क्या मेथिलीन ब्लू कैंसर का कारण बनता है? विषविज्ञान साक्ष्य

मेथिलीन ब्लू ने दीर्घकालिक पशु प्रयोगों में ट्यूमर से जुड़े संकेत और आनुवंशिक क्षति के कई प्रयोगशाला परीक्षणों में सकारात्मक परिणाम दिए हैं। इन निष्कर्षों पर ध्यान देना उचित है। वे यह स्थापित नहीं करते कि किसी विशेष एक्सपोज़र के बाद किसी व्यक्ति में कैंसर विकसित होने की कितनी संभावना है।

2016 में प्रकाशित IARC मूल्यांकन ने मेथिलीन ब्लू को Group 3 में रखा, जिसका अर्थ है कि मनुष्यों में इसकी कार्सिनोजेनिसिटी को वर्गीकृत नहीं किया जा सका। कार्यसमूह के पास मानव कैंसर संबंधी डेटा नहीं था और उसने पशु-साक्ष्य को सीमित माना। Group 3 का अर्थ यह नहीं है कि इसे हानिरहित सिद्ध कर दिया गया है। इसी तरह, पशुओं में मिला कोई निष्कर्ष हर प्रकार के मानव एक्सपोज़र को कैंसर का सिद्ध कारण नहीं बना देता।

तीन प्रश्न जिनके अलग-अलग उत्तर आवश्यक हैं

कार्सिनोजेनिसिटी ट्यूमर के विकास से संबंधित है। दीर्घकालिक पशु अध्ययन किसी परिभाषित एक्सपोज़र के बाद ट्यूमर के पैटर्न का पता लगा सकता है। जीनोटॉक्सिसिटी आनुवंशिक पदार्थ की क्षति या उससे संबंधित कोशिकीय घटनाओं से संबंधित है। किसी म्यूटेशन परीक्षण में सकारात्मक परिणाम चेतावनी का संकेत देता है, लेकिन वह सीधे मनुष्यों में कैंसर के मामलों की संख्या नहीं बताता। मानव जोखिम वास्तविक एक्सपोज़र परिस्थितियों में हानि होने की संभावना से संबंधित है।

इन प्रश्नों के लिए अलग-अलग माप आवश्यक हैं। बैक्टीरियल म्यूटेंट की गिनती करना, चूहे की रक्त कोशिकाओं की जांच करना और नेक्रोप्सी में ट्यूमर का निदान करना एक-दूसरे के बदले उपयोग किए जा सकने वाले एंडपॉइंट नहीं हैं। इसी तरह, कोई उपचार प्रयोग यह दिखाए कि कोई पदार्थ कैंसर कोशिकाओं को क्षति पहुंचाता है, तो इससे यह स्थापित नहीं होता कि बार-बार एक्सपोज़र स्वस्थ ऊतक में ट्यूमर की शुरुआत कर सकता है। कैंसर अनुसंधान में मेथिलीन ब्लू पर अलग चर्चा उपचार संबंधी दावों को संबोधित करती है।

अध्ययन तुलना: वास्तविक दीर्घकालिक एक्सपोज़र

मुख्य प्रयोग में मेथिलीन ब्लू trihydrate का उपयोग किया गया, जिसे 0.5% जलीय methylcellulose में oral gavage द्वारा दिया गया, यानी एक नली के माध्यम से पेट में मापी हुई मात्रा पहुंचाई गई। प्रत्येक दीर्घकालिक अध्ययन के खुराक समूह में हर प्रजाति के 50 नर और 50 मादा शामिल थे। Auerbach और सहकर्मियों की अध्ययन रिपोर्ट के अनुसार, प्रशासन दो वर्षों तक प्रति सप्ताह पांच दिन किया गया।

तालिका NTP के प्रजाति-विशिष्ट निष्कर्षों को यथावत दर्शाती है। मात्राएं खुराक दिए जाने वाले दिनों में परीक्षण की गई सामग्री के मिलीग्राम प्रति किलोग्राम पशु शरीर भार हैं, मानव उपयोग की सिफारिशें नहीं। शून्य-खुराक वाले पशुओं को vehicle दिया गया।

मॉडल	खुराक समूह, mg/kg	प्रशासन मार्ग और अवधि	NTP निष्कर्ष और संबंधित परिणाम
नर F344/N चूहे	0, 5, 25, 50	Oral gavage; पांच दिन/सप्ताह; दो वर्ष	कुछ साक्ष्य: अग्न्याशयी islet-cell adenomas और संयुक्त adenoma/carcinoma में वृद्धि हुई।
मादा F344/N चूहे	0, 5, 25, 50	समान कार्यक्रम	इन परिस्थितियों में कार्सिनोजेनिक गतिविधि का कोई साक्ष्य नहीं।
नर B6C3F1 चूहे	0, 2.5, 12.5, 25	Oral gavage; पांच दिन/सप्ताह; दो वर्ष	कुछ साक्ष्य: छोटी आंत के carcinoma और संयुक्त adenoma/carcinoma में वृद्धि हुई। Malignant lymphoma भी संबंधित हो सकता था।
मादा B6C3F1 चूहे	0, 2.5, 12.5, 25	समान कार्यक्रम	अनिश्चित साक्ष्य: malignant lymphoma में मामूली वृद्धि।

“कुछ साक्ष्य” NTP की एक श्रेणी है, जो सकारात्मक प्रयोगात्मक निष्कर्ष को दर्शाती है, लेकिन जिसकी साक्ष्य-शक्ति “स्पष्ट साक्ष्य” से कम होती है। “अनिश्चित” किसी निष्कर्ष की अनिश्चितता को दर्शाता है। ये श्रेणियां साक्ष्य की शक्ति बताती हैं, जोखिम का प्रतिशत या किसी कार्सिनोजेन की क्षमता की रैंकिंग नहीं।

नर चूहों का परिणाम लगातार बढ़ती सीढ़ी जैसा नहीं था। अग्न्याशयी islet adenoma या carcinoma 4/50 नियंत्रण पशुओं में और बढ़ती खुराकों पर क्रमशः 9/50, 14/50 और 8/50 पशुओं में पाया गया। प्रकाशित शोध-पत्र केवल मध्य खुराक के लिए सांख्यिकीय महत्व की रिपोर्ट करता है। इसलिए एक सरल सीधी-रेखा वाली व्याख्या सटीक नहीं है; इससे यह भी स्थापित नहीं होता कि सबसे अधिक खुराक सुरक्षात्मक थी। Adenoma एक सौम्य ट्यूमर है, जबकि carcinoma घातक होता है। संयुक्त एंडपॉइंट का वर्णन इस तरह नहीं किया जाना चाहिए मानो गिना गया हर ट्यूमर कैंसर था।

अलग-अलग सारांश विरोधाभासी क्यों लगते हैं

वर्तमान PROVAYBLUE prescribing information नर चूहों में अग्न्याशय संबंधी निष्कर्षों की रिपोर्ट करता है, लेकिन चूहों में दवा से संबंधित neoplastic निष्कर्षों का वर्णन नहीं करता। शोध-पत्र कहता है कि चूहों में neoplastic वृद्धि सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण नहीं थी, हालांकि उसमें सकारात्मक रुझान दर्ज किए गए। इसके बावजूद NTP ने चूहों के लिए ऊपर दिखाई गई श्रेणियां निर्धारित कीं।

IARC का पशु-अध्ययन विश्लेषण एक महत्वपूर्ण सांख्यिकीय अंतर स्पष्ट करता है: नर चूहों में आंत संबंधी निष्कर्षों में खुराक के साथ महत्वपूर्ण रुझान थे, लेकिन नियंत्रण समूहों के साथ जोड़ीवार तुलना में अलग-अलग खुराक समूह महत्वपूर्ण नहीं थे। सभी खुराकों में समग्र पैटर्न का परीक्षण करना प्रत्येक समूह को अलग-अलग जांचने से भिन्न है। पाठकों को स्रोत और उसकी मूल शब्दावली को बनाए रखना चाहिए, न कि इन सभी निष्कर्षों को केवल “चूहों में कैंसर विकसित हुआ” या “चूहे का अध्ययन नकारात्मक था” में समेट देना चाहिए। इनमें से कोई भी मापा हुआ मानव कैंसर दर प्रदान नहीं करता।

अध्ययन तुलना: आनुवंशिक क्षति के एंडपॉइंट

NTP Technical Report 540 का genetic toxicology अनुभाग अलग प्रकार के प्रयोगों का वर्णन करता है। S9 एक प्रयोगशाला मिश्रण है जिसमें यकृत एंजाइम होते हैं और जिसका उपयोग metabolic activation का मॉडल बनाने के लिए किया जाता है। इसकी उपस्थिति किसी कोशिका परीक्षण को पूरे शरीर के एक्सपोज़र अध्ययन में नहीं बदलती।

परीक्षण प्रणाली	वास्तविक एक्सपोज़र परिस्थितियां	मापा गया एंडपॉइंट और परिणाम
बैक्टीरियल म्यूटेशन परीक्षण, परीक्षण किया गया दूसरा lot	Salmonella: 0.25–150 µg/plate; E. coli: 0.25–1,500 µg/plate; rat-liver S9 के साथ और बिना	परीक्षण किए गए strains में mutations बढ़े।
संवर्धित Chinese hamster ovary कोशिकाएं	Sister-chromatid exchange परीक्षण में S9 के बिना 0.17–2.5 µg/mL, S9 के साथ 5 µg/mL तक; chromosome-aberration परीक्षण में 4.7–22 µg/mL का उपयोग हुआ	Exchange और chromosome-aberration के सकारात्मक परिणाम।
नर चूहे, तीव्र प्रयोग	एकल intraperitoneal injection: 25, 50 या 150 mg/kg; 48 घंटे पर नमूने	marrow या blood में micronucleated erythrocytes में कोई वृद्धि नहीं।
नर और मादा चूहे, दोहराया गया प्रयोग	Oral gavage: 25, 50, 100 या 200 mg/kg; तीन महीनों तक पांच दिन/सप्ताह	peripheral-blood micronucleated erythrocytes में कोई वृद्धि नहीं।

Micronucleus एक छोटा अतिरिक्त nuclear body है, जो कोशिका विभाजन के दौरान chromosome टूटने या chromosome के खोने को दर्शा सकता है। नकारात्मक blood-cell assay उन नमूना ली गई कोशिकाओं में उसी विशेष प्रश्न का उत्तर देता है। यह हर अंग में हर प्रकार की DNA क्षति को बाहर नहीं कर सकता। इसके विपरीत, सकारात्मक cultured-cell assay यह नहीं बताता कि किसी व्यक्ति के ऊतकों में कौन-सी concentration पहुंची।

Prescribing information भी यही समग्र पैटर्न दर्ज करता है: सकारात्मक bacterial और cultured-cell परीक्षण तथा नकारात्मक mouse micronucleus परीक्षण। मेथिलीन ब्लू को केवल “genotoxic” या “non-genotoxic” कहना ऐसी जानकारी हटा देता है जो व्याख्या के लिए महत्वपूर्ण है।

मानव एक्सपोज़र के लिए इसका क्या अर्थ है

ये अध्ययन मनुष्यों के लिए सत्यापित कैंसर-सुरक्षित दैनिक सीमा प्रदान नहीं करते। किसी चूहे की खुराक को शरीर-भार के किसी factor से विभाजित करने पर absorption, metabolism, route, exposure frequency या lifetime duration में अंतर हल नहीं होंगे। उससे केवल परिवर्तित मात्रा मिलेगी, सुरक्षा का प्रमाण नहीं।

दो वर्षों का gavage प्रयोग और थोड़े समय का चिकित्सकीय निगरानी में दिया गया intravenous उपचार अलग-अलग प्रश्न पूछते हैं। यह अंतर सीधे संख्यात्मक extrapolation को रोकता है; इससे पशु-अध्ययनों के निष्कर्ष समाप्त नहीं हो जाते। उपयोगी आकलन के लिए सटीक compound और formulation, मात्रा, route, frequency, duration और उपयोग का कारण देखना आवश्यक है। “कुछ बूंदें” concentration और मापे गए volume, दोनों की जानकारी छोड़ देता है।

यदि मेथिलीन ब्लू किसी चिकित्सकीय कारण से दिया गया था, तो केवल ट्यूमर संबंधी निष्कर्ष यह निर्धारित नहीं कर सकते कि उस उपचार के लाभ उसके जोखिमों से अधिक थे या नहीं। यदि बार-बार वैकल्पिक उपयोग पर विचार किया जा रहा है, तो मापा न गया दीर्घकालिक कैंसर जोखिम शून्य नहीं बताया जाना चाहिए। अधिक तात्कालिक मुद्दों, जिनमें दवा interactions और haemolysis के प्रति susceptibility शामिल हैं, पर दुष्प्रभाव और contraindications में चर्चा की गई है।

आगे पढ़ने के लिए, मानव अध्ययनों को पशु और कोशिका प्रयोगों से अलग करने हेतु research library का उपयोग करें। प्रत्येक शोध-पत्र के लिए मूल प्रश्न यह है कि उसने किस एक्सपोज़र का परीक्षण किया और वास्तव में कौन-सा outcome मापा।