ការកំណត់អត្តសញ្ញាណមេទីឡែនប្លូក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍៖ ស្ប៉ិចត្រាអ៊ីនហ្វ្រារ៉េដ និងវិធីសាស្ត្របំពេញបន្ថែម

ស្រមៃថាមន្ទីរពិសោធន៍បីទទួលបានម្សៅពណ៌ខៀវដូចគ្នា។ មន្ទីរពិសោធន៍ទីមួយកត់ត្រាស្ប៉ិចត្រាអ៊ីនហ្វ្រារ៉េដ ហើយប្រកាសថាវាជាមេទីឡែនប្លូ។ មន្ទីរពិសោធន៍ទីពីរធ្វើក្រូម៉ាតូក្រាហ្វី ហើយរាយការណ៍ថាមាន Azure B 0.4%។ មន្ទីរពិសោធន៍ទីបីធ្វើឌីហ្វ្រាក់ស្យុងកាំរស្មីអ៊ិចលើគ្រីស្តាល់ ហើយកំណត់ឈ្មោះទម្រង់អ៊ីដ្រាតមួយ។ មន្ទីរពិសោធន៍ទាំងបីសុទ្ធតែត្រឹមត្រូវ ហើយគ្មានមួយណាបានឆ្លើយសំណួរពីរផ្សេងទៀតឡើយ។ ភាពច្របូកច្របល់ចាប់ផ្តើម នៅពេលគេបកស្រាយលទ្ធផលមួយថាជាចម្លើយចំពោះសំណួរទាំងបី។

អត្ថបទនេះបែងចែកសំណួរទាំងនោះឱ្យដាច់ពីគ្នា។ ការកំណត់អត្តសញ្ញាណដោយអ៊ីនហ្វ្រារ៉េដបញ្ជាក់អត្តសញ្ញាណម៉ូលេគុល ដោយប្រៀបធៀបនឹងសារធាតុស្តង់ដារយោង។ ក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីបញ្ជាក់សមាសភាព។ ឌីហ្វ្រាក់ស្យុងបញ្ជាក់ទម្រង់ក្នុងសភាពរឹង។ លទ្ធផលត្រូវគ្នាដែលឆ្លងកាត់ការធ្វើតេស្តអត្តសញ្ញាណ មិនមែនជាវិញ្ញាបនបត្រភាពបរិសុទ្ធទេ។

ការកំណត់អត្តសញ្ញាណដោយអ៊ីនហ្វ្រារ៉េដឆ្លើយសំណួរមួយបានល្អ

តេស្តអត្តសញ្ញាណមេទីឡែនប្លូតាមឱសថកោស គឺជាការប្រៀបធៀបស្ប៉ិចត្រាជាមួយសារធាតុស្តង់ដារ មិនមែនជាបញ្ជីផ្ទៀងផ្ទាត់កំពូលសញ្ញាទេ។ នៅក្នុង ទិដ្ឋភាពមុននៃម៉ូណូក្រាហ្វ USP ស្តីពីមេទីឡែនប្លូ តេស្តអត្តសញ្ញាណ A យោងទៅលើស្ប៉ិចត្រូស្កូពីអ៊ីនហ្វ្រារ៉េដ ដោយប្រើប្រព័ន្ធអុបទិក ATR ឬគ្រាប់ប៉ូតាស្យូមប្រូមីតដែលបានបង្ហាប់។ ស្ប៉ិចត្រារបស់សំណាកត្រូវតែត្រូវគ្នានឹងស្ប៉ិចត្រារបស់សារធាតុស្តង់ដារយោង USP ដោយសំណាកនិងសារធាតុស្តង់ដារត្រូវបានរៀបចំ និងកត់ត្រាក្រោមលក្ខខណ្ឌសមមូល។ មិនមានបញ្ជីថេរនៃចំនួនរលកសម្រាប់សម្គាល់អត្តសញ្ញាណណាមួយដែលជាមូលដ្ឋាននៃសេចក្តីសន្និដ្ឋានឡើយ។ ការដាក់ស្ប៉ិចត្រាត្រួតគ្នាទើបជាមូលដ្ឋាន។

ជម្រើសរចនាតេស្តនេះឆ្លុះបញ្ចាំងពីលក្ខណៈរបស់ស្ប៉ិចត្រា FTIR នៃមេទីឡែនប្លូ។ លក្ខណៈសញ្ញាខ្លាំងបំផុតស្ថិតនៅក្នុងតំបន់ស្នាមម្រាមដៃ។ ការកំណត់ប្រភពសញ្ញាក្នុងឯកសារវិទ្យាសាស្ត្រតែងតែដាក់បង់សំខាន់របស់រង្វង់កុងជូហ្គេតនៅជិត 1590 ដល់ 1600 cm-1 ដែលរបៀបរំញ័រលាតសន្ធឹងនៃចំណងកាបូន-កាបូន និងកាបូន-អាសូតក្នុងរង្វង់អារ៉ូម៉ាទិកមានការភ្ជាប់គ្នា។ បង់បន្ថែមនៅជិត 1490 និង 1390 cm-1 មានលក្ខណៈនៃរំញ័រប្រែទ្រង់ទ្រាយរបស់រង្វង់ ចំណងកាបូន-អាសូត និងកាបូន-អ៊ីដ្រូសែន។ បង់នៅជិត 1355 និង 1330 cm-1 ពាក់ព័ន្ធនឹងចំណងកាបូន-អាសូតរបស់ក្រុមឌីមេទីលអាមីណូ និងរំញ័រប្រែទ្រង់ទ្រាយរបស់ក្រុមមេទីល។ លក្ខណៈសញ្ញានៅជិត 1225 ដល់ 1250 cm-1 ជារបស់គ្រោងរង្វង់ហេតេរ៉ូស៊ីក្លិក ខណៈបង់នៅជិត 1170 ដល់ 1130 និង 1066 cm-1 មានលក្ខណៈកាបូន-ស្ពាន់ធ័រ ហើយរំញ័របត់របស់ C-H អារ៉ូម៉ាទិកស្ថិតនៅជិត 880 cm-1។ របៀបរំញ័រលាតសន្ធឹងលេចឡើងនៅចំនួនរលកខ្ពស់ជាងនេះ៖ C-H អារ៉ូម៉ាទិកនៅជិត 3040 cm-1 និង C-H របស់ N-មេទីលនៅចន្លោះប្រហែល 2900 និង 3000 cm-1។ ការកំណត់ប្រភពសញ្ញាដែលបានបោះពុម្ពផ្សាយមានភាពខុសគ្នាក្នុងព័ត៌មានលម្អិត ព្រោះគ្រោងផេណូធីអាស៊ីនីញ៉ូមរំញ័រជាប្រព័ន្ធដែលភ្ជាប់គ្នា។ ដូច្នេះ គួរចាត់ទុកតារាងកំណត់ប្រភពសញ្ញាណាមួយថាជាការរាយការណ៍មួយ មិនមែនជាការកំណត់តែមួយគត់ទេ។

ឥទ្ធិពលពីការរៀបចំសំណាកពីរយ៉ាងគួរឱ្យយកចិត្តទុកដាក់ ព្រោះវាផ្លាស់ប្តូរស្ប៉ិចត្រា IR របស់មេទីឡែនប្លូដោយមិនផ្លាស់ប្តូរសារធាតុពណ៌។ ទីមួយ សារធាតុដែលមានទឹកអ៊ីដ្រាតបង្ហាញសញ្ញា O-H ទូលាយនៅជុំវិញ 3300 ដល់ 3500 cm-1 រួមនឹងរំញ័របត់របស់ទឹកនៅជិត 1630 ដល់ 1640 cm-1 ហើយទម្រង់អ៊ីដ្រាតផ្សេងៗធ្វើឱ្យបង់ក្នុងតំបន់ស្នាមម្រាមដៃរំកិលក្នុងកម្រិតដែលអាចវាស់បាន។ ទីពីរ ម៉ាទ្រីសគ្រាប់ KBr បង្ហាប់មានលក្ខណៈស្រូបសំណើម៖ សំណើមដែលវាស្រូបយកបង្កើតបង់នៅត្រង់តំបន់ទឹកទាំងនោះ ហើយអាចធ្វើឱ្យគេច្រឡំថាជាទឹកអ៊ីដ្រាតពីសំណាក។ ការវាស់សំណាកដោយ ATR ជៀសវាងម៉ាទ្រីស KBr ប៉ុន្តែអាំងតង់ស៊ីតេ ATR ប្រែប្រួលតាមជម្រៅជ្រៀតចូលដែលអាស្រ័យលើចំនួនរលក។ ដូច្នេះ ស្ប៉ិចត្រា ATR និងស្ប៉ិចត្រាឆ្លងកាត់របស់ម្សៅដូចគ្នា មិនអាចដាក់ត្រួតគ្នាដោយផ្ទាល់បានទេ។ វិធានអនុវត្តជាក់ស្តែងស្របតាមតម្រូវការឱសថកោសគឺ៖ ប្រៀបធៀបសំណាកនិងសារធាតុយោងដែលបានកត់ត្រាដោយបច្ចេកទេសដូចគ្នា ហើយកត់ត្រាថាបានប្រើបច្ចេកទេសណា។ សម្រាប់គីមីសាស្ត្រមូលដ្ឋាននៃកាត្យុង អំបិល និងអ៊ីដ្រាតដែលបង្កើតស្ប៉ិចត្រាទាំងនេះ សូមមើល ឯកសារយោងអំពីរចនាសម្ព័ន្ធ និងលក្ខណៈសម្បត្តិរបស់មេទីឡែនប្លូ។

តារាងជ្រើសរើសវិធីសាស្ត្រវិភាគ

តារាងនេះជាឧបករណ៍សម្រាប់ជ្រើសរើស។ អានតាមជួរដេកនីមួយៗ ដើម្បីដឹងថាវិធីសាស្ត្រមួយឆ្លើយសំណួរអ្វី លទ្ធផលដែលឆ្លងកាត់តេស្តបញ្ជាក់អ្វី និងអ្វីដែលនៅមិនទាន់បានបញ្ជាក់។

ហេតុអ្វីភាពត្រូវគ្នានៃអ៊ីនហ្វ្រារ៉េដមិនមែនជាវិញ្ញាបនបត្រភាពបរិសុទ្ធ

ភាពត្រូវគ្នានៃអត្តសញ្ញាណអាចបដិសេធថាជាសារធាតុពណ៌ខុសប្រភេទ។ វាមិនរាយបញ្ជីអ្វីៗទាំងអស់ដែលមានក្នុងសំណាកទេ។ មានដែនកំណត់បីដែលសំខាន់បំផុត។

ទីមួយ សារធាតុដែលមានរចនាសម្ព័ន្ធជិតគ្នាមើលទៅស្រដៀងគ្នាក្នុងស្ប៉ិចត្រាអ៊ីនហ្វ្រារ៉េដ។ Azure B ខុសពីមេទីឡែនប្លូត្រឹមក្រុមមេទីលមួយប៉ុណ្ណោះ ដូច្នេះស្ប៉ិចត្រារបស់វាស្រដៀងនឹងស្ប៉ិចត្រារបស់មេទីឡែនប្លូយ៉ាងខ្លាំង។ ល្បាយដែលមាន Azure B ប៉ុន្មានភាគរយ នៅតែអាចដាក់ត្រួតគ្នាបានល្អជាមួយសារធាតុយោងមេទីឡែនប្លូ។ ការរកឃើញសារធាតុមិនបរិសុទ្ធនោះជាការងាររបស់ក្រូម៉ាតូក្រាហ្វី ដែលបានពិភាក្សាក្នុង មគ្គុទ្ទេសក៍អំពីសារធាតុមិនបរិសុទ្ធ និងវិធីសាស្ត្រធ្វើតេស្តមេទីឡែនប្លូ។

ទីពីរ ស្ប៉ិចត្រូស្កូពីអ៊ីនហ្វ្រារ៉េដជាបច្ចេកទេសដែលវាស់សំណាកជារួម ហើយមានភាពរសើបមានកម្រិតចំពោះសមាសធាតុដែលមានបរិមាណតិច។ បរិមាណតិចតួចនៃសារធាតុពណ៌ដែលមានរចនាសម្ព័ន្ធពាក់ព័ន្ធ សារធាតុរំលាយសំណល់ ឬសំណល់អសរីរាង្គ ត្រូវបានបាំងដោយបង់សំខាន់ៗ។ ការមិនមានកំពូលសញ្ញាបន្ថែមគឺជាភស្តុតាងខ្សោយសម្រាប់បញ្ជាក់ថាគ្មានសារធាតុមិនបរិសុទ្ធ។

ទីបី សារធាតុស្តង់ដារយោងកំណត់មូលដ្ឋាននៃការប្រៀបធៀបទាំងមូល។ សារធាតុស្តង់ដារដែលបានខូចគុណភាព មានស្ប៉ិចត្រារំកិលដោយសារអ៊ីដ្រាត ឬត្រូវបានចាត់ចែងមិនត្រឹមត្រូវ ធ្វើឱ្យមូលដ្ឋានវិនិច្ឆ័យប្រែប្រួល។ ការផ្គូផ្គងបច្ចេកទេសមិនស្របគ្នាក៏ដូច្នោះដែរ ដូចជាការវិនិច្ឆ័យស្ប៉ិចត្រាសំណាក ATR ដោយប្រៀបធៀបនឹងសារធាតុយោង KBr។ ត្រូវកត់ត្រាឡូត៍របស់សារធាតុស្តង់ដារ បច្ចេកទេស និងការរៀបចំ ជាមួយសេចក្តីសន្និដ្ឋាននីមួយៗ។

ល្បាយបន្ថែមចំណុចប្រុងប្រយ័ត្នចុងក្រោយមួយ។ ស្ប៉ិចត្រាដែលត្រូវគ្នាជាចម្បង ប៉ុន្តែមានស្មាកំពូលសញ្ញា ឬអាំងតង់ស៊ីតេខុសប្រក្រតី មិនមែនជាលទ្ធផលឆ្លងកាត់តេស្តដែលគ្រាន់តែត្រូវបន្ថែមកំណត់សម្គាល់ទេ។ វាជាសញ្ញាថាត្រូវបំបែកសំណាកមុននឹងកំណត់អត្តសញ្ញាណ។

វិធីសាស្ត្របំពេញបន្ថែមក្នុងការអនុវត្ត

HPLC សម្រាប់មេទីឡែនប្លូផ្តល់ចម្លើយអំពីសមាសភាពដែលអ៊ីនហ្វ្រារ៉េដមិនអាចផ្តល់បាន។ វិធីសាស្ត្រឱសថកោសបច្ចុប្បន្នប្រើកូឡោនប្រភេទផេនីល ជាមួយល្បាយទឹក-អាសេតូនីទ្រីលដែលប្តូរសមាមាត្រជាបន្តបន្ទាប់ និងមានអាស៊ីតទ្រីហ្វ្លុយអូរ៉ូអាសេទិក ហើយចាប់សញ្ញានៅ 246 nm មិនមែនក្នុងបង់ពន្លឺដែលមើលឃើញទេ។ អត្តសញ្ញាណបានមកពីភាពត្រូវគ្នានៃពេលវេលារក្សាទុកជាមួយសារធាតុស្តង់ដារយោង ហើយការប្រៀបធៀបដូចគ្នានេះផ្តល់ការវាស់បរិមាណសារធាតុគោល។ តេស្តសារធាតុមិនបរិសុទ្ធសរីរាង្គកំណត់ Azure B ដោយប្រើសារធាតុយោងរបស់វាផ្ទាល់ នៅការរក្សាទុកធៀបជិត 0.8 ប្រៀបធៀបនឹងមេទីឡែនប្លូដែលនៅ 1.0 ហើយតម្រូវឱ្យមានកម្រិតបំបែកខ្ពស់រវាងកំពូលសញ្ញាទាំងពីរ។ សូមកត់សម្គាល់ការជ្រើសរើសប្រវែងរលក៖ ស៊េរីសារធាតុដែលខុសគ្នាតាមការដកក្រុមមេទីលស្រូបពន្លឺកាន់តែឆ្ពោះទៅតំបន់ពណ៌ក្រហមជាបន្តបន្ទាប់ ពីធីអូនីននៅជិត 600 nm តាមរយៈ Azure C, Azure A និង Azure B រហូតដល់មេទីឡែនប្លូនៅជិត 670 nm។ ដូច្នេះ ឧបករណ៍ចាប់សញ្ញាដែលកំណត់ថេរនៅជិត 660 nm ឆ្លើយតបមិនស្មើគ្នាចំពោះសារធាតុក្នុងស៊េរីនេះ ហើយវាស់សារធាតុហូម៉ូឡូកមួយចំនួនបានទាបជាងបរិមាណពិត។ នៅពេលចាំបាច់ ការវិភាគទម្រង់ពេញលេញនៃស៊េរីទាំងមូលគួរធ្វើដោយវិធីសាស្ត្រ C18 LC-MS/MS ជាមួយសារធាតុស្តង់ដារដែលបានវាយតម្លៃភាពសមស្របសម្រាប់សារធាតុវិភាគនីមួយៗ។

ឌីហ្វ្រាក់ស្យុងម្សៅឆ្លើយសំណួរអំពីសភាពរឹង ដែលវិធីសាស្ត្រទាំងពីរខាងលើបំផ្លាញព័ត៌មាន ឬមិនបានពិចារណា៖ ការរំលាយម្សៅសម្រាប់ក្រូម៉ាតូក្រាហ្វីលុបបំបាត់ព័ត៌មានអំពីគ្រីស្តាល់ ហើយរំញ័រម៉ូលេគុលបង្ហាញអំពីចំណង ជាជាងការរៀបចំម៉ូលេគុលក្នុងលំដាប់ចម្ងាយវែង។ លំនាំឌីហ្វ្រាក់ស្យុងបែងចែកផាសអ៊ីដ្រាត និងភាពជាគ្រីស្តាល់ ហើយមេទីឡែនប្លូត្រូវការការពិនិត្យនេះច្រើនជាងសារធាតុភាគច្រើន។ ការសិក្សាសភាពរឹងដោយ Rager និងសហការីបានកំណត់រចនាសម្ព័ន្ធអ៊ីដ្រាតខុសគ្នាចំនួនប្រាំ រួមមានប៉ង់តាអ៊ីដ្រាតមួយ ឌីអ៊ីដ្រាតពីរ ម៉ូណូអ៊ីដ្រាតមួយ និងអ៊ីដ្រាតកម្រិតមធ្យមមួយ ហើយមិនបានរកឃើញទ្រីអ៊ីដ្រាតពិតប្រាកដក្នុងចំណោមទម្រង់ដែលបានកំណត់លក្ខណៈឡើយ។ ការចាត់ចែងក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍មានសារៈសំខាន់នៅទីនេះ៖ សំណើមនិងសីតុណ្ហភាពធ្វើឱ្យស្ថិរភាពអ៊ីដ្រាតប្រែប្រួល ហើយការកិនខ្លាំងអាចប្តូរផាស ឬបន្ថយភាពជាគ្រីស្តាល់។ ដូច្នេះ ត្រូវគ្រប់គ្រងនិងកត់ត្រាសំណើមធៀប និងសីតុណ្ហភាព ហើយកិនតិចបំផុតតាមដែលចាំបាច់។ ការដាក់ស្លាកអ៊ីដ្រាត និងឥទ្ធិពលរបស់វាលើម៉ាសដែលថ្លឹង ត្រូវបានពិភាក្សាបន្ថែមក្នុង ទម្រង់អ៊ីដ្រាត និងការដាក់ស្លាកមេទីឡែនប្លូ។

ការស្រូបពន្លឺ UV-Vis ដើរតួនាទីជាជំនួយ។ អតិបរមានៃការស្រូបពន្លឺដែលគេស្គាល់បញ្ជាក់ឥរិយាបថសូលុយស្យុងតាមការរំពឹងទុក និងអនុញ្ញាតឱ្យវាស់កំហាប់បាន។ ប៉ុន្តែសូលុយស្យុងពណ៌ខៀវដែលស្រូបពន្លឺនៅប្រវែងរលករំពឹងទុក គ្រាន់តែស្របនឹងមេទីឡែនប្លូដោយមិនបញ្ជាក់ច្បាស់ថាជាវាឡើយ ព្រោះសារធាតុពណ៌ដែលមានរចនាសម្ព័ន្ធពាក់ព័ន្ធស្រូបពន្លឺនៅប្រវែងរលកក្បែរគ្នា។

អ្វីដែលត្រូវសួរមុនពេលទិញ

បម្លែងភាពខុសគ្នាទាំងនេះទៅជាសំណួរសម្រាប់ការទិញ។ សួរថាឡូត៍ណាត្រូវបានធ្វើតេស្ត បច្ចេកទេសណាបានបញ្ជាក់អត្តសញ្ញាណ តើតេស្តសារធាតុមិនបរិសុទ្ធដោយ HPLC បានប្រើសារធាតុយោង Azure B ឬទេ និងតើទម្រង់អ៊ីដ្រាតត្រូវបានកំណត់លក្ខណៈ ឬគ្រាន់តែសន្មត។ សំខាន់បំផុត សួរថាវិញ្ញាបនបត្រគ្របដណ្តប់លក្ខណៈបច្ចេកទេសពេញលេញ ឬគ្រាន់តែតេស្តដែលបានជ្រើសរើសខ្លះប៉ុណ្ណោះ។ អ្នកលក់ជាច្រើនដែលអះអាងថាអនុលោមតាមឱសថកោស ធ្វើតេស្តតែលោហៈធ្ងន់ប៉ុណ្ណោះ ដែលទុកសំណួរអំពីអត្តសញ្ញាណ បរិមាណសារធាតុគោល សារធាតុមិនបរិសុទ្ធសរីរាង្គ សារធាតុរំលាយ និងមីក្រូសារពាង្គកាយឱ្យនៅគ្មានចម្លើយ។

Blupreme ធ្វើតេស្តលក្ខណៈបច្ចេកទេស USP ពេញលេញ ដែលគ្របដណ្តប់អត្តសញ្ញាណ ភាពបរិសុទ្ធ សារធាតុមិនបរិសុទ្ធសរីរាង្គ សារធាតុរំលាយសំណល់ សារធាតុមិនបរិសុទ្ធជាធាតុ សំណល់ក្រោយដុត កម្រិតកំណត់មីក្រូសារពាង្គកាយ និងអង់ដូតុកស៊ីនបាក់តេរី ដោយសហការជាមួយក្រុមហ៊ុនផលិតមេទីឡែនប្លូសម្រាប់វិស័យឱសថ។ វិញ្ញាបនបត្រវិភាគសាធារណៈសម្រាប់បាច់ផលិតនីមួយៗត្រូវបានផ្សព្វផ្សាយនៅលើ ការធ្វើតេស្តគុណភាពរបស់ Blupreme ដូច្នេះអាចអានមូលដ្ឋាននៃការវាស់បរិមាណសារធាតុគោល និងលទ្ធផលសារធាតុមិនបរិសុទ្ធដោយផ្ទាល់ ជំនួសឱ្យការសន្និដ្ឋានដោយប្រយោល។ លទ្ធផលដែលជិត 100% នៅតែត្រូវបញ្ជាក់មូលដ្ឋានគណនា ដូចដែល មគ្គុទ្ទេសក៍អំពីលទ្ធផលវាស់បរិមាណសារធាតុគោលលើស 100 ភាគរយ ពន្យល់។ ភាពត្រូវគ្នានៃអត្តសញ្ញាណចាប់ផ្តើមការស៊ើបពិនិត្យ។ កំណត់ត្រាពេញលេញបញ្ចប់វា។