Metileno mėlis mažinant patogenų kiekį plazmoje: kaip vyksta procesas

Metileno mėlis gali padėti sumažinti patogenų kiekį donorinėje plazmoje, kai jis naudojamas kaip kontroliuojamos apdorojimo sistemos dalis. Apdorojimas vyksta už organizmo ribų, prieš leidžiant plazmą naudoti perpylimui. Procesas apima nurodytą įrangą, dažiklio poveikį, apšvietimą, filtravimą ir gauto kraujo komponento patikras.

Šis skirtumas lemia, kaip reikia suprasti įrodymus. Tyrimas, rodantis, kad apdorojimo sistema sumažina infekcinio viruso kiekį plazmos maišelyje, patvirtina rezultatą būtent tai medžiagai ir tam procesui. Jis nepatvirtina, kad metileno mėlio vartojimas gydo žmogaus infekciją.

Klinikiniu požiūriu svarbus klausimas taip pat yra dvejopas: kiek procesas sumažina patogenų kiekį ir kiek naudingos plazmos funkcijos išlieka?

Pradėkite nuo plazmos, o ne nuo neapibrėžto kraujo produkto

Plazma yra skystasis kraujo komponentas, kuriame yra baltymų, įskaitant krešėjimo faktorius. Negalima manyti, kad plazmos apdorojimo sistema tinka visam kraujui, eritrocitų koncentratams ar trombocitų komponentams. Šių medžiagų sudėtis ir funkcijos, kurias reikia išsaugoti, skiriasi.

Konkretus pavyzdys – „Macopharma“ THERAFLEX MB-Plasma sistema, skirta vieno donoro plazmos vienetams apdoroti. Jos dokumentuose aprašyta seka apima ląstelių kiekio mažinimą, metileno mėlio pridėjimą, apšvietimą, dažiklio pašalinimą ir laikymą. Gamintojas aprašo skirtingas konfigūracijas plazmai, gautai iš viso kraujo, ir didesniems aferezės būdu surinktos plazmos kiekiams. Todėl pradinė medžiaga ir vienkartinis rinkinys yra svarbūs dar prieš pradedant apšvietimą.

„Metileno mėliu apdorota plazma“ yra apdoroto komponento apibūdinimas, o ne išsami specifikacija. Prasmingame palyginime nurodoma sistema, konfigūracija, plazmos šaltinis ir naudojimo instrukcijos versija.

Sekite medžiagą per apdorojimo ir vertinimo etapus

Aukščiau pateiktoje iliustracijoje etapai atskirti. Šioje papildomoje lentelėje paaiškinama, kuo prisideda kiekvienas etapas ir ko vien juo negalima nustatyti.

Lentelė padeda suprasti validuotą procesą, bet neatstoja darbo procedūros. Visų pirma, pašalinimo filtras ir šviesos šaltinis atlieka skirtingas funkcijas. „Macopharma“ nurodo, kad Blueflex sumažina metileno mėlio ir jo darinių kiekį, įskaitant azuro junginius ir tioniną. Teiginį apie cheminių medžiagų pašalinimą reikia suprasti kaip išmatuotą kiekio sumažėjimą, o ne pažadą, kad nelieka nė vienos molekulės.

Kodėl šviesos šaltinis yra intervencijos dalis

Metileno mėlis yra fotoaktyvus. Apšvietimas gali sukelti biologinių taikinių cheminį pažeidimą, todėl šis derinys buvo tiriamas siekiant inaktyvuoti virusus. Mohr ir kolegų fenotiazino dažiklių ir šviesos tyrime pakeitus apšvietimo šaltinį pasikeitė tiek virusų inaktyvacija, tiek plazmos baltymų pažeidimas.

Tai neleidžia daryti dažnos supaprastintos išvados: laikyti dažiklio pavadinimą visos intervencijos apibūdinimu. Kitokia lempa, maišelis, optinis kelias ar medžiaga gali pakeisti poveikį. Platesniame vadove apie tai, kaip tiriamas fotodinaminis gydymas metileno mėliu, paaiškinama, kodėl sudėtį ir apšvietimą reikia aprašyti kartu.

Temperatūra yra ypač naudingas pavyzdys. 2018 metų tyrime apie apdorojimą THERAFLEX sistema skirtingose temperatūrose buvo lyginama plazma, kurios temperatūra buvo maždaug 5°C, 22°C ir 30°C. Esant žemiausiai temperatūrai, tyrėjai stebėjo prastesnį tabletės tirpimą ir silpnesnę trijų tirtų virusų inaktyvaciją. Aukštesnėje temperatūroje didėjo krešėjimo laiko pokyčiai ir krešėjimo faktorių aktyvumo nuostoliai.

Šie rezultatai nenustato naujo darbinių temperatūrų intervalo. Jie paaiškina, kodėl kraujo tarnyba turi laikytis nurodytų sąlygų: pakeitus parametrą ir pagerinus vieną rezultatą, kitas gali pablogėti.

Kuri sistemos dalis sumažino mikroorganizmo kiekį?

Po viso proceso išmatuoto patogenų kiekio sumažėjimo negalima automatiškai priskirti vien šviesa aktyvuotam dažikliui.

2015 metų bandymo su tyčia užteršta plazma tyrime tyrėjai ėmė medžiagos mėginius po atskirų apdorojimo etapų. Didžiąją bakterijų kiekio sumažėjimo dalį lėmė ląstelių filtravimas. Mažos bakterijos Brevundimonas diminuta atveju šis pirmasis etapas užtikrino 1.7 log sumažėjimą; paskesnis apdorojimas šviesa ir dažiklio filtravimas bendrą sumažėjimą padidino iki bent 3.7 log, taigi kiekis tapo mažesnis už tyrimo aptikimo ribą.

Tai yra bendros sistemos rezultatas. Jis nerodo, kad įprastas metileno mėlio tirpalas taip pat sumažina bakterijų kiekį. Šis skirtumas svarbus ir skaitant platesnius metileno mėlio antimikrobinio poveikio tyrimus.

Logaritminis sumažėjimas apibūdina išmatuoto pradinio ir likusio infekcinės medžiagos kiekio santykį. Trijų logaritminių vienetų sumažėjimas reiškia sumažėjimą tūkstantį kartų. „Žemiau aptikimo ribos“ reiškia, kad taikytomis bandymo sąlygomis tyrimas negalėjo kiekybiškai nustatyti likusio kiekio. Tai nėra visiško sterilumo ar universalaus veiksmingumo prieš netirtus mikroorganizmus įrodymas. Viruso rūšis, pradinis kiekis, mėginio matrica ir tyrimo jautrumas tebėra būtinos tokio teiginio dalys.

Išsaugokite funkciją, dėl kurios plazma bus naudojama

Procesas gali sumažinti infekcinį aktyvumą ir kartu pakeisti kliniškai svarbius baltymus. Todėl vien patogenų kiekio sumažėjimo matavimo nepakanka išsamiam vertinimui.

2014 metų plazmos šaltinių ir apdorojimo laiko palyginime po apdorojimo metileno mėliu išlikusio VIII faktoriaus aktyvumo dalis skirtingose tyrimo serijose svyravo nuo 78% iki 89%. Išlikęs aktyvumas priklausė nuo plazmos šaltinio; tyrėjai taip pat vertino fibrinogeną. Tai yra laboratoriniai apdoroto komponento matavimai. Šie procentai nereiškia klinikinio veiksmingumo pacientams.

Įsivaizduokite du plazmos vienetus su skirtingais pradiniais faktorių lygiais. Net jei apdorojant išlieka tokia pati jų aktyvumo dalis, galutiniai lygiai skirsis. Ir atvirkščiai – didesnė išlikusio aktyvumo procentinė dalis nebūtinai reiškia didesnę galutinę koncentraciją. Vertinkite ir matavimus prieš apdorojimą bei po jo, ir taikomą leidimo naudoti specifikaciją.

Pacientų gydymo rezultatams įvertinti reikia kitokio pobūdžio įrodymų. Vien komponento kokybės tyrimas negali patvirtinti lygiavertės kraujavimo kontrolės, perpylimo poreikio ar nepageidaujamų reiškinių dažnio konkrečioje pacientų populiacijoje.

Atskirkite apdorojimo įrodymus nuo gydymo teiginių

Plazmos maišelis leidžia užtikrinti kontroliuojamą poveikį: jo tūris, geometrija ir apdorojimo seka yra apibrėžti, o rezultatas išmatuojamas. Žmogus turi audinius, kraujotaką, medžiagų apykaitą ir infekcijos židinius, kurių šis eksperimentas neatkuria.

Todėl teiginiams apie ŽIV gydymą, lyginant su inaktyvacijos plazmoje įrodymais, ir metileno mėlio naudojimo sergant COVID-19 bei ilgalaikiu COVID įrodymams reikia atskiro klinikinio vertinimo. Sumažėjusio infekcinio aktyvumo donorinėje medžiagoje įrodymas neatsako nė į vieną iš šių klausimų.

Naudojimui kraujo tarnyboje įvertinkite konkretų komponentą ir vietoje leidžiamą sistemą, jos validavimą konkretiems mikroorganizmams, išlikusią baltymų funkciją, cheminių medžiagų likučius ir leidimo naudoti kontrolę. Kaip nurodo gamintojas, produkto prieinamumas skirtingose šalyse skiriasi. Ankstesnis naudojimas ar sėkmingas eksperimentas nepatvirtina, kad šiuo metu jį leidžiama naudoti visur. Prasmingas įrodymų vienetas yra visas validuotas procesas, taikomas jam numatytam plazmos komponentui.