Metilena biru dalam pengurangan patogen plasma: cara proses ini berfungsi

Metilena biru boleh membantu mengurangkan patogen dalam plasma yang didermakan apabila digunakan sebagai sebahagian daripada sistem pemprosesan terkawal. Rawatan ini dilakukan di luar badan, sebelum plasma diluluskan untuk transfusi. Proses ini menggabungkan peralatan yang ditetapkan, pendedahan kepada pewarna, penyinaran, penapisan dan pemeriksaan terhadap komponen darah yang terhasil.

Perbezaan itu menentukan maksud bukti yang diperoleh. Kajian yang menunjukkan bahawa sesuatu sistem pemprosesan mengurangkan virus berjangkit dalam beg plasma membuktikan hasil bagi bahan dan proses tersebut. Kajian itu tidak membuktikan bahawa pengambilan metilena biru merawat jangkitan dalam seseorang.

Persoalan yang relevan secara klinikal juga mempunyai dua aspek: berapa banyak pengurangan patogen yang dicapai oleh proses itu, dan berapa banyak fungsi berguna plasma yang masih kekal?

Mulakan dengan plasma, bukan produk darah yang tidak dinyatakan jenisnya

Plasma ialah komponen cecair darah yang mengandungi protein, termasuk faktor pembekuan. Sistem pemprosesan plasma tidak boleh dianggap sesuai untuk darah penuh, pekatan sel darah merah atau komponen platelet. Bahan-bahan tersebut mempunyai komposisi dan fungsi berbeza yang perlu dikekalkan.

Sebagai contoh khusus, sistem THERAFLEX MB-Plasma daripada Macopharma memproses unit plasma daripada penderma tunggal. Urutan proses yang didokumenkan merangkumi pengurangan sel, penambahan metilena biru, penyinaran, penyingkiran pewarna dan penyimpanan. Pengilang menerangkan konfigurasi berbeza untuk plasma yang diperoleh daripada darah penuh dan untuk kutipan aferesis yang lebih besar. Oleh itu, bahan permulaan dan set pakai buang perlu diberi perhatian sebelum penyinaran bermula.

“Plasma metilena biru” ialah penerangan tentang komponen yang telah diproses, bukan spesifikasi lengkap. Perbandingan yang berguna menyatakan sistem, konfigurasi, sumber plasma dan versi arahan operasi.

Ikuti bahan sepanjang pemprosesan dan penilaian

Ilustrasi di atas memisahkan peringkat-peringkat proses. Jadual pendamping ini menerangkan sumbangan setiap peringkat dan perkara yang tidak dapat dibuktikannya secara bersendirian.

Jadual ini ialah panduan untuk memahami proses yang telah disahkan, bukan pengganti prosedur operasi. Khususnya, penapis penyingkiran dan sumber cahaya menjalankan tugas yang berbeza. Macopharma menerangkan bahawa Blueflex mengurangkan metilena biru dan terbitannya, termasuk sebatian azure dan tionina. Dakwaan penyingkiran bahan kimia perlu difahami sebagai pengurangan yang diukur, bukan jaminan bahawa tiada molekul yang tinggal.

Mengapa sumber cahaya merupakan sebahagian daripada intervensi

Metilena biru bersifat fotoaktif. Penyinaran boleh menyebabkan kerosakan kimia pada sasaran biologi, sebab itulah gabungan ini dikaji untuk penyahaktifan virus. Dalam kajian Mohr dan rakan-rakan tentang pewarna fenotiazina dan cahaya, perubahan sumber penyinaran mengubah kedua-dua penyahaktifan virus dan kerosakan protein plasma.

Hal ini mengelakkan satu anggapan mudah yang lazim: menganggap nama pewarna seolah-olah menerangkan keseluruhan intervensi. Lampu, beg, laluan optik atau bahan yang berbeza boleh mengubah pendedahan. Panduan yang lebih menyeluruh tentang cara rawatan fotodinamik metilena biru dikaji menerangkan mengapa formulasi dan penyinaran perlu dinyatakan dalam penerangan yang sama.

Suhu memberikan contoh yang sangat berguna. Satu kajian pada 2018 tentang pemprosesan THERAFLEX pada suhu berbeza membandingkan plasma pada suhu sekitar 5°C, 22°C dan 30°C. Pada suhu paling rendah, penyelidik mendapati pelarutan tablet yang lebih lemah dan penyahaktifan yang lebih rendah bagi ketiga-tiga virus yang dikaji. Suhu yang lebih tinggi meningkatkan perubahan masa pembekuan dan kehilangan aktiviti faktor pembekuan.

Dapatan tersebut tidak menetapkan julat operasi baharu. Sebaliknya, dapatan itu menerangkan mengapa perkhidmatan darah mesti menggunakan keadaan yang ditetapkan: memperbaik satu hasil dengan mengubah sesuatu parameter boleh menjejaskan hasil yang lain.

Bahagian sistem manakah yang mengurangkan organisma tersebut?

Pengurangan patogen yang diukur selepas proses lengkap tidak boleh secara automatik dikaitkan dengan pewarna yang diaktifkan cahaya semata-mata.

Dalam satu kajian cabaran pada 2015 menggunakan plasma yang sengaja dicemarkan, penyelidik mengambil sampel bahan selepas setiap peringkat pemprosesan. Sebahagian besar pengurangan bakteria berpunca daripada penapisan sel. Bagi bakteria kecil Brevundimonas diminuta, langkah pertama itu mencapai pengurangan 1.7 log; rawatan cahaya dan penapisan pewarna yang menyusul menjadikan pengurangan keseluruhan sekurang-kurangnya 3.7 log, iaitu di bawah had pengesanan ujian.

Ini ialah hasil bagi suatu sistem gabungan. Hasil ini tidak menunjukkan bahawa larutan metilena biru biasa menghasilkan pengurangan bakteria yang sama. Perbezaan ini juga terpakai apabila membaca penyelidikan antimikrob metilena biru yang lebih luas.

Pengurangan log menerangkan nisbah antara jumlah bahan berjangkit pada permulaan dan jumlah yang masih tinggal, berdasarkan pengukuran. Pengurangan tiga log ialah pengurangan seribu kali ganda. “Di bawah had pengesanan” bermaksud ujian itu tidak dapat mengukur jumlah yang masih tinggal dalam keadaan ujiannya. Ini bukan bukti kesterilan mutlak atau aktiviti sejagat terhadap organisma yang belum diuji. Spesies virus, beban awal, matriks sampel dan kepekaan ujian tetap merupakan maklumat yang diperlukan dalam dakwaan tersebut.

Kekalkan fungsi yang diperlukan bagi penggunaan plasma

Sesuatu proses boleh mengurangkan keupayaan menjangkiti sambil mengubah protein yang penting secara klinikal. Oleh itu, pengukuran pengurangan patogen sahaja menjadikan penilaian tidak lengkap.

Dalam satu perbandingan sumber plasma dan masa pemprosesan pada 2014, kadar pengekalan faktor VIII selepas rawatan metilena biru berada dalam julat 78% hingga 89% merentas siri kajian. Kadar pengekalan bergantung pada sumber plasma, dan penyelidik turut menilai fibrinogen. Ini ialah ukuran makmal terhadap komponen yang telah diproses. Angka tersebut bukan peratusan keberkesanan klinikal dalam pesakit.

Pertimbangkan dua unit plasma dengan paras faktor awal yang berbeza. Walaupun kedua-duanya mengekalkan pecahan aktiviti yang sama semasa rawatan, paras akhirnya akan berbeza. Sebaliknya, peratusan pengekalan yang lebih tinggi tidak semestinya bermakna kepekatan akhir yang lebih tinggi. Teliti ukuran sebelum dan selepas pemprosesan serta spesifikasi pelepasan yang terpakai.

Hasil pada pesakit memerlukan jenis bukti yang lain. Kajian kualiti komponen tidak boleh, dengan sendirinya, membuktikan kesetaraan kawalan pendarahan, keperluan transfusi atau kadar kejadian buruk dalam populasi pesakit tertentu.

Asingkan bukti pemprosesan daripada dakwaan rawatan

Beg plasma membolehkan pendedahan terkawal: beg itu mempunyai isi padu, geometri dan urutan pemprosesan yang ditetapkan, serta hasil yang boleh diukur. Seseorang mempunyai tisu, peredaran darah, metabolisme dan lokasi jangkitan yang tidak direplikasi oleh eksperimen ini.

Atas sebab itu, dakwaan rawatan HIV berbanding bukti penyahaktifan dalam plasma dan bukti metilena biru untuk COVID-19 dan COVID berpanjangan memerlukan penilaian klinikal masing-masing. Kedua-dua persoalan itu tidak terjawab dengan menunjukkan pengurangan keupayaan menjangkiti dalam bahan yang didermakan.

Untuk kegunaan perkhidmatan darah, nilai komponen dan sistem khusus yang dibenarkan setempat, pengesahannya mengikut organisma, fungsi protein yang dikekalkan, baki bahan kimia dan kawalan pelepasan. Ketersediaan produk berbeza mengikut negara, seperti yang dinyatakan oleh pengilang. Penggunaan pada masa lalu atau eksperimen yang berjaya tidak membuktikan adanya kebenaran semasa di semua tempat. Unit bukti yang berguna ialah keseluruhan proses yang telah disahkan, yang digunakan pada komponen plasma yang ditetapkan.