मेथिलीन ब्लू और आंत का माइक्रोबायोम: चूहों पर अध्ययन क्या दिखाता है

मेथिलीन ब्लू चूहों के मल में मापी गई जीवाणुओं की संरचना बदल सकता है। यह निष्कर्ष स्थापित नहीं करता कि यह मनुष्यों की आंत का स्वास्थ्य सुधारता है, चुनिंदा रूप से हानिकारक जीवाणुओं को हटाता है या डिस्बायोसिस का उपचार करता है। महत्वपूर्ण अंतर सूक्ष्मजीव समुदाय को बदलने और उस समुदाय को आश्रय देने वाले जीव के स्वास्थ्य को सुधारने के बीच है।

इस प्रश्न से सबसे सीधे संबंधित चूहों के प्रयोग में जीवाणु DNA और भूलभुलैया में प्रदर्शन मापा गया था। ये माप ऐसे पैटर्न पहचान सकते हैं जिनकी आगे जांच की जानी चाहिए। अपने आप में ये स्थापित नहीं कर सकते कि जीवाणुओं में बदलाव के कारण व्यवहार में बदलाव आया या इनमें से कोई भी पाचन संबंधी लक्षणों से राहत का पूर्वानुमान देता है।

शोधकर्ताओं ने वास्तव में क्या मापा

गुरीव और सहकर्मियों के 2020 के प्रयोग में तीन महीने के C57Bl/6 चूहों को चार सप्ताह तक 15 mg/kg/day मेथिलीन ब्लू (नौ चूहे), 50 mg/kg/day मेथिलीन ब्लू (आठ चूहे) या नियंत्रण के लिए पानी (13 चूहे) दिया गया। प्रयोग की रूपरेखा वाले खंड में दवा देने का मार्ग या पशुओं का लिंग स्पष्ट रूप से नहीं बताया गया है।

उपचार से पहले और हर सप्ताह मल के नमूने लिए गए। जांचकर्ताओं ने जीवाणु समूहों के qPCR और अतिरिक्त 16S DNA एम्प्लिकॉन अनुक्रमण का उपयोग किया। अंतिम पांच दिनों में चूहों को दो दिन परीक्षण की परिस्थितियों से परिचित कराया गया, जिसके बाद तीन दिन पुरस्कार आधारित T-आकार की भूलभुलैया का परीक्षण किया गया। हर दिन दस विकल्प चुनने पर अंक दिए गए।

ये चूहों को प्रयोग में दी गई मात्राएं हैं, मनुष्यों के लिए खुराक की सिफारिशें नहीं। आंत तक कितनी दवा पहुंचती है, इसकी व्याख्या में दवा देने का मार्ग मायने रखता है। यदि मार्ग निर्दिष्ट नहीं है, तो उसे अनिर्दिष्ट ही माना जाना चाहिए। शरीर के वजन के आधार पर मात्रा का रूपांतरण मनुष्यों के लिए सुरक्षित या प्रभावी उपयोग पद्धति स्थापित नहीं करेगा।

माइक्रोबायोम अध्ययन के प्रमाणों की तालिका

यह मौलिक तालिका अध्ययन में बताए गए अवलोकनों को उन अतिरिक्त दावों से अलग करती है जो पाठक के सामने आ सकते हैं। जीवाणु समूहों के नाम शोधपत्र की शब्दावली के अनुसार हैं।

तालिका को जानबूझकर इस आधार पर विभाजित किया गया है कि क्या मापा गया था। एक पंक्ति में अनुकूल उत्तर दूसरी पंक्ति में अनुपस्थित उत्तर की भरपाई नहीं कर सकता। उदाहरण के लिए, भूलभुलैया में बेहतर प्रदर्शन आंत की सूजन के बारे में अनुपस्थित प्रमाण उपलब्ध नहीं कराता।

जीवाणुओं के प्रतिशत से यह क्यों नहीं पता चलता कि कौन से जीवाणु मारे गए

सापेक्ष प्रचुरता शब्द मापे गए समुदाय में किसी समूह का हिस्सा बताता है। यह प्रति ग्राम मल में जीवाणु कोशिकाओं की संख्या से अलग है। अपने माइक्रोबायोम के मात्रात्मक स्वरूप निर्धारण के अध्ययन में वांडेपुट और सहकर्मियों ने दिखाया कि समुदायों के बीच अंतर की व्याख्या करते समय सूक्ष्मजीवों की कुल मात्रा क्यों मायने रखती है।

उदाहरण के लिए, एक नमूने में जीव A की दस इकाइयां और अन्य जीवों की 90 इकाइयां मानें। A का हिस्सा 10% है। यदि A दस पर ही रहे, जबकि अन्य जीव घटकर 40 रह जाएं, तो अब A का हिस्सा 20% होगा। उसकी कुल मात्रा बढ़े बिना उसका हिस्सा दोगुना हो गया। यह गणितीय उदाहरण मेथिलीन ब्लू प्रयोग का परिणाम नहीं है।

यही अंतर जीवाणुओं को मारने संबंधी दावों को सीमित करता है। DNA पर आधारित अनुपात जीवित रहने का प्रत्यक्ष परीक्षण नहीं है। जीवित जीवाणुओं की संख्या में कमी स्थापित करने के लिए प्रयोग में ऐसे माप चाहिए जो जीवित रहने की क्षमता की जांच करें और कुल आबादी को ध्यान में रखें। कार्य में बदलाव स्थापित करने के लिए उससे संबंधित कार्यात्मक माप चाहिए, जैसे किसी चयापचय उत्पाद का मापन, केवल जीवाणुओं के नामों पर आधारित अनुमान नहीं।

व्यापक श्रेणियों के नाम जैविक विविधता को भी छिपाते हैं। पूरे संघ को लाभकारी या हानिकारक मान लेना उन जीवों और गतिविधियों की अनदेखी करता है जो किसी विशेष परिणाम के लिए जिम्मेदार हैं। इसलिए किसी अनुपात में बदलाव अपने आप में न तो डिस्बायोसिस का निदान है और न ही उसके ठीक होने का प्रमाण।

क्या माइक्रोबायोम से भूलभुलैया के परिणाम की व्याख्या हुई?

प्रयोग में दवा की मात्रा, जीवाणुओं की संरचना और व्यवहार का अध्ययन एक साथ किया गया। यह परिकल्पना बनाने के लिए उपयोगी है। हमारी व्याख्या यह है कि प्रयोग की रूपरेखा कई संभावित कारणों के बीच अंतर नहीं करती: व्यवहार पर दवा का प्रत्यक्ष प्रभाव, सूक्ष्मजीवों के माध्यम से अप्रत्यक्ष प्रभाव या समान मात्रा के प्रति व्यवहार और जीवाणुओं की अलग-अलग प्रतिक्रियाएं।

मध्यस्थ भूमिका की जांच करने वाला अधिक मजबूत प्रयोग दवा से स्वतंत्र रूप से प्रस्तावित सूक्ष्मजीवी मध्यस्थ में बदलाव करेगा। शोधकर्ता जांच सकते हैं कि क्या किसी परिभाषित समुदाय का स्थानांतरण प्रभाव को भी स्थानांतरित करता है या किसी प्रस्तावित सूक्ष्मजीवी मार्ग को हटाने से वह प्रभाव रुकता है। ऐसे प्रयोगों में इस बात के लिए भी नियंत्रण आवश्यक हैं कि साथ में और क्या स्थानांतरित या परिवर्तित हो रहा है।

व्यवहार संबंधी परिणाम को भी उतनी ही सावधानी से समझना चाहिए। पुरस्कार आधारित भूलभुलैया में पशु को विशिष्ट परिस्थितियों में विकल्प चुनने होते हैं। आकलन के सिद्धांत के अनुसार, प्रदर्शन खोजबीन की इच्छा, चलने-फिरने, पुरस्कार पाने की प्रेरणा और सीखने पर निर्भर हो सकता है। किसी परिणाम को “बेहतर संज्ञान” कहना इन अंतरों को समेटकर एक कर देता है। सीधे मापा गया कार्य अधिक जानकारी देने वाला विवरण बना रहता है।

क्या मेथिलीन ब्लू आंत के जीवाणुओं को मारता है?

मेथिलीन ब्लू प्रयोगशाला की परिभाषित परिस्थितियों में रोगाणुरोधी गतिविधि में भाग ले सकता है। इससे यह स्पष्ट नहीं होता कि मुंह से दिए जाने के बाद पूरे आंत संबंधी समुदाय में क्या होता है।

उदाहरण के लिए, प्रकाशगतिक विधि से जीवाणुओं को निष्क्रिय करने के एक प्रयोगशाला अध्ययन में प्रकाश-संवेदी पदार्थों और नियंत्रित प्रकाश के साथ E. coli और S. aureus का परीक्षण किया गया। इसमें कॉलोनी बनने और झिल्ली को होने वाली क्षति का आकलन किया गया तथा अंधेरे में रखे गए समकक्ष नियंत्रण भी शामिल थे। परीक्षण की गई उन परिस्थितियों में केवल प्रकाश या केवल प्रकाश-संवेदी पदार्थ का कोई प्रभाव नहीं था।

ये नियंत्रण उस प्रयोग के भीतर कारण संबंध के एक महत्वपूर्ण प्रश्न का उत्तर देते हैं: दोनों के संयोजन का क्या योगदान था? किसी पदार्थ को निगलना जीवाणुओं के निलंबन पर प्रकाश डालने जैसी परिस्थितियां नहीं बनाता। दूसरी ओर, एक सांद्रता और अवधि पर अंधेरे वाले नियंत्रण में प्रभाव न मिलना यह सिद्ध नहीं करता कि प्रकाश के बिना दिया गया पदार्थ हर परिस्थिति में जैविक रूप से निष्क्रिय होता है। रोगाणुरोधी शोध का अवलोकन परिस्थितियों पर निर्भर इन अंतरों को समझाता है।

आंत के समुदाय का अध्ययन किसी विशेष संक्रमण के उपचार को भी स्थापित नहीं कर सकता। जीव की पहचान करना और उपयुक्त नैदानिक परिणाम प्रदर्शित करना अलग कार्य हैं। यह बात परजीवियों के उपचार संबंधी दावों का आकलन करते समय भी लागू होती है।

मानव आंत के स्वास्थ्य संबंधी दावों के लिए इसका क्या अर्थ है

इस लेख के लिए की गई केंद्रित साहित्य खोज में मनुष्यों के आंत संबंधी माइक्रोबायोम का ऐसा नियंत्रित परीक्षण नहीं मिला जो मेथिलीन ब्लू से आंत के स्वास्थ्य को लाभ स्थापित करता हो। यह मिले हुए प्रमाणों के बारे में कथन है, इस बात का प्रमाण नहीं कि कोई प्रासंगिक अध्ययन मौजूद ही नहीं है। मुंह के भीतर स्थानीय प्रकाशगतिक उपचार पर मानव शोध एक अलग प्रश्न है: उदाहरण के लिए, मुंह की दुर्गंध पर 45 लोगों के परीक्षण में जीभ पर जमी परत के नमूने लिए गए और सांस की गैसें मापी गईं, आंत का स्वास्थ्य नहीं।

मनुष्यों की आंत के स्वास्थ्य संबंधी दावे का समर्थन करने के लिए अध्ययन में परिभाषित प्रतिभागी समूह, पुनरुत्पादनीय औषधि संरचना और प्रशासन मार्ग, उपयुक्त तुलना समूह तथा ऐसा परिणाम चाहिए जो उस समूह के लिए मायने रखता हो। सूक्ष्मजीवों की संरचना परिणाम को समझाने में मदद कर सकती है, लेकिन लक्षणों में सुधार, रोग नियंत्रण और प्रतिकूल प्रभावों का आकलन फिर भी आवश्यक होगा।

चूहों के एक मॉडल में चार सप्ताह का अध्ययन महीनों या वर्षों तक उपयोग के परिणाम भी स्थापित नहीं कर सकता। मेथिलीन ब्लू के दैनिक और दीर्घकालिक उपयोग की समीक्षा उपचार की अवधि को अवलोकन और सुरक्षा संबंधी परिणाम मापों से अलग करती है। व्यापक नैदानिक संदर्भ के लिए देखें कि मानव शोध किन बातों का समर्थन करता है।