksidazu A, zbog čega uz određene antidepresive nosi rizik povezan sa serotoninom; pregled prijavljenih slučajeva toksičnosti za središnji živčani sustav utvrdio je da je 13 od 14 slučajeva zadovoljilo Hunterove kriterije za serotoninsku toksičnost. Pri visokoj izloženosti može uzrokovati i methemoglobinemiju. Ako uzimate lijekove na recept, pitanje o kombiniranju koje trebate postaviti liječniku odnosi se na te putove, a ne na redoks-ravnotežu. Isti oprez vrijedi i za uobičajene kombinacije: drugi dodaci prehrani koji se uzimaju uz metilensko modrilo imaju vlastitu, uglavnom neispitanu, dokaznu podlogu.

Zašto čistoća određuje koji pokus zapravo provodite

Proizvod s metilenskim modrilom mješavina je dok laboratorij ne dokaže suprotno. Nečistoća koja je ovdje važna jest Azure B, demetilirani fenotiazin koji nije inertan. Riječ je o redoks-aktivnom bojilu s istim osnovnim elektrokemijskim svojstvima, pa proizvod koji sadrži značajnu količinu Azure B nije čišća ili nečistija inačica iste intervencije. To je drukčija mješavina koja djeluje na isti put, u omjeru koji nitko nije karakterizirao.

Kvaliteta prema USP-u način je na koji kupac dolazi do definirane tvari. Proizvod koji nije kvalitete prema USP-u najvjerojatnije je bojilo tekstilne kvalitete, a tekstilna bojila sadrže nečistoće zbog kojih nisu prikladna za konzumaciju, uključujući teške metale i ostatna otapala.

Razlika ne postoji samo između razreda kvalitete. Mnogi prodavači koji tvrde da je proizvod usklađen s USP-om ispituju samo teške metale, a zatim taj pojedinačni skup analiza predstavljaju kao dokaz potpune usklađenosti. Potpuna specifikacija obuhvaća identitet, čistoću, organske nečistoće, ostatna otapala, elementarne nečistoće, ostatak nakon žarenja, mikrobiološke granice i bakterijske endotoksine. Djelomičan skup analiza ne može ništa reći o onome što izostavlja, a izostavljene stavke uključuju srodne tvari i ostatke otapala.

Blupreme nabavlja metilensko modrilo od farmaceutskog proizvođača i objavljuje certifikat analize koji obuhvaća potpunu specifikaciju, tako da je tvar u bočici ona koju istraživanja opisuju. Ako prije kupnje želite sami provjeriti logiku iza toga, članak kako čitati istraživanja o metilenskom modrilu objašnjava što pojedina vrsta istraživanja može, a što ne može pokazati.

Razlika koja izdržava kritičku provjeru

Dodavanje prekursora NAD+ mijenja količinu NAD+ koja postoji. Metilensko modrilo mijenja ono što postojeći NAD+ radi. Prvo je pitanje opskrbe, drugo je pitanje protoka, a pokusi koji podupiru jedno govore malo o drugome.

Metilensko modrilo iza sebe ima dosljedan mehanizam, potvrđen u izoliranim mitohondrijima i životinjskom tkivu, uz jasno i opetovano ograničenje: promjena omjera nije isto što i popravak tkiva. Nedostaju mu ispitivanja koja mjere učinak na NAD+ u ljudi. Ono što nedostaje objema kategorijama jest izravno ispitivanje njihove zajedničke primjene.

Obje kategorije zaslužuju isti pristup. Pitajte koju varijablu proizvod navodno mijenja, a zatim koja mjerenja te varijable postoje u ljudi. Kada je odgovor istraživanje na stanicama, štakor ili uvjerljiv biološki put, to je upravo ono što jest. Nije dokaz za kombinaciju dodataka prehrani.