Xanh methylen trong giảm tác nhân gây bệnh ở huyết tương: quy trình hoạt động như thế nào

Xanh methylen có thể giúp giảm tác nhân gây bệnh trong huyết tương hiến tặng khi được sử dụng trong một hệ thống xử lý có kiểm soát. Việc xử lý diễn ra bên ngoài cơ thể, trước khi huyết tương được phê duyệt để truyền. Quy trình kết hợp thiết bị được chỉ định, tiếp xúc với chất màu, chiếu sáng, lọc và kiểm tra thành phần máu thu được.

Sự phân biệt này quyết định ý nghĩa của bằng chứng. Một nghiên cứu cho thấy hệ thống xử lý làm giảm virus có khả năng gây nhiễm trong túi huyết tương chỉ xác lập kết quả đối với vật liệu và quy trình đó. Nghiên cứu ấy không xác lập rằng việc dùng xanh methylen điều trị được tình trạng nhiễm trùng ở người.

Câu hỏi có ý nghĩa lâm sàng cũng gồm hai mặt: quy trình giảm được tác nhân gây bệnh đến mức nào, và bao nhiêu chức năng hữu ích của huyết tương còn được giữ lại?

Bắt đầu từ huyết tương, không phải một chế phẩm máu chưa được xác định rõ

Huyết tương là thành phần lỏng của máu chứa protein, bao gồm các yếu tố đông máu. Không nên mặc định rằng một hệ thống xử lý huyết tương phù hợp với máu toàn phần, khối hồng cầu hoặc các thành phần tiểu cầu. Những vật liệu này có thành phần và chức năng cần bảo toàn khác nhau.

Ví dụ cụ thể, hệ thống THERAFLEX MB-Plasma của Macopharma xử lý các đơn vị huyết tương từ một người hiến. Trình tự được ghi trong tài liệu bao gồm giảm tế bào, bổ sung xanh methylen, chiếu sáng, loại bỏ chất màu và bảo quản. Nhà sản xuất mô tả các cấu hình khác nhau dành cho huyết tương tách từ máu toàn phần và các lượng huyết tương lớn hơn thu bằng phương pháp gạn tách. Vì vậy, vật liệu ban đầu và bộ dụng cụ dùng một lần đều quan trọng trước khi bắt đầu chiếu sáng.

“Huyết tương xử lý bằng xanh methylen” là cách mô tả một thành phần đã được xử lý, không phải một bộ thông số kỹ thuật đầy đủ. Một phép so sánh hữu ích cần nêu rõ hệ thống, cấu hình, nguồn huyết tương và phiên bản hướng dẫn vận hành.

Theo dõi vật liệu qua quá trình xử lý và đánh giá

Hình minh họa phía trên tách riêng các giai đoạn. Bảng đi kèm dưới đây giải thích đóng góp của từng giai đoạn và những điều mà bản thân giai đoạn đó không thể xác lập.

Bảng này là hướng dẫn để hiểu một quy trình đã được thẩm định, không thay thế quy trình vận hành. Đặc biệt, bộ lọc loại bỏ chất màu và nguồn sáng thực hiện những nhiệm vụ khác nhau. Macopharma mô tả Blueflex có tác dụng giảm xanh methylen và các dẫn xuất của nó, bao gồm các hợp chất azure và thionine. Một tuyên bố về việc loại bỏ hóa chất cần được hiểu là mức giảm đã được đo lường, không phải lời bảo đảm rằng không còn phân tử nào.

Vì sao nguồn sáng là một phần của biện pháp xử lý

Xanh methylen có hoạt tính quang hóa. Chiếu sáng có thể gây tổn thương hóa học cho các đích sinh học, đó là lý do sự kết hợp này đã được nghiên cứu để bất hoạt virus. Trong nghiên cứu của Mohr và cộng sự về các chất màu phenothiazine và ánh sáng, việc thay đổi nguồn chiếu sáng làm thay đổi cả mức bất hoạt virus lẫn tổn thương protein huyết tương.

Điều này giúp tránh một cách suy diễn giản lược thường gặp: xem tên chất màu như thể nó mô tả toàn bộ biện pháp xử lý. Một đèn, túi, đường truyền quang học hoặc vật liệu khác có thể làm thay đổi mức tiếp xúc. Bài hướng dẫn tổng quan về cách nghiên cứu xử lý quang động bằng xanh methylen giải thích vì sao công thức chế phẩm và việc chiếu sáng phải được mô tả cùng nhau.

Nhiệt độ là một ví dụ đặc biệt hữu ích. Một nghiên cứu năm 2018 về xử lý bằng THERAFLEX ở các nhiệt độ khác nhau đã so sánh huyết tương ở nhiệt độ gần 5°C, 22°C và 30°C. Ở nhiệt độ thấp nhất, các nhà nghiên cứu ghi nhận viên nén hòa tan kém hơn và mức bất hoạt thấp hơn đối với ba virus được nghiên cứu. Nhiệt độ cao hơn làm tăng mức thay đổi thời gian đông máu và mức mất hoạt tính của các yếu tố đông máu.

Những phát hiện này không đưa ra một khoảng nhiệt độ vận hành mới. Chúng giải thích vì sao cơ sở cung cấp máu phải tuân thủ các điều kiện được chỉ định: thay đổi một thông số để cải thiện một kết quả có thể làm suy giảm một kết quả khác.

Bộ phận nào của hệ thống đã làm giảm vi sinh vật?

Không thể tự động quy toàn bộ mức giảm tác nhân gây bệnh đo được sau khi hoàn tất quy trình cho riêng chất màu được hoạt hóa bằng ánh sáng.

Trong một nghiên cứu thử thách năm 2015 sử dụng huyết tương được chủ động gây nhiễm, các nhà nghiên cứu lấy mẫu vật liệu sau từng giai đoạn xử lý. Lọc tế bào đóng góp phần lớn vào mức giảm vi khuẩn. Đối với vi khuẩn có kích thước nhỏ Brevundimonas diminuta, bước đầu tiên này đạt mức giảm 1.7 log; xử lý bằng ánh sáng và lọc chất màu sau đó đưa tổng mức giảm lên ít nhất 3.7 log, xuống dưới giới hạn phát hiện của phép xét nghiệm.

Đây là kết quả của một hệ thống kết hợp. Nó không cho thấy một dung dịch xanh methylen thông thường tạo ra cùng mức giảm vi khuẩn. Sự phân biệt này cũng cần được áp dụng khi đọc các nghiên cứu rộng hơn về tác dụng kháng vi sinh vật của xanh methylen.

Mức giảm log mô tả tỷ lệ giữa lượng vật liệu có khả năng gây nhiễm đo được ban đầu và lượng còn lại. Mức giảm ba log tương đương mức giảm một nghìn lần. “Dưới giới hạn phát hiện” có nghĩa là phép xét nghiệm không thể định lượng lượng còn lại trong các điều kiện thử nghiệm của nó. Đây không phải bằng chứng về tính vô trùng tuyệt đối hoặc tác dụng phổ quát đối với những vi sinh vật chưa được thử nghiệm. Loài virus, lượng ban đầu, nền mẫu và độ nhạy của phép xét nghiệm vẫn là những thông tin cần thiết trong tuyên bố này.

Bảo toàn chức năng phục vụ mục đích sử dụng huyết tương

Một quy trình có thể làm giảm khả năng gây nhiễm đồng thời làm biến đổi các protein có ý nghĩa lâm sàng. Vì vậy, chỉ đo mức giảm tác nhân gây bệnh sẽ khiến việc đánh giá chưa đầy đủ.

Trong một nghiên cứu năm 2014 so sánh các nguồn huyết tương và thời điểm xử lý, tỷ lệ thu hồi yếu tố VIII sau xử lý bằng xanh methylen dao động từ 78% đến 89% trong các loạt mẫu nghiên cứu. Tỷ lệ thu hồi phụ thuộc vào nguồn huyết tương, và các nhà nghiên cứu cũng đánh giá fibrinogen. Đây là các phép đo trong phòng xét nghiệm đối với thành phần đã được xử lý. Chúng không phải tỷ lệ phần trăm hiệu quả lâm sàng ở bệnh nhân.

Hãy xét hai đơn vị huyết tương có mức yếu tố đông máu ban đầu khác nhau. Ngay cả khi chúng giữ lại cùng một tỷ lệ hoạt tính trong quá trình xử lý, mức cuối cùng vẫn sẽ khác nhau. Ngược lại, tỷ lệ thu hồi cao hơn không nhất thiết đồng nghĩa với nồng độ cuối cùng cao hơn. Cần xem cả kết quả đo trước và sau xử lý, cùng các tiêu chuẩn kỹ thuật áp dụng khi phê duyệt để sử dụng.

Kết quả ở bệnh nhân đòi hỏi một loại bằng chứng khác. Tự nó, một nghiên cứu về chất lượng thành phần máu không thể xác lập sự tương đương về kiểm soát chảy máu, nhu cầu truyền máu hoặc tỷ lệ biến cố bất lợi trong một nhóm bệnh nhân cụ thể.

Tách biệt bằng chứng xử lý khỏi các tuyên bố điều trị

Túi huyết tương cho phép kiểm soát việc tiếp xúc: nó có thể tích, hình dạng, trình tự xử lý xác định và kết quả đầu ra có thể đo lường. Cơ thể người có mô, tuần hoàn, chuyển hóa và các vị trí nhiễm trùng mà thí nghiệm này không tái hiện.

Vì lý do đó, các tuyên bố điều trị HIV so với bằng chứng bất hoạt trong huyết tương và bằng chứng về xanh methylen đối với COVID-19 và COVID kéo dài cần được đánh giá lâm sàng riêng. Việc chứng minh khả năng gây nhiễm giảm đi trong vật liệu hiến tặng không trả lời được câu hỏi nào trong hai câu hỏi này.

Đối với việc sử dụng tại cơ sở cung cấp máu, cần đánh giá chính xác thành phần máu và hệ thống được phép sử dụng tại địa phương, việc thẩm định riêng cho từng vi sinh vật, chức năng protein được giữ lại, hóa chất tồn dư và các biện pháp kiểm soát khi phê duyệt để sử dụng. Theo nhà sản xuất, khả năng cung ứng sản phẩm khác nhau giữa các quốc gia. Việc từng được sử dụng hoặc một thí nghiệm thành công không xác lập rằng sản phẩm hiện được cấp phép ở mọi nơi. Đơn vị bằng chứng hữu ích là toàn bộ quy trình đã được thẩm định, áp dụng cho thành phần huyết tương được chỉ định.