Метилен хөхийг лабораторид таних нь: хэт улаан туяаны спектр ба нэмэлт аргууд

Гурван лаборатори ижил хөх нунтаг хүлээн авлаа гэж төсөөлье. Эхнийх нь хэт улаан туяаны спектрийг бүртгээд метилен хөх гэж дүгнэнэ. Хоёр дахь нь хроматографийн шинжилгээ хийж, 0.4% Azure B байгааг мэдээлнэ. Гурав дахь нь талстуудаас рентген туяаг дифракцлуулж, гидратын хэлбэрийг нэрлэнэ. Гурвуулаа зөв боловч аль нь ч нөгөө хоёр асуултад хариулаагүй. Нэг үр дүнг гурван асуултын хариу мэт ойлгох үед төөрөгдөл үүсдэг.

Энэ нийтлэл тэдгээр асуултыг ялгаж тайлбарлана. Хэт улаан туяагаар таних шинжилгээ нь жишиг стандарттай харьцуулан молекулын мөн чанарыг тогтооно. Хроматографи нь найрлагыг тогтооно. Дифракц нь хатуу төлөвийн хэлбэрийг тогтооно. Таних шинжилгээнд тохирсон үр дүн нь цэвэршлийн гэрчилгээ биш.

Хэт улаан туяагаар таних шинжилгээ нэг асуултад сайн хариулдаг

Метилен хөхийг таних фармакопейн шинжилгээ нь спектрийг стандарттай харьцуулах арга болохоос оргилуудыг жагсаалтаар шалгах арга биш. USP-ийн метилен хөхийн монографийн урьдчилсан харагдац-д Таних шинжилгээ A нь ATR оптик эсвэл калийн бромидын шахмал ашигласан хэт улаан туяаны спектроскопийг заасан байдаг. Дээж болон стандартыг ижил нөхцөлд бэлтгэж, спектрийг нь бүртгэсэн байх бөгөөд дээжийн спектр USP-ийн жишиг стандартын спектртэй тохирох ёстой. Оношлох долгионы тоонуудын тогтмол жагсаалт дүгнэлтийг шийддэггүй. Спектрүүдийг давхцуулсан харьцуулалт шийддэг.

Ийм арга сонгосон нь метилен хөхийн FTIR спектрийн онцлогтой холбоотой. Хамгийн хүчтэй шинжүүд нь хурууны хээний мужид байрладаг. Эрдэм шинжилгээний бүтээлүүдэд гол коньюгацлагдсан цагирагийн зурвасыг тогтмол 1590-аас 1600 cm-1 орчимд хамааруулдаг бөгөөд энэ мужид ароматик нүүрстөрөгч-нүүрстөрөгч болон нүүрстөрөгч-азотын суналтын хэлбэлзлүүд харилцан холбогддог. 1490 болон 1390 cm-1 орчмын бусад зурвас нь цагираг, нүүрстөрөгч-азот, нүүрстөрөгч-устөрөгчийн деформацын шинжтэй. 1355 болон 1330 cm-1 орчмын зурвас нь диметиламиногийн нүүрстөрөгч-азотын холбоо болон метилийн деформацтай холбоотой. 1225-аас 1250 cm-1 орчмын шинжүүд гетероциклийн үндсэн бүтцэд хамаардаг бол 1170-аас 1130 болон 1066 cm-1 орчмын зурвас нүүрстөрөгч-хүхрийн шинжтэй бөгөөд ароматик C-H-ийн нугаралтын хэлбэлзэл 880 cm-1 орчимд илэрнэ. Суналтын хэлбэлзлүүд илүү өндөр мужид гардаг: ароматик C-H нь 3040 cm-1 орчимд, N-метилийн C-H нь ойролцоогоор 2900-аас 3000 cm-1 хооронд байна. Фенотиазинийн үндсэн бүтэц харилцан холбогдсон систем байдлаар хэлбэлздэг тул хэвлэгдсэн бүтээлүүдийн зурвасын хамааруулалт нарийн зүйлсээрээ ялгаатай. Иймээс аливаа нэг хамааруулалтын хүснэгтийг цорын ганц тайлбар бус, тухайн бүтээлд мэдээлсэн тайлбар гэж үзээрэй.

Дээж бэлтгэхтэй холбоотой хоёр нөлөөнд анхаарах хэрэгтэй. Эдгээр нь будагч бодисыг өөрчлөхгүйгээр метилен хөхийн IR спектрийг өөрчилдөг. Нэгдүгээрт, гидратжсан материалд 3300-аас 3500 cm-1 орчимд өргөн O-H зурвас, мөн 1630-аас 1640 cm-1 орчимд усны нугаралтын хэлбэлзэл илэрдэг бөгөөд гидратын өөр өөр хэлбэр хурууны хээний зурвасуудыг хэмжигдэхүйц хэмжээгээр шилжүүлдэг. Хоёрдугаарт, KBr шахмалын матриц чийг татдаг: шингээсэн чийг нь усны яг тэр мужуудад зурвас үүсгэж, дээжийн гидратын ус мэт харагдаж болно. ATR аргаар дээжийг хэмжихэд KBr матриц хэрэглэхгүй боловч ATR-ийн эрчим нь долгионы тооноос хамаарах нэвтрэлтийн гүнтэй уялдан өөрчлөгддөг тул ижил нунтагт авсан ATR спектр болон нэвтрүүлэлтийн спектрийг шууд давхцуулж болохгүй. Фармакопейн шаардлагаас практик дүрэм урган гарна: ижил аргаар бүртгэсэн дээж ба жишиг стандартын спектрийг харьцуулж, ямар арга хэрэглэснийг баримтжуул. Эдгээр спектрийн цаадах катион, давс, гидратын химийн үндсийг метилен хөхийн бүтэц ба шинж чанарын лавлах-аас үзнэ үү.

Шинжилгээний арга сонгох хүснэгт

Энэ хүснэгт арга сонгоход тусална. Мөр бүрийг хөндлөн уншиж, тухайн арга ямар асуултад хариулах, шаардлага хангасан үр дүн юуг тогтоох, юу нь батлагдаагүй үлдэхийг харна уу.

Хэт улаан туяаны спектрийн тохирол яагаад цэвэршлийн гэрчилгээ биш вэ

Таних шинжилгээний тохирол нь өөр будагч бодис байх боломжийг үгүйсгэнэ. Гэхдээ дээжид байгаа бүхнийг бүртгэн тодорхойлохгүй. Гурван хязгаарлалт хамгийн чухал.

Нэгдүгээрт, бүтцийн хувьд ойролцоо бодисууд хэт улаан туяаны спектрт төстэй харагддаг. Azure B нь метилен хөхөөс ганц метил бүлгээр ялгаатай тул спектр нь метилен хөхийнхтэй маш төстэй. Хэдэн хувийн Azure B агуулсан холимог ч метилен хөхийн жишиг спектртэй сайн давхцана. Тэр хольцыг илрүүлэх нь хроматографийн ажил бөгөөд үүнийг метилен хөхийн хольц ба шинжилгээний аргын гарын авлага-д тайлбарласан.

Хоёрдугаарт, хэт улаан туяаны спектроскопи нь дээжийг бүхэлд нь хэмждэг, бага хэмжээтэй бүрэлдэхүүнд мэдрэмж хязгаарлагдмал арга юм. Бүтцийн хувьд ойролцоо будагч бодис, үлдэгдэл уусгагч эсвэл органик бус үлдэгдлийн бага хэмжээ нь гол зурвасуудын дор далдлагддаг. Нэмэлт оргил байхгүй нь хольц байхгүйг батлах сул нотолгоо юм.

Гуравдугаарт, бүх харьцуулалт жишиг стандартаас хамаарна. Задарсан, гидратжилтаас болж спектр нь шилжсэн, эсвэл буруу харьцсан стандарт нь үнэлэх суурийг өөрчилнө. ATR аргаар авсан дээжийн спектрийг KBr аргаар авсан жишиг спектртэй харьцуулах зэрэг арга нь тохироогүй хослол ч мөн адил нөлөөлнө. Дүгнэлт бүрийн хамт стандартын цуврал, хэрэглэсэн арга, бэлтгэл ажиллагааг бүртгэ.

Холимгийн тухайд бас нэг анхааруулга бий. Ихэнх хэсгээрээ тохирсон ч оргилын мөр эсвэл эрчмийн хэвийн бус байдалтай спектрийг тайлбар зүүлттэйгээр тэнцсэнд тооцож болохгүй. Энэ нь дээжийг танихаас өмнө бүрэлдэхүүнүүдийг нь салгах шаардлагатай гэсэн дохио юм.

Нэмэлт аргуудыг практикт хэрэглэх нь

Метилен хөхийн HPLC шинжилгээ нь хэт улаан туяаны арга өгч чаддаггүй найрлагын хариуг өгдөг. Одоогийн фармакопейн арга нь трифторцууны хүчил агуулсан ус-ацетонитрилийн градиент бүхий фенил төрлийн багана ашиглаж, үзэгдэх гэрлийн мужид бус 246 nm-д илрүүлдэг. Жишиг стандартын баригдах хугацаатай тохирсноор бодисыг танина; мөн энэ харьцуулалтаар агууламжийг тодорхойлно. Органик хольцын шинжилгээнд Azure B-ийг өөрийн жишиг материалтай нь харьцуулан, метилен хөхийн харьцангуй баригдалтыг 1.0 гэж үзэхэд ойролцоогоор 0.8-д таних бөгөөд хоёр оргилын хооронд өндөр ялгах чадвар шаарддаг. Долгионы уртын сонголтыг анхаараарай: метил бүлгээ алдсан бодисуудын цувааны шингээлт тионины 600 nm орчмоос Azure C, Azure A, Azure B-ээр дамжин метилен хөхийн 670 nm орчим хүртэл улаан мужийн зүг аажмаар шилждэг. Иймээс 660 nm орчимд тогтмол тохируулсан детектор цувааны бодисуудад жигд бус хариу үзүүлж, зарим гомологийн хэмжээг дутуу үнэлдэг. Шаардлагатай үед бүх цувааны бүрэлдэхүүнийг бүрэн тодорхойлоход шинжлэх бодис бүрийн тохирох эсэхийг баталгаажуулсан стандарттай C18 LC-MS/MS арга хэрэглэнэ.

Нунтаг дифракц нь дээрх хоёр арга устгадаг эсвэл үл тоомсорлодог хатуу төлөвийн асуултад хариулна: хроматографийн шинжилгээнд зориулж нунтгийг уусгахад талстын мэдээлэл алдагддаг, харин молекулын хэлбэлзэл нь алсын эрэмбэт байрлалыг бус холбоог илэрхийлдэг. Дифракцын дүрсүүд гидратын фаз болон талстжилтыг ялган харуулдаг бөгөөд метилен хөхөд ийм нарийвчилсан шинжилгээ бусад олон материалаас илүү шаардлагатай. Рагер болон хамтран ажиллагчдын хатуу төлөвийн судалгаагаар пентагидрат, хоёр дигидрат, моногидрат, завсрын гидрат зэрэг таван ялгаатай гидратын бүтцийг тодорхойлсон бөгөөд шинж чанарыг нь тогтоосон хэлбэрүүдийн дунд жинхэнэ тригидрат илрээгүй. Энд лабораторийн ажиллагаа чухал: чийгшил ба температур гидратын тогтвортой байдлыг өөрчилж, хэт хүчтэй нунтаглах нь фазыг өөрчлөх эсвэл талстжилтыг бууруулах боломжтой. Иймээс харьцангуй чийгшил, температурыг хянаж баримтжуулан, нунтаглалтыг хамгийн бага хэмжээнд байлга. Гидратын шошгололт болон жинлэсэн массад үзүүлэх нөлөөг метилен хөхийн гидратын хэлбэрүүд ба шошгололт-д дэлгэрүүлэн авч үзсэн.

UV-Vis шингээлт нь дэмжих үүрэгтэй. Танил максимумууд нь уусмалын хүлээгдэж буй төлөвийг бататгаж, концентрацыг тодорхойлох боломж олгодог. Гэхдээ хүлээгдэж буй долгионы уртад шингээлт үзүүлдэг хөх уусмал нь метилен хөхтэй нийцэж байгаа ч түүнийг мөн гэдгийг батлахгүй, учир нь бүтцийн хувьд ойролцоо будагч бодисууд ойролцоо мужид шингээдэг.

Худалдан авахаасаа өмнө юу асуух вэ

Эдгээр ялгааг худалдан авахдаа асуух асуулт болгоорой. Аль цувралыг шинжилсэн, ямар аргаар бодисыг таньсан, HPLC хольцын шинжилгээнд Azure B жишиг материал ашигласан эсэх, гидратын хэлбэрийг шинжилж тогтоосон уу эсвэл таамагласан уу гэдгийг асуу. Хамгийн гол нь гэрчилгээ бүх үзүүлэлтийн шаардлагыг хамарсан уу эсвэл зөвхөн сонгосон шинжилгээнүүдийг хамарсан уу гэдгийг асуугаарай. Фармакопейн шаардлагад нийцсэн гэж мэдэгддэг олон борлуулагч зөвхөн хүнд металлыг шинжилдэг бөгөөд ингэснээр бодисыг таних, агууламж, органик хольц, уусгагч, бичил биетний талаарх асуултууд хариултгүй үлддэг.

Blupreme нь метилен хөхийн эмийн үйлдвэрлэлийн үйлдвэрлэгчтэй хамтран USP-ийн бүрэн үзүүлэлтийн шаардлагын дагуу шинжилгээ хийдэг. Үүнд бодисыг таних, цэвэршил, органик хольц, үлдэгдэл уусгагч, элементийн хольц, шатаалтын үлдэгдэл, бичил биетний хязгаар, бактерийн эндотоксин багтана. Цуврал бүрийн нийтэд нээлттэй шинжилгээний гэрчилгээг Blupreme-ийн чанарын шинжилгээ-нд нийтэлдэг тул агууламжийн тооцооны суурь болон хольцын үр дүнг таамаглах бус шууд унших боломжтой. 100% орчим үр дүн гарсан ч тооцооны суурийг нь тодорхой заах шаардлагатайг 100 хувиас дээш агууламжийн тухай гарын авлага тайлбарладаг. Таних шинжилгээний тохирол судалгааны эхлэл болдог. Бүрэн баримт нь түүнийг дуусгана.