Метыленавы сіні і падыходы з NAD+: механізмы, доказы і сцвярджэнні пра камбінацыі

Метыленавы сіні і дабаўкі, якія прадаюцца як сродкі для павышэння NAD+, апісваюць праз мітахондрыі і клетачную энергію. Ніводнае з гэтых апісанняў не тлумачыць, што прадукт насамрэч робіць.

Гэтыя два падыходы ўплываюць на розныя пераменныя. Адзін імкнецца змяніць колькасць NAD+ у вашых клетках. Другі змяняе суадносіны паміж дзвюма яго формамі. Гэта не дзве дарогі да аднаго і таго ж месца.

Дзве велічыні, якія ўвесь час блытаюць

NAD+ — гэта кафермент. Ён прымае пару электронаў у форме гідрыд-іёна і ператвараецца ў NADH. Калі NADH перадае гэтыя электроны далей, ён зноў становіцца NAD+. Клеткі пастаянна выкарыстоўваюць гэты цыкл: так энергія, атрыманая з ежы, трапляе да бялковых механізмаў, якія сінтэзуюць ATP.

Паколькі NAD+ і NADH — два станы адной малекулы, у клетцы варта адсочваць дзве асобныя велічыні. Першая — агульны запас: колькі NAD+ і NADH ёсць разам. Другая — суадносіны паміж імі, якія паказваюць, наколькі пераносчыкі электронаў цяпер імі загружаныя.

Вадасховішча робіць гэтую розніцу нагляднай. Аб’ём вады за плацінай — гэта запас. Суадносіны паміж вадой, утрыманай вышэй па цячэнні, і вадой, выпушчанай ніжэй, — гэта суадносіны. Іх можна павялічыць, не дадаючы ні літра, проста адкрыўшы затвор. Гэта не метафара дзеяння метыленавага сіняга. Гэта бліжэй да літаральнага апісання.

Падыход праз папаўненне запасу

Дабаўкі з папярэднікамі NAD+, у тым ліку нікацінамідрыбазід, нікацінамідмонануклеатыд і нікацінамід, — гэта будаўнічы матэрыял. Клеткі сінтэзуюць NAD+ праз шлях паўторнага выкарыстання кампанентаў, вядомы як шлях рэўтылізацыі, а папярэднікі паступаюць у гэты працэс. Мэта — павялічыць запас.

Для жывёл гэта добра ўстаноўлена: у многіх мадэлях колькасць NAD+ у тканках зніжаецца з узростам і пры метабалічных захворваннях, а ўвядзенне папярэднікаў з кормам звычайна яе павышае. Для людзей высновы больш абмежаваныя. Даследаванні з удзелам людзей сапраўды паказваюць, што гэтыя злучэнні павышаюць вымераныя ўзроўні NAD+ у крыві. Чаго яны не прадэманстравалі, дык гэта стабільнага паляпшэння клінічнай канчатковай кропкі — таго, што чалавек мог бы заўважыць або што даследаванне прызначана вымяраць.

«Узроўні NAD+ павысіліся» — гэта вымярэнне таго, што адбываецца ўнутры арганізма. Гэта не выснова пра тое, як чалавек сябе адчуваў, рухаўся ці аднаўляўся.

Што замест гэтага робіць метыленавы сіні

Метыленавы сіні — не папярэднік. Гэта акісляльна-аднаўленчы фарбавальнік, які выкарыстоўваецца ў медыцыне ўжо значна больш за стагоддзе, а яго дазволеныя сферы прымянення вузейшыя за тыя, што даследуюцца.

Унутры клеткі флавінзалежныя ферменты аднаўляюць яго да бясколернай формы, лейкаметыленавага сіняга, якая затым зноў акісляецца. Электроны, якія прайшлі б праз комплекс I, першую станцыю дыхальнага ланцуга, замест гэтага могуць перадавацца з NADH праз метыленавы сіні. NADH ператвараецца ў NAD+.

Суадносіны павялічваюцца. Запас не расце.

У даследаванні на пацуках з дыябетычным паражэннем сэрца гэта вымяралі непасрэдна ў ізаляваных мітахондрыях сэрца. Дадаванне метыленавага сіняга ў канцэнтрацыях ад 6 да 18 мікрамоль/л падчас акіслення тлустых кіслот выклікала дозазалежнае зніжэнне NADH і суадносін NADH да NAD+. Абсалютная колькасць NAD+ змянялася значна менш, чым NADH, чаго і варта чакаць ад злучэння, якое ператварае адну форму ў другую, а не стварае больш кожнай з іх.

Важна, куды трапляюць гэтыя электроны. У ізаляваных мітахондрыях мозгу метыленавы сіні ў канцэнтрацыях ад 100 нанамоль/л да 1 мікрамоль/л паляпшаў выпрацоўку энергіі пры прыгнечаным дыхальным ланцугу і адначасова павялічваў утварэнне перакісу вадароду, зніжаючы яго выдаленне ва ўсіх правераных умовах. Аўтары звязваюць утварэнне перакісу вадароду з непасрэдным аднаўленнем кіслароду адноўленым метыленавым сінім. Электроны, якія пакідаюць NADH гэтым шляхам, не знікаюць. Яны пераходзяць да кіслароду.

Асобнае даследаванне тканкі ахілава сухажылля выразна фармулюе гэтую думку. Метыленавы сіні аднаўляў баланс NAD+/NADH і павялічваў выпрацоўку ATP у пашкоджаных тэнацытах і ў пацучынай мадэлі тэндынапатыі, пры гэтым у артыкуле адзначана, што агульны запас NAD істотна не змяніўся.

Што ўстанаўліваюць эксперыменты на тканках і жывёлах

Чатыры эксперыменты на працягу чатырох дзесяцігоддзяў прасочваюць адну і тую ж ідэю і зноў і зноў акрэсліваюць яе межы.

Пры працяглым увядзенні алкаголю з кормам пацукам этанол зніжаў як цытазольныя, так і мітахандрыяльныя суадносіны NAD+/NADH у печані. Дадаванне метыленавага сіняга ў рацыён у значнай ступені прадухіляла гэты зрух. Але яно не памяншала тлушчавае перараджэнне печані, выкліканае этанолам. Выпраўленне суадносін не выпраўляла вынік. Пра гэты вынік 1985 года варта памятаць перад любым сцвярджэннем, што акісляльна-аднаўленчы зрух — механізм, які стаіць за карысным эфектам.

У клетках печані і ў мышэй на рацыёне з высокім утрыманнем тлушчу метыленавы сіні павялічваў суадносіны NAD+/NADH, павышаў SIRT1, зніжаў ацэтыляванне PGC-1alpha, актываваў AMPK і памяншаў назапашванне тлушчу ў печані. Тут вынік сапраўды змяняўся разам з суадносінамі. Той жа артыкул паказвае, што эфект неманатонны: тры міліграмы на кілаграм у дзень павялічвалі ўтрыманне мітахандрыяльнай ДНК больш эфектыўна, чым дзесяць, тады як спажыванне кіслароду і сігнальная актыўнасць AMPK узрасталі з дозай.

Пры дыябетычным паражэнні сэрца метыленавы сіні, які давалі з пітной вадой на працягу адзінаццаці тыдняў, зніжаў суадносіны NADH да NAD+ у мітахондрыях сэрца і павышаў актыўнасць сіртуіну 3. Ацэтыляванне лізіну знізілася ў 83 участках 34 бялкоў, пераважна звязаных з транспартам і акісленнем тлустых кіслот. Фракцыя выкіду палепшылася. Але дыханне, якое забяспечваецца комплексам I, не аднавілася. А эксперымент з накаўтам гена раздзяліў два эфекты, якія лёгка зблытаць: змяненне суадносін адбывалася ў асноўным без сіртуіну 3, тады як дэацэтыляванне залежала ад яго.

У даследаванні сухажылля метыленавы сіні ўжывалі, калі комплекс I быў хімічна заблакаваны ратэнонам. Ён усё роўна аднаўляў баланс NAD+, але па-ранейшаму не прадухіляў акісляльны стрэс, дэгенерацыю матрыксу і страту жыццяздольнасці клетак. Аднаўлення суадносін было недастаткова для аднаўлення тканкі.

У аркушы для друку з поўнымі бібліяграфічнымі спасылкамі выкарыстаныя тыя ж радкі.

Чаму ў аргументацыю ўключаюць сіртуіны

Сіртуіны выдаляюць ацэтыльныя групы з бялкоў і расходуюць для гэтага NAD+. Іх актыўнасць рэагуе на даступнасць NAD+, таму любое злучэнне, якое змяняе гэтую даступнасць, уплывае на актыўнасць сіртуінаў на наступных этапах.

На гэтым трымаецца большая частка маркетынгу «метыленавага сіняга для NAD+». Тут жа логіка дае збой. Зрух суадносін можа павысіць актыўнасць сіртуінаў. З гэтага не вынікае, што прадукт пастаўляе NAD+, і не вынікае, што яго эфект раўназначны прыёму папярэдніка. Акісляльна-аднаўленчая інтэрпрэтацыя гэтых вымярэнняў мае свае падводныя камяні, з якімі варта азнаёміцца, перш чым прымаць любую з гэтых трактовак.

Што правяралі на людзях

Метыленавы сіні дзесяцігоддзямі выкарыстоўваецца ў клінічнай практыцы пры вострых станах пад наглядам: метгемаглабінеміі, нейратаксічнасці, звязанай з іфасфамідам, і рэзка паніжаным артэрыяльным ціску падчас аперацыі. Гэта вузкія сферы прымянення пад наглядам, а не доказы на карысць штодзённага прыёму ўнутр для павышэння працаздольнасці.

Пошук для гэтага артыкула не выявіў даследавання з удзелам людзей, у якім вымяралі б метабаліты NAD+ пасля метыленавага сіняга ў здаровых добраахвотнікаў. Прыведзеныя вышэй вынікі атрыманыя на ізаляваных мітахондрыях, клетачных культурах, тканках пацукоў і эксплантатах чалавечых тканак. Эксплантат сухажылля, жыццядзейнасць якога падтрымліваюць у лабараторнай пасудзіне, — карысны крок наперад у параўнанні з клетачнай лініяй. Але гэта ўсё яшчэ не чалавек.

Даследаванні папярэднікаў сапраўды праводзяцца на людзях, і іх вынікі сціплыя. NAD+ у крыві павышаецца. Вынікі паводле клінічных канчатковых кропак неадназначныя, а эфекты звычайна невялікія.

Таму пытанне пра камбінацыю слушнае, але адказ не задавальняе: ніводнае апублікаванае даследаванне, выпрабаванне ці серыя клінічных выпадкаў, знойдзеныя для гэтага артыкула, не правяралі метыленавы сіні разам з нікацінамідрыбазідам, нікацінамідмонануклеатыдам або інфузіяй NAD+. Кожны, хто апісвае такую камбінацыю як пацверджаную доказамі або сінергічную, экстрапалюе вынікі двух асобных масіваў доказаў.

Экстрапаляцыя можа падвесці ў абодвух напрамках. Яна можа быць занадта аптымістычнай, калі пасля аднаўлення суадносін запас увогуле не з’яўляецца абмежавальнай пераменнай. Яна таксама можа быць занадта спрошчанай, бо залежнасць эфекту метыленавага сіняга ад дозы мяняе кірунак. Даследчыкі самі апісваюць гэтае злучэнне як гарметычнае: ніжэйшыя канцэнтрацыі спрыяюць аднаўленню, а вышэйшыя перанакіроўваюць электроны ў абыход дыхальнага ланцуга і могуць дзейнічаць як прааксідант. Дадаванне большай колькасці субстрату не робіць гэтую крывую бяспечнейшай.

Ёсць і рызыкі ўзаемадзеяння, якія не маюць нічога агульнага з NAD+. Метыленавы сіні інгібіруе монаамінаксідазу A, таму пры спалучэнні з пэўнымі антыдэпрэсантамі ён нясе рызыку, звязаную з сератанінам; агляд апісаных выпадкаў таксічнага ўздзеяння на ЦНС выявіў, што 13 з 14 выпадкаў адпавядалі крытэрыям Хантэра для сератанінавай таксічнасці. Пры высокай экспазіцыі ён таксама можа выклікаць метгемаглабінемію. Калі вы прымаеце рэцэптурныя лекі, пытанне пра камбінацыю, якое варта задаць свайму лекару, датычыцца гэтых механізмаў, а не акісляльна-аднаўленчага балансу. Такая ж строгасць патрэбная і для звычайных спалучэнняў: іншыя дабаўкі, якія прымаюць разам з метыленавым сінім, маюць уласную, у значнай ступені неправераную доказную базу.

Чаму чысціня вызначае, які эксперымент вы насамрэч праводзіце

Прадукт з метыленавым сінім — гэта сумесь, пакуль лабараторыя не дакажа адваротнае. Дамешка, якая тут мае значэнне, — Azure B, дэметыляваны фенатыязін, які не з’яўляецца інертным. Гэта акісляльна-аднаўленча актыўны фарбавальнік з той жа базавай электрахіміяй, таму прадукт са значнай колькасцю Azure B — не проста больш ці менш чыстая версія таго ж уздзеяння. Гэта іншая сумесь, якая дзейнічае на той жа шлях, з суадносінамі кампанентаў, якіх ніхто не ахарактарызаваў.

Адпаведнасць USP дазваляе пакупніку атрымаць рэчыва з вызначанымі характарыстыкамі. Прадукт, які не адпавядае USP, хутчэй за ўсё з’яўляецца фарбавальнікам для тэкстылю, а тэкстыльныя гатункі ўтрымліваюць дамешкі, якія выключаюць іх спажыванне, у тым ліку цяжкія металы і рэшткавыя растваральнікі.

Адрозненні ёсць не толькі паміж гатункамі. Многія прадаўцы, якія заяўляюць адпаведнасць USP, правяраюць толькі цяжкія металы і больш нічога, а затым прадстаўляюць гэты адзіны набор аналізаў як поўную адпаведнасць. Поўная спецыфікацыя ахоплівае ідэнтычнасць, чысціню, арганічныя дамешкі, рэшткавыя растваральнікі, элементныя дамешкі, рэштак пасля прапальвання, мікрабіялагічныя межы і бактэрыяльныя эндатаксіны. Няпоўны набор аналізаў нічога не можа сказаць пра прапушчаныя паказчыкі, сярод якіх — роднасныя рэчывы і рэшткі растваральнікаў.

Blupreme закупляе метыленавы сіні ў фармацэўтычнага вытворцы і публікуе сертыфікат аналізу, які ахоплівае поўную спецыфікацыю, таму рэчыва ў флаконе адпавядае рэчыву, апісанаму ў даследаваннях. Калі вы хочаце самастойна праверыць аргументацыю перад купляй, артыкул як чытаць даследаванні метыленавага сіняга тлумачыць, што кожны тып даследавання можа і чаго не можа паказаць.

Розніца, якая вытрымлівае праверку

Дадаванне папярэдніка NAD+ змяняе колькасць NAD+. Метыленавы сіні змяняе тое, што робіць ужо наяўны NAD+. Першы падыход датычыцца забеспячэння, другі — патоку, і эксперыменты, якія пацвярджаюць адзін, мала што кажуць пра другі.

За метыленавым сінім стаіць узгоднены механізм, пацверджаны ў ізаляваных мітахондрыях і тканках жывёл, з выразнай і неаднаразовай агаворкай: зрух суадносін — не тое самае, што аднаўленне тканкі. Чаго яму бракуе, дык гэта даследаванняў з удзелам людзей, якія вымяраюць уплыў на NAD+ у чалавека. Чаго няма ў ніводнай з дзвюх катэгорый, дык гэта прамой праверкі іх сумеснага прыёму.

Абедзве катэгорыі заслугоўваюць аднолькавага падыходу. Спытайце, якую пераменную прадукт, паводле заявы, змяняе, а затым — якія вымярэнні гэтай пераменнай існуюць у людзей. Калі адказ — даследаванне клетак, пацук або праўдападобны механізм, менавіта гэтым ён і з’яўляецца. Гэта не схема камбінаванага прыёму.