Methylene blue kumpara sa mga pamamaraan ng NAD+: mga mekanismo, ebidensiya, at pahayag tungkol sa pagsasabay

Ang methylene blue at ang mga suplementong ibinebenta bilang pampataas ng NAD+ ay kapwa ipinapaliwanag gamit ang mga salitang mitochondria at enerhiya ng selula. Wala sa dalawang paglalarawang ito ang nagsasabi kung ano talaga ang ginagawa ng produkto.

Magkaibang variable ang pinakikialaman ng dalawang pamamaraan. Sinusubukan ng isa na baguhin kung gaano karaming NAD+ ang nasa iyong mga selula. Binabago naman ng isa ang ratio ng dalawang anyo nito. Hindi ito dalawang landas patungo sa iisang destinasyon.

Dalawang bilang na laging napagkakapalit

Ang NAD+ ay isang coenzyme. Tumatanggap ito ng isang pares ng electron, sa anyo ng isang hydride ion, at nagiging NADH. Kapag ipinasa ng NADH ang mga electron na iyon, nagiging NAD+ itong muli. Palaging ginagamit ng mga selula ang siklong ito: sa ganitong paraan nakararating ang enerhiyang kinukuha mula sa pagkain sa makinaryang protina na gumagawa ng ATP.

Dahil ang NAD+ at NADH ay dalawang estado ng iisang molekula, may dalawang magkahiwalay na dami sa isang selula na mahalagang subaybayan. Ang una ay ang kabuuang imbakan: kung gaano karaming NAD+ at NADH ang naroon kapag pinagsama. Ang ikalawa ay ang ratio ng dalawa, na naglalarawan kung gaano karaming electron ang kasalukuyang karga ng mga tagapagdala nito.

Nagiging mas malinaw ang pagkakaiba sa halimbawa ng isang imbakan ng tubig. Ang dami ng tubig sa likod ng dam ang kabuuang imbakan. Ang paghahati sa tubig na nakaipon sa itaas at tubig na inilabas sa ibaba ang ratio. Maaari mong pataasin ang ratio na iyon nang walang idinadagdag na litre, sa pamamagitan ng pagbubukas ng isang tarangkahan. Hindi lang ito metapora para sa ginagawa ng methylene blue. Mas malapit ito sa isang literal na paglalarawan.

Ang pamamaraang nakatuon sa suplay

Ang mga suplementong precursor ng NAD+, kabilang ang nicotinamide riboside, nicotinamide mononucleotide, at nicotinamide, ay mga materyales na ginagamit sa pagbuo nito. Binubuo ng mga selula ang NAD+ sa pamamagitan ng isang ruta ng pagre-recycle na tinatawag na salvage pathway, at pumapasok dito ang mga precursor. Layunin nitong palakihin ang kabuuang imbakan.

Sa mga hayop, matibay na itong naitatag: bumababa ang NAD+ sa tisyu kasabay ng pagtanda at sakit sa metabolismo sa maraming modelo, at karaniwang napapataas ito ng pagpapakain ng mga precursor. Sa mga tao, mas limitado ang ipinakikita ng ebidensiya. Ipinakikita nga ng mga pag-aaral sa tao na pinatataas ng mga compound na ito ang nasusukat na antas ng NAD+ sa dugo. Ang hindi pa nila naipakikita ay tuluy-tuloy na pagbuti sa isang klinikal na sukatan ng kinalabasan, ibig sabihin, sa mga bagay na mapapansin ng isang tao o sadyang sinusukat sa isang pag-aaral.

Ang “tumaas ang antas ng NAD+” ay sumusukat ng isang bagay sa loob ng katawan. Hindi ito natuklasan tungkol sa naramdaman, paggalaw, o paggaling ng isang tao.

Ano ang ginagawa ng methylene blue sa halip

Hindi precursor ang methylene blue. Isa itong redox dye na mahigit isang siglo nang ginagamit sa medisina, at ang mga awtorisadong gamit nito ay mas limitado kaysa sa mga gamit na pinag-aaralan pa.

Sa loob ng isang selula, nirereduce ito ng mga enzyme na umaasa sa flavin tungo sa isang walang-kulay na anyo, ang leucomethylene blue, na pagkatapos ay muling nao-oxidize. Ang mga electron na sana ay dadaan sa complex I, ang unang himpilan ng respiratory chain ay maaari sa halip na mailabas mula sa NADH sa pamamagitan ng methylene blue. Nagiging NAD+ ang NADH.

Tumataas ang ratio. Hindi lumalaki ang kabuuang imbakan.

Direkta itong sinukat ng isang pag-aaral sa daga tungkol sa pusong may diabetes, gamit ang nakahiwalay na mitochondria ng puso. Ang pagdaragdag ng methylene blue sa mga konsentrasyong mula 6 hanggang 18 micromolar habang nagaganap ang oksidasyon ng fatty acid ay nagdulot ng pagbaba ng NADH at ng ratio ng NADH sa NAD+ na nakadepende sa dosis. Di-hamak na mas kaunti ang pagbabago sa mismong dami ng NAD+ kaysa sa NADH, na siyang aasahan mula sa isang compound na nagko-convert ng isang anyo tungo sa isa sa halip na gumawa pa ng alinman sa dalawa.

Mahalaga kung saan napupunta ang mga electron na iyon. Sa nakahiwalay na mitochondria ng utak, pinahusay ng methylene blue sa 100 nanomolar hanggang 1 micromolar ang paggawa ng enerhiya kapag hinahadlangan ang respiratory chain. Kasabay nito, pinataas nito ang paggawa ng hydrogen peroxide at binawasan ang pag-aalis nito, sa bawat kondisyong sinubukan. Iniuugnay ng mga may-akda ang hydrogen peroxide sa direktang reduction ng oxygen ng reduced methylene blue. Hindi naglalaho ang mga electron na umaalis sa NADH sa rutang ito. Napupunta ang mga ito sa oxygen.

Malinaw na inilalahad ang puntong ito sa isang hiwalay na pag-aaral sa tisyu ng Achilles tendon. Naibalik ng methylene blue ang balanse ng NAD+/NADH at napataas ang paggawa ng ATP sa mga napinsalang tenocyte at sa isang modelo ng tendinopathy sa daga. Nakatala rin sa papel na walang makabuluhang pagbabago sa kabuuang imbakan ng NAD.

Ano ang naitatatag ng mga eksperimento sa tisyu at hayop

Sinusundan ng apat na eksperimento sa loob ng apat na dekada ang iisang ideya at paulit-ulit na ipinakikita ang hangganan nito.

Sa pangmatagalang pagpapakain ng alkohol sa mga daga, pinababa ng ethanol ang parehong cytosolic at mitochondrial na ratio ng NAD+/NADH sa atay. Napigilan ang malaking bahagi ng pagbabagong iyon nang idagdag ang methylene blue sa pagkain. Hindi nito nabawasan ang pag-iipon ng taba sa atay na dulot ng ethanol. Hindi naitama ng pagwawasto sa ratio ang kinalabasan. Mahalagang alalahanin ang resultang iyon noong 1985 bago tanggapin ang anumang pahayag na ang pagbabago sa redox ang mekanismo sa likod ng isang benepisyo.

Sa mga selula ng atay at mga dagang pinakain ng pagkaing mataas sa taba, pinataas ng methylene blue ang ratio ng NAD+/NADH at ang SIRT1, binawasan ang acetylation ng PGC-1alpha, inaktiba ang AMPK, at binawasan ang pag-iipon ng taba sa atay. Dito, nagbago nga ang kinalabasan kasabay ng ratio. Ipinakikita rin ng parehong papel na hindi iisa ang direksiyon ng epekto habang tumataas ang dosis: mas epektibong napataas ng tatlong milligrams per kilogram per day ang dami ng mitochondrial DNA kaysa sa sampu, samantalang tumaas ang pagkonsumo ng oxygen at pagsesenyas ng AMPK kasabay ng dosis.

Sa pusong may diabetes, ang methylene blue na ibinigay sa inuming tubig sa loob ng labing-isang linggo ay nagpababa sa ratio ng NADH sa NAD+ sa mitochondria ng puso at nagpataas sa aktibidad ng sirtuin 3. Bumaba ang lysine acetylation sa 83 lugar sa 34 protina, na nakatuon sa transportasyon at oksidasyon ng fatty acid. Bumuti ang ejection fraction. Ngunit hindi naayos ang respirasyong sinusuportahan ng complex I. At pinaghiwalay ng isang knockout experiment ang dalawang epektong madaling mapagkamalang iisa: naganap ang malaking bahagi ng pagbabago sa ratio kahit walang sirtuin 3, samantalang nakadepende rito ang deacetylation.

Sa pag-aaral sa tendon, inilapat ang methylene blue habang hinaharangan ng kemikal na rotenone ang complex I. Naibalik pa rin nito ang balanse ng NAD+, ngunit hindi pa rin nito napigilan ang oxidative stress, pagkasira ng matrix, at pagkawala ng kakayahan ng mga selulang manatiling buhay. Hindi sapat ang pagpapanumbalik ng ratio para makabawi ang tisyu.

Gumagamit ng parehong mga hanay ang isang napi-print na pahina na may kumpletong mga sanggunian.

Bakit nadadamay ang mga sirtuin sa argumento

Inaalis ng mga sirtuin ang mga acetyl group mula sa mga protina, at kumokonsumo sila ng NAD+ para magawa ito. Tumutugon ang kanilang aktibidad sa magagamit na NAD+, kaya anumang compound na nagbabago sa magagamit na dami nito ay nagbabago rin sa kasunod na aktibidad ng sirtuin.

Dito nakasalalay ang karamihan ng marketing na “methylene blue para sa NAD+.” Dito rin pumapalya ang lohika. Maaaring pataasin ng pagbabago sa ratio ang aktibidad ng sirtuin. Hindi nito ibig sabihin na nagsusuplay ng NAD+ ang produkto, at hindi rin nito ibig sabihin na katumbas ng pag-inom ng precursor ang epekto. May sarili ring mga posibleng pagkakamali ang redox na interpretasyon ng mga sukat na ito na mahalagang basahin bago tanggapin ang alinmang paliwanag.

Ano ang nasubukan sa mga tao

Ilang dekada nang ginagamit ang methylene blue sa klinika para sa mga agarang kondisyong may masusing pagsubaybay: methemoglobinemia, neurotoxicity na kaugnay ng ifosfamide, at matinding pagbaba ng presyon ng dugo habang inooperahan. Mga limitado at pinangangasiwaang paggamit ang mga iyon, hindi ebidensiya para sa araw-araw na pag-inom bilang pantulong sa pagganap.

Sa mga paghahanap para sa artikulong ito, walang natagpuang pag-aaral sa tao na sumusukat sa mga metabolite ng NAD+ matapos bigyan ng methylene blue ang malulusog na boluntaryo. Ang mga natuklasan sa itaas ay mula sa nakahiwalay na mitochondria, mga selulang pinalago sa laboratoryo, tisyu ng daga, at mga tisyu ng tao na inalis mula sa katawan. Ang tendon na inalis at pinananatiling buhay sa isang laboratory dish ay isang kapaki-pakinabang na hakbang na mas malapit sa tunay na tisyu kaysa sa isang cell line. Hindi pa rin ito isang tao.

Talagang may mga pag-aaral sa tao ang literatura tungkol sa mga precursor, at katamtaman ang mga resulta nito. Tumataas ang NAD+ sa dugo. Halo-halo ang mga klinikal na kinalabasan at karaniwang maliit ang mga pagbabago.

Kaya makatuwirang itanong ang pahayag tungkol sa pagsasabay, ngunit hindi kasiya-siya ang sagot: walang nailathalang pag-aaral, pagsubok, o serye ng kaso na natagpuan para sa artikulong ito na sumubok sa methylene blue kasabay ng nicotinamide riboside, nicotinamide mononucleotide, o infusion ng NAD+. Sinumang naglalarawan sa pagsasabay bilang suportado ng ebidensiya, o bilang may synergistic na epekto, ay naghihinuha mula sa dalawang magkahiwalay na pangkat ng ebidensiya.

Maaaring pumalya ang paghihinuhang ito sa dalawang paraan. Maaari itong maging labis na optimistiko kung hindi naman ang kabuuang imbakan ang naglilimita sa proseso kapag naibalik na ang ratio. Maaari rin itong maging sobrang payak, dahil may dose-response ang methylene blue na bumabaligtad sa mas mataas na dosis. Inilalarawan mismo ng mga mananaliksik nito ang compound bilang hormetic: pinapaboran ng mas mababang konsentrasyon ang reduction, samantalang inililihis ng mas mataas na konsentrasyon ang mga electron palayo sa respiratory chain at maaari itong kumilos bilang pro-oxidant. Hindi ginagawang mas ligtas ng pagdaragdag ng substrate ang kurbang iyon.

Mayroon ding mga alalahanin tungkol sa interaksiyon na walang kinalaman sa NAD+. Hinahadlangan ng methylene blue ang monoamine oxidase A, kaya may panganib itong kaugnay ng serotonin kapag isinabay sa ilang antidepressant; natuklasan ng isang pagsusuri sa mga naiulat na kaso ng toxicity sa CNS na 13 sa 14 na kaso ang tumugon sa Hunter criteria para sa serotonin toxicity. Maaari rin itong magdulot ng methemoglobinemia sa mataas na pagkakalantad. Kung umiinom ka ng inireresetang gamot, ang dapat itanong sa iyong clinician tungkol sa pagsasabay ay may kinalaman sa mga pathway na iyon, hindi sa balanse ng redox. Ganoon din ang pamantayan sa karaniwang mga pagsasabay: ang ibang suplementong iniinom kasabay ng methylene blue ay may sariling batayan ng ebidensiya na sa malaking bahagi ay hindi pa nasusubukan.

Bakit ang kadalisayan ang nagtatakda kung anong eksperimento talaga ang isinasagawa mo

Ang isang produkto ng methylene blue ay isang halo hangga't hindi napapatunayan ng laboratoryo na hindi ito ganoon. Ang mahalagang dumi rito ay Azure B, isang demethylated phenothiazine na hindi inert. Isa itong tina na aktibo sa redox at may parehong batayang electrochemistry, kaya ang produktong may makabuluhang dami ng Azure B ay hindi lamang mas malinis o mas maruming bersiyon ng parehong interbensiyon. Isa itong ibang halo na kumikilos sa parehong pathway, sa isang ratio na hindi pa nailalarawan ng sinuman.

Ang USP grade ang paraan para makakuha ang mamimili ng isang sangkap na may malinaw na espesipikasyon. Ang produktong hindi USP grade ay malamang na tinang para sa tela, at ang mga ganitong grado ay may mga duming hindi katanggap-tanggap para sa pagkonsumo, kabilang ang mabibigat na metal at mga natitirang solvent.

Hindi lamang sa pagitan ng mga grado ang agwat. Maraming nagbebenta na nagsasabing sumusunod sila sa USP ang nagsusuri lamang para sa mabibigat na metal, at pagkatapos ay ipinapakita ang iisang pangkat ng pagsusuring iyon bilang ganap na pagsunod. Saklaw ng buong espesipikasyon ang pagkakakilanlan, kadalisayan, mga organikong dumi, mga natitirang solvent, mga elementong dumi, latak matapos sunugin, mga limitasyong mikrobyal, at mga bacterial endotoxin. Hindi mapatutunayan ng isang bahagyang pangkat ng pagsusuri ang mga hindi nito saklaw, at kabilang sa mga hindi nasusuri ang mga kaugnay na sangkap at latak ng solvent.

Bumibili ang Blupreme mula sa isang tagagawa ng methylene blue para sa parmasyutiko at naglalathala ng sertipiko ng pagsusuri na sumasaklaw sa buong espesipikasyon, upang ang sangkap sa bote ay ang sangkap na inilalarawan ng pananaliksik. Kung nais mong suriin mismo ang pangangatwiran bago bumili, ipinapaliwanag ng kung paano basahin ang pananaliksik tungkol sa methylene blue kung ano ang kayang at hindi kayang ipakita ng bawat uri ng pag-aaral.

Ang pagkakaibang nananatili sa masusing pagsusuri

Binabago ng pagdaragdag ng precursor ng NAD+ kung gaano karaming NAD+ ang naroon. Binabago ng methylene blue kung ano ang ginagawa ng umiiral nang NAD+. Ang una ay tanong tungkol sa suplay, ang ikalawa ay tanong tungkol sa daloy, at kaunti lamang ang masasabi ng mga eksperimentong sumusuporta sa isa tungkol sa kabila.

May malinaw at magkakaugnay na mekanismong sumusuporta sa methylene blue, na napatunayan sa nakahiwalay na mitochondria at sa tisyu ng hayop, ngunit may malinaw at paulit-ulit na limitasyon: hindi katumbas ng pag-aayos ng tisyu ang pagbabago sa ratio. Ang kulang dito ay mga pag-aaral sa tao na sumusukat sa epekto nito sa NAD+ sa mga tao. Ang wala naman sa alinmang kategorya ay isang direktang pagsusuri sa pagsasabay ng dalawa.

Nararapat lamang na pareho ang pamantayang gamitin sa dalawang kategorya. Itanong kung aling variable ang sinasabing binabago ng produkto, pagkatapos ay itanong kung anong mga pagsukat sa variable na iyon ang mayroon sa mga tao. Kung ang sagot ay isang pag-aaral sa selula, isang daga, o isang kapani-paniwalang pathway, iyon lamang ang ebidensiya. Hindi iyon ebidensiya para sa pagsasabay.