Մետիլենային կապույտի և հերպեսվիրուսների մասին պնդումները․ շրթնային հերպես, EBV և վիրուսային ինակտիվացում

Այս քննարկման մեջ մեկ բառով երկու հասկացություն են նշում, որոնք պետք է առանձին անվանումներ ունենան։ Առաջինը վիրիոնի ինակտիվացումն է․ ներկանյութը, թթվածինը և լույսը հեղուկում հանդիպում են վիրուսային մասնիկին ու վնասում այն այնպես, որ այն այլևս չի կարող բազմանալ։ Երկրորդը մարդու վարակման բուժումն է․ շրթնային հերպեսի ավելի քիչ բռնկումներ, ավելի արագ ապաքինում, վիրուսի ավելի քիչ արտազատում կամ Էպշտեյն–Բար վիրուսի ավելի ցածր բեռնվածություն։ Առաջինը լաբորատորիայում բազմիցս ցուցադրվել է պարզ հերպեսի վիրուսի համար։ Երկրորդը չի ցուցադրվել բերանով ընդունվող մետիլենային կապույտի դեպքում՝ ո՛չ պարզ հերպեսի, ո՛չ Էպշտեյն–Բար վիրուսի նկատմամբ։ Երբ այս տարբերակումը հստակ է, գրականությունը հեշտ է դասակարգել։

Դրան զուգահեռ կա նաև երկրորդ շփոթությունը։ HSV-ն և EBV-ն պատկանում են վիրուսների նույն մեծ ընտանիքին, բայց տարբեր հյուսվածքներում տարբեր հիվանդություններ են առաջացնում։ Շրթնային հերպեսը մակերեսային ախտահարում է՝ տեղային լիտիկ բազմացմամբ․ դրա վրա կարելի է ներկանյութ քսել և նույն տեղը լուսավորել։ EBV-ն լատենտ վիճակում պահպանվում է արյան և լիմֆոիդ հյուսվածքի մեջ տարածված B բջջային ռեզերվուարներում, որոնց ամբողջությանը չեն կարող հասնել ո՛չ տեղային ներկանյութը, ո՛չ կարմիր լամպը։ Մի պայմաններում ստացված արդյունքը չի փոխանցվում մյուսին։ Այս դասակարգման ընդհանուր մեթոդով հետաքրքրվող ընթերցողները կարող են այն գտնել մետիլենային կապույտի հետազոտություններն ընթերցելու ուղեցույցում։

Լաբորատոր լուսաինակտիվացում․ արտաբջջային HSV, լույսը պարտադիր է

Ամենավաղ ուղղակի փորձարկման ժամանակ օգտագործվել են թարմ կլինիկական մեկուսացված նմուշներ, ոչ թե մեկ լաբորատոր շտամ։ Հերպեսվիրուս հոմինիսի լուսադինամիկ ինակտիվացման 1975 թվականի հետազոտության ընթացքում սեռական օրգանների և բերանի ախտահարումներից ստացված 37 մեկուսացված նմուշ խառնել են մետիլենային կապույտի հետ՝ 10 միկրոմոլար խտությամբ, մեկ ժամ պահել մթության մեջ, ապա բաժանել մութ և լուսավորվող մասերի․ վերջիններս հինգ րոպե լուսավորվել են երկու 15 վատտ հզորությամբ լյումինեսցենտ խողովակներով՝ 15 cm հեռավորությունից։ 37 նմուշներից 27-ը կորցրել են հայտնաբերելի վարակունակությունը միայն լույսի ազդեցությամբ, իսկ 4-ի վարակունակությունը նվազել է ավելի քան 100 անգամ։ Մթության մեջ պահված վերահսկիչ նմուշները պահպանել են վարակունակությունը․ առանց լույսի այս խտությունը նմուշը չի ստերիլացրել։

Ավելի ուշ հետազոտությունը ցույց տվեց, թե որոշ պայմաններում որքան համեստ կարող է լինել միայն ներկանյութի և լույսի ազդեցությունը։ HSV-1-ի և HSV-2-ի վրա մետիլենային կապույտի, լույսի ու էլեկտրականության ազդեցության 1979 թվականի փորձերում 10 միկրոմոլար ներկանյութը՝ շիկացման լամպի լույսի հետ 180 վայրկյան կիրառվելիս, վարակունակ HSV-1-ի քանակը նվազեցրել է մոտ 60 տոկոսով՝ մոտավորապես 0.4 log։ Միայն փոքր հաստատուն հոսանքի հավելումն է նույն համակարգում ապահովել ավելի քան 99.99 տոկոս նվազում։ Միայն լույսը, միայն հոսանքը և առանց ներկանյութի լույսի ու հոսանքի համակցությունը քիչ ազդեցություն են ունեցել։ Մեծ ազդեցության համար անհրաժեշտ էր էլեկտրական սարքավորումը, ուստի հոդվածը չպետք է մեջբերել որպես ապացույց, թե սովորական ներկանյութն ու լամպը կանոնավոր կերպով ապահովում են չորս log ոչնչացում։

Այնուհետև մեխանիզմներին նվիրված աշխատանքներում ուսումնասիրվել է, թե մշակված մասնիկները դեռ ինչ կարող էին անել։ HSV-ի լուսադինամիկ մեխանիզմների մասին Journal of Clinical Investigation ամսագրի 1980 թվականի հետազոտությունը վիրուսային ԴՆԹ-ում հայտնաբերել է միաշղթա խզումներ՝ առանց երկշղթա խզումների գերակշռության․ մշակված վիրիոնները դեռ կպչում էին բջիջներին և ներթափանցում դրանց մեջ, սակայն հասունացումը կանգ էր առնում։ Մետիլենային կապույտից և լույսից հետո վարակի ցիկլի 1997 թվականի հետազոտությունը դա հաստատել է 1 միկրոմոլար ներկանյութով և կարմիր լույսով․ թաղանթի կոպիտ քայքայում չի եղել, ներթափանցումն ու ԴՆԹ-ի ազատումը պահպանվել են, սակայն բազմացումը վերացել է՝ լուսավորումից կախված ԴՆԹ-ի քայքայմամբ։ Սինգլետ թթվածնի 1995 թվականի համեմատական հետազոտությունը մատնանշել է սինգլետ թթվածնի մասնակցությունը՝ հավանական լրացուցիչ ռադիկալային ռեակցիաներով։ Այն մասին մանրամասները, թե ինչպես է մետիլենային կապույտը կլանում լույսը և առաջացնում թթվածնի ռեակտիվ ձևեր, բացատրում են, թե ինչու ներկանյութը, թթվածինը և ֆոտոնները պետք է միաժամանակ ներկա լինեն թիրախում։

Ամենահստակ քանակական ցուցադրությունը ստացվել է արյան բաղադրիչների վերաբերյալ աշխատանքից, որը նաև ամենահստակ զգուշացումն է արդյունքները չափազանց լայն մեկնաբանելու դեմ։ 627 nm կարմիր LED-երով պլազմայում ախտածինների նվազեցման 2013 թվականի հետազոտության ընթացքում պլազմային ավելացված HSV-ի քանակը 60 րոպե անց նվազել է մոտ 5.2 log-ով՝ 1 միկրոմոլար, և 6.0 log-ով՝ 10 միկրոմոլար խտության դեպքում։ Սա լուսավորվող հեղուկի ախտահանում է, ոչ թե նեյրոններում լատենտ վարակի բուժում, և այն չի կանխատեսում, թե կուլ տված լուծույթն ինչ է անում լույս չստացող մարմնի ներսում։

Ախտահարումների տեղային բուժում․ փոքրածավալ, հին և ոչ միանշանակ տվյալներ

Տեղային կիրառման մասին հաղորդումներում ներկանյութը քսում են ախտահարմանը և լուսավորում այն, ինչը գոնե պահպանում է լաբորատոր պայմանների տարածական կառուցվածքը։ Ամենավաղը հերպետիկ էկզեմայի՝ էկզեմայի տարածուն HSV գերվարակման դեպքի նկարագրությունն է։ Մետիլենային կապույտի և լույսի կիրառմամբ հերպետիկ էկզեմայի մասին 1975 թվականի հաղորդումը նկարագրել է արագ բարելավում տեղային ներկանյութի և լույսի կիրառման հետևանքով․ 10 միկրոմոլար ներկանյութը լույսի տակ վիրուսասպան էր, բայց ոչ մթության մեջ։ Մեկնաբանության մեջ նշվել է տարածքի կեսի վրա 0.1 տոկոսանոց լուծույթի կիրառումը՝ նույն պացիենտի ներսում համեմատություն կատարելու համար։ Որպես շրթնային հերպեսի վերաբերյալ ապացույց՝ սա այդ ժամանակաշրջանի մեկ պացիենտի դիտարկում է՝ թերի դոզիմետրիայով։

Ավելի մեծ պատմական շարքը վերաբերում էր սեռական օրգանների ախտահարումներին։ Սեռական հերպեսով 56 պացիենտների 1975 թվականի շարքում 36-ը ստացել են մետիլենային կապույտ, բայց միայն առաջին 35-ն էին պատահական բաշխվել երեք ներկանյութերի միջև, ուստի այս խումբը լիարժեք պատահականացված փորձարկում չէր։ Հաղորդվել է, որ բուժված կրկնվող դեպքերի մոտ 70 տոկոսի վիճակը բարելավվել է մոտավորապես 48 ժամվա ընթացքում, սակայն ռեցիդիվների հաճախականությունը էապես չի նվազել։ Տանը լյումինեսցենտ լույսով կամ արևի լույսով լուսավորումը վերահսկված չէր։ Ընթացիկ դրվագի բարելավումը՝ առանց կրկնությունների նվազման, համահունչ է տեղային միջամտությանը, որն ազդում է ներկա ախտահարման, բայց ոչ լատենտ ռեզերվուարի վրա։ Նույն զգուշությունը վերաբերում է մետիլենային կապույտ օգտագործող լուսադինամիկ թերապիայի արձանագրություններին։

Շրթնային հերպեսի ժամանակակից փորձարկումները փոքրածավալ են և չեն հանգում միատեսակ արդյունքների։ 2009 թվականի՝ շրթնային հերպեսով չորս պացիենտների շարքում օգտագործվել է 0.01 տոկոսանոց ներկանյութ՝ 660 nm լազերով և 120 J մեկ քառակուսի cm-ի համար, ու հաղորդվել է արագ ապաքինում, սակայն վերահսկիչ խումբ չի եղել, իսկ հետո կիրառվել է ֆոտոբիոմոդուլյացիա, ինչպես նկարագրված է շրթնային հերպեսի լուսադինամիկ բուժման դեպքերի 2009 թվականի շարքում։ 75 պացիենտների պատահական բաշխումը լուսադինամիկ բուժման, տեղային ացիկլովիրի կամ երկուսի համակցման խմբերի միջև չի ցույց տվել ապաքինման ժամանակի կամ ցավի տարբերություն՝ ըստ լուսադինամիկ թերապիայի և ացիկլովիրի 2021 թվականի փորձարկման։ HSV-1-ի qPCR-ով 24 պացիենտների պատահականացված փորձարկումը չի հայտնաբերել ախտահարման վերացման կամ մեկ տարվա ընթացքում կրկնության տարբերություն, ինչպես նկարագրված է պարզ հերպեսի հակամանրէային լուսադինամիկ թերապիայի 2025 թվականի պատահականացված փորձարկման մեջ։ 2025 թվականի՝ 60 պացիենտների փորձարկումը, որն ուսումնասիրել է ներկանյութով լուսադինամիկ բուժման, ֆոտոբիոմոդուլյացիայի և բշտիկների դրենավորման համակցությունը, հայտնել է ցավի ավելի արագ մեղմացում, որը չի կարելի վերագրել ներկանյութին՝ ըստ համակցված լուսադինամիկ բուժման և ֆոտոբիոմոդուլյացիայի 2025 թվականի հաղորդման։

Այստեղ անցանկալի ազդեցությունների մասին տվյալները սակավ են։ 1975 թվականի հոդվածներում բացակայում է դրանց հայտնաբերման ժամանակակից մոտեցումը։ Հետագա փոքր հետազոտություններում հաղորդվել են քիչ սուր ազդեցություններ կամ դրանց բացակայություն, սակայն կապույտ ներկումը անխուսափելի է, իսկ տեղային լուսաթունավոր գրգռումը մնում է հնարավոր։ Ներկումն ու լամպի կիրառումը տարբերվում են ներկանյութը կուլ տալուց, ուստի մետիլենային կապույտի անվտանգության տվյալների ակնարկը կիրառման ուղիները դիտարկում է առանձին։

EBV․ մետիլենային կապույտի վերաբերյալ ուղղակի ապացույցներ չկան

EBV-ի դեպքում որոնումը ցույց է տալիս տվյալների բացակայություն։ Այս ակնարկի համար հայտնաբերված ոչ մի գրախոսված փորձ կամ վերահսկվող փորձարկում չի ցույց տալիս, որ մետիլենային կապույտը՝ լույսով կամ առանց լույսի, նվազեցնում է EBV-ի վարակունակությունը, ճնշում վերաակտիվացումը կամ նվազեցնում մարդկանց վիրուսային բեռնվածությունը։ EBV-դրական քիթըմպանային կարցինոմայի բջիջների վերաբերյալ աշխատանքներում օգտագործվում են այլ լուսազգայունացնող նյութեր և չափվում է ուռուցքային բջիջների կենսունակությունը, ոչ թե մետիլենային կապույտով վիրուսի վերացումը։ Ակնարկներում EBV-ն նշվում է հետագա փորձարկումներ պահանջող վիրուսների շարքում, ոչ թե հաստատված ցուցումների։

Կենսաբանությունը բացատրում է, թե ինչու չի կարելի փոխառել փորձանոթում HSV-ի համար ստացված արդյունքը։ Շրթնային հերպեսի բուժման ժամանակ բոլոր երեք անհրաժեշտ բաղադրիչները՝ ներկանյութը, թթվածինը և ֆոտոնները, տեղակայվում են մեկ հասանելի մակերեսի վրա։ EBV-ի լատենտ վարակը հիմնականում պահպանվում է արյան և լիմֆոիդ հյուսվածքի մեջ տարածված B բջիջներում։ Տեղային կարմիր լույսը չի կարող լուսավորել այդ տարածված ռեզերվուարը, իսկ կուլ տված ներկանյութն այդ վայրերում նպատակային լույս չի ապահովում։ Այլ լուսազգայունացնող նյութով EBV-դրական ուռուցքային բջիջ սպանելը բջջի ոչնչացում է, ոչ թե հակավիրուսային ակտիվության ապացույց։ Այդ բացը կարևոր է, երբ կարդում ենք, թե իրականում ինչպես են չափվում վիրուսային բեռնվածությունն ու վերաակտիվացման ցուցիչները։

Բերանային բուժումը և առանց կրկնությունների շրջանի թյուր եզրակացությունը

Այս ակնարկի համար հայտնաբերված ոչ մի վերահսկվող մարդկային փորձարկում չի ցույց տալիս, որ համակարգային կամ բերանով ընդունվող մետիլենային կապույտը նվազեցնում է շրթնային հերպեսի կրկնությունները, կրճատում ապաքինման ժամանակը, նվազեցնում վիրուսի արտազատումը կամ փոխում EBV-ի որևէ վերջնակետ, օրինակ՝ արյան կամ թքի ԴՆԹ-ի պատճենների քանակը կամ սահմանված լիտիկ ցուցիչները։ Մարդու հերպեսի վերաբերյալ գրականության մեջ օգտագործվում է տեղային ներկանյութ՝ տեղային լույսով։ Առանց նպատակային լուսավորման համակարգային կիրառումը այլ միջամտություն է և պահանջում է իր առանձին փորձարկումը՝ պատահականացված, կույր և պլացեբո-վերահսկվող, հաստատված կրկնվող դեպքերով, ելակետային հաճախականությունը որոշելու նախնական դիտարկման շրջանով, նախապես սահմանված ազդեցության ստուգումներով, վեցից տասներկու ամսվա հսկողությամբ, qPCR-ով հաջորդական քսուքների քննությամբ, հրահրող գործոնների գրանցմամբ և անվտանգության վերահսկմամբ։ Մետիլենային կապույտի բերանային դեղաչափման և ներծծման ընդհանուր սկզբունքները չեն փոխարինում այդ վերջնակետերին։

Հենց այստեղ է սովորական պատմությունը կորցնում հիմնավորվածությունը։ Ինչ-որ մեկը միաժամանակ սկսում է մի քանի միջամտություն, հայտնում է, որ ամիսներ շարունակ շրթնային հերպես չի ունեցել, և դա վերագրում դրանցից մեկին։ HSV-ի դրվագները խմբվում են, ապա ամիսներով անհետանում՝ առանց զգայական հանգույցներից վիրուսի վերացման։ Հրահրող գործոնները փոխվում են, ակնկալիքն ազդում է հաղորդումների վրա, իսկ միայն պատահականությունն էլ կարող է ընդմիջումներ առաջացնել։ Միաժամանակ մի քանի փոփոխության դեպքում չկա հակափաստական համեմատություն, որը թույլ կտա այդ ընդմիջումը վերագրել մեկ բաղադրիչի։ Սեռական հերպեսի 1975 թվականի շարքը ցույց տվեց հակառակ պատկերը՝ ընթացիկ դրվագի բարելավում՝ առանց ռեցիդիվների հաճախականության բարելավման։ Այս բռնկման ապաքինումը նույն հասկացությունը չէ, ինչ հաջորդի կանխարգելումը։

Ապացույցների աղյուսակ՝ ըստ վիրուսի և կիրառման պայմանների

Ինչպես օգտագործել այս ապացույցները

Յուրաքանչյուր մեջբերվող աշխատանքի վերաբերյալ տվեք չորս հարց։ Լո՞ւյս, թե՞ մթություն, քանի որ լուսադինամիկ ոչնչացումը չի կանխատեսում համակարգային ոչնչացում։ Ազատ վիրիոննե՞ր, առկա ախտահարո՞ւմ, թե՞ լատենտ ռեզերվուար, քանի որ պնդմանը պատասխանում է միայն համապատասխան թիրախը։ Վարակունակությո՞ւն, ապաքինո՞ւմ, կրկնությո՞ւն, թե՞ վիրուսային բեռնվածություն, քանի որ վարակունակության ցուցանիշը չի կարող պատասխանել կրկնության հարցին։ HSV, թե՞ EBV, քանի որ հասանելի ախտահարումն ու տարածված B բջջային ռեզերվուարը տարբեր խնդիրներ են։ Տվյալները հաստատում են մեկ նեղ պնդում․ մետիլենային կապույտը կարող է ուժեղ լուսաինակտիվացնել HSV-ն, երբ արտաբջջային վիրուսը հանդիպում է ներկանյութին, թթվածնին և համապատասխան լույսին։ Կրկնվող ախտահարումների կլինիկորեն նշանակալի բուժման ապացույցները սահմանափակ են և ոչ միանշանակ, բերանային կանխարգելման ապացույցները բացակայում են, իսկ EBV-ի դեմ ազդեցության ուղղակի ապացույցներ չկան։ Մի քանի բուժման համակցված կիրառման ընթացքում առանց շրթնային հերպեսի հանգիստ շրջանը դրանցից ոչ մեկը չի փոխում։