Метилен көгі мен NAD+: механизмдер, дәлелдер, біріктіру

Метилен көгі де, NAD+ деңгейін арттырушы ретінде сатылатын қоспалар да митохондриялар мен жасушалық энергия ұғымдары арқылы түсіндіріледі. Бірақ бұл сипаттамалардың ешқайсысы өнімнің нақты не істейтінін айтпайды.

Екі тәсіл әртүрлі айнымалыларға әсер етеді. Бірі жасушаларыңыздағы NAD+ мөлшерін өзгертуге тырысады. Екіншісі оның екі түрінің арақатынасын өзгертеді. Бұлар бір жерге апаратын екі жол емес.

Үнемі шатастырылатын екі көрсеткіш

NAD+ — кофермент. Ол гидрид ионы түріндегі электрондар жұбын қабылдап, NADH-қа айналады. NADH сол электрондарды әрі қарай бергенде, қайтадан NAD+ болады. Жасушалар осы циклді үнемі пайдаланады: тағамнан алынған энергия ATP түзетін ақуыздық жүйеге осылай жетеді.

NAD+ пен NADH бір молекуланың екі күйі болғандықтан, жасушада бөлек бақылауға тұрарлық екі шама бар. Біріншісі — жалпы қор: NAD+ пен NADH-тың жиынтық мөлшері. Екіншісі — олардың арақатынасы, ол электрон тасымалдаушылардың қазіргі сәтте қаншалықты жүктелгенін сипаттайды.

Су қоймасы бұл айырмашылықты нақты көрсетеді. Бөгеттің ар жағындағы су көлемі — қор. Жоғарыда ұсталып тұрған су мен төменге жіберілген судың бөлінісі — арақатынас. Қақпаны ашып, бір литр су қоспай-ақ сол арақатынасты арттыруға болады. Бұл метилен көгінің әсерін бейнелейтін жай метафора емес. Ол нақты сипаттамаға жақынырақ.

Қорды толықтыру тәсілі

Никотинамид рибозиді, никотинамид мононуклеотиді және никотинамид сияқты NAD+ прекурсорлық қоспалары — құрылыс материалы. Жасушалар NAD+-ты қайта пайдалану жолы деп аталатын үдеріс арқылы құрастырады, ал прекурсорлар осы жолға түседі. Мақсат — қорды ұлғайту.

Жануарларда бұл жақсы дәлелденген: көптеген модельдерде жас ұлғайғанда және метаболизмдік аурулар кезінде тіндердегі NAD+ азаяды, ал прекурсорлар беру оны әдетте арттырады. Адамдардағы деректердің ауқымы тарлау. Адамдар қатысқан сынақтар бұл қосылыстардың қанда өлшенетін NAD+ деңгейін арттыратынын көрсетеді. Бірақ олар клиникалық соңғы көрсеткіштердің, яғни адам байқайтын немесе сынақ өлшеуге арналған нәтижелердің тұрақты жақсаруын көрсеткен жоқ.

«NAD+ деңгейі артты» деген нәтиже ағза ішіндегі бір шаманы өлшейді. Ол адамның өзін қалай сезінгені, қалай қозғалғаны немесе қалай қалпына келгені туралы қорытынды емес.

Метилен көгі оның орнына не істейді

Метилен көгі — прекурсор емес. Ол медицинада бір ғасырдан әлдеқайда ұзақ қолданылып келе жатқан тотығу-тотықсыздану бояғышы, әрі оның рұқсат етілген қолданылу аясы зерттеліп жатқан қолданылу аясынан тар.

Жасуша ішінде флавинге тәуелді ферменттер оны түссіз түрге — лейкометилен көгіне дейін тотықсыздандырады, содан кейін ол қайта тотығады. Әдетте тыныс алу тізбегінің алғашқы буыны — I кешен арқылы өтетін электрондар оның орнына NADH-тан метилен көгі арқылы шығарылуы мүмкін. NADH NAD+-қа айналады.

Арақатынас артады. Қор ұлғаймайды.

Егеуқұйрықтардың диабетке шалдыққан жүрегін зерттеген жұмыста бұл оқшауланған жүрек митохондрияларында тікелей өлшенді. Май қышқылдары тотығу кезінде метилен көгін 6–18 микромоляр концентрацияда қосу NADH мөлшері мен NADH-тың NAD+-қа арақатынасының дозаға тәуелді төмендеуіне әкелді. NAD+-тың абсолютті мөлшері NADH-қа қарағанда әлдеқайда аз өзгерді. Екі түрдің де мөлшерін көбейтудің орнына бір түрді екіншісіне айналдыратын қосылыстан дәл осындай нәтиже күтіледі.

Бұл электрондардың қайда баратыны маңызды. Оқшауланған ми митохондрияларында тыныс алу тізбегі тежелгенде, 100 наномолярдан 1 микромолярға дейінгі метилен көгі энергия өндіруді жақсартты. Сонымен қатар сыналған барлық жағдайда сутек асқын тотығының түзілуін арттырып, оның жойылуын азайтты. Авторлар сутек асқын тотығының түзілуін тотықсызданған метилен көгінің оттекті тікелей тотықсыздандыруымен байланыстырады. NADH-тан осы жолмен шығатын электрондар жоғалып кетпейді. Олар оттекке өтеді.

Ахилл сіңірінің тініне жүргізілген бөлек зерттеу бұл ойды анық тұжырымдайды. Метилен көгі зақымданған теноциттерде және егеуқұйрықтардағы тендинопатия моделінде NAD+/NADH теңгерімін қалпына келтіріп, ATP өндіруді арттырды. Ал мақалада жалпы NAD қорының елеулі өзгермегені тіркелген.

Тіндер мен жануарлардағы тәжірибелер нені көрсетеді

Төрт онжылдықтағы төрт тәжірибе бір идеяны тексеріп, оның шегін қайта-қайта көрсетеді.

Егеуқұйрықтарға ұзақ уақыт алкоголь берілгенде, этанол бауырдағы цитозольдік және митохондриялық NAD+/NADH арақатынастарын төмендетті. Рационға метилен көгін қосу бұл өзгерістің едәуір бөлігін болдырмады. Бірақ этанол тудырған бауырдың майлануын азайтпады. Арақатынасты түзету нәтижені түзеткен жоқ. Тотығу-тотықсыздану өзгерісін пайдалы әсердің механизмі деп тұжырымдамас бұрын, 1985 жылғы осы нәтижені есте ұстаған жөн.

Бауыр жасушаларында және майы көп рациондағы тышқандарда метилен көгі NAD+/NADH арақатынасын арттырды, SIRT1 деңгейін көтерді, PGC-1alpha ацетилденуін азайтты, AMPK-ны белсендірді және бауырда май жиналуын төмендетті. Мұнда нәтиже арақатынаспен бірге өзгерді. Сол мақала әсердің бір бағытта ғана өзгермейтінін көрсетеді: тәулігіне килограмына үш миллиграмм митохондриялық ДНҚ мөлшерін он миллиграммға қарағанда тиімдірек арттырды, ал оттек тұтыну мен AMPK сигналдық белсенділігі доза артқан сайын өсті.

Диабетке шалдыққан жүректе он бір апта бойы ауыз сумен берілген метилен көгі жүрек митохондрияларындағы NADH-тың NAD+-қа арақатынасын төмендетіп, сиртуин 3 белсенділігін арттырды. 34 ақуыздағы 83 учаскеде лизиннің ацетилденуі азайды; бұл учаскелер негізінен май қышқылдарын тасымалдау мен тотықтыруға қатысатын ақуыздарда шоғырланған. Қан айдау фракциясы жақсарды. Бірақ I кешенге тәуелді тыныс алу қалпына келмеді. Ал генді өшіру тәжірибесі оңай шатастырылатын екі әсерді ажыратты: арақатынастың өзгеруі негізінен сиртуин 3 болмаса да жүрді, ал деацетилдену оған тәуелді болды.

Сіңірді зерттеген жұмыста метилен көгі I кешен ротенонмен химиялық жолмен бұғатталған кезде қолданылды. Ол бәрібір NAD+ теңгерімін қалпына келтірді, бірақ тотығу стрессінің, матрикс дегенерациясының және жасушалардың тіршілік қабілетін жоғалтуының алдын ала алмады. Тіннің қалпына келуі үшін арақатынасты түзету жеткіліксіз болды.

Не өзгереді	NAD+ прекурсорларына негізделген тәсілдер	Метилен көгі
Жалпы NAD мөлшері	Нысана осы. Прекурсорлар қайта пайдалану жолын материалмен қамтамасыз етеді, ал адамдардағы сынақтар қандағы NAD+ артатынын көрсетеді.	Оны өлшеген модельдерде, соның ішінде сіңір зерттеуінде, өзгермеген.
NAD+/NADH арақатынасы	Нәтиже көрсеткіші ретінде сирек беріледі.	Тікелей әсері осы. NADH электрондарын беріп, NAD+ артады, ал қор өзгермейді.
Клиникалық соңғы көрсеткіштер	Адамдардағы сынақтар бар; нәтижелері әркелкі, ал өзгерістер әдетте шағын.	Жануарлардағы соңғы көрсеткіштер өзгереді, бірақ арақатынаспен әрдайым сәйкес келмейді, әрі I кешен ақаулары түзетілмейді.
Бірге қолдануға қатысты тікелей дәлел	Табылған зерттеулердің ешқайсысы екеуін бірге тексермеген.	Дәл солай.

Толық дереккөздері бар басып шығаруға арналған парақта осы жолдар пайдаланылған.

Сиртуиндер бұл талқылауға неге қосылады

Сиртуиндер ақуыздардан ацетил топтарын алып тастайды және бұл үшін NAD+-ты жұмсайды. Олардың белсенділігі NAD+ қолжетімділігіне жауап береді, сондықтан қолжетімділікті өзгертетін кез келген қосылыс кейінгі кезеңде сиртуиндердің белсенділігін де өзгертеді.

«NAD+ үшін метилен көгі» деген маркетингтің көбі осыған сүйенеді. Логика да дәл осы жерде жаңылысады. Арақатынасты өзгерту сиртуиндердің белсенділігін арттыруы мүмкін. Бірақ бұдан өнім NAD+ жеткізеді деген қорытынды шықпайды, әрі оның әсері прекурсор қабылдаумен бірдей деген қорытынды да шықпайды. Екі түсіндірудің бірін қабылдамас бұрын, бұл өлшемдерді тотығу-тотықсыздану тұрғысынан түсіндірудің өзіндік қиындықтары туралы оқыған жөн.

Адамдарда не тексерілген

Метилен көгі ондаған жыл бойы жедел жағдайларда, медициналық бақылаумен қолданылып келеді: метгемоглобинемияда, ифосфамидке байланысты нейроуыттылықта және операция кезіндегі қан қысымының қатты төмендеуінде. Бұлар — нақты шектелген, маман бақылауындағы қолданулар. Олар метилен көгін күнделікті ішіп, жұмыс қабілетін арттыруға пайдаланудың дәлелі емес.

Осы мақала үшін жүргізілген іздеу барысында дені сау еріктілерге метилен көгін бергеннен кейін NAD+ метаболиттерін өлшеген адам зерттеуі табылмады. Жоғарыдағы нәтижелер оқшауланған митохондриялардан, өсірілген жасушалардан, егеуқұйрық тінінен және адам тінінің эксплантаттарынан алынған. Ыдыста тірі күйде сақталған сіңір эксплантаты — жасушалық желімен салыстырғанда пайдалы ілгері қадам. Бірақ ол әлі де адам емес.

Прекурсорлар жөніндегі әдебиет шынымен адамдарға жүргізілген зерттеулерге сүйенеді, ал нәтижелері қарапайым. Қандағы NAD+ артады. Клиникалық соңғы көрсеткіштер әркелкі, ал өзгерістер әдетте шағын.

Сондықтан біріктіру туралы сұрақ орынды, бірақ жауабы көңіл көншітпейді: осы мақала үшін табылған жарияланған зерттеулердің, сынақтардың немесе клиникалық жағдайлар топтамаларының ешқайсысы метилен көгін никотинамид рибозидімен, никотинамид мононуклеотидімен немесе NAD+ инфузиясымен бірге тексермеген. Бұл үйлесімді дәлелденген немесе синергиялық деп сипаттайтын кез келген адам екі бөлек дәлелдер жиынтығынан экстраполяция жасап отыр.

Экстраполяция екі бағытта да жаңылыстыруы мүмкін. Арақатынас қалпына келгеннен кейін қор ешқашан шектеуші айнымалы болмаған болса, ол тым оптимистік болуы мүмкін. Ол тым қарапайым да болуы мүмкін, өйткені метилен көгінің дозаға жауап қисығы бір нүктеден кейін бағытын өзгертеді. Оны зерттеушілердің өзі қосылысты гормезистік деп сипаттайды: төмен концентрациялар тотықсыздануға ықпал етеді, ал жоғары концентрациялар электрондарды тыныс алу тізбегінен басқа бағытқа бұрып, прооксидант ретінде әрекет етуі мүмкін. Көбірек субстрат қосу бұл қисықты қауіпсіз етпейді.

NAD+-қа мүлде қатысы жоқ өзара әсер мәселелері де бар. Метилен көгі моноаминоксидаза A-ны тежейді, сондықтан кейбір антидепрессанттармен бірге қолданылғанда серотонинге байланысты қауіп туғызады; хабарланған орталық жүйке жүйесі уыттылығына шолу 14 жағдайдың 13-і серотониндік уыттылықтың Hunter критерийлеріне сәйкес келгенін анықтады. Жоғары экспозиция кезінде ол метгемоглобинемия да туғызуы мүмкін. Егер рецептпен берілетін дәрі қабылдасаңыз, дәрігеріңізге бірге қолдану туралы қоятын сұрақ осы жолдарға қатысты болуы керек, тотығу-тотықсыздану теңгеріміне емес. Кәдімгі үйлесімдерге де дәл осындай талап қойылады: метилен көгімен бірге қабылданатын басқа қоспалардың өзіндік, негізінен тексерілмеген дәлелдер базасы бар.

Тазалық нақты қандай тәжірибе жүргізіп жатқаныңызды неге анықтайды

Зертхана керісінше дәлелдегенше, метилен көгі өнімі — қоспа. Бұл жерде маңызды бөгде қоспа — Azure B, инертті емес деметилденген фенотиазин. Ол негізгі электрохимиялық қасиеттері ұқсас, тотығу-тотықсыздануға белсенді бояғыш. Сондықтан елеулі мөлшерде Azure B бар өнім сол бір әсер ету тәсілінің таза не лас нұсқасы емес. Ол ешкім сипаттамаған арақатынаста сол жолға әсер ететін басқа қоспа.

USP сапа стандарты сатып алушыға құрамы анықталған затқа қол жеткізуге мүмкіндік береді. USP стандартына сай емес өнім, ең ықтимал жағдайда, тоқымаға арналған бояғыш болады. Ал тоқыма бояғыштарында оларды тұтынуға жарамсыз ететін қоспалар, соның ішінде ауыр металдар мен қалдық еріткіштер болады.

Айырмашылық тек сапа санаттары арасында емес. USP талаптарына сәйкес келетінін мәлімдейтін көптеген сатушылар тек ауыр металдарды тексереді де, осы жалғыз талдау жиынтығын толық сәйкестік ретінде ұсынады. Толық спецификация заттың сәйкестігін, тазалығын, органикалық қоспаларын, қалдық еріткіштерін, элементтік қоспаларын, күйдіргеннен кейінгі қалдығын, микробтық шектерін және бактериялық эндотоксиндерін қамтиды. Ішінара талдау қамтылмаған көрсеткіштер туралы ештеңе айта алмайды, ал қамтылмағандарына туыстас заттар мен еріткіш қалдықтары кіреді.

Blupreme метилен көгін фармацевтикалық өндірушіден сатып алып, толық спецификацияны қамтитын талдау сертификатын жариялайды. Осылайша құтыдағы зат зерттеуде сипатталған затқа сәйкес келеді. Сатып алмас бұрын бұл пайымдауды өзіңіз тексергіңіз келсе, метилен көгі жөніндегі зерттеулерді қалай оқу керек мақаласы әр зерттеу түрінің нені көрсете алатынын және нені көрсете алмайтынын түсіндіреді.

Мұқият тексеруге төтеп беретін айырмашылық

NAD+ прекурсорын қосу NAD+ мөлшерін өзгертеді. Метилен көгі қолда бар NAD+-тың не істеп жатқанын өзгертеді. Біріншісі — қорды толықтыру мәселесі, екіншісі — ағын мәселесі, ал бірін қолдайтын тәжірибелер екіншісі туралы аз мәлімет береді.

Метилен көгінің негізінде оқшауланған митохондриялар мен жануар тіндерінде расталған біртұтас механизм бар. Бірақ оған анық әрі қайта-қайта көрсетілген ескерту қоса жүреді: арақатынасты өзгерту тінді қалпына келтірумен бірдей емес. Оған жетіспейтіні — адамдардағы NAD+ әсерін өлшейтін клиникалық сынақтар. Ал екі санатта да жоқ нәрсе — оларды бірге қабылдауды тікелей тексеру.

Екі санатқа да бірдей талап қойылуы керек. Өнім қай айнымалыны өзгертемін деп мәлімдейтінін сұраңыз, содан кейін сол айнымалыға қатысты адамдарда қандай өлшемдер бар екенін сұраңыз. Егер жауап жасушалық зерттеу, егеуқұйрық немесе қисынды көрінетін жол болса, оны сол күйінде қабылдаңыз. Бұл бірге қабылданатын қоспалар кешені емес.