ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಇತಿಹಾಸ: ಬಣ್ಣದಿಂದ ಔಷಧ ಮತ್ತು ಸಂಶೋಧನೆವರೆಗೆ

ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಔಷಧಾಲಯವನ್ನು ತಲುಪುವ ಮೊದಲು ರೋಗಿಯನ್ನು ತಲುಪಿತ್ತು.

ಮಲೇರಿಯಾದಲ್ಲಿ ಈ ಬಣ್ಣದ ಬಳಕೆಯ ಕುರಿತು Paul Guttmann ಮತ್ತು Paul Ehrlich ಅವರ 1891ರ ವರದಿಯಲ್ಲಿ ಎರಡು ತಾಪಮಾನ ಚಾರ್ಟ್‌ಗಳಿವೆ. ಎರಡನೆಯದು 13 July ರಿಂದ 5 August ವರೆಗೆ ಸಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ದಿನದಿಂದ ದಿನಕ್ಕೆ ನೀಡಿದ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯನ್ನು ಅಂಚಿನುದ್ದಕ್ಕೂ ದಾಖಲಿಸಲಾಗಿದೆ. 18 ಮತ್ತು 19 July ದಿನಾಂಕಗಳ ದಾಖಲೆಯಲ್ಲಿ "1 × 0,05 Methylenblau" ಎಂದು ಇದೆ. ನಂತರದ ದಿನಗಳಲ್ಲಿ ಅದೇ ಪ್ರಮಾಣದ ಐದು ಮತ್ತು ಏಳು ಡೋಸ್‌ಗಳನ್ನು ದಾಖಲಿಸಲಾಗಿದೆ; 22 July ವೇಳೆಗೆ ಸ್ವಲ್ಪ ಪ್ರಮಾಣದ ಕ್ವಿನೈನ್ ಕೂಡ ದಾಖಲೆಗೆ ಸೇರಿದೆ. ಚಾರ್ಟ್‌ನ ಮೊದಲಾರ್ಧದಲ್ಲಿ 37 °C ಮತ್ತು 39.5 °C ನಡುವೆ ಏರುಪೇರುಗೊಳ್ಳುವ ಜ್ವರದ ರೇಖೆ, ಬಣ್ಣವನ್ನು ನೀಡಲು ಆರಂಭಿಸಿದ ನಂತರ ಸಮತಟ್ಟಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಉಳಿದ ಮೂರು ವಾರಗಳಲ್ಲಿ ಸುಮಾರು 36 °C ಮತ್ತು 37.5 °C ನಡುವೆಯೇ ಉಳಿಯುತ್ತದೆ.

ಆ ರೋಗಿ ಇಬ್ಬರಲ್ಲಿ ಒಬ್ಬನು; ಲೇಖನದಲ್ಲಿ ಅವರನ್ನು ಗೃಹಸೇವಕ ಮತ್ತು ನಾವಿಕ ಎಂದು ವಿವರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಅವರಿಗೆ ನೀಡಲಾದ ಸಂಯೋಗವು ಆಗಲೇ ಹದಿನೈದು ವರ್ಷಗಳಿಂದ ವಾಣಿಜ್ಯ ವಸ್ತ್ರ ಬಣ್ಣವಾಗಿತ್ತು; ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಜೀವಿಯನ್ನು ಗುರಿಯಾಗಿಸಿಕೊಂಡ ಸಂಪೂರ್ಣ ಸಂಶ್ಲೇಷಿತ ಔಷಧದಿಂದ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ಪಡೆದಿರುವುದಾಗಿ ದಾಖಲಾಗಿರುವ ಮೊದಲ ವ್ಯಕ್ತಿಗಳಲ್ಲಿ ಈ ಇಬ್ಬರೂ ಸೇರಿದ್ದಾರೆ.

ಮೊದಲು ಬಂದದ್ದು ಬಣ್ಣ

ವಾಣಿಜ್ಯವಾಗಿ ಯಶಸ್ವಿಯಾದ ಮೊದಲ ಸಂಶ್ಲೇಷಿತ ಬಣ್ಣವನ್ನು William Henry Perkin 1856ರಲ್ಲಿ ಸೃಷ್ಟಿಸಿದರು. Perkinಗೆ ಆಗ ಹದಿನೆಂಟು ವರ್ಷ; Easter ರಜಾದಿನಗಳಲ್ಲಿ ಮನೆಯ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದಲ್ಲಿ ಕೆಲಸ ಮಾಡುತ್ತಾ ಕ್ವಿನೈನ್ ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಲು ಪ್ರಯತ್ನಿಸುತ್ತಿದ್ದರು. ಬದಲಾಗಿ ಅವರಿಗೆ ಕಪ್ಪು ಅವಶೇಷ ದೊರಕಿತು; ಅದನ್ನು ಕರಗಿಸಿದಾಗ ರೇಷ್ಮೆಗೆ ಅತ್ಯಂತ ಚೆನ್ನಾಗಿ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವ ಬಣ್ಣ ಕಂಡುಬಂತು. ಅವರು August 1856ರಲ್ಲಿ ಅದಕ್ಕೆ ಪೇಟೆಂಟ್ ಪಡೆದರು ಮತ್ತು 1857ರ ಅಂತ್ಯದ ವೇಳೆಗೆ Londonನ ರೇಷ್ಮೆ ಬಣ್ಣಗಾರಿಕೆಗೆ ಪೂರೈಕೆ ಮಾಡುವ ಕಾರ್ಖಾನೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದರು.

1875ರಲ್ಲಿ Adolf von Baeyer ಕೆಂಪು ಬಣ್ಣವೊಂದನ್ನು ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಿ, ಪ್ರಭಾತಕ್ಕೆ ಬಳಸುವ Greek ಪದ Eosನಿಂದ ಅದಕ್ಕೆ eosin ಎಂದು ಹೆಸರು ನೀಡಿದರು. 1876ರಲ್ಲಿ ಆಗ Badische Anilin- und Soda-Fabrik ಪ್ರಯೋಗಾಲಯದ ನಿರ್ದೇಶಕರಾಗಿದ್ದ Heinrich Caro, Baeyer ಅವರೊಂದಿಗೆ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂವನ್ನು ಹತ್ತಿಗೆ ಬಳಸುವ ಅನಿಲಿನ್-ಆಧಾರಿತ ಬಣ್ಣವಾಗಿ ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಿದರು. ಅದರ ರಾಸಾಯನಿಕ ರಚನೆ ಸುಮಾರು ಒಂಬತ್ತು ವರ್ಷಗಳ ಬಳಿಕವಷ್ಟೇ ಸ್ಥಿರವಾಯಿತು.

ಆ ಮೂಲವು ಪದಾರ್ಥದ ಹೆಸರಿನಲ್ಲಿಯೇ ಇನ್ನೂ ಗೋಚರಿಸುತ್ತದೆ. "ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ" ಎಂಬುದು ಬಣ್ಣದ ಕ್ಯಾಟಲಾಗ್‌ನ ವ್ಯಾಪಾರ ಹೆಸರು; ಅದು ರಾಸಾಯನಿಕ ವಿವರಣೆ ಅಲ್ಲ. ಅದು ಸೂಚಿಸುವ ಸಂಯೋಗ methylthioninium chloride ಆಗಿದ್ದು, ಯಾರಾದರೂ ಪದಾರ್ಥವನ್ನು ತೂಕ ಹಾಕುವಾಗ ಅಥವಾ ಸ್ಪೆಸಿಫಿಕೇಶನ್ ಓದುವಾಗಲೇ ಹೆಸರು, ಉಪ್ಪು ಮತ್ತು ಅದರ ಹೈಡ್ರೇಟ್‌ಗಳ ನಡುವಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳು ಮಹತ್ವ ಪಡೆಯುತ್ತವೆ.

ಸ್ಟೇನಿಂಗ್ ಸೇತುವೆಯಾಯಿತು

ಬಣ್ಣಗಾರಿಕೆಯಿಂದ ಆಸ್ಪತ್ರೆಯವರೆಗಿನ ದಾರಿ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪ್ ಮೂಲಕ ಸಾಗಿತು; ಅದು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಅಸ್ತಿತ್ವಕ್ಕೆ ಬರುವುದಕ್ಕೂ ಮೊದಲು ಆರಂಭವಾಗಿತ್ತು. 1865ರಲ್ಲಿ picric acid ಬಳಸಿ ರಕ್ತಕ್ಕೆ ಸಂಶ್ಲೇಷಿತ ಬಣ್ಣ ಹಚ್ಚಿದ ಮೊದಲ ವ್ಯಕ್ತಿ Wilhelm Erb; ಅವರು ಕೆಲವು ಕೆಂಪು ರಕ್ತಕಣಗಳ ಒಳಗೆ ಜಾಲದಂತಹ ವಿನ್ಯಾಸವನ್ನು ಕಂಡರು.

Paul Ehrlich ಅವರ 1878ರ ಡಾಕ್ಟರಲ್ ಪ್ರಬಂಧವು ಹಿಸ್ಟೋಲಾಜಿಕಲ್ ಸ್ಟೇನಿಂಗ್ ಅನ್ನು ವಸ್ತ್ರ ಬಣ್ಣಿಸುವಿಕೆಗೆ ಹೋಲಿಸಿ, ಎರಡೂ ರಾಸಾಯನಿಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳೆಂದು ವಾದಿಸಿತು. Robert Koch ಅವರೊಂದಿಗೆ tubercle bacillus ಕುರಿತು ಕೆಲಸ ಮಾಡುವಾಗ, ಅವರು ಅನಿಲಿನ್ ಬಣ್ಣಗಳನ್ನು ಆಮ್ಲೀಯ ಮತ್ತು ಕ್ಷಾರೀಯ ವರ್ಗಗಳಾಗಿ ವಿಭಜಿಸಿ, ಪ್ರತಿ ವರ್ಗವೂ ಕೋಶದ ಬೇರೆ ಬೇರೆ ಭಾಗಗಳನ್ನು ಬಣ್ಣಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಸ್ಥಾಪಿಸಿದರು. 1880ರಲ್ಲಿ ಅವರು ಎರಡನ್ನೂ ಒಟ್ಟಿಗೆ ಮಿಶ್ರಿಸಿದರು: supernatant ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗುವವರೆಗೆ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂನ ಸ್ಯಾಚುರೇಟೆಡ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು acid fuchsinಗೆ ಸುರಿದರು. ಅವರು neutralen Farbkörper ಅಥವಾ ತಟಸ್ಥ ಸ್ಟೇನ್ ಎಂದು ಕರೆಯಿದ ಫಲಿತಾಂಶವು ಒಂದರ ಬದಲು ಮೂರು ಬಣ್ಣಗಳನ್ನು ನೀಡಿತು, ಹಿಂದೆ ಕಾಣದಿದ್ದ polymorphonuclear ಕೋಶಗಳ ಗ್ರ್ಯಾನುಲ್‌ಗಳನ್ನು ಗೋಚರಿಸಿತು ಮತ್ತು ಮೊದಲ leukocyte differential count ಸಾಧ್ಯವಾಗಿಸಿತು. ಆ ಗ್ರ್ಯಾನುಲ್‌ಗಳು ಮಿಶ್ರಣದ ಎರಡೂ ಘಟಕಗಳನ್ನು ಸ್ವೀಕರಿಸಿದ್ದರಿಂದ, Ehrlich ಅವುಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಕೋಶಗಳಿಗೆ neutrophil ಎಂಬ ಪದವನ್ನು ರೂಪಿಸಿದರು.

ಎರಡು ವರ್ಷಗಳ ನಂತರ Koch ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಬಳಸಿ tubercle bacillus ಅನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಿದರು; 1883ರಲ್ಲಿ Ehrlich ವಿಧಾನವನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಿದರು. 1886ರಲ್ಲಿ ಅವರು ಬೇರೆ ಸ್ವರೂಪದ ಅವಲೋಕನ ಪ್ರಕಟಿಸಿದರು: ಜೀವಂತ ಪ್ರಾಣಿಗಳಿಗೆ ಬಣ್ಣವನ್ನು ಇಂಜೆಕ್ಟ್ ಮಾಡಿ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಅಂಗವು ಅದನ್ನು ಎಷ್ಟು ಬಲವಾಗಿ ಸ್ವೀಕರಿಸುತ್ತದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಹೋಲಿಸಿ, ಅದು ಮೆದುಳು ಮತ್ತು ನರಕೋಶಕಗಳಿಗೆ ಸ್ಪಷ್ಟ ಆಕರ್ಷಣೆ ಹೊಂದಿದೆ ಎಂದು ತೀರ್ಮಾನಿಸಿದರು. ಆ ಆಕರ್ಷಣೆಯನ್ನು ಅವರು ಬಣ್ಣದ oxidation-reduction cyclingಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದರು; ಅದನ್ನು ಹಿಂದಿನ ವರ್ಷವೇ ಅವರು ಗಮನಿಸಿದ್ದರು. ಇದೇ cycling ಕಾರಣದಿಂದ, ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ದ್ರಾವಣದ ಆಮ್ಲಜನಕ ಬಳಕೆಯಾದಾಗ ಅದು ಬಣ್ಣ ಕಳೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಗಾಳಿ ಮರಳಿದಾಗ ಮತ್ತೆ ಬಣ್ಣ ಪಡೆಯುತ್ತದೆ. ಆ cyclingನ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಮೊದಲ ಬಾರಿಗೆ ಅಳೆಯಿದ ಪ್ರಯೋಗಗಳು ನಂತರದ ದಶಕಕ್ಕೆ ಸೇರಿವೆ; ಅದರ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವು ಇತಿಹಾಸದಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾದ ವಿಷಯ.

ಪರೋಪಜೀವಿ ಮತ್ತು ನೇರಳೆ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್

Alphonse Laveran 1880ರಲ್ಲಿ ತಾಜಾ, ಬಣ್ಣಹಚ್ಚದ ರಕ್ತವನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಿ ಮಲೇರಿಯಾ ಪರೋಪಜೀವಿಯನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿದರು. ಒಣಗಿಸಿದ ಸ್ಮಿಯರ್‌ನಲ್ಲಿ ಅದನ್ನು ನಿಯಮಿತವಾಗಿ ನೋಡುವುದಕ್ಕೆ ಸ್ಟೇನ್ ಅಗತ್ಯವಿತ್ತು; ಆ ಕಾಲದ ಸ್ಟೇನ್‌ಗಳು ಕೆಂಪು ಮತ್ತು ನೀಲಿ ಎಂಬ ಎರಡು ಬಣ್ಣಗಳನ್ನು ಮಾತ್ರ ನೀಡುತ್ತಿದ್ದವು.

1888ರಲ್ಲಿ Polish pathologist Czesław Cheçinski acid fuchsin ಬದಲು eosin ಬಳಸಿದರು; ಇದರಿಂದ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಮತ್ತು eosin ಮಿಶ್ರಣ ಸಿದ್ಧವಾಯಿತು. ಅವರ ವಿಧಾನಕ್ಕೆ ಆಧಾರವಾದ ಪ್ರಕರಣವು 30 September 1887ರಂದು ಮಲೇರಿಯಾದಿಂದ ಮೃತಪಟ್ಟ ಸೈನಿಕನದು. ರಕ್ತ ಫಿಲ್ಮ್‌ಗಳಲ್ಲಿ Cheçinski ನೀಲಿ ಡೈಸಿ ಹೂವಿನಂತಹ ರೂಪಗಳನ್ನು ಕಂಡರು; ಅವುಗಳನ್ನು ಈಗ Plasmodium malariae ಎಂದು ಗುರುತಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಹಾಗೆಯೇ ಅರ್ಧಚಂದ್ರಾಕಾರದ ರೂಪಗಳನ್ನು ಕಂಡರು; ಅವುಗಳನ್ನು ಈಗ Plasmodium falciparumನ gametocytes ಎಂದು ಗುರುತಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಫಲಿತಾಂಶವು ರೋಗದ ಕುರಿತು ಇದ್ದ ಎರಡು ಸ್ಪರ್ಧಾತ್ಮಕ ವಿವರಣೆಗಳಿಗೆ ಒಂದೇ ವೇಳೆ ಅಂತ್ಯ ತಂದಿತು: miasma ಸಿದ್ಧಾಂತ ಮತ್ತು ಮಲೇರಿಯಾ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಂನಿಂದ ಉಂಟಾಗುತ್ತದೆ ಎಂಬ Edwin Klebs ಮತ್ತು Corrado Tommasi-Crudeli ಅವರ ವಾದ.

ಪರೋಪಜೀವಿ ಗೋಚರಿಸಿತು. ಅದರ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಮಾತ್ರ ಗೋಚರಿಸಲಿಲ್ಲ; ಆದ್ದರಿಂದ ಅದರ ಸ್ವಭಾವದ ಪ್ರಶ್ನೆ ತೆರೆದೆಯೇ ಉಳಿಯಿತು. Breslauನ ವೈದ್ಯ Ernst Malachowski ಆ ಸಮಸ್ಯೆಯನ್ನು ಮೊದಲು ಆಕಸ್ಮಿಕವಾಗಿ ಮತ್ತು ನಂತರ ಉದ್ದೇಶಪೂರ್ವಕವಾಗಿ ಪರಿಹರಿಸಿದರು. 1889ರಲ್ಲಿ ಒಂದು ತಯಾರಿಕೆಯಲ್ಲಿ plasmodial nucleus ವಿಭಿನ್ನವಾಗಿ ಬಣ್ಣಗೊಳ್ಳುವುದನ್ನು ಅವರು ಗಮನಿಸಿದರು, ಆದರೆ ಅದನ್ನು ಮರುಸೃಷ್ಟಿಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗಲಿಲ್ಲ. ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂವನ್ನು ಆಮ್ಲೀಕರಿಸುವುದರಿಂದ ಪ್ರಯೋಜನವಾಗಲಿಲ್ಲ. ಅದನ್ನು borax ಬಳಸಿ ಕ್ಷಾರೀಯಗೊಳಿಸಿದಾಗ ಪ್ರತಿಸಾರಿ ಪರಿಣಾಮ ದೊರಕಿತು. ಅವರು 15 June 1890ರಂದು ವಿಧಾನವನ್ನು ಸಾರ್ವಜನಿಕವಾಗಿ ಪ್ರದರ್ಶಿಸಿ ಅದೇ ವರ್ಷ ಪ್ರಕಟಿಸಿದರು; August 1891ರಲ್ಲಿ ಇನ್ನಷ್ಟು ಸಂಪೂರ್ಣ ವಿಧಾನವನ್ನು ಪ್ರಕಟಿಸಿದರು.

Dmitri Romanowsky September 1891ರಲ್ಲಿ ತಮ್ಮದೇ ಆವೃತ್ತಿಯನ್ನು ಪ್ರಕಟಿಸಿದರು. ಅವರ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಎರಡು ತಿಂಗಳಿಗಿಂತ ಹಳೆಯದಾದ, ನಿರ್ಲಕ್ಷ್ಯಗೊಂಡು ಹುಳು ಬೆಳೆದ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ದ್ರಾವಣದ ಬಾಟಲಿಯಿಂದ ಬಂದವು. Malachowski ಅವರ ವಿವರಣೆ ಉದ್ದೇಶಪೂರ್ವಕವಾಗಿತ್ತು ಮತ್ತು ಅವರದೇ ಮಾತಿನಲ್ಲಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ಮರುಸೃಷ್ಟಿಸಬಹುದಾಗಿತ್ತು; Romanowsky ಅವರ ವಿಧಾನ ಒಮ್ಮೆ ಕೆಲಸ ಮಾಡಿದರೂ ಮುಂದಕ್ಕೆ ಕರೆದೊಯ್ಯಲಾರದ ದಾರಿಯಾಗಿತ್ತು. ಆದರೂ ಹೆಸರಿನ ಗೌರವ Romanowskyಗೆ ಸಿಕ್ಕಿತು; ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಗೋಚರಿಸುವಂತೆ ಮಾಡಿದ ನೇರಳೆ ಬಣ್ಣವನ್ನು ಯಾರು ಸೃಷ್ಟಿಸಿದರು ಎಂಬ ವಿವಾದ ತನ್ನದೇ ದಾಖಲೆಗಳಿರುವ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಕಥೆ.

ಚಿತ್ರ: Guttmann ಮತ್ತು Ehrlich ಅವರ 1891ರ ವರದಿಯ ಎರಡನೇ ತಾಪಮಾನ ಚಾರ್ಟ್. ಮೇಲಿನ ಪ್ಯಾನೆಲ್ 13 ರಿಂದ 24 July ವರೆಗೆ ಮತ್ತು ಕೆಳಗಿನ ಪ್ಯಾನೆಲ್ 25 July ರಿಂದ 5 August ವರೆಗೆ ವ್ಯಾಪಿಸುತ್ತದೆ; ಅಂಚಿನ ದಾಖಲೆಗಳು ನೀಡಿದ ಡೋಸ್‌ಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ದಾಖಲೆಯ ಕೊನೆಯ ಮೂರು ವಾರಗಳಲ್ಲಿ ತಾಪಮಾನ ಸಾಮಾನ್ಯ ಮಟ್ಟದ ಸಮೀಪ ಉಳಿಯುತ್ತದೆ. Krafts, Hempelmann ಮತ್ತು Skórska-Staniaಗಾಗಿ ಸ್ಕ್ಯಾನ್ ಮಾಡಲಾದ ವರದಿಯಿಂದ ಮರುಪ್ರಕಟಿಸಲಾಗಿದೆ, Parasitology Research 111:1–6 (2012), PMID 22411634.

"Ripening" ಎನ್ನುವುದು demethylation ಎಂದು ತಿಳಿದುಬಂತು

1890ರ ದಶಕದಲ್ಲಿ ಸಂಬಂಧಪಟ್ಟ ಯಾರಿಗೂ "ripening" ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಮೇಲೆ ಏನು ಮಾಡುತ್ತದೆ ಎಂಬುದು ತಿಳಿದಿರಲಿಲ್ಲ. ಉತ್ತರ ಕೈಗಾರಿಕಾ ರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರದಿಂದ ಹೊರಬಂತು. Heinrich August Bernthsen 1883ರಲ್ಲಿ ಮೂಲ ಸಂಯೋಗ phenothiazine ಅನ್ನು ಸಂಶ್ಲೇಷಿಸಿದರು, 1885ರಲ್ಲಿ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಆ ಕುಟುಂಬಕ್ಕೆ ಸೇರಿದೆ ಎಂದು ಸ್ಥಾಪಿಸಿದರು ಮತ್ತು ಅದೇ ಅವಧಿಯಲ್ಲಿ ಕ್ಷಾರೀಯ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳು ಬಣ್ಣದಿಂದ methyl ಗುಂಪುಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿ, ಈಗ azures ಎಂದು ಕರೆಯಲಾಗುವ ಸಂಯೋಗಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತವೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದರು.

Bernard Nocht 1898 ಮತ್ತು 1899ರಲ್ಲಿ ಸಕ್ರಿಯ ಭಾಗವನ್ನು ಹೊರತೆಗೆದರು ಮತ್ತು ಅದನ್ನು Rot aus Methylenblau, ಅಂದರೆ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂದಿಂದ ಬಂದ ಕೆಂಪು ಎಂದು ಮಾತ್ರ ಕರೆಯಲು ಸಾಧ್ಯವಾಯಿತು. Michaelis 1901ರಲ್ಲಿ ಅದನ್ನು azure I ಎಂದು ಗುರುತಿಸಿದರು. Jenner 1899ರಲ್ಲಿ dye precipitateಗೆ ದ್ರಾವಕವಾಗಿ absolute methanol ಪರಿಚಯಿಸಿದರು; ಇದರಿಂದ ರಕ್ತ ಫಿಲ್ಮ್‌ಗಳನ್ನು heat-fix ಮಾಡುವ ಅಗತ್ಯ ತಪ್ಪಿತು. Leishman ಮತ್ತು Reuter ಈ ಎರಡೂ ಮುನ್ನಡೆಗಳನ್ನು ಸಂಯೋಜಿಸಿದರು; Wright 1902ರಲ್ಲಿ ಸರಳೀಕೃತ ವಿಧಾನವನ್ನು ಪ್ರಕಟಿಸಿದರು. Giemsa ಅವರ ಕೊಡುಗೆ, ಅದೂ 1902ರಲ್ಲಿ, ಯಾದೃಚ್ಛಿಕವಾಗಿ ripen ಆಗಿದ್ದ ದ್ರಾವಣದ ಮೇಲೆ ಅವಲಂಬಿಸದೆ, ತಿಳಿದಿರುವ ಬಣ್ಣಗಳ ಅಳೆಯಲ್ಪಟ್ಟ ಪ್ರಮಾಣಗಳನ್ನು ಬಳಸುವುದಾಗಿತ್ತು. ನಂತರ ಅವರು ಶುದ್ಧ methylene azure ಅನ್ನು ಹೇಗೆ ತಯಾರಿಸುತ್ತಿದ್ದರು ಎಂಬುದನ್ನು ಪ್ರಕಟಿಸಲು ನಿರಾಕರಿಸಿ, ವಿಧಾನವನ್ನು Dr. Grübler's laboratoryಗೆ ಮಾರಿದರು; ಅದು ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು azure I ಎಂದು ಮಾರುಕಟ್ಟೆಗೆ ತಂದಿತು ಮತ್ತು ತನ್ನ ಆವೃತ್ತಿಯೇ ನಿಜವಾದ Giemsa stain ಎಂದು ಹೇಳಿತು.

ಎರಡು ವಿಶ್ವಯುದ್ಧಗಳು ಆ ಕೆಲಸವನ್ನು ಆಕಸ್ಮಿಕವಾಗಿ ಪೂರ್ಣಗೊಳಿಸಿವೆ. German ಬಣ್ಣಗಳು ದೊರೆಯದಾಗ, Lillie, Roe ಮತ್ತು Wilcox American ಪರ್ಯಾಯಗಳ ಮೇಲೆ ಕೆಲಸ ಮಾಡಿ, ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಸ್ಟೇನಿಂಗ್ ಮೂರು ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಘಟಕಗಳಿಂದ ದೊರೆಯುತ್ತದೆ ಎಂದು ಕಂಡುಕೊಂಡರು: ಶುದ್ಧ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ, ಅದರ ವಿಭಜನಾ ಉತ್ಪನ್ನ Azure B, ಮತ್ತು eosin. ಇಂದು ಮಲೇರಿಯಾ ನಿರ್ಣಯದಲ್ಲಿ ಬಳಸುವ ಸ್ಟೇನ್‌ನ ಪ್ರಮುಖ ಘಟಕಗಳಾಗಿ ಈ ಮೂರೂ ಉಳಿದಿವೆ; ಈಗ ಅದರ ಹೆಸರಿನಲ್ಲಿ Malachowski, Wright ಮತ್ತು Giemsa ಮೂರೂ ಒಟ್ಟಾಗಿ ಬರುತ್ತಾರೆ.

ಚಿತ್ರ: ಮಾನವ ಕೆಂಪು ರಕ್ತಕಣಗಳಲ್ಲಿ Plasmodium falciparum ring forms, Romanowsky-type ವಿಧಾನದಿಂದ ಬಣ್ಣಿಸಲಾಗಿದೆ. ಉಂಗುರದ ಒಳಗಿನ ನೇರಳೆ ರಚನೆಯೇ Malachowski ಅವರ borax-ಚಿಕಿತ್ಸಿತ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ ಮೊದಲ ಬಾರಿಗೆ ಗೋಚರವಾಗಿಸಿದ chromatin. ಚಿತ್ರ: Ernst Hempelmann; public domainಗೆ ಬಿಡುಗಡೆ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.

ಒಂದು ಹೆಸರು, ಹಲವು ಪದಾರ್ಥಗಳು

ಆ ಘಟಕಗಳನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸಲು ತೆಗೆದುಕೊಂಡ ವರ್ಷಗಳು ರಸಾಯನಶಾಸ್ತ್ರಕ್ಕಿಂತಲೂ ದೀರ್ಘಕಾಲ ಉಳಿದ ಸಮಸ್ಯೆಯನ್ನು ಬಿಟ್ಟವು. Ralph Lillie 1969ರಲ್ಲಿ ಜೈವಿಕ ಸ್ಟೇನ್‌ಗಳು—"ಅವುಗಳ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಮತ್ತು ಕಠಿಣ ಬಳಕೆಗಳಿಗೆ ತಕ್ಕ ಕಟ್ಟುನಿಟ್ಟಾದ ಸ್ಪೆಸಿಫಿಕೇಶನ್‌ಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ತಯಾರಿಸಲಾದವು"—ಮತ್ತು ವಸ್ತ್ರ ಬಣ್ಣಿಸಲು ಬಳಸುವ ಅಜೈವಿಕ ಸ್ಟೇನ್‌ಗಳು—"ಕಡಿಮೆ ಕಟ್ಟುನಿಟ್ಟಿನ ಮತ್ತು ಕಡಿಮೆ ಬೇಡಿಕೆಯ ಉತ್ಪಾದನಾ ಮಾನದಂಡಗಳನ್ನು ಅಗತ್ಯಪಡಿಸುವವು"—ಎಂಬುದರ ನಡುವೆ ಗಡಿ ಎಳೆದರು. ಎರಡೂ ವಿಧದ ಉತ್ಪನ್ನಗಳು ಒಂದೇ ಹೆಸರನ್ನು ಹೊತ್ತಿದ್ದವು; ಅವುಗಳ ನಡುವಿನ ವ್ಯತ್ಯಾಸವು ಎಂದಿಗೂ ಕೇವಲ ಪ್ರಮಾಣದ ವ್ಯತ್ಯಾಸವಾಗಿರಲಿಲ್ಲ. ಹತ್ತಿಗಾಗಿ ಬರೆಯಲಾದ ಸ್ಪೆಸಿಫಿಕೇಶನ್ ಮತ್ತು diagnostic reagentಗಾಗಿ ಬರೆಯಲಾದ ಸ್ಪೆಸಿಫಿಕೇಶನ್ ಪರಸ್ಪರ ಬದಲಾಯಿಸಬಹುದಾದವುಗಳಲ್ಲ; ವಸ್ತ್ರ ಬಳಕೆಗೆ ತಯಾರಿಸಲಾದ ಪದಾರ್ಥವನ್ನು ನುಂಗಲು ಉದ್ದೇಶಿಸಲಾಗಿರಲಿಲ್ಲ.

Azure B ಇದಕ್ಕೆ ಅತ್ಯಂತ ಸ್ಪಷ್ಟ ಉದಾಹರಣೆ. ಅದು ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂನ monodemethylated ರೂಪವಾಗಿದೆ, ತನ್ನದೇ ಅಳೆಯಬಹುದಾದ pharmacological activity ಹೊಂದಿದೆ, ಮತ್ತು ಎರಡನ್ನೂ ಬೇರ್ಪಡಿಸುವ ಮೊದಲು ಒಂದು ಶತಮಾನಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಕಾಲ clinical methylene blue ತಯಾರಿಕೆಗಳಲ್ಲಿ ನಿಯಂತ್ರಣವಿಲ್ಲದ ಘಟಕವಾಗಿ ಇತ್ತು. ಒಂದು ಸಂಶೋಧನಾ ತಂಡವು methylene blue administration ನಂತರ autopsy ವೇಳೆ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿದ ಮಾನವ tissueನಲ್ಲಿ 5 ರಿಂದ 14 per cent ಬದಲಾಗದೆ ಉಳಿದ methylene blue ಮತ್ತು 86 ರಿಂದ 95 per cent Azure B ಇತ್ತು ಎಂದು ಕಂಡುಹಿಡಿದಿತು. ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ತಯಾರಿಕೆಯಲ್ಲಿ Azure B ಇರಬೇಕೇ, ಇದ್ದರೆ ಯಾವ ಮಿತಿಯಲ್ಲಿ ಇರಬೇಕು ಎಂಬುದು ಸ್ಪೆಸಿಫಿಕೇಶನ್ ಪ್ರಶ್ನೆ; Azure B ಅನ್ನು impurity ಮತ್ತು metabolite ಆಗಿ ಪರಿಶೀಲಿಸಿದ ಸಂಶೋಧನೆ ಅಲ್ಲಿಂದ ಮುಂದುವರಿಯುತ್ತದೆ.

ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪರಿಣಾಮವೂ ಸ್ಪೆಸಿಫಿಕೇಶನ್‌ನಲ್ಲೇ ಇದೆ. USP ಅನುಗುಣತೆ ಮಾರುಕಟ್ಟೆಯಲ್ಲಿ ಲಭ್ಯವಿರುವ ಅತ್ಯುನ್ನತ ಶುದ್ಧತೆಗೆ ಸಾಗುವ ಮಾರ್ಗ, ಏಕೆಂದರೆ ಅದು ಒಂದೇ ಮಾಪನವಲ್ಲ, ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಪ್ರಕಟಿತ ಪರೀಕ್ಷಾ ಮಾನದಂಡ. ಅದು identity, assay, Azure B ಸೇರಿದಂತೆ organic impurities, residual solvents, elemental impurities, residue on ignition, microbial limits ಮತ್ತು bacterial endotoxinsಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. heavy-metal ಫಲಿತಾಂಶವೊಂದನ್ನು ವರದಿ ಮಾಡಿ ಅದನ್ನು USP compliance ಎಂದು ಕರೆಯುವ certificate, ಆ ಪಟ್ಟಿಯ ಒಂದೇ ಸಾಲನ್ನು ಮಾತ್ರ ವರದಿ ಮಾಡಿದೆ.

Blupreme ತನ್ನ ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂವನ್ನು pharmaceutical manufacturerನಿಂದ ಪಡೆಯುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸಂಪೂರ್ಣ certificate of analysis ಅನ್ನು ಪ್ರಕಟಿಸುತ್ತದೆ; heavy metals ಮಾತ್ರವಲ್ಲದೆ ಸಂಪೂರ್ಣ USP specification ಅನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸುತ್ತದೆ. certificate of analysis ಓದುವ ಮಾರ್ಗದರ್ಶಿ ಮತ್ತು USP designation ಏನನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಏನನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಎಂಬ ಲೇಖನಗಳು ದಾಖಲೆಯನ್ನು ಹೇಳಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ ಹೇಗೆ ಪರಿಶೀಲಿಸಬೇಕು ಎಂಬುದನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತವೆ.

ಇತಿಹಾಸವು ಏನನ್ನು ಸಮರ್ಥಿಸುತ್ತದೆ, ಏನನ್ನು ಸಮರ್ಥಿಸುವುದಿಲ್ಲ

ಈ ವಂಶಾವಳಿ ನಿಜವಾದದ್ದು ಮತ್ತು ಬಹುತೇಕ product pageಗಳು ಸೂಚಿಸುವುದಕ್ಕಿಂತ ದೀರ್ಘವಾಗಿದೆ. ಮೆಥಿಲೀನ್ ಬ್ಲೂ 1891ರಲ್ಲಿ ಮಲೇರಿಯಾ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಲ್ಪಟ್ಟಿತು, 1899ರಲ್ಲಿ agitated psychosisನಲ್ಲಿ sedative ಆಗಿ ವರದಿಯಾಯಿತು, ಮತ್ತು ಅದರ side chain quinacrine, chloroquine, promethazine ಮತ್ತು chlorpromazineಗಳವರೆಗೆ ಸಾಗುತ್ತದೆ. Arthur Leppmann ಜೊತೆ Ehrlich ಬರೆದ 1890ರ ಲೇಖನವು neuralgic ಮತ್ತು rheumatic painನಲ್ಲಿ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ವಿವರಿಸಿತು; ನಂತರ ಮಾನಸಿಕ ಅಸ್ವಸ್ಥತೆಯಲ್ಲಿ ಬಣ್ಣವನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸುವ ವಿಚಾರವನ್ನು ಪರಿಗಣಿಸಿ, ಅದನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸದಿರಲು ತೀರ್ಮಾನಿಸಿತು.

ಇವುಗಳಲ್ಲಿ ಯಾವುದೂ ಆಧುನಿಕ ಬಳಕೆಯನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸುವುದಿಲ್ಲ. 1891ರ ಮಲೇರಿಯಾ ಫಲಿತಾಂಶವು ಇಬ್ಬರು ರೋಗಿಗಳು ಮತ್ತು ಒಂದು ತಾಪಮಾನ ಚಾರ್ಟ್ ಮಾತ್ರ. ಒಂದು ಅಣುವಿನೊಂದಿಗೆ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಪರಿಚಯವು ಅದನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲು ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು; ಅದು ಸ್ವತಃ ಫಲಿತಾಂಶವಲ್ಲ. ಔಷಧವಾಗಿ ಈ ಸಂಯೋಗದ ಇತಿಹಾಸ ಮತ್ತು ಮಲೇರಿಯಾದ ಆಧುನಿಕ ಪ್ರಯೋಗಗಳು Ehrlich ಕೇಳುತ್ತಿದ್ದ ಪ್ರಶ್ನೆಗಳಿಗೆ ಭಿನ್ನವಾದ ಪ್ರಶ್ನೆಗಳಿಗೆ ಉತ್ತರಿಸುತ್ತವೆ; endpointsಗಳನ್ನು ಅವುಗಳದೇ ಅರ್ಥದಲ್ಲಿ ಓದಬೇಕು.

ದಾಖಲೆಯಲ್ಲಿ ಭೂತಕಾಲಕ್ಕಿಂತ ವರ್ತಮಾನಕ್ಕೆ ಸೇರಿದ ಒಂದು ವಿವರ ಇದೆ. 2000ರ ದಶಕದಲ್ಲಿ Burkina Fasoದಲ್ಲಿ ಸಂಶೋಧಕರು methylene blue malaria trials ನಡೆಸಿದಾಗ, pharmaceutical-grade materialಗಾಗಿ ಸ್ಪರ್ಧಿಸಬೇಕಾದ ಪರಿಸ್ಥಿತಿ ಎದುರಾಯಿತು; GMP validation ಪಡೆದ ನಂತರ raw materialನ ಬೆಲೆ ಸುಮಾರು ನೂರು ಪಟ್ಟು ಏರಿತ್ತು ಎಂದು ಅವರು ವರದಿ ಮಾಡಿದರು. ಬಣ್ಣವನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸಬಹುದಿತ್ತು. ಔಷಧವನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸಲಾಗಲಿಲ್ಲ. Lillie 1969ರಲ್ಲಿ ಎಳೆದ ವ್ಯತ್ಯಾಸವೇ ಇಂದು ಒಂದು ಬಾಟಲಿಯಲ್ಲಿ ಏನು ಇದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುವ ಅದೇ ವ್ಯತ್ಯಾಸ.