Laboratoriýada metilen gögüni tanamak: infragyzyl spektrler we goşmaça usullar

Üç laboratoriýanyň şol bir gök poroşogy alandygyny göz öňüne getiriň. Birinjisi infragyzyl spektri ýazga alýar we onuň metilen gögi bolandygyny yglan edýär. Ikinjisi hromatografiýa geçirýär we 0.4% Azure B bardygyny habar berýär. Üçünjisi kristallarda rentgen şöhleleriniň difraksiýasyny ölçäp, gidrat görnüşini kesgitleýär. Üçüsiniň hem netijesi dogry, ýöne olaryň hiç biri beýleki iki soraga jogap bermedi. Bulaşyklyk bir netijäniň üç soragyň hem jogaby hökmünde kabul edilmeginden başlanýar.

Bu makala şol soraglary biri-birinden aýyrýar. Infragyzyl identifikasiýa etalon standart bilen deňeşdirmek arkaly molekulýar şahsyýeti tassyklaýar. Hromatografiýa düzümi kesgitleýär. Difraksiýa gaty haldaky görnüşi kesgitleýär. Identifikasiýa boýunça gabat gelýän netije arassalyk şahadatnamasy däldir.

Infragyzyl identifikasiýa bir soraga gowy jogap berýär

Metilen gögi üçin farmakopeýa identifikasiýa synagy pikleriň sanawyny barlamak däl-de, spektri standart bilen deňeşdirmekdir. USP metilen gögi monografiýasynyň deslapky görnüşine görä, Identifikasiýa A synagynda ATR optikasy ýa-da kaliý bromid tabletkasy bilen infragyzyl spektroskopiýa görkezilýär. Nusganyň spektri USP etalon standartynyň spektrine laýyk gelmelidir; nusga bilen standart deň şertlerde taýýarlanylmaly we olaryň spektrleri deň şertlerde ýazga alynmalydyr. Anyklaýjy tolkun sanlarynyň öňünden kesgitlenen sanawy netijäni çözmeýär. Ony spektrleriň üstme-üst gabat gelmegi çözýär.

Bu çemeleşme metilen gögi üçin FTIR spektrleriniň aýratynlyklaryny görkezýär. Iň güýçli alamatlar barmak yzy sebitinde ýerleşýär. Edebiýatdaky düşündirişler esasy konýugirlenen halka zolagyny yzygiderli 1590 bilen 1600 cm-1 töwereginde ýerleşdirýär; bu ýerde aromatik uglerod-uglerod we uglerod-azot baglarynyň uzalma yrgyldylary özara baglanyşýar. 1490 we 1390 cm-1 töweregindäki beýleki zolaklar halka, uglerod-azot we uglerod-wodorod deformasiýalaryna degişli aýratynlyklary görkezýär. 1355 we 1330 cm-1 töweregindäki zolaklar dimetilamino toparynyň uglerod-azot baglary we metil deformasiýalary bilen baglanyşyklydyr. 1225 bilen 1250 cm-1 töweregindäki alamatlar geterosiklik gurluşa degişlidir, 1170 bilen 1130 we 1066 cm-1 töweregindäki zolaklar bolsa uglerod-kükürt baglaryna mahsusdyr; aromatik C-H egilmesi 880 cm-1 töwereginde görünýär. Uzalma yrgyldylary has ýokary tolkun sanlarynda ýüze çykýar: aromatik C-H takmynan 3040 cm-1, N-metil C-H bolsa takmynan 2900 bilen 3000 cm-1 aralygynda. Çap edilen düşündirişler jikme-jikliklerde tapawutlanýar, sebäbi fenotiazin skeleti özara baglanyşykly ulgam hökmünde yrgyldaýar. Şonuň üçin islendik aýratyn düşündiriş tablisasyny ýeke-täk dogry düşündiriş hökmünde däl-de, habar berlen düşündiriş hökmünde kabul ediň.

Taýýarlamagyň iki täsirine üns bermek gerek, sebäbi olar boýagy üýtgetmän, metilen gögi üçin IR spektrlerini üýtgedýär. Birinjiden, gidratlaşan materialda 3300 bilen 3500 cm-1 töwereginde giň O-H zolagy we 1630 bilen 1640 cm-1 töwereginde suwuň egilme yrgyldysy görünýär; dürli gidrat görnüşleri bolsa barmak yzy zolaklaryny ölçäp bolýan derejede süýşürýär. Ikinjiden, KBr tabletka matrisasy gigroskopikdir: siňdirilen çyg hut şol suw sebitlerinde zolaklary döredýär we nusgadaky gidrat suwy ýaly görünip biler. ATR arkaly nusga almak KBr matrisasyny ulanmak zerurlygyny aradan aýyrýar, ýöne ATR intensiwlikleri tolkun sanyna bagly aralaşma çuňlugyna görä üýtgeýär. Şonuň üçin şol bir poroşogyň ATR spektri bilen geçiriliş spektrini göni üstme-üst goýup deňeşdirip bolmaýar. Amaly düzgün farmakopeýa talabyndan gelip çykýar: şol bir tehnika bilen ýazga alnan nusgany we etalony deňeşdiriň hem-de haýsy tehnikanyň ulanylandygyny resmileşdiriň. Bu spektrleriň aňyrsyndaky kationyň, duzuň we gidratlaryň esasy himiýasy üçin metilen gögüniň gurluşy we häsiýetleri baradaky maglumat çeşmesine serediň.

Analitiki usuly saýlamak üçin tablisa

Bu tablisa usuly saýlamak üçin guraldyr. Usulyň haýsy soraga jogap berýändigini, talaba laýyk netijäniň nämäni tassyklaýandygyny we nämäniň subut edilmän galýandygyny bilmek üçin setiriň ähli sütünlerini okaň.

Näme üçin infragyzyl gabat gelme arassalyk şahadatnamasy däl

Identifikasiýa boýunça gabat gelme nädogry boýagy aradan aýyrýar. Ol nusganyň doly düzümini sanap bermeýär. Üç çäklendirme aýratyn ähmiýetlidir.

Birinjiden, ýakyn himiki garyndaşlar infragyzyl spektrde meňzeş görünýär. Azure B metilen gögünden ýekeje metil topary bilen tapawutlanýar, şonuň üçin onuň spektri metilen gögüniň spektrine örän meňzeşdir. Birnäçe göterim Azure B saklaýan garyndy hem metilen gögi etalony bilen gowy üstme-üst gabat gelýär. Bu garyndyny ýüze çykarmak hromatografiýanyň wezipesidir; ol metilen gögüniň garyndylary we synag usullary boýunça gollanmada düşündirilýär.

Ikinjiden, infragyzyl spektroskopiýa nusgany tutuşlygyna ölçän usuldyr we az mukdarly düzüm böleklerine duýgurlygy çäklidir. Meňzeş boýaglaryň, galyndy eredijileriň ýa-da organiki däl galyndylaryň az mukdary esasy zolaklaryň astynda gizlenýär. Goşmaça pikleriň ýoklugy garyndylaryň ýokdugynyň gowşak subutnamasydyr.

Üçünjiden, etalon standart tutuş deňeşdirmäni kesgitleýär. Zaýalanan, gidratlaşma sebäpli spektri süýşen ýa-da nädogry işlenen standart deňeşdirme esasyny üýtgedýär. ATR nusga spektrini KBr etalony bilen bahalandyrmak ýaly gabat gelmeýän tehnika jübüti hem şeýle edýär. Her netije bilen birlikde standartyň partiýasyny, tehnikany we taýýarlanyşyny ýazga alyň.

Garyndylar soňky bir seresaplyk talaby hem döredýär. Köplenç gabat gelýän, ýöne pikleriň gapdallarynda egin görnüşli alamatlary ýa-da intensiwlik gyşarmalary bolan spektr bellikler bilen kabul edilýän netije däldir. Ol nusgany tanamazdan öň ony düzüm böleklerine bölmegiň zerurdygyny görkezýär.

Goşmaça usullar iş ýüzünde

Metilen gögi üçin HPLC infragyzyl usulyň berip bilmeýän düzüm jogabyny berýär. Häzirki farmakopeýa usuly trifluorsirke kislotasyny saklaýan suw-asetonitril gradiýenti bilen fenil görnüşli kolonkany ulanýar we görünýän zolakda däl-de, 246 nm-de detektirleýär. Identifikasiýa etalon standart bilen saklanma wagtynyň laýyk gelmegine esaslanýar; şol deňeşdirme mukdar analizini hem üpjün edýär. Organiki garyndylar synagy Azure B-ni öz etalon materialy bilen kesgitleýär: onuň otnositel saklanmasy takmynan 0.8, metilen gögüniňki bolsa 1.0 bolup, iki pikiň arasynda ýokary bölüniş talap edilýär. Tolkun uzynlygynyň saýlanyşyna üns beriň: demetilleşme hatarynyň siňdirmesi gyzyl tarapa yzygiderli süýşýär — takmynan 600 nm-de tioninden başlap, Azure C, Azure A we Azure B arkaly takmynan 670 nm-de metilen gögüne çenli. Şonuň üçin takmynan 660 nm-de sazlanan detektor hataryň agzalaryna deň jogap bermeýär we käbir gomologlaryň mukdaryny pes görkezýär. Zerur bolanda, tutuş hataryň doly profilini kesgitlemek her analit üçin talaba laýyklygy tassyklanan standartlary ulanýan C18 LC-MS/MS usuly arkaly geçirilmelidir.

Poroşok difraksiýasy ýokardaky iki usulyň ýok edýän ýa-da ünsden düşürýän gaty hal baradaky soragyna jogap berýär: poroşogy hromatografiýa üçin eretmek kristal baradaky maglumaty ýitirýär, molekulýar yrgyldylar bolsa uzak aralyk tertipleşmesini däl-de, baglary görkezýär. Difraksiýa şekilleri gidrat fazalaryny we kristallylygy tapawutlandyrýar; metilen gögi bolsa şeýle barlaga materiallaryň köpüsinden has köp mätäçdir. Rager we kärdeşleriniň gaty hal boýunça geçiren işi bäş dürli gidrat gurluşyny, şol sanda bir pentagidraty, iki digidraty, bir monogidraty we bir aralyk gidraty kesgitledi; häsiýetlendirilen görnüşleriň arasynda hakyky trigidrat tapylmady. Bu ýerde laboratoriýada işlemek şertleri möhümdir: çyglylyk we temperatura gidratlaryň durnuklylygyny üýtgedýär, güýçli owratmak bolsa fazany üýtgedip ýa-da kristallylygy peseldip biler. Şonuň üçin otnositel çyglylygy we temperaturany gözegçilikde saklaň hem-de ýazga alyň, owratmagy bolsa mümkin boldugyça azaldyň. Gidratyň belgilenilişi we onuň çekilýän massa edýän täsiri metilen gögüniň gidrat görnüşleri we belgilenilişi baradaky makalada has giňişleýin ara alnyp maslahatlaşylýar.

UV-Vis siňdirmesi kömekçi wezipäni ýerine ýetirýär. Tanyş maksimumlar erginiň garaşylýan hereketini tassyklaýar we konsentrasiýany kesgitlemäge mümkinçilik berýär. Ýöne garaşylýan tolkun uzynlygynda siňdirýän gök ergin metilen gögüne laýyk gelse-de, onuň metilen gögi bolandygyny subut etmeýär, sebäbi ýakyn boýaglar hem golaý tolkun uzynlyklarynda siňdirýär.

Satyn almazdan öň näme soramaly

Bu tapawutlary satyn almak baradaky soraglara öwüriň. Haýsy partiýanyň synagdan geçirilendigini, identifikasiýanyň haýsy tehnika bilen tassyklanandygyny, HPLC garyndy synagynda Azure B etalon materialynyň ulanylyp-ulanylmandygyny we gidrat görnüşiniň häsiýetlendirilendigini ýa-da diňe çaklanandygyny soraň. Iň esasysy, şahadatnamanyň doly spesifikasiýany ýa-da diňe saýlanan synaglary öz içine alýandygyny soraň. Farmakopeýa talaplaryna laýyklygy öňe sürýän köp satyjy diňe agyr metallary barlaýar; bu bolsa identifikasiýa, mukdar analizi, organiki garyndylar, eredijiler we mikrobiologik görkezijiler baradaky soraglary jogapsyz galdyrýar.

Blupreme metilen gögüni öndürýän farmasewtik öndüriji bilen hyzmatdaşlykda doly USP spesifikasiýasyny barlaýar. Bu barlag identifikasiýany, arassalygy, organiki garyndylary, galyndy eredijileri, element garyndylaryny, ýakylanda galýan galyndyny, mikrobiologik çäkleri we bakterial endotoksinleri öz içine alýar. Her partiýanyň köpçülige açyk analiz şahadatnamasy Blupreme hil synaglary sahypasynda çap edilýär. Şeýlelikde, mukdar analiziniň esasyny we garyndy netijelerini çaklamagyň ýerine göni okap bolýar. 100% töweregindäki netijelerde hem hasaplamanyň esasyny görkezmek zerurdyr; muny 100 göterimden ýokary mukdar analizi baradaky gollanma düşündirýär. Identifikasiýa boýunça gabat gelme barlagy başlaýar. Doly maglumat toplumy ony tamamlaýar.