اهي تجربا جن ميٿيلين بلو کي خلوي تنفس سان ڳنڍيو

فائبرن کان پاڪ ڪيل انساني رت کي 37 °C تي ٽن ڪلاڪن تائين گرم رکڻ سان، اهو پاڻ ۾ موجود آڪسيجن جو لڳ ڀڳ ٻه سيڪڙو استعمال ڪري ٿو. ان کي گرم رکڻ کان اڳ ميٿيلين بلو جي ٿوري مقدار شامل ڪريو ته ساڳيو رت لڳ ڀڳ پنجهٺ سيڪڙو آڪسيجن استعمال ڪري ٿو. خلين ۾ ڪا به تبديلي نه آئي. رڳو محلول بدليو.

اهو انگ جانز هاپڪنز ۾ جارج هيرپ ۽ اي. ايس. گزمان بيرن جي 1928 واري تحقيقي مقالي مان اچي ٿو، ۽ اهو ئي وڏي پيماني تي ورجايل هن بيان جو بنياد آهي ته ميٿيلين بلو خلوي تنفس کي بهتر ڪري ٿو. اهو بيان غلط ناهي، پر ان جي معنيٰ ايتري وسيع ناهي جيتري ٻڌڻ ۾ لڳي ٿي.

جدول ۾ ڏنل انگ اصل ۾ ڇا ماپي ٿو

ماپ جو آخري نتيجو آڪسيجن جو جذب هو، جيڪو گئسن جي تجزيي سان طئي ڪيو ويو. هيرپ ۽ بيرن تازو ڪڍيل رت کي 10 °C تي ڪپهه مان ڇاڻي اڇا خليا ڪڍيا، نموني کي آڪسيجن سان سير ڪيو، ان کي ٻن حصن ۾ ورهايو، هڪ حصي ۾ رنگ وڌو، ۽ مقرر وقت تائين رکڻ کان پوءِ ٻنهي جو تجزيو ڪيو. اڇن رت جي خلين جو ڳاڻيٽو ورلي ئي لڳ ڀڳ هڪ هزار في مڪعب مليميٽر کان وڌيو. آڪسيجن جي استعمال کي نموني جي شروعاتي آڪسيجن مان غائب ٿيل حصي جي صورت ۾ ڄاڻايو ويو.

انهن ڪاربان ڊاءِ آڪسائيڊ به ماپي، پر اتي طريقي مسئلا پيدا ڪيا. فائبرن کان پاڪ ڪيل رت، مطالعي هيٺ ردعمل سان لاڳاپيل نه هوندڙ سببن ڪري، پهرين ڪلاڪ ۾ هر 100 mL مان ٻن ملي مولن تائين ڪاربان ڊاءِ آڪسائيڊ خارج ڪئي؛ تنهنڪري سڄي رت مان حاصل ڪيل تنفسي نسبت استعمال لائق نه هئي. رڳو لاڪ جي محلول ۾ ڌوتل خلين مان اهڙا انگ مليا جن جي معنيٰ سمجهي سگهجي ٿي، ۽ رنگ سان توڙي رنگ کان سواءِ اهي 0.73 ۽ 0.80 جي وچ ۾ هئا.

هي تفصيل معمولي ناهي. انهن مقالن ۾ ”تنفس“ جو مطلب بند ٿانوَ اندر گئسن جي مٽاسٽا آهي. آڪسيجن جي استعمال ۽ ڪمائتي توانائي جي پيداوار جي وچ واري فرق تي الڳ مضمون آڪسيجن جو استعمال ATP بابت ڇا ٻڌائي ٿو ۽ ڇا نٿو ٻڌائي ۾ بحث ڪيو ويو آهي.

جتي خليا سڀ کان گهٽ تنفس ڪندا هئا، اتي رنگ سڀ کان وڌيڪ اضافو ڪيو

مماليا جا بالغ ڳاڙها رت جا خليا آڪسيجن جو تقريباً ڪو ماپڻ لائق استعمال نٿا ڪن. پکين جا مرڪز رکندڙ ڳاڙها رت جا خليا ڪن ٿا. هيرپ ۽ بيرن ٻنهي تي تجربا ڪيا، ۽ اهو فرق سندن دليل جو بنياد آهي.

مماليا جي نمونن ۾ رنگ ويهه کان پنجاهه ڀيرا واڌ پيدا ڪئي. هنج جي رت ۾، جنهن جا خليا اڳ ئي تنفس ڪندا هئا، ان شرح کي ڪڏهن به ٻيڻ کان وڌيڪ نه وڌايو. شروعاتي تنفس جي شرح جيتري وڌيڪ هئي، رنگ اوترو گهٽ اضافو ڪري سگهيو.

ساڳيو لاڙو هڪ ئي نوع جي اندر به نظر اچي ٿو. پولي سائيٿيميا ويرا واري هڪ مريض جي انساني رت جي نموني ۾ نابالغ خليا موجود هئا، ۽ رنگ کان سواءِ ان پنهنجي آڪسيجن جو 11.3 سيڪڙو استعمال ڪيو؛ ان جي ڀيٽ ۾ هڪ صحتمند عطيو ڏيندڙ جي ڌوتل خلين 2.8 سيڪڙو استعمال ڪيو. رنگ ان کي رڳو 63.4 سيڪڙو تائين وٺي ويو، يعني ڇهه ڀيرا تيزي، جڏهن ته عام خلين ۾ لڳ ڀڳ ٽيهه ڀيرا تيزي آئي. رنگ بالغ خلين کي نابالغ خلين جهڙي رويي ڏانهن ڌڪيو، ۽ ليکڪن به ان جي عمل کي اهڙيءَ طرح بيان ڪيو.

سائنائيڊ کي اهو عمل روڪڻ گهرجي ها

اها ڳالهه معلوم هئي ته سائنائيڊ خلوي آڪسائيڊيشن کي روڪي ٿو. تنهن هوندي به هيرپ ۽ بيرن ان کي رنگ سان گڏ شامل ڪيو.

ڳئون جي رت جا نتيجا ٻين نتيجن جي نمائندگي ڪن ٿا. ڪجهه به شامل ڪرڻ کان سواءِ ٽن ڪلاڪن ۾ آڪسيجن جو مقدار 22.61 مان گهٽجي 22.03 حجمي سيڪڙو ٿيو. ميٿيلين بلو سان اهو گهٽجي 12.84 ٿيو. ميٿيلين بلو ۽ هڪ پنج هزارين مولر پوٽاشيم سائنائيڊ سان اهو گهٽجي 12.74 ٿيو. رنگ جو اثر بنيادي طور اڻبدليل رهيو.

شڪل: انساني ڳاڙهن رت جي خلين جي مائڪروتنفس جو لڳاتار رڪارڊ. تير ميٿيلين بلو شامل ڪرڻ جو وقت ڏيکاري ٿو. ان کان اڳ ليڪ لڳ ڀڳ هموار آهي؛ ان کان پوءِ اها لاڳيتو مٿي چڙهي ٿي. هيرپ ۽ بيرن، جرنل آف ايڪسپيريمينٽل ميڊيسن 48:207–223 (1928) تان ٻيهر پيش ڪيل، PMID 19869478.

سندن نتيجو اهو هو ته رنگ آڪسيجن کڻندڙ طور ڪم ڪيو، ”اهڙو مادو فراهم ڪندي جيڪو بالغ مماليا جي بي مرڪز ڳاڙهن رت جي خلين مان غائب ٿي چڪو آهي.“ ٻن سالن کان پوءِ، راڪفيلر انسٽيٽيوٽ ۾ ميڪائلس ۽ سالومن هن اختلاف کي اهڙي صورت ڏني جيڪا اڄ تائين برقرار آهي. يا ته رنگ جو اثر ”رنگ جي هڪ اتفاقي خاصيت“ هو، يا رنگ ”جاندارن ۾ ڪنهن اڻڄاتل مادي جو نمونو“ هو. انهن ٻن امڪانن مان ڪنهن هڪ تي اڃا فيصلو نه ٿيو آهي. جيڪا ڳالهه بدلي آهي، سا اها ته هاڻي خلين کي گهڻو وڌيڪ درست نموني بيان ڪري سگهجي ٿو.

جگر جي عرق به ساڳيو ڪم ڪيو

ميڪائلس ۽ سالومن ڏيکاريو ته عضون مان ٿڌي پاڻيءَ سان ڪڍيل عرق به ساڳي تحريڪ پيدا ڪن ٿا. چوهي جو جگر سڀ کان وڌيڪ اثرائتو هو، ان کان پوءِ بُڪيو، تِلي ۽ خصيو. دماغ، عضلي ۽ رت جي سيرم جو اثر ٿورو هو يا بلڪل نه هو.

پوءِ انهن عرق کي ڪاربان مونو آڪسائيڊ جي موجودگيءَ ۾ آزمايو. عرق يا رنگ مان ڪنهن به هڪ سان پيدا ٿيل تنفس 98 سيڪڙو ڪاربان مونو آڪسائيڊ ۽ 2 سيڪڙو آڪسيجن واري ملاوٽ ۾ اڻبدليل رهيو. ساڳي گئسي ملاوٽ خمير ۽ مرڪز رکندڙ ڪڪڙ جي ڳاڙهن رت جي خلين جو تنفس لڳ ڀڳ 60 کان 80 سيڪڙو روڪيو، جيڪو واربرگ جي ڪاربان مونو آڪسائيڊ لاءِ حساس تنفسي اينزائم واري بيان سان ٺهڪي آيو. تنهنڪري بافتن جو اهو اڻسڃاتل مادو واربرگ وارو اينزائم نه هو.

ان دوران ڪيتريون امڪاني سڃاڻپون رد ٿيون. ريڊيوس ٿيل گلوٽاٿائون ۽ سسٽين رڳو ايتري آڪسيجن استعمال ڪئي جيتري سندن پنهنجي آڪسائيڊيشن لاءِ گهربل هئي. هارڊن ۽ ينگ جو ڪو اينزائم رد ڪيو ويو، ڇاڪاڻ ته عضلي ۾ ان جي مقدار سڀ کان وڌيڪ هوندي آهي، پر ان لڳ ڀڳ سڀ کان گهٽ اثر ڏيکاريو. ڪيلن جي سائٽوڪروم، جنهن کي ڪجهه سال اڳ نالو ڏنو ويو هو، به ساڳئي تضاد سان منهن ڏنو. سندن پنهنجي تجويز، ته فعال مادو خليي جي مرڪز مان آيو هو، کي هنن رڳو هڪ تجويز قرار ڏنو.

اثر ڪجهه شرطن سان لاڳاپيل هو

خلين جو سلامت هجڻ ضروري هو. مقطر پاڻي يا بار بار ڄمائڻ سان ڳاڙهن خلين جي ٽٽڻ رنگ ۽ عرق ٻنهي جو ردعمل ختم ڪري ڇڏيو، ۽ جزوي طور خلين جي ٽٽڻ ان کي ساڳئي تناسب سان گهٽايو.

کنڊ به ضروري هئي. گلوڪوز، فرڪٽوز ۽ سڪروز رنگ جي پيدا ڪيل تنفس کي سهارو ڏنو؛ مينيٽول نه ڏنو. کنڊ جي غيرموجودگيءَ ۾ تنفس بلڪل نه ٿيو، ۽ ان عمل دوران رنگ ڄڻ خلين کي نقصان پهچايو؛ تنهنڪري هڪ يا ٻه ڪلاڪ پوءِ شامل ڪيل گلوڪوز ان کي بحال نه ڪيو. ليکڪن تجويز ڪيو ته رنگ خليي جي ڪنهن اهڙي ساختي جز کي آڪسائيڊ ڪري رهيو هو جنهن جي خليي کي ضرورت هئي.

روشنيءَ رنگ جو اثر گهڻو وڌايو، جيتوڻيڪ اونداهيءَ ۾ به اثر واضح هو. ٻيا ريڊيوس ٿي سگهندڙ رنگ مختلف نموني هليا: ٽوليولين بلو ميٿيلين بلو جي برابر يا ان کان وڌيڪ اثر ڏيکاريو، جڏهن ته انڊيگو ڊاءِ سلفونيٽ لڳ ڀڳ ڪجهه به نه ڪيو. رنگ جي آڪسائيڊيشن-ريڊڪشن پوٽينشل ۽ ان جي اثر جي مقدار وچ ۾ ڪو واضح تعلق سامهون نه آيو؛ ليکڪن ان کي جھليءَ مان گذرڻ جي صلاحيت ۽ زهريلي اثر سان منسوب ڪيو.

اثر تنفس بدران تخمر سان لاڳاپيل هو

بيرن جي 1930 واري مطالعي ۾ خلين جي معلق محلولن بدران چوهي جي عام عضون ۽ پيوند ڪيل ڳوڙهن جي بافتن جا سنها ٽڪرا استعمال ڪيا ويا.

جن بافتن ۾ آڪسيجن جي موجودگيءَ ۾ گلوڪولائسز نه ٿيندي هئي، انهن ۾ ميٿيلين بلو ڪجهه به نه ڪيو يا آڪسيجن جي استعمال کي ٿورو گهٽايو: بُڪي ۾ لڳ ڀڳ 14 سيڪڙو، لبلبي ۾ لڳ ڀڳ 14 سيڪڙو، جگر ۾ لڳ ڀڳ 5 سيڪڙو. جن بافتن ۾ آڪسيجن جي موجودگيءَ ۾ تخمر ٿيندو هو، انهن ۾ ان استعمال وڌايو: تِلي ۾ لڳ ڀڳ 8 سيڪڙو، دماغ ۾ لڳ ڀڳ 13 سيڪڙو. ڳوڙهن ۾ واڌ انساني ڇاتيءَ جي ڪارسينوما ۾ لڳ ڀڳ 27 سيڪڙو کان وٺي رائوس ڪڪڙ سارڪوما ۾ 80 سيڪڙو کان وڌيڪ هئي، ۽ اها لڳ ڀڳ هر بافت جي آڪسيجن جي موجودگيءَ ۾ ٿيندڙ گلوڪولائسز جي تناسب ۾ هئي.

شڪل: هر نقطو بافت جي هڪ قسم کي ظاهر ڪري ٿو. افقي محور آڪسيجن جي موجودگيءَ ۾ ٿيندڙ گلوڪولائسز آهي؛ عمودي محور ميٿيلين بلو کان پوءِ آڪسيجن جي استعمال ۾ تبديلي آهي. ڊيٽا بيرن، جرنل آف ايڪسپيريمينٽل ميڊيسن 52:447–456 (1930)، جدول 6 تان، PMID 19869777.

پوءِ سائنائيڊ واري تجربي ابتڙ تصوير پيش ڪئي. جڏهن اڳ ردعمل نه ڏيکاريندڙ انهن بافتن ۾ سائنائيڊ سان تنفس روڪيو ويو ۽ تخمر نمايان ٿيو، تڏهن رنگ وري آڪسيجن جو استعمال وڌايو: بُڪي ۾ لڳ ڀڳ 59 سيڪڙو، جگر ۾ لڳ ڀڳ 19 سيڪڙو، تِلي ۾ لڳ ڀڳ 286 سيڪڙو، خصيي ۾ لڳ ڀڳ 200 سيڪڙو.

بيرن تجويز ڪيو ته رنگ ڪنهن خليي يا بافت جي تخمر ڪرڻ جي صلاحيت جي جاچ طور ڪم اچي سگهي ٿو، ۽ آخر ۾ هڪ قياس پيش ڪيو: رنگ رکندڙ وسيلي ۾ ڳوڙهي جي خلين جي ڪيترين نسلن تائين پرورش شايد ڪنهن ڏينهن ڳوڙهي جي ميٽابولزم کي مستقل طور عام بافت جهڙو بڻائي ڇڏي. اهو 1930 ۾ لکيل هڪ تحقيقي سوال هو. اهو علاج جي دعويٰ ناهي.

اهي تجربا ڇا ماپي نه پئي سگهيا

1928 ۽ 1930 ۾ ”تنفس“ جو مطلب آڪسيجن جو استعمال هو. ايڊينوسين ٽرائي فاسفيٽ بابت پهرين رپورٽ 1929 ۾ آئي، ۽ الڳ ڪيل مائٽوڪانڊريا پاران اليڪٽران منتقل ڪرڻ دوران فاسفيٽ کي ايسٽر ۾ بدلائڻ جو ثبوت 1949 ۾ مليو. ميٿيلين بلو بابت شروعاتي مقالن مان ڪنهن ۾ به توانائي جي پيداوار ماپڻ ممڪن نه هو، ۽ ڪنهن به اهڙي دعويٰ نه ڪئي.

ٻيو مسئلو خليا آهن. مماليا جي بالغ ڳاڙهن رت جي خلين ۾ مائٽوڪانڊريا نه هوندا آهن. ريٽيڪيولوسائيٽ واري مرحلي دوران اهي چونڊيل آٽوفيجي ذريعي مائٽوڪانڊريا ۽ رائبوسوم ختم ڪن ٿا؛ انهيءَ ڪري بالغ ڳاڙهو خليا گلوڪولائسز تي هلي ٿو ۽ پنهنجي پينٽوز فاسفيٽ رستي تي بنيادي طور ATP بدران NADPH لاءِ ڀاڙي ٿو. 1928 جي تجربن ۾ مرمت لاءِ ڪو اليڪٽران منتقليءَ جو سلسلو موجود ئي نه هو. جيڪا به شيءِ آڪسيجن استعمال ڪري رهي هئي، سا ٻيو ڪجهه ڪري رهي هئي.

اهو ٻيو عمل ڇا هو، تنهن جي هاڻي ڪافي چڱي وضاحت موجود آهي. ميٿيلين بلو خلوي ريڊيوس ڪندڙ برابرين کان اليڪٽران وٺي ليوڪوميٿيلين بلو بڻجي ٿو، جنهن کي ماليڪيولي آڪسيجن وري آڪسائيڊ ڪري ٿي، ۽ اهڙيءَ طرح چڪر مڪمل ٿئي ٿو. انساني ڳاڙهن رت جي خلين ۾ NADPH تي دارومدار رکندڙ فليوين ريڊڪٽيز ۽ لاڳاپيل ڊاءِ سلفائيڊ ريڊڪٽيز ريڊڪشن وارو قدم انجام ڏين ٿا. نشان لڳل گلوڪوز استعمال ڪندڙ 1976 جي هڪ مطالعي ۾ معلوم ٿيو ته رنگ هيڪسوز مونو فاسفيٽ شنٽ کي تيز ڪري ٿو، گهٽ ڪنسنٽريشن وارو اثر آڪسي هيموگلوبن تي دارومدار رکي ٿو، ۽ وڌيڪ ڪنسنٽريشن، 0.1 mM، هائيڊروجن پرآڪسائيڊ پيدا ڪري ٿي. ريڊيوس ٿيل رنگ آڪسيجن سان ملڻ تي پرآڪسائيڊ پيدا ڪري ٿو، فاسفيٽ جا بند نه.

مائٽوڪانڊريا ۾ صورتحال مشهور خلاصن ۾ تسليم ڪيل ڳالهه کان وڌيڪ تڪراري آهي. تحقيق جي هڪ رخ موجب رنگ ڪمپليڪس I جي علائقي مان اليڪٽران وٺي سائٽوڪروم c کي ڏئي ٿو. ٻي تحقيق ۾ معلوم ٿيو ته ڪوئي جي دماغ جي مائٽوڪانڊريا ۾ اهو اينٽي مائيسن سان ٿيل رڪاوٽ کان پوءِ تنفس بحال نٿو ڪري سگهي، ۽ ان بدران اليڪٽران قبول ڪندڙ جي جاءِ ڪمپليڪس III جي يوبيڪينول سان ڳنڍجڻ واري هنڌ تي رکي وئي. ٽين تحقيق ۾ معلوم ٿيو ته گهٽ ڪنسنٽريشن آرام واري حالت ۾ آڪسيجن جو استعمال وڌايو، پر ADP سان تحريڪ ڏنل تنفس اڻبدليل رهيو. هن نڪتي جو سڀ کان سڌو بيان اهو آهي ته ميٿيلين بلو جي پيدا ڪيل آڪسيجن جو استعمال آڪسائيڊيٽو فاسفوريليشن تي بلڪل دارومدار نٿو رکي: اهو تنفسي سلسلو روڪڻ تي به جاري رهيو، ۽ اهڙين تيارين ۾ به جن ۾ اهو سلسلو موجود ئي نه هو.

انهن ٻن مقدارن جي وچ واري فرق جون سڌيون ماپون به موجود آهن. چوهي جي جگر مان الڳ ڪيل مائٽوڪانڊريا ۾ رنگ جي وڌندڙ ڪنسنٽريشن تنفسي ڪنٽرول جون نسبتون گهٽايون ۽ سوجن پيدا ڪئي، جنهن کي ليکڪن آڪسائيڊيٽو فاسفوريليشن جي ڳانڍاپي جي ٽٽڻ طور بيان ڪيو. چوهي جي جگر مان محلول وهائي ڪيل تجربي ۾ ميٿيلين بلو آڪسيجن جو استعمال وڌايو، جڏهن ته ATP ۽ ADP جي نسبت گهٽجي وئي.

طبي رڪارڊ به ساڳيو پيغام ڏئي ٿو. ميٽ هيموگلوبينيميا جو علاج NADPH تي دارومدار رکندڙ ريڊڪشن رستي وسيلي لڳ ڀڳ هڪ کان ٻه مليگرام ميٿيلين بلو في ڪلوگرام رڳ ۾ ڏئي ڪيو ويندو آهي، ۽ وڏيون مقدارون ساڳي حالت پيدا ڪن ٿيون جنهن جو علاج ڪيو پيو وڃي. ساڳيو جائزو ٻڌائي ٿو ته ترياق وارو اثر سلامت ڳاڙهن رت جي خلين ۾ سڀ کان وڌيڪ هوندو آهي ۽ خلين جي ٽٽڻ جي موجودگيءَ ۾ گهٽجي ويندو آهي؛ اهو ئي 1930 وارو خلين جي ٽٽڻ بابت نتيجو آهي، جيڪو ٽيهتر سالن کان پوءِ اسپتال جي ماحول ۾ ٻيهر سامهون آيو. جنهن مرڪب جا ڪمائتا ۽ نقصانڪار اثر مقدار جي هڪ حد جي ٻنهي پاسن تي هجن، ان جي مقدار آڪسيجن جي استعمال جي ماپ مان اخذ نه ڪرڻ گهرجي.

بيچ کي بحث ۾ ڇو شامل ڪرڻ گهرجي

هيرپ ۽ بيرن هڪ اهڙي ڳالهه نوٽ ڪئي جنهن کي ٻيهر پڙهڻ گهرجي. ميٿيلين بلو پاڻ اسپيڪٽرو اسڪوپ ۾ ميٽ هيموگلوبن جي ٻن مخصوص پٽين جي وچ ۾ هڪ پٽي پيدا ڪري ٿو، ”جيڪا سرسري معائني ۾ آسانيءَ سان مونجهارو پيدا ڪري سگهي ٿي.“ رنگ ان مادي جهڙو نظر اچي سگهي ٿو جنهن جي ڳولا ڪئي پئي وڃي.

ساڳئي مسئلي جي هڪ ڪيميائي صورت به آهي. ننڍڙي جز طور موجود لاڳاپيل فينوٿائيازين جو پنهنجو ريڊاڪس رويو، پنهنجي پارگميتا ۽ پنهنجو زهريلو اثر هوندو آهي. هڪ دستاويزي مثال هن مسئلي جي اهميت واضح ڪري ٿو: ميٿيلين بلو جي آئيڊينيشن بابت هڪ مطالعي ۾، لڳ ڀڳ 7 کان 8 سيڪڙو Azure B رکندڙ نمونن بنيادي طور آئيڊين ٿيل Azure B پيدا ڪيو، تنهنڪري ردعمل تي ميٿيلين بلو بدران نجاست غالب رهي.

جيڪو به ميٿيلين بلو کي رياجينٽ طور، ليبارٽريءَ ۾، رنگ لڳائڻ واري ميز تي، يا اڪويريم ۾ استعمال ڪري ٿو، اهو اڻڄاتل خاصيتن واري جز سان ڪم ڪري رهيو آهي، جيستائين بيچ جون خاصيتون طئي نه ڪيون ويون هجن. لاڳاپيل مادا، سڃاڻپ، عنصري نجاستون، بچيل محلل ۽ ساڙڻ کان پوءِ رهيل باقيات، تجربي جو حصو آهن، رڳو ان جي چوڌاري ڪاغذي ڪارروائي نه. Blupreme پنهنجو ميٿيلين بلو هڪ دواساز ٺاهيندڙ کان حاصل ڪري ٿو ۽ مڪمل تجزياتي سرٽيفڪيٽ شايع ڪري ٿو، جنهن ۾ رڳو ڳرن ڌاتن بدران پوري USP معيار جي جاچ ٿئي ٿي؛ تجزياتي سرٽيفڪيٽ پڙهڻ جي رهنمائي ۽ USP-گريڊ جو نالو ڇا ثابت ڪري ٿو ۽ ڇا نٿو ڪري وضاحت ڪن ٿا ته دستاويز کي دعويٰ جي ڀيٽ ۾ ڪيئن جانچجي.

انگ صحيح هو

1928 ۽ 1930 جا تجربا احتياط سان ڪيل هئا، ۽ انهن جو مرڪزي مشاهدو اڄ تائين برقرار آهي: ريڊيوس ٿي سگهندڙ رنگ هڪ اهڙي خليي کان، جيڪو مشڪل سان تنفس ڪري ٿو، ان جي آرام واري شرح کان ڪيترائي ڀيرا وڌيڪ آڪسيجن استعمال ڪرائي سگهي ٿو، بغير ان قدم مان گذرڻ جي جنهن کي سائنائيڊ روڪي ٿو.

غلطي پوءِ ظاهر ٿئي ٿي، جڏهن ”تنفس“ کي ان جي جديد معنيٰ ۾ پڙهيو وڃي ٿو. گئسن جي مٽاسٽا جي ماپ ٻڌائي ٿي ته اليڪٽران آڪسيجن تائين پهتا. اها نٿي ٻڌائي ته انهن مان ڪي ATP ٺاهڻ لاءِ استعمال ٿيا، ۽ جنهن خليي ۾ مائٽوڪانڊريا ئي نه هجن، اتي انهن ٻن بيانن جي وچ ۾ فرق پنهنجي سڀ کان وڏي حد تي آهي. ميٿيلين بلو خلين ۾ ڇا ڪري ٿو، تنهن جو وسيع خاڪو ساڳئي فرق کي وڌيڪ وسيع تناظر ۾ رکي ٿو، ۽ رنگ کان دوا تائين هن مرڪب جي تاريخ بيان ڪري ٿي ته ڪپڙي جو هڪ رنگ آخر انهن تجربن تائين ڪيئن پهتو.