Ìtàn methylene blue: láti awọ sí oogun àti ìwádìí

Methylene blue dé ọ̀dọ̀ aláìsàn kí ó tó dé ilé ìtajà oogun.

Ìròyìn ọdún 1891 tí Paul Guttmann àti Paul Ehrlich kọ nípa lílo awọ náà fún malaria ní àwòrán ìwọ̀n-otútù méjì. Èkejì bẹ̀rẹ̀ láti 13 July sí 5 August, pẹ̀lú ìtọ́jú tí a kọ sí etí àwòrán náà lọ́jọ́ dé ọjọ́. Àwọn àkọsílẹ̀ ọjọ́ 18 àti 19 July sọ pé "1 × 0,05 Methylenblau". Àwọn ọjọ́ tó tẹ̀ lé e ṣe àkọsílẹ̀ ìwọ̀n márùn-ún àti méje ti iye kan náà, nígbà tí díẹ̀ quinine sì ti darapọ̀ mọ́ àkọsílẹ̀ náà ní 22 July. Laini ibà, tó ń gòkè-gbàlẹ̀ láàárín 37 °C àti 39.5 °C ní ìdajì àkọ́kọ́ àwòrán náà, bẹ̀rẹ̀ sí í dọ́gba lẹ́yìn tí awọ náà farahàn, ó sì dúró láàárín nǹkan bí 36 °C àti 37.5 °C fún ọ̀sẹ̀ mẹ́ta tó kù.

Aláìsàn náà jẹ́ ọ̀kan nínú ẹni méjì, tí ìwé náà ṣàpèjúwe gẹ́gẹ́ bí ìránṣẹ́ ilé àti atukọ̀ ojú omi. Àkópọ̀ tí wọ́n gba ti jẹ́ awọ aṣọ ti ìṣòwò fún ọdún mẹ́ẹ̀ẹ́dógún, àwọn ọkùnrin méjì náà sì wà lára àwọn ènìyàn àkọ́kọ́ tí a ní àkọsílẹ̀ pé a fi oogun sintetiki pípé kan tí a pinnu sí ohun alààyè pàtó ṣe ìtọ́jú fún.

Awọ náà ló kọ́kọ́ wá

Awọ sintetiki àkọ́kọ́ tí ó ṣàṣeyọrí nípa ìṣòwò ni William Henry Perkin ṣẹ̀dá ní 1856. Ọmọ ọdún méjìdínlógún ni Perkin, ó ń ṣiṣẹ́ ní yàrá ìdánwò inú ilé nígbà ìsinmi Easter, ó sì ń gbìyànjú láti ṣe quinine nípa sintetiki. Dípò bẹ́ẹ̀, ó rí ìyókù dúdú kan, ó tú un sínú omi, ó sì rí awọ kan tí ó di mọ́ silk lọ́nà tó lágbára. Ó gba patent rẹ̀ ní August 1856, ní òpin 1857 sì ni ó ti ní fábríkì tó ń pèsè fún ilé ìkun-awọ silk kan ní London.

Ní 1875 Adolf von Baeyer ṣe awọ pupa kan nípa sintetiki, ó sì pè é ní eosin, láti inú Eos, ọ̀rọ̀ Greek fún ìmọ́lẹ̀ òwúrọ̀. Ní 1876 Heinrich Caro, tó jẹ́ olùdarí yàrá ìdánwò ní Badische Anilin- und Soda-Fabrik nígbà náà, ṣe ìdàgbàsókè methylene blue pẹ̀lú Baeyer gẹ́gẹ́ bí awọ tí a ṣe láti aniline fún òwú. A kò parí ìfìdímúlẹ̀ ìṣètò kemikali rẹ̀ títí di nǹkan bí ọdún mẹ́sàn-án lẹ́yìn náà.

Ìpilẹ̀ yẹn ṣì hàn nínú bí a ṣe ń pe nkan náà. "Methylene blue" jẹ́ orúkọ ìṣòwò láti inú katalogi awọ, kì í ṣe àpèjúwe kemikali. Àkópọ̀ tí orúkọ náà ń tọ́ka sí ni methylthioninium chloride, àti pé ìyàtọ̀ tó wà láàárín orúkọ náà, iyọ̀ náà, àti àwọn hydrate rẹ̀ di pàtàkì ní kété tí ẹnikẹ́ni bá fẹ́ wọn ohun èlò náà tàbí ka àlàyé ìlànà rẹ̀.

Ìkun-awọ sẹẹli ni afárá náà

Ọ̀nà láti ilé iṣẹ́ awọ sí ilé ìwòsàn gba abẹ́ microscope kọjá, ó sì bẹ̀rẹ̀ kí methylene blue tó wà. Wilhelm Erb ni ẹni àkọ́kọ́ tó lo awọ sintetiki sí ẹ̀jẹ̀, ní lílo picric acid ní 1865, ó sì rí àwòrán bíi nẹ́tíwọ́ọ̀kì nínú díẹ̀ lára àwọn sẹẹli ẹ̀jẹ̀ pupa.

Thesis doctorate Paul Ehrlich ti 1878 fi ìkun-awọ àsopọ̀ ara wé ìkun-awọ aṣọ, ó sì jiyàn pé méjèèjì jẹ́ ìṣesí kemikali. Nígbà tó ń ṣiṣẹ́ lábẹ́ Robert Koch lórí tubercle bacillus, ó pín àwọn awọ aniline sí ẹ̀ka acid àti basic, ó sì fi hàn pé ẹ̀ka kọ̀ọ̀kan máa ń kun àwọn apá sẹẹli tó yàtọ̀. Ní 1880 ó da àwọn méjèèjì pọ̀: ojútùú methylene blue tí ó kún dé ìwọ̀n ni a dà sínú acid fuchsin títí omi tó wà lókè fi mọ́. Àbájáde náà, tí ó pè ní neutralen Farbkörper tàbí neutral stain, dá awọ mẹ́ta jáde dípò ọ̀kan, ó ṣí àwọn granule nínú àwọn sẹẹli polymorphonuclear tí a kò tíì rí rí, ó sì jẹ́ kí kika ìyàtọ̀ leukocyte àkọ́kọ́ ṣeé ṣe. Nítorí àwọn granule wọ̀nyẹn gba àwọn èròjà méjèèjì inú àdàlù náà, Ehrlich dá ọ̀rọ̀ neutrophil sílẹ̀ fún àwọn sẹẹli tó gbé wọn.

Ọdún méjì lẹ́yìn náà Koch lo methylene blue láti rí tubercle bacillus, ní 1883 Ehrlich sì mú ọ̀nà náà dára sí i. Ní 1886 ó tẹ àkíyèsí míì jáde: ó fi awọ náà sínú àwọn ẹranko alààyè ní abẹ́rẹ́, ó fi bí ẹ̀yà ara kọ̀ọ̀kan ṣe gba a lágbára tó wé ara wọn, ó sì pinnu pé ó ní ìfẹ́-mọ́ra tó hàn gbangba sí àsopọ̀ ọpọlọ àti iṣan. Ó sọ pé ìfẹ́-mọ́ra yẹn ní í ṣe pẹ̀lú yíyí oxidation-reduction awọ náà, èyí tí ó ti ṣàkíyèsí ní ọdún tó ṣáájú. Yíyí náà tún ni ìdí tí ojútùú methylene blue fi pàdánù awọ rẹ̀ nígbà tí oxygen rẹ̀ bá tán, tí ó sì tún rí awọ rẹ̀ nígbà tí afẹ́fẹ́ bá padà. Àwọn ìdánwò tó kọ́kọ́ wọn àwọn àbájáde yíyí náà jẹ́ ti ọdún mẹ́wàá tó tẹ̀ lé e, ẹ̀rọ ìṣe náà fúnra rẹ̀ sì jẹ́ kókó tó yàtọ̀ sí ìtàn náà.

Parasite àti nucleus àlùkò

Alphonse Laveran rí parasite malaria ní 1880 nípa ṣíṣe àyẹ̀wò ẹ̀jẹ̀ tuntun tí a kò kun ní awọ. Láti máa rí i déédé nínú smear tí ó gbẹ, awọ ni a nílò, àwọn awọ ìgbà náà sì ń mú pupa àti blue nìkan jáde.

Ní 1888 onímọ̀ pathology ará Poland Czesław Cheçinski rọ́pò acid fuchsin pẹ̀lú eosin, tó sì ṣẹ̀dá àdàlù methylene blue àti eosin. Ọ̀ràn tó jẹ́ ìpilẹ̀ ọ̀nà rẹ̀ jẹ́ ọmọ-ogun kan tó kú nítorí malaria ní 30 September 1887. Nínú àwọn film ẹ̀jẹ̀, Cheçinski rí àwọn ìrísí blue tó dà bí odòdó daisy, tí a mọ̀ nísinsìnyí sí Plasmodium malariae, àti àwọn ìrísí tó dà bí dòjé, tí a mọ̀ nísinsìnyí sí gametocytes ti Plasmodium falciparum. Àbájáde náà parí àwọn àlàyé méjì tó ń bá ara wọn díje nípa àrùn náà lẹ́ẹ̀kan náà: ẹ̀kọ́ miasma, àti ẹ̀sùn Edwin Klebs àti Corrado Tommasi-Crudeli pé bacterium kan ló ń fa malaria.

A lè rí parasite náà. A kò lè rí nucleus rẹ̀, èyí sì jẹ́ kí ìwà rẹ̀ ṣì ṣí sí ìbéèrè. Ernst Malachowski, dókítà kan ní Breslau, yanjú ìṣòro náà láìròtẹ́lẹ̀, lẹ́yìn náà pẹ̀lú ète. Ó ṣàkíyèsí ìkun-awọ tó yàtọ̀ ti nucleus plasmodial nínú àpẹrẹ kan ní 1889, kò sì lè tún un ṣe. Mímú methylene blue di acid kò ran án lọ́wọ́. Ṣíṣe e di alkaline pẹ̀lú borax máa ń mú ipa náà ṣẹlẹ̀ ní gbogbo ìgbà. Ó fi ọ̀nà náà hàn ní gbangba ní 15 June 1890, ó sì tẹ̀ ẹ́ jáde ní ọdún kan náà, pẹ̀lú ọ̀nà tó kún sí i ní August 1891.

Dmitri Romanowsky tẹ ẹ̀dà tirẹ̀ jáde ní September 1891. Àwọn àbájáde rẹ̀ tó dára jù lọ wá láti inú igo ojútùú methylene blue kan tí a ti kọ sílẹ̀, tí mold ti wọ̀, tí ó sì ti ju oṣù méjì lọ. Àkọsílẹ̀ Malachowski jẹ́ ohun tí a ṣe pẹ̀lú ète àti, gẹ́gẹ́ bí ọ̀rọ̀ rẹ̀, ohun tí ó rọrùn láti tún ṣe; ti Romanowsky jẹ́ ọ̀nà tí kò lọ síwájú, tó ṣiṣẹ́ lẹ́ẹ̀kan ṣoṣo. Síbẹ̀, orúkọ eponym náà lọ sí Romanowsky, àti àríyànjiyàn lórí ẹni tó dá àlùkò tó mú kí nucleus hàn jẹ́ ìtàn míì tó ní àwọn ìwé tirẹ̀.

Àwòrán: àwòrán ìwọ̀n-otútù kejì láti inú ìròyìn Guttmann àti Ehrlich ti 1891. Apá òkè bo 13 sí 24 July, apá ìsàlẹ̀ sì bo 25 July sí 5 August; àwọn àkọsílẹ̀ etí àwòrán náà sọ àwọn ìwọ̀n tí a fún, ìwọ̀n-otútù náà sì dúró nítòsí àárín deede fún ọ̀sẹ̀ mẹ́ta tó gbẹ̀yìn nínú àkọsílẹ̀ náà. A tún un ṣe láti inú ìròyìn tí a scan fún Krafts, Hempelmann àti Skórska-Stania, Parasitology Research 111:1–6 (2012), PMID 22411634.

Ó wá hàn pé “ripening” jẹ́ demethylation

Kò sí ẹni tó kópa ní àwọn ọdún 1890s tó mọ ohun tí "ripening" ń ṣe sí methylene blue. Ìdáhùn náà jáde láti inú kemistri ilé iṣẹ́. Heinrich August Bernthsen ti ṣe àkópọ̀ ìpilẹ̀ phenothiazine ní 1883, ó fi hàn ní 1885 pé methylene blue jẹ́ ti ẹbí yẹn, ó sì tún fi hàn ní àkókò kan náà pé ipò alkaline máa ń yọ àwọn methyl group kúrò nínú awọ náà, tó sì ń ṣẹ̀dá àwọn àkópọ̀ tí a ń pè ní azures nísinsìnyí.

Bernard Nocht yọ apá tó ń ṣiṣẹ́ jáde ní 1898 àti 1899, kò sì lè pè é ní nǹkan mìíràn ju Rot aus Methylenblau, pupa láti methylene blue. Michaelis dá a mọ̀ sí azure I ní 1901. Jenner mú absolute methanol wọlé gẹ́gẹ́ bí solvent fún precipitate awọ náà ní 1899, èyí tó yọ ìlò heat-fix fún film ẹ̀jẹ̀ kúrò; Leishman àti Reuter darapọ̀ àwọn ìlọsíwájú méjèèjì; Wright tẹ ọ̀nà tó rọrùn sí i jáde ní 1902. Ìfọwọ́sí Giemsa, ní 1902 pẹ̀lú, ni pé kó dáwọ́ gbígbẹ́kẹ̀lé ojútùú tó “ripen” láìsí ìṣàkóso, kí ó sì lo iye tí a wọn ti àwọn awọ tí a mọ̀ dípò rẹ̀. Lẹ́yìn náà ó kọ̀ láti tẹ bí ó ṣe ń ṣe methylene azure mímọ́ jáde, ó sì ta ọ̀nà náà fún yàrá ìdánwò Dr. Grübler, tó ta ọjà náà gẹ́gẹ́ bí azure I, tí ó sì sọ pé ẹ̀dà tirẹ̀ nìkan ni Giemsa stain tòótọ́.

Àwọn ogun àgbáyé méjì parí iṣẹ́ náà láìròtẹ́lẹ̀. Nígbà tí a kò lè rí àwọn awọ German mọ́, Lillie, Roe àti Wilcox ṣiṣẹ́ lórí àwọn àropo American, wọ́n sì rí i pé ìkun-awọ tó dára jù lọ wá láti àwọn èròjà mẹ́ta tí a yà sọ́tọ̀: methylene blue mímọ́, ọjà ìbàjẹ́ rẹ̀ azure B, àti eosin. Mẹ́tẹ̀ẹ̀ta yẹn ṣì jẹ́ àwọn èròjà pàtàkì nínú stain tí a ń lò láti ṣàyẹ̀wò malaria lónìí, lábẹ́ orúkọ tó ti darapọ̀ Malachowski, Wright àti Giemsa pọ̀.

Àwòrán: àwọn ìrísí orùka Plasmodium falciparum nínú àwọn sẹẹli ẹ̀jẹ̀ pupa ènìyàn, tí a kun pẹ̀lú ọ̀nà irú Romanowsky. Ìṣètò àlùkò tó wà nínú orùka náà ni chromatin tí methylene blue Malachowski tí a tọ́jú pẹ̀lú borax mú kí ó hàn fún ìgbà àkọ́kọ́. Àwòrán láti ọwọ́ Ernst Hempelmann, tí a fi sí public domain.

Orúkọ kan, ohun èlò púpọ̀

Àwọn ọdún tó yà àwọn èròjà wọ̀nyẹn sọ́tọ̀ fi ìṣòro kan sílẹ̀ tó pé ju kemistri náà lọ. Ralph Lillie fa ìlà ní 1969 láàárín biological stains, tí a “ṣe sí àwọn ìlànà tó le gan-an tó bá ìlò wọn tó jẹ́ ẹlẹgẹ́ tí ó sì nílò ìpéye mu”, àti non-biological stains fún ìkun-awọ aṣọ, tí “kò nílò àwọn ìlànà iṣelọpọ tó le àti tó ní ìbéèrè tó pọ̀ tó bẹ́ẹ̀”. Àwọn irú ọjà méjèèjì ní orúkọ kan náà, ìyàtọ̀ wọn kò sì jẹ́ ìyàtọ̀ ìpele lasan. Ìlànà tí a kọ fún òwú àti ìlànà tí a kọ fún reagent àyẹ̀wò kò lè rọ́pò ara wọn, ohun èlò tí a ṣe gẹ́gẹ́ bí ti aṣọ náà kò sì jẹ́ ohun tí a pinnu kí a gbé mì.

Azure B ni àpẹẹrẹ tó ṣe kedere jù lọ. Ó jẹ́ irú methylene blue tí methyl group kan ti yọ kúrò, ó ní pharmacological activity tirẹ̀ tí a lè wọn, ó sì wà nínú àwọn ìmúrasílẹ̀ methylene blue fún ìṣègùn gẹ́gẹ́ bí èròjà tí a kò ṣàkóso fún ju ọgọ́rùn-ún ọdún lọ kí ẹnikẹ́ni tó ya àwọn méjèèjì sọ́tọ̀. Ẹgbẹ́ kan rí i pé àsopọ̀ ènìyàn tí a gba ní autopsy lẹ́yìn fífún methylene blue ní 5 sí 14 per cent methylene blue tí kò yí padà àti 86 sí 95 per cent azure B. Bóyá ìmúrasílẹ̀ kan yẹ kí ó ní azure B, àti iye tó yẹ kí opin rẹ̀ jẹ́, jẹ́ ìbéèrè ìlànà, ìwádìí lórí azure B gẹ́gẹ́ bí impurity àti metabolite sì bẹ̀rẹ̀ láti ibẹ̀.

Ìlànà náà tún ni ibi tí àbájáde tó wúlò lójúṣe wà. Ìbámu pẹ̀lú USP ni ọ̀nà sí ìmímọ́ tó ga jù lọ tí ọjà ń pèsè, nítorí pé ó jẹ́ ìlànà ìdánwò pípé tí a tẹ̀ jáde dípò ìwọ̀n kan ṣoṣo. Ó bo ìdánimọ̀, assay, organic impurities pẹ̀lú àwọn azure dyes, residual solvents, elemental impurities, residue on ignition, microbial limits, àti bacterial endotoxins. Certificate kan tó sọ àbájáde heavy-metal kan tí ó sì pè é ní ìbámu USP ti sọ laini kan ṣoṣo nínú àkójọ náà.

Blupreme ń gba methylene blue rẹ̀ láti ọ̀dọ̀ pharmaceutical manufacturer, ó sì ń tẹ full certificate of analysis jáde, ní ṣíṣe àyẹ̀wò gbogbo ìlànà USP dípò heavy metals nìkan. Ìtọ́sọ́nà sí bí a ṣe ń ka certificate of analysis àti ohun tí àpèjúwe USP ń fi hàn àti ohun tí kò fi hàn ṣàlàyé bí a ṣe lè fi ìwé náà wé ẹ̀sùn tí a ṣe nípa rẹ̀.

Ohun tí ìtàn náà fàyè gba láti sọ, àti ohun tí kò fàyè gba

Ìtẹ̀síwájú ìtàn náà jẹ́ gidi, ó sì gùn ju bí ọ̀pọ̀ ojú-ewé ọjà ṣe ń fi hàn lọ. Methylene blue ni a lò láti tọ́jú malaria ní 1891, a ròyìn rẹ̀ gẹ́gẹ́ bí sedative nínú agitated psychosis ní 1899, ẹ̀ka side-chain rẹ̀ sì kọjá quinacrine, chloroquine, promethazine àti chlorpromazine. Ìwé Ehrlich ti 1890 pẹ̀lú Arthur Leppmann ṣàpèjúwe ìtura fún neuralgic àti rheumatic pain, lẹ́yìn náà wọ́n ronú lórí fífi awọ náà dán wò nínú mental illness, wọ́n sì pinnu láti má ṣe é.

Kò sí èyíkéyìí nínú ìyẹn tó fi ìlò òde òní múlẹ̀. Àbájáde malaria ti 1891 jẹ́ aláìsàn méjì àti àwòrán ìwọ̀n-otútù kan. Pípẹ́ tí a ti mọ molecule kan jẹ́ ìdí láti kẹ́kọ̀ọ́ rẹ̀, kì í ṣe àbájáde. Ìtàn àkópọ̀ náà gẹ́gẹ́ bí oogun àti àwọn ìdánwò òde òní lórí malaria ń dáhùn àwọn ìbéèrè tó yàtọ̀ sí àwọn tí Ehrlich ń béèrè, a sì gbọ́dọ̀ ka àwọn endpoint wọn gẹ́gẹ́ bí ìtumọ̀ tirẹ̀.

Àlàyé kan wà nínú àkọsílẹ̀ náà tó jẹ́ ti àkókò yìí dípò ti ìgbà àtijọ́. Nígbà tí àwọn olùṣèwádìí ṣe àwọn ìdánwò methylene blue fún malaria ní Burkina Faso ní àwọn ọdún 2000s, wọ́n rí ara wọn nínú ìdíje láti rí pharmaceutical-grade material, wọ́n sì ròyìn pé iye owó raw material ti pọ̀ sí i ní nǹkan bí ìlọ́po ọgọ́rùn-ún lẹ́yìn tí ó gba GMP validation. A lè fi awọ mìíràn rọ́pò dye kan. A kò lè ṣe bẹ́ẹ̀ fún drug kan. Ìyàtọ̀ tí Lillie fa ní 1969 ni ìyàtọ̀ kan náà tó ń pinnu ohun tí igo kan ní nínú rẹ̀ lónìí. :::