אידענטיפֿיצירן מעטילען־בלוי אין לאַבאָראַטאָריע: אינפֿראַרויטע ספּעקטרען און דערגאַנצנדיקע מעטאָדן

שטעלט אײַך פֿאָר אַז דרײַ לאַבאָראַטאָריעס באַקומען דעם זעלבן בלויען פּודער. די ערשטע רעקאָרדירט אַן אינפֿראַרויטן ספּעקטרום און דערקלערט אַז דאָס איז מעטילען־בלוי. די צווייטע פֿירט דורך כראָמאַטאָגראַפֿיע און באַריכטעט 0.4% Azure B. די דריטע לאָזט רענטגן־שטראַלן דיפֿראַקטירן פֿון די קריסטאַלן און באַשטימט אַ הידראַט־פֿאָרעם. אַלע דרײַ האָבן רעכט, און קיינער פֿון זיי האָט נישט געענטפֿערט אויף די אַנדערע צוויי פֿראַגעס. דער צעמישעניש הייבט זיך אָן ווען מען לייענט איין רעזולטאַט ווי אַן ענטפֿער אויף אַלע דרײַ.

דער אַרטיקל צעטיילט די פֿראַגעס. אינפֿראַרויטע אידענטיפֿיקאַציע באַשטעטיקט די מאָלעקולאַרע אידענטיטעט אין פֿאַרגלײַך מיט אַ רעפֿערענץ־סטאַנדאַרט. כראָמאַטאָגראַפֿיע באַשטעטיקט דעם צוזאַמענשטעל. דיפֿראַקציע באַשטעטיקט די פֿאָרעם אין פֿעסטן צושטאַנד. אַ דורכגעגאַנגענער אידענטיטעט־צופּאַס איז נישט קיין ריינקייט־סערטיפֿיקאַט.

אינפֿראַרויטע אידענטיפֿיקאַציע ענטפֿערט גוט אויף איין פֿראַגע

דער פאַרמאַקאָפּעאישער אידענטיטעט־טעסט פֿאַר מעטילען־בלוי איז אַ פֿאַרגלײַך פֿון אַ ספּעקטרום מיט אַ סטאַנדאַרט, נישט אַ קאָנטראָל־רשימה פֿון שפּיצן. לויטן פֿאָרויסקוק פֿון דער USP־מאָנאָגראַפֿיע פֿאַר מעטילען־בלוי, שרײַבט דער אָפּטייל פֿאַר אידענטיפֿיקאַציע A פֿאָר אינפֿראַרויטע ספּעקטראָסקאָפּיע מיט אָדער ATR־אָפּטיק אָדער אַ קאַליום־בראָמיד־פּעלעט. דער ספּעקטרום פֿון דער פּראָבע מוז שטימען מיטן ספּעקטרום פֿונעם USP־רעפֿערענץ־סטאַנדאַרט, ווען די פּראָבע און דער סטאַנדאַרט ווערן צוגעגרייט און רעקאָרדירט אונטער גלײַכווערטיקע באַדינגונגען. נישט קיין פֿעסטע רשימה פֿון דיאַגנאָסטישע כוואַליעצאָלן באַשטימט דעם אורטייל. דאָס טוט דאָס איבערלייגן פֿון די ספּעקטרען.

די אויסוואַל פֿון דעם אופֿן שפּיגלט אָפּ ווי FTIR־ספּעקטרען פֿון מעטילען־בלוי פֿירן זיך. די שטאַרקסטע אייגנשאַפֿטן געפֿינען זיך אין דער פֿינגעראָפּדרוק־געגנט. די ליטעראַטור שרײַבט כּסדר צו דעם הויפּטבאַנד פֿון די קאָניוגירטע רינגען בײַ בערך 1590 ביז 1600 cm-1, וווּ אַראָמאַטישע קוילנשטאָף־קוילנשטאָף און קוילנשטאָף־שטיקשטאָף שטרעק־מאָדעס זענען געקאָפּלט. ווײַטערדיקע באַנדן בײַ בערך 1490 און 1390 cm-1 האָבן כאַראַקטער פֿון רינג־, קוילנשטאָף־שטיקשטאָף־ און קוילנשטאָף־וואַסערשטאָף־דעפֿאָרמאַציעס. באַנדן בײַ בערך 1355 און 1330 cm-1 זענען פֿאַרבונדן מיט די דימעטילאַמינאָ־קוילנשטאָף־שטיקשטאָף־בינדונגען און מעטיל־דעפֿאָרמאַציעס. אייגנשאַפֿטן בײַ בערך 1225 ביז 1250 cm-1 געהערן צום העטעראָציקלישן גערעם, בשעת באַנדן בײַ בערך 1170 ביז 1130 און 1066 cm-1 האָבן קוילנשטאָף־שוועבל־כאַראַקטער, מיט אַראָמאַטישער C-H־בייגונג בײַ בערך 880 cm-1. שטרעק־מאָדעס דערשײַנען העכער: אַראָמאַטישע C-H בײַ בערך 3040 cm-1 און N־מעטיל־C-H צווישן בערך 2900 און 3000 cm-1. פֿאַרעפֿנטלעכטע צושרײַבונגען זײַנען אַנדערש אין פּרטים, ווײַל דער פֿענאָטיאַזיניום־גערעם וויברירט ווי אַ געקאָפּלטע סיסטעם; דערפֿאַר באַטראַכט יעדע איינציקע צושרײַבונג־טאַבעלע ווי אַ באַריכטעטע אויסלייגונג, נישט ווי די איינציק מעגלעכע.

צוויי ווירקונגען פֿון דער צוגרייטונג פֿאַרדינען אויפֿמערקזאַמקייט, ווײַל זיי בײַטן די IR־ספּעקטרען פֿון מעטילען־בלוי אָן צו בײַטן דעם פֿאַרבשטאָף. ערשטנס, הידראַטירט מאַטעריאַל ווײַזט אַ ברייטן O-H־באַנד אַרום 3300 ביז 3500 cm-1 און וואַסער־בייגונג בײַ בערך 1630 ביז 1640 cm-1, און פֿאַרשידענע הידראַט־פֿאָרמען פֿאַררוקן די פֿינגעראָפּדרוק־באַנדן אין אַ מעסטלעכן מאָס. צווייטנס, די KBr־פּעלעט־מאַטריץ איז היגראָסקאָפּיש: אײַנגעזאַפּטע פֿײַכטקייט שאַפֿט באַנדן דווקא אין די דאָזיקע וואַסער־געגנטן און קען אויסזען ווי הידראַט־וואַסער פֿון דער פּראָבע. בײַ ATR־מעסטונגען פֿאַרמײַדט מען די KBr־מאַטריץ, אָבער די ATR־אינטענסיטעטן טוישן זיך לויט דער אַרײַנדרינג־טיפֿקייט, וואָס ווענדט זיך אָן אין דער כוואַליעצאָל. דערפֿאַר קען מען אַן ATR־ספּעקטרום און אַ טראַנסמיסיע־ספּעקטרום פֿונעם זעלבן פּודער נישט גלײַך איבערלייגן איינס אויפֿן צווייטן. דער פּראַקטישער כּלל פֿאָלגט פֿון דער פאַרמאַקאָפּעאישער פֿאָדערונג: פֿאַרגלײַכט פּראָבע און רעפֿערענץ וואָס זענען רעקאָרדירט מיט דער זעלבער טעכניק, און דאָקומענטירט וועלכע טעכניק מען האָט גענוצט. פֿאַר דער כעמיע פֿונעם קאַטיאָן, זאַלץ און הידראַטן וואָס ליגן אונטער די ספּעקטרען, זעט דעם רעפֿערענץ וועגן דער סטרוקטור און די אייגנשאַפֿטן פֿון מעטילען־בלוי.

טאַבעלע פֿאַר אויסקלײַבן אַן אַנאַליטישן מעטאָד

די טאַבעלע איז אַ מיטל פֿאַרן אויסקלײַב. לייענט לענגאויס אַ ריי צו געפֿינען אויף וועלכער פֿראַגע אַ מעטאָד ענטפֿערט, וואָס אַ דורכגעגאַנגענער רעזולטאַט באַשטעטיקט, און וואָס בלײַבט אומבאַוויזן.

פֿאַר וואָס אַן אינפֿראַרויטער צופּאַס איז נישט קיין ריינקייט־סערטיפֿיקאַט

אַן אידענטיטעט־צופּאַס שליסט אויס דעם אומריכטיקן פֿאַרבשטאָף. ער שטעלט נישט צונויף אַן אינווענטאַר פֿון דער פּראָבע. דרײַ באַגרענעצונגען זענען די וויכטיקסטע.

ערשטנס, נאָענט פֿאַרוואַנדטע שטאָפֿן זעען אויס ענלעך אין אינפֿראַרויט. Azure B איז אַנדערש פֿון מעטילען־בלוי נאָר אין איין מעטיל־גרופּע, דערפֿאַר איז זײַן ספּעקטרום זייער ענלעך צו דעם פֿון מעטילען־בלוי. אַ געמיש מיט עטלעכע פּראָצענט Azure B פּאַסט זיך נאָך אַלץ גוט צו אַ מעטילען־בלוי־רעפֿערענץ ווען מען לייגט די ספּעקטרען איבער. דערקענען די דאָזיקע אומרייניקייט איז אַן אויפֿגאַבע פֿאַר כראָמאַטאָגראַפֿיע, וואָס ווערט באַהאַנדלט אינעם וועגווײַזער וועגן אומרייניקייטן און טעסט־מעטאָדן פֿון מעטילען־בלוי.

צווייטנס, אינפֿראַרויטע ספּעקטראָסקאָפּיע איז אַ טעכניק וואָס מעסט דאָס מאַטעריאַל אין גאַנצן, מיט באַגרענעצטער סענסיטיוויטעט צו מינאָריטעטן־קאָמפּאָנענטן. קליינע מאָסן פֿאַרוואַנדטע פֿאַרבשטאָפֿן, רעשטלעכע סאָלווענטן אָדער אומאָרגאַנישע רעשטלעך באַהאַלטן זיך אונטער די הויפּטבאַנדן. דאָס פֿעלן פֿון צוגאָב־שפּיצן איז אַ שוואַכער באַווײַז אַז עס פֿעלן אומרייניקייטן.

דריטנס, דער רעפֿערענץ־סטאַנדאַרט באַשטימט דעם גאַנצן פֿאַרגלײַך. אַ סטאַנדאַרט וואָס איז דעגראַדירט, וועמענס ספּעקטרום האָט זיך פֿאַררוקט דורך הידראַטאַציע, אָדער וואָס איז נישט ריכטיק געהאַנדלט געוואָרן, פֿאַררוקט די קריטעריעס. דאָס זעלבע טוט אַ נישט צוגעפּאַסטע פּאָר טעכניקן, למשל ווען מען באַורטיילט אַן ATR־ספּעקטרום פֿון אַ פּראָבע קעגן אַ KBr־רעפֿערענץ. רעקאָרדירט די פּאַרטיע פֿונעם סטאַנדאַרט, די טעכניק און די צוגרייטונג צוזאַמען מיט יעדן אורטייל.

געמישן ברענגען נאָך אַ לעצטע וואָרענונג. אַ ספּעקטרום וואָס שטימט צום מערסטן, אָבער האָט פּלייצעס אָדער אַבנאָרמאַלע אינטענסיטעטן, איז נישט קיין דורכגעגאַנגענער טעסט מיט פֿוסנאָטעס. דאָס איז אַ סיגנאַל צו צעשיידן די פּראָבע איידער מען אידענטיפֿיצירט זי.

דערגאַנצנדיקע מעטאָדן אין דער פּראַקטיק

HPLC פֿון מעטילען־בלוי גיט די ענטפֿער וועגן צוזאַמענשטעל וואָס אינפֿראַרויט קען נישט געבן. דער איצטיקער פאַרמאַקאָפּעאישער מעטאָד נוצט אַ קאָלאָנע פֿון פֿעניל־טיפּ מיט אַ וואַסער־אַצעטאָניטריל־גראַדיענט וואָס אַנטהאַלט טריפֿלואָראָעסיקזויער, און דעטעקטירט בײַ 246 nm, נישט אינעם קענטיקן באַנד. די אידענטיטעט קומט פֿון דער שטימונג פֿון דער רעטענציע־צײַט מיטן רעפֿערענץ־סטאַנדאַרט; דער זעלבער פֿאַרגלײַך גיט אויך די קוואַנטיטאַטיווע באַשטימונג. דער טעסט פֿאַר אָרגאַנישע אומרייניקייטן אידענטיפֿיצירט Azure B מיט זײַן אייגענעם רעפֿערענץ־מאַטעריאַל בײַ אַ רעלאַטיווער רעטענציע פֿון בערך 0.8, קעגן מעטילען־בלוי בײַ 1.0, און פֿאָדערט אַ הויכע רעזאָלוציע צווישן די צוויי שפּיצן. באַמערקט דעם אויסקלײַב פֿון כוואַליעלענג: די דעמעטילאַציע־סעריע אַבזאָרבירט אַלץ ווײַטער אין דער ריכטונג פֿון רויט, פֿון תיאָנין בײַ בערך 600 nm דורך Azure C, Azure A און Azure B ביז מעטילען־בלוי בײַ בערך 670 nm. אַ דעטעקטאָר פֿיקסירט בײַ בערך 660 nm רעאַגירט דערפֿאַר אומגלײַך אויף די מיטגלידער פֿון דער סעריע און אונטערשאַצט עטלעכע האָמאָלאָגן. אַ פֿולשטענדיקער פּראָפֿיל פֿון דער גאַנצער סעריע, ווען ער איז נייטיק, דאַרף ווערן געמאַכט מיט אַ C18 LC-MS/MS־מעטאָד און קוואַליפֿיצירטע סטאַנדאַרטן פֿאַר יעדן אַנאַליט.

פּודער־דיפֿראַקציע ענטפֿערט אויף דער פֿראַגע וועגן פֿעסטן צושטאַנד, וואָס ביידע אויבנדערמאָנטע מעטאָדן אָדער צעשטערן אָדער איגנאָרירן: אויפֿלעזן דעם פּודער פֿאַר כראָמאַטאָגראַפֿיע מעקט אויס די קריסטאַל־אינפֿאָרמאַציע, און מאָלעקולאַרע וויבראַציעס מעלדן וועגן בינדונגען, נישט וועגן דער לאַנג־רײַכיקער פּאַקונג. דיפֿראַקציע־מוסטערן אונטערשיידן הידראַט־פֿאַזעס און קריסטאַליניטעט, און מעטילען־בלוי דאַרף אַזאַ דורכקוק מער ווי רובֿ מאַטעריאַלן. פֿאָרשונג וועגן פֿעסטן צושטאַנד דורך ראַגער און זײַנע קאָלעגן האָט אידענטיפֿיצירט פֿינף באַזונדערע הידראַט־סטרוקטורן, אַרײַנגערעכנט אַ פּענטאַהידראַט, צוויי דיהידראַטן, אַ מאָנאָהידראַט און אַן צווישן־הידראַט, און האָט נישט געפֿונען קיין אמתן טריהידראַט צווישן די כאַראַקטעריזירטע פֿאָרמען. די לאַבאָראַטאָרישע האַנדלונג איז דאָ וויכטיק: פֿײַכטקייט און טעמפּעראַטור בײַטן די סטאַביליטעט פֿון הידראַטן, און שטאַרק מאָלן קען בײַטן די פֿאַזע אָדער פֿאַרערגערן די קריסטאַליניטעט. דערפֿאַר קאָנטראָלירט און דאָקומענטירט די רעלאַטיווע פֿײַכטקייט און טעמפּעראַטור, און האַלט דאָס מאָלן אויף אַ מינימום. די באַצייכענונג פֿון הידראַטן און איר ווירקונג אויף דער אָפּגעוואָגענער מאַסע ווערן ווײַטער באַהאַנדלט אין הידראַט־פֿאָרמען און באַצייכענונג פֿון מעטילען־בלוי.

UV-Vis־אַבזאָרפּציע שפּילט אַן אונטערשטיצנדיקע ראָלע. די באַקאַנטע מאַקסימאַ באַשטעטיקן די דערוואַרטע אויפֿפֿירונג פֿון דער לייזונג און דערמעגלעכן אַרבעט מיט קאָנצענטראַציע. אָבער אַ בלויע לייזונג וואָס אַבזאָרבירט בײַ דער דערוואַרטער כוואַליעלענג איז נאָר קאָנסיסטענט מיט מעטילען־בלוי, אָן צו באַווײַזן אַז דאָס איז טאַקע ער, ווײַל פֿאַרוואַנדטע פֿאַרבשטאָפֿן אַבזאָרבירן דערנעבן.

וואָס צו פֿרעגן פֿאַרן קויפֿן

מאַכט פֿון די אונטערשיידן פֿראַגעס בײַם קויפֿן. פֿרעגט וועלכע פּאַרטיע איז טעסטירט געוואָרן, וועלכע טעכניק האָט באַשטעטיקט די אידענטיטעט, צי דער HPLC־טעסט פֿאַר אומרייניקייטן האָט גענוצט דעם Azure B־רעפֿערענץ־מאַטעריאַל, און צי די הידראַט־פֿאָרעם איז כאַראַקטעריזירט געוואָרן אָדער נאָר אָנגענומען. איבער אַלץ, פֿרעגט צי דער סערטיפֿיקאַט דעקט די גאַנצע ספּעציפֿיקאַציע אָדער נאָר אויסגעקליבענע טעסטן. אַ סך פֿאַרקויפֿער וואָס טענהן אַז זייער מאַטעריאַל שטימט מיט פאַרמאַקאָפּעאישע פֿאָדערונגען, טעסטירן נאָר שווערע מעטאַלן. דאָס לאָזט די פֿראַגעס וועגן אידענטיטעט, קוואַנטיטאַטיווער באַשטימונג, אָרגאַנישער אומרייניקייט, סאָלווענטן און מיקראָבן אָן אַן ענטפֿער.

Blupreme טעסטירט די גאַנצע USP־ספּעציפֿיקאַציע, אַרײַנגערעכנט אידענטיטעט, ריינקייט, אָרגאַנישע אומרייניקייטן, רעשטלעכע סאָלווענטן, עלעמענט־אומרייניקייטן, רעשט נאָך גליען, מיקראָבישע גרענעצן און באַקטעריעלע ענדאָטאָקסינען, אין שותּפֿות מיט אַ פֿאַרמאַצעווטישן פּראָדוצירער פֿון מעטילען־בלוי. דער עפֿנטלעכער אַנאַליז־סערטיפֿיקאַט פֿאַר יעדער פּאַרטיע ווערט פֿאַרעפֿנטלעכט אויף די קוואַליטעט־טעסטן פֿון Blupreme, אַזוי אַז מען קען לייענען דעם באַזיס פֿון דער קוואַנטיטאַטיווער באַשטימונג און די אומרייניקייט־רעזולטאַטן גלײַך, אַנשטאָט זיי אויסצופֿירן פֿון השערות. רעזולטאַטן נאָענט צו 100% דאַרפֿן נאָך אַלץ אַן אָנגעגעבענעם רעכענונג־באַזיס, ווי עס דערקלערט דער וועגווײַזער וועגן קוואַנטיטאַטיווע באַשטימונגען העכער 100 פּראָצענט. דער אידענטיטעט־צופּאַס עפֿנט די אויספֿאָרשונג. די גאַנצע דאָקומענטאַציע פֿאַרענדיקט זי.