Метыленавы сіні і сцвярджэнні пра герпесвірусы: герпес на вуснах, EBV і інактывацыя вірусаў

У гэтай дыскусіі адно слова абазначае два паняцці, якім патрэбныя асобныя назвы. Першае паняцце — інактывацыя вірыёнаў: фарбавальнік, кісларод і святло ўзаемадзейнічаюць з віруснай часціцай у вадкасці і пашкоджваюць яе так, што яна не можа рэплікавацца. Другое паняцце — лячэнне інфекцыі ў чалавека: менш эпізодаў герпесу на вуснах, хутчэйшае гаенне, меншае выдзяленне віруса або меншая вірусная нагрузка Эпштэйна — Бар. Першае неаднаразова паказана для віруса простага герпесу ў лабараторыі. Другое не паказана для пероральнага прыёму метыленавага сіняга ні супраць віруса простага герпесу, ні супраць віруса Эпштэйна — Бар. Калі ўлічваць гэтае адрозненне, разабрацца ў літаратуры нескладана.

Побач з гэтым існуе яшчэ адна блытаніна. HSV і EBV належаць да аднаго вялікага сямейства вірусаў, але выклікаюць розныя захворванні ў розных тканках. Герпес на вуснах — гэта паверхневае паражэнне з мясцовай літычнай рэплікацыяй: на яго можна нанесці фарбавальнік і асвятліць тое ж месца. EBV захоўваецца ў латэнтным стане ў рэзервуарах B-клетак, размеркаваных у крыві і лімфоіднай тканцы, дзе ні мясцовы фарбавальнік, ні чырвоная лямпа не могуць ахапіць увесь рэзервуар. Вынік, атрыманы ў адных умовах, не пераносіцца на іншыя. Чытачы, якім патрэбны агульны падыход да такога размежавання, знойдуць яго ў кіраўніцтве па чытанні даследаванняў метыленавага сіняга.

Лабараторная фотаінактывацыя: пазаклетачны HSV, святло абавязковае

У самым раннім прамым выпрабаванні выкарыстоўвалі свежыя клінічныя ізаляты, а не адзін лабараторны штам. У даследаванні фотадынамічнай інактывацыі herpesvirus hominis 1975 года 37 ізалятаў з генітальных і аральных паражэнняў змешвалі з метыленавым сінім у канцэнтрацыі 10 мікрамаляр, вытрымлівалі адну гадзіну ў цемры, а затым дзялілі на дзве часткі: адну пакідалі ў цемры, другую на пяць хвілін асвятлялі дзвюма люмінесцэнтнымі трубкамі магутнасцю 15 ват на адлегласці 15 cm. З 37 ізалятаў 27 страцілі выяўную інфекцыйнасць толькі на святле, а ў 4 яна знізілася больш чым у 100 разоў. Кантрольныя ўзоры ў цемры захавалі інфекцыйнасць: без святла гэтая канцэнтрацыя не стэрылізавала ўзор.

Пазнейшае даследаванне паказала, наколькі сціплым пры пэўных умовах можа быць эфект звычайнага фарбавальніка ў спалучэнні са святлом. У эксперыментах 1979 года з метыленавым сінім, святлом і электрычнасцю на HSV-1 і HSV-2 фарбавальнік у канцэнтрацыі 10 мікрамаляр са святлом лямпы напальвання на працягу 180 секунд знізіў колькасць інфекцыйнага HSV-1 прыкладна на 60 працэнтаў, або каля 0.4 log. Толькі даданне невялікага пастаяннага току дазволіла той жа сістэме дасягнуць страты больш за 99.99 працэнта. Асобна святло, асобна ток і святло з токам без фарбавальніка давалі нязначны эфект. Для вялікага эфекту патрабаваўся электрычны апарат, таму гэтую працу не варта цытаваць як доказ таго, што звычайны фарбавальнік з лямпай рэгулярна забяспечвае інактывацыю на чатыры log.

Затым даследаванні механізмаў высвятлялі, на што яшчэ здольныя апрацаваныя часціцы. Даследаванне фотадынамічных механізмаў HSV, апублікаванае ў Journal of Clinical Investigation ў 1980 годзе, выявіла аднацепачковыя разрывы віруснай ДНК без перавагі двухцепачковых разрываў: апрацаваныя вірыёны па-ранейшаму прымацоўваліся да клетак і пранікалі ў іх, але паспяванне спынялася. Даследаванне цыклу інфекцыі пасля ўздзеяння метыленавага сіняга і святла 1997 года пацвердзіла гэта пры канцэнтрацыі фарбавальніка 1 мікрамаляр і чырвоным святле: істотнага разбурэння абалонкі не было, пранікненне і вызваленне ДНК захоўваліся, але рэплікацыя спынялася з дэградацыяй ДНК, залежнай ад асвятлення. Параўнальнае даследаванне сінглетнага кіслароду 1995 года указала на ўдзел сінглетнага кіслароду з верагодным дадатковым удзелам радыкальных рэакцый. Падрабязнасці пра тое, як метыленавы сіні паглынае святло і ўтварае актыўныя формы кіслароду, тлумачаць, чаму фарбавальнік, кісларод і фатоны павінны адначасова прысутнічаць у мішэні.

Найбольш выразная колькасная дэманстрацыя паходзіць з працы з прадуктамі крыві, якая адначасова найвыразней папярэджвае пра небяспеку празмерных высноў. У даследаванні зніжэння колькасці патагенаў у плазме 2013 года з чырвонымі святлодыёдамі на 627 nm колькасць HSV, дададзенага ў плазму, праз 60 хвілін знізілася прыкладна на 5.2 log пры 1 мікрамаляр і на 6.0 log пры 10 мікрамаляр. Гэта абеззаражванне асветленай вадкасці, а не лячэнне латэнтнай інфекцыі ў нейронах, і яно не дазваляе прадказаць, што робіць праглынуты раствор унутры цела, куды святло не трапляе.

Мясцовае лячэнне паражэнняў: невялікія, старыя і неадназначныя даследаванні

У паведамленнях пра мясцовае лячэнне фарбавальнік наносяць на паражэнне і асвятляюць яго, што прынамсі захоўвае геаметрыю лабараторнага ўздзеяння. Самае ранняе з іх — апісанне выпадку герпетычнай экзэмы, распаўсюджанай суперінфекцыі HSV на фоне экзэмы. У паведамленні 1975 года пра метыленавы сіні і святло пры герпетычнай экзэме апісана хуткае паляпшэнне пасля мясцовага прымянення фарбавальніка са святлом; фарбавальнік у канцэнтрацыі 10 мікрамаляр меў віруліцыднае дзеянне на святле, але не ў цемры. У каментары ўдакладнялася, што раствор 0.1 працэнта наносілі на палову плошчы для параўнання ў межах аднаго пацыента. Як доказ адносна герпесу на вуснах гэта назіранне за адным пацыентам з ранняга перыяду даследаванняў, з недастатковай дазіметрыяй.

Большая гістарычная серыя датычылася генітальных паражэнняў. У серыі 1975 года з 56 пацыентаў з генітальным герпесам 36 атрымлівалі метыленавы сіні, але толькі першыя 35 былі рандомізаваныя паміж трыма фарбавальнікамі, таму кагорта не ўяўляла сабой метадалагічна чыстага выпрабавання. Паведамлялася, што прыкладна ў 70 працэнтаў пралечаных выпадкаў рэцыдывавальнага герпесу наступіла паляпшэнне прыкладна за 48 гадзін, аднак частата рэцыдываў істотна не знізілася. Хатняе асвятленне люмінесцэнтнай лямпай або сонечным святлом не кантралявалася. Паляпшэнне ў вострай фазе без змяншэння колькасці рэцыдываў адпавядае мясцовай працэдуры, якая ўплывае на наяўнае паражэнне, але не на латэнтны рэзервуар. Такая ж асцярожнасць патрэбная пры разглядзе пратаколаў фотадынамічнай тэрапіі з метыленавым сінім.

Сучасныя выпрабаванні пры герпесе на вуснах невялікія і не даюць узгодненых вынікаў. У серыі 2009 года з чатырох пацыентаў з герпесам на вуснах выкарыстоўвалі фарбавальнік 0.01 працэнта з лазерам на 660 nm пры 120 J на квадратны cm і паведамілі пра хуткае гаенне, але кантрольнай групы не было, а пасля праводзілася фотабіямадуляцыя, як апісана ў серыі клінічных выпадкаў фотадынамічнага лячэння герпесу на вуснах 2009 года. Рандомізацыя 75 пацыентаў на фотадынамічнае лячэнне, мясцовы ацыклавір або іх спалучэнне не выявіла розніцы ў часе гаення або болю, паводле выпрабавання фотадынамічнай тэрапіі і ацыклавіру 2021 года. Рандомізаванае выпрабаванне з 24 пацыентамі і qPCR на HSV-1 не выявіла розніцы ў знікненні паражэнняў або рэцыдывах на працягу аднаго года, як апісана ў рандомізаваным выпрабаванні антымікробнай фотадынамічнай тэрапіі пры простым герпесе 2025 года. У выпрабаванні 2025 года з 60 пацыентамі, дзе ўжывалі комплекс з фотадынамічнага лячэння з фарбавальнікам, фотабіямадуляцыі і дрэнавання пузыркоў, паведамілі пра хутчэйшае палягчэнне болю, якое нельга прыпісаць фарбавальніку, паводле паведамлення 2025 года пра спалучэнне фотадынамічнага лячэння і фотабіямадуляцыі.

Паведамленняў пра непажаданыя з'явы тут мала. У працах 1975 года няма іх выяўлення і ўліку паводле сучасных стандартаў. У пазнейшых невялікіх даследаваннях паведамлялася пра нешматлікія вострыя эфекты або іх адсутнасць, але сіняе афарбоўванне непазбежнае, а мясцовае фотатаксічнае раздражненне застаецца магчымым. Афарбоўванне з наступным асвятленнем лямпай адрозніваецца ад праглынання фарбавальніка, таму агляд бяспекі метыленавага сіняга разглядае шляхі прымянення асобна.

EBV: няма прамых доказаў для метыленавага сіняга

Для EBV пошук паказвае адсутнасць доказаў. Ні адзін з рэцэнзаваных эксперыментаў або кантраляваных выпрабаванняў, знойдзеных для гэтага агляду, не паказвае, што метыленавы сіні са святлом або без яго зніжае інфекцыйнасць EBV, прыгнятае рэактывацыю або памяншае вірусную нагрузку ў людзей. У працах з EBV-станоўчымі клеткамі назофарынгеальнай карцыномы выкарыстоўваюць іншыя сенсібілізатары і вымяраюць жыццяздольнасць пухліны, а не ліквідацыю віруса метыленавым сінім. Агляды пералічваюць EBV сярод вірусаў, для якіх патрэбныя будучыя выпрабаванні, а не сярод усталяваных паказанняў.

Біялогія тлумачыць, чаму нельга пераносіць вынік з HSV у прабірцы. Пры лячэнні герпесу на вуснах усе тры неабходныя кампаненты — фарбавальнік, кісларод і фатоны — размяшчаюцца на адной даступнай паверхні. Латэнтны EBV знаходзіцца пераважна ў B-клетках, размеркаваных у крыві і лімфоіднай тканцы. Мясцовае чырвонае святло не можа ахапіць гэты размеркаваны рэзервуар, а праглынуты фарбавальнік не забяспечвае мэтанакіраванага асвятлення ў гэтых месцах. Знішчэнне EBV-станоўчай пухліннай клеткі іншым сенсібілізатарам — гэта знішчэнне клеткі, а не доказ супрацьвіруснай актыўнасці. Гэты прабел важны пры вывучэнні таго, як насамрэч вымяраюць вірусную нагрузку і маркеры рэактывацыі.

Пероральнае лячэнне і памылковая выснова з інтэрвалу без рэцыдываў

Ніводнае кантраляванае выпрабаванне на людзях, знойдзенае для гэтага агляду, не паказвае, што сістэмнае або пероральнае прымяненне метыленавага сіняга зніжае частату рэцыдываў герпесу на вуснах, скарачае час гаення, памяншае выдзяленне віруса або змяняе які-небудзь канчатковы паказчык EBV, напрыклад колькасць копій ДНК у крыві або сліне ці вызначаныя літычныя маркеры. У літаратуры пра герпес у людзей выкарыстоўваюць мясцовы фарбавальнік з мясцовым асвятленнем. Сістэмнае ўвядзенне без мэтанакіраванага асвятлення — іншае ўмяшанне, якому патрэбнае ўласнае выпрабаванне: рандомізаванае, сляпое і плацэба-кантраляванае, з пацверджанымі рэцыдывавальнымі выпадкамі, уступным перыядам для вызначэння зыходнай частаты, загадзя вызначанымі праверкамі экспазіцыі, назіраннем на працягу ад шасці да дванаццаці месяцаў, паслядоўным узяццем мазкоў з qPCR, рэгістрацыяй правакавальных фактараў і маніторынгам бяспекі. Агульныя прынцыпы пероральнага дазавання і ўсмоктвання метыленавага сіняга не замяняюць гэтых канчатковых паказчыкаў.

Менавіта тут распаўсюджаная гісторыя не вытрымлівае праверкі. Хтосьці адначасова пачынае некалькі ўмяшанняў, паведамляе, што месяцамі не было герпесу на вуснах, і прыпісвае гэта аднаму з іх. Эпізоды HSV узнікаюць групамі, а затым знікаюць на месяцы без ліквідацыі віруса з сэнсарных гангліяў. Правакавальныя фактары змяняюцца, чаканні ўплываюць на паведамленні, а адна толькі выпадковасць стварае прамежкі без эпізодаў. Пры некалькіх адначасовых зменах няма контрфактычнага параўнання, якое дазволіла б прыпісаць гэты прамежак аднаму кампаненту. Серыя генітальнага герпесу 1975 года паказала адваротную карціну: паляпшэнне ў вострай фазе пры нязменнай частаце рэцыдываў. Гаенне цяперашняга паражэння — не тое самае паняцце, што і прадухіленне наступнага.

Табліца доказаў паводле віруса і ўмоў

Як карыстацца гэтымі доказамі

Задавайце чатыры пытанні да кожнай цытаванай працы. Святло ці цемра, бо фотадынамічнае знішчэнне не прадказвае сістэмнага знішчэння. Свабодныя вірыёны, наяўнае паражэнне ці латэнтны рэзервуар, бо толькі адпаведная мішэнь дазваляе праверыць сцвярджэнне. Інфекцыйнасць, гаенне, рэцыдывы ці вірусная нагрузка, бо паказчык інфекцыйнасці не адказвае на пытанне пра рэцыдывы. HSV ці EBV, бо даступнае паражэнне і размеркаваны рэзервуар B-клетак — розныя праблемы. Сукупнасць даследаванняў падтрымлівае адно вузкае сцвярджэнне: метыленавы сіні можа эфектыўна фотаінактываваць HSV, калі пазаклетачны вірус сустракаецца з фарбавальнікам, кіслародам і адпаведным святлом. Доказы клінічна значнага лячэння рэцыдывавальных паражэнняў абмежаваныя і неадназначныя, доказаў пероральнай прафілактыкі няма, і прамых доказаў эфекту супраць EBV няма. Спакойны перыяд без герпесу на вуснах падчас схемы з некалькімі метадамі лячэння нічога з гэтага не змяняе.