Artikulua
Metileno-urdina eta diabetesa: glukosaren garraioa eta animalien ikerketak azalduak
Gehiegizko ikusminaren atzean dagoen galdera
Ondorio horrek logikoa dirudi, baina eredu mental oker batean oinarritzen da. Hiru kontzeptu desberdin bakarra balira bezala hartzen ditu: laborategiko plaka bateko zelula bakar batean glukosa sartzea, bihotzeko mitokondria baten barruko metabolismoa eta pertsona oso baten glukosaren kontrola. Bakoitzak bere neurketak eta mugak ditu. Artikulu honek bereizi egiten ditu.
Erantzun laburra: metileno-urdinak glukosaren garraioa aktibatzen du ondo aztertutako zelula-lerro batean, eta mitokondrien kimika nahiz bihotzaren zenbait parametro aldatzen ditu arratoi diabetikoetan. Baina arratoiekin egindako ikerketa luzeenean ez zituen aldatu baraualdiko glukosa edo hemoglobina glikatua, eta argitaratutako gizakien ebidentziak ez du erakusten metileno-urdin sistemikoak odoleko azukrea, HbA1c edo intsulina hobetzen dituenik diabetesean.
Zelulak: glukosa azkarrago sartzen da mintzean lehendik dauden garraiatzaileen bidez
Ikertzaileek L929 fibroblastoak erabili zituzten; zelula-lerro horretan glukosaren sarrera garraiatzaile bakarraren mende dago: GLUT1. Garraiatzaile bakarra dagoenez, sarreran gertatzen den edozein aldaketak garraiatzaile horretatik etorri behar du.
Taldeak zelula horiek metileno-urdinarekin kontaktuan jarri zituenean, trazatzailearen sarrera handitu egin zen 10 minuturen buruan, dosiaren araberako eran, eta hasierako mailaren ehuneko 800 ingurura iritsi zen 50 micromolar-eko kontzentrazioan 45 minutuz. Xehetasun zinetikoa garrantzitsua da: gehieneko abiadura (Vmax) handitu egin zen, baina afinitatea (Km) eta GLUT1 proteinaren kantitatea ez ziren aldatu. Ate kopuru berak glukosa gehiago uzten zuen igarotzen minutuko. Tindagaiak mintzean lehendik zeuden garraiatzaileak aktibatu zituen, berriak gehitu beharrean.
Kontrol-esperimentuek argitu egiten dute irudia. Forma erreduzituak (koloregabeak) ez zuen ezer egin. Tindagaia sartzea eragozten zuen zelulaz kanpoko oxidatzaile batek blokeatu egin zituen bai tindaketa, bai estimulazioa. AMP kinasaren eta PI kinasaren bideetako blokeatzaileek ez zuten ezer aldatu; horrek bi seinaleztapen-bide ezagun horien parte-hartzearen aurka egiten du.
Lehen hipotesia ziklo erredoxa izan zen: tindagaiak elektroiak garraiatzen ditu, estres arina eragiten dio zelulari, eta estresatutako zelulek glukosaren ateak irekitzen dituzte. Ondorengo ikerketa batek ideia hori probatu zuen. Ikertzaileek metil-beta-ziklodextrina erabili zuten, metileno-urdina inklusio-konplexu batean harrapatzen duen eraztun-formako molekula bat (elkartze-konstantea 310 M-1 ingurukoa). Harrapatutako tindagaiak ez zituen zelulak tindatu, ezta glukosaren sarrera estimulatu ere; eta tindagaia garbiketaz kentzea oso lotuta zegoen efektua galtzearekin. Haien ondorioak erredoxaren azalpenaren aurka egin zuen: aktibazioa ziurrenik tindagaiak GLUT1 aktibatzeko bideko proteina batekin duen zuzeneko interakziotik dator, ez estres oxidatibo orokorretik.
Funtzionamendu-printzipioa mugatua da. Metileno-urdinak GLUT1 bidezko glukosaren sarrera modu akutuan eta itzulgarrian aktiba dezake L929 zeluletan, zelulan sartzearen eta proteina-mailako interakzio baten bidez. Horrek ez du ezer esaten intsulinari, pankreari edo animalia bizi baten odoleko azukreari buruz. Tindagaiak elektroi-garraiatzaile gisa duen eginkizua ulertzeko, ikus metileno-urdinak nola jarduten duen elektroi-garraiatzaile gisa. Zelulen ikerketak irakurtzeko irizpideetarako, ikus nola irakurri metileno-urdinari buruzko ikerketak.
Arratoi diabetikoak: bihotzak aldatu ziren, odoleko azukrea ez
Animalien ikerketek beste kontzeptu bat aztertzen dute: bihotz diabetikoa. Arratoiekin egindako bi ikerketek estreptozotozina erabili zuten, intsulina ekoizten duten beta zelulak suntsitzen dituen eta 1 motako diabetesaren antzeko egoera sortzen duen toxina bat. Metileno-urdinari eta 2 motako diabetesari buruzko informazioa bilatzen duten irakurleek hasieratik hartu behar dute kontuan desadostasun hori. Ez dira 2 motako diabetesa duten animaliak.
Ikerketa kronikoan, Lewis arratoi arrek egunean 10 mg jaso zituzten kg bakoitzeko, edateko uretan, 11 astez, intsulina-dosi txikiekin batera, ahultzea saihesteko baina glukosa normalizatu gabe. Bihotzeko mitokondrietan, tindagaiak NADH oxidatzen lagundu zuen, NAD+ handitu zuen eta Sirtuin 3 desazetilasaren jarduera areagotu zuen. Proteomikak azetilazio txikiagoa aurkitu zuen 34 proteina mitokondrialetako 83 kokalekutan, gantzen oxidazioan, azido zitrikoaren zikloan eta elektroien garraioan. Kate luzeko gantzen oxidazioa eta hidroxiazil-CoA deshidrogenasaren jarduera murriztu egin ziren; bihotz diabetikoak gantzekiko duen gehiegizko mendekotasun zurruna arintzea bezala interpretatu zen hori. Bolumenek eta eiekzio-frakzioak hobera egin zuten, eta hipertrofia-markatzaile bat normalizatu zen, nahiz eta presioak eta uzkurtze-abiadurak apalduta jarraitu.
Hona hemen emaitzarik garrantzitsuena: gluzemia ez zen aldatu. Baraualdiko eta baraurik gabeko glukosak altu jarraitu zuten; HbA1c ehuneko 5.6 inguruan mantendu zen bai tratatutako bai tratatu gabeko arratoi diabetikoetan, tratamenduaren eragin esanguratsurik gabe. Tindagaiak ez zuen konpondu mitokondria isolatuetako I eta II konplexuen arnasketa-akatsa ere. Bihotzaren funtzioak hobera egin zuen parametro batzuetan, baina glukosaren kontrolak eta oinarrizko arnasketa-akatsak ez. Emaitza bereiziak bereizita mantendu ziren.
Bigarren ikerketak eskala txikiagoan jardun zuen: bihotz osasuntsuetatik eta bi hilabeteko diabetesa zuten bihotzetatik isolatutako mitokondriak, neurketan zehar 0.1 micromolar-eko dosi baxu bakarra jasota. Oxigeno-kontsumoa handitu egin zen bai I konplexuaren bai II konplexuaren substratuekin. Baina hidrogeno peroxidoaren askapena desberdina izan zen erregaiaren arabera: handitu egin zen glutamatoarekin eta malatoarekin, eta murriztu sukzinatoarekin. Kaltzioaren atxikipena ez zen aldatu. Hau farmakologia mitokondriala da, ez bihotzaren funtzioari edo glukosari buruzko saiakuntza bat. Irakatsi ziguna da tindagaia ez dela antioxidatzaile uniformea. Oxidatzaileen askapena handitu edo murriztu egiten den mitokondriak erretzen duen substratuaren araberakoa da. Lotutako informaziorako, ikus metileno-urdina ikerketa kardiobaskularrean.
Ereduen eta emaitza-neurrien taula: zer probatu zen, zer aldatu zen eta zer ez
| Eredua | Metileno-urdinak zer egin zuen | Neurtutako emaitza | Emaitza |
|---|---|---|---|
| L929 fibroblastoak, GLUT1 soilik, trazatzailearen sarrera | Lehendik zeuden garraiatzaileen aktibazio akutua, Vmax handitu, Km aldatu gabe, GLUT1 proteina berririk ez | Glukosaren sarrera-abiadura laborategiko plakan | ~8 aldiz arte handitu zen 50 micromolar-eko kontzentrazioan; itzulgarria garbiketaz kendutakoan |
| L929 fibroblastoak eta ziklodextrina-tranpa | Tindagaia zeluletatik kanpo atxiki zen, tindaketa galdu zen | Sarreraren estimulazioa | Tindaketarekin batera blokeatu zen; proteinekiko zuzeneko interakzioaren alde egiten du, estres erredox orokorraren ordez |
| STZ bidezko arratoi diabetikoak, 10 mg/kg/day ahoz, 11 aste | NADH oxidazioa, NAD+ handiagoa, Sirtuin 3 jarduera handiagoa, 83 kokaleku mitokondrial desazetilatu, kate luzeko gantzen oxidazio murriztua | Bihotzeko bolumenak, eiekzio-frakzioa, hipertrofia-markatzailea | Partzialki hobetu ziren (bolumenak, eiekzio-frakzioa, ANP normalizatu zen; presioek eta dP/dt-k apalduta jarraitu zuten) |
| Arratoien ikerketa kroniko bera | Dosifikazio bera | Baraualdiko glukosa, baraurik gabeko glukosa, HbA1c | Aldaketa esanguratsurik ez; diabetesak bere horretan jarraitu zuen |
| Arratoien ikerketa kroniko bera, mitokondria isolatuak | Ahozko dosifikazio kronikoa, ondoren ex vivo arnasketa | I eta II konplexuek bultzatutako fosforilazio oxidatiboa | Akatsa ez zen zuzendu |
| Bihotz osasuntsuetako eta diabetikoetako mitokondria isolatuak, 0.1 micromolar modu akutuan | Elektroien bidea aldatzea errespiometrian zehar | Oxigeno-kontsumoa | Handitu egin zen I eta II konplexuen substratuekin |
| Mitokondrien ikerketa akutu bera | Dosifikazio bera | Hidrogeno peroxidoaren askapena | Substratuaren araberakoa: handitu glutamato/malatoarekin, murriztu sukzinatoarekin |
| Gizakiak, dosifikazio sistemikoa | Ez dago emaitza nagusi gluzemikoa eta argitaratutako emaitzak dituen saiakuntza argitaraturik | HbA1c, baraualdiko glukosa, intsulina | Ez da hobekuntza argitaraturik aurkitu |
Pertsonak: gizakien datu gluzemikoak ia hutsik daude
Saiakuntza batek diabetesa duten pertsonen zauriak azter ditzake glukosaren kontrola aztertu gabe, eta hortz-prozedura batek HbA1c bigarren mailako neurri gisa jakinaraz dezake diabetesaren tratamendu bat probatu gabe.
Erregistratutako saiakuntza batek, NCT05850611 zenbakikoak, ahozko metileno-urdina erabiltzea aurreikusten du (70 mg esnetan, lau astez) oin diabetikoko ultzerarako, eta neurketen artean baraualdiko glukosa, intsulina eta HbA1c jasotzen ditu, baina ez du emaitzarik argitaratu. Argitaratutako ikerketa pilotu txiki batek plaketetan aberatsa den plasma-gela eta dosi baxuko ahozko tindagaia konbinatu zituen oineko ultzerarako, eta zaurien eta oxigenazioaren emaitzak jakinarazi zituen, ez emaitza gluzemikoak. Periodontitisa eta diabetesa zuten pazienteetan tindagaia tokian bertan argiz aktibatutako antimikrobiano gisa aplikatu zuten hortz-saiakuntzek ez zuten HbA1c-rako abantaila esanguratsurik aurkitu. Hortzoi-poltsa bateko tindagaia eta terapia metaboliko sistemikoa kontzeptu desberdinak dira; beraz, emaitza negatibo horiek ez dute ezer esaten ahozko dosifikazioari buruz ere.
Laburpen zintzoa: argitaratutako gizakien ebidentziak ez du erakusten metileno-urdin sistemikoak HbA1c, baraualdiko glukosa edo intsulina hobetzen dituenik diabetesean. Ebidentziarik ez egoteak ez du frogatzen eraginik ez dagoenik, baina baliogabetu egiten du zelulen glukosa-sarrera edo arratoien bihotzetako aurkikuntzak glukosaren kontrolaren froga gisa aurkezten dituen marketina. Norbaitek esperimentatu aurretik segurtasun-mugak ezagutzeko, ohiko antidepresiboekin serotonina-sindromea izateko arriskua barne, ikus metileno-urdinaren segurtasuna eta sendagaiekiko interakzioak.
Nola erabili ebidentzia hau zeure burua engainatu gabe
Pentsatu hiru makinatan. Lehen makina kultibatutako zelula bateko glukosaren ate bat da. Bigarren makina arratoi baten bihotzeko mitokondria bat da. Hirugarren makina diabetesa duen pertsona bat da, bere pankrea, gibela, muskuluak, giltzurrunak, sendagaiak eta otorduak dituena. Frogatuta dago tindagaiak lehenengo eta bigarren makinetan eragiten duela. Ez da frogatu hirugarren makinak glukosaren kontrol hobearekin erantzuten duenik.
Bereizketa horrek artikulua paragrafo bakarrean laburbiltzen du. Metileno-urdinarekin diabetesa zaintzeari buruzko baieztapen batek garraiatzaileen aktibazioa edo azetilazio mitokondriala aipatzen badu emaitza gluzemiko baten ordez, gaia aldatu du. Sirtuin 3-ri eta gantzen oxidazioari buruzko aurkikuntzek arreta merezi dute oraindik, baina itxaron beharreko esperimentua zehatza da: diabetesa duten pertsonengan egindako saiakuntza kontrolatu bat, HbA1c, baraualdiko glukosa edo intsulina emaitza nagusi gisa neurtzen dituena.