Metileno urdina eta ALS: zergatik aldatzen diren emaitzak eredu esperimentalen arabera

Metileno urdinari eta ALSri buruz bilatuz gero, elkarren aurkakoak diruditen bi baieztapen aurkituko dituzu. Batak dio tindagai urdinak neuronak babestu zituela ALS ereduetan. Besteak dio ez zuela ezer egin ALS sagu-eredu batean. Bi baieztapenek benetako artikulu zientifikoak aipatzen dituzte, eta bi artikuluak serio hartzekoak dira. Kontraesana desagertu egiten da esperimentu bakoitzaren atzean dagoen ideia argitzen denean: eredua bera da baieztapenaren esparrua.

Zizare batean lortutako emaitza zizare bati buruzko baieztapena da. Arrain-larba batean lortutako emaitza arrain-larba bati buruzko baieztapena da. Bietako bat ere ez da paziente bati buruzko baieztapena, ugaztun baten gaixotasunaren bilakaerak hori berresten duen arte. Artikulu honek gehien aipatutako bi lanak parez pare alderatzen ditu, haien erantzunak zergatik diren desberdinak ikus dezazun.

Bi esperimentuak taula bakarrean

Eduki taula hau eskura irakurtzen duzun bitartean. Ikerketen arteko alde garrantzitsu guztiak bertan jasota daude.

Genetika desberdina da, espezieak desberdinak dira, administrazio-bidea desberdina da, unea desberdina da eta ebaluazio-irizpideak desberdinak dira. Genotipoa bost aldeetako bat baino ez da; beraz, bi ikerketek ezin dute frogatu metileno urdinak modu selektiboan funtzionatzen duenik ALSren bide batean. Zerbait mugatuagoa baina baliagarria frogatzen dute: eredu sinpleetan esposizio zuzen eta goiztiarrarekin lortutako berreskurapen handia ez zen ugaztun baten gaixotasunaren bilakaerara hedatu ahozko administrazio kronikoarekin.

Emaitza positiboa: zizareen eta arrainen ikerketak erakutsi zuena

2012ko zizareen eta arrainen ikerketan, giza TDP-43 edo FUS mutatua adierazarazi zuten zizareen neurona motorretan, eta giza mRNA mutatua injektatu zuten arrain-enbrioietan. Proteotoxikotasun-ereduak dira horiek. Proteina mutatuak mugimenduan eta neuronen forman egun gutxiren buruan dituen ondorio toxikoak erreproduzitzen dituzte, ez gizaki helduen ALSren urteetako bilakaera osoa.

Tratamendua oso goiz hasi zen. Zizareak metileno urdina zuen agarrean hazi ziren eklosiotik aurrera. Arrain-enbrioiak farmakoaren disoluzioan egon ziren gau osoan, ernalketatik 24 ordura hasita, eta portaera gutxi gorabehera bi egun geroago probatu zen. Ez zegoen farmakoaren eta neuronaren arteko hesi hematoentzefalikorik ugaztunetan dagoen moduan, eta ez zen farmakoaren mailarik neurtu plasman edo garunean.

Baldintza horietan, ondorioak handiak eta koherenteak izan ziren. Bai 6 bai 60 μM-k adinaren araberako paralisia murriztu zuten TDP-43 eta FUS zizareetan. Helduaroko 12. egunean, tratatu gabeko TDP-43 zizareen ehuneko 80 inguru paralizatuta zeuden; eklosiotik tratatutako zizareetan, aldiz, ehuneko 10 inguru. Saiakuntza sinaptiko batek ere norabide bera erakutsi zuen: TDP-43 zizareak hipersentikorrak ziren aldikarbarekiko, transmisio neuromuskularra aztertzeko erabiltzen den farmako batekiko, eta metileno urdinak erantzuna ohiko mailarantz eraman zuen. Endekatzen ari ziren neurona motorren luzakinen kopurua jaitsi egin zen, eta eragin argiena 60 μM-rekin ikusi zen. Arrainetan, ukimenak eragindako igeriketa nabarmen hobetu zen, eta laburtutako axoi motorrak berriro hazi ziren ohiko luzerarantz 30 edo 60 μM-rekin, nahiz eta berreskurapena partziala izan, ez osoa.

Estres oxidatiboaren datuak interpretazio antioxidatzailearekin bat datoz. Zizare eta arrain mutanteek oxigeno-espezie erreaktiboen neurketa-balio altuak zituzten, eta tratamenduarekin jaitsi egin ziren; gainera, metileno urdina jasotzen zuten zizare normalek tratatu gabekoek baino askoz gehiago iraun zuten bizirik eraso prooxidatzaile baten aurrean. Baina bi muga garrantzitsu daude. TDP-43 eta FUS proteina mutatuen maila totalak ez ziren jaitsi, eta ikerketak ez zituen zuzenean kuantifikatu proteina-agregatuak; beraz, berreskurapen funtzionala erakusten du, baina ez du frogatzen agregatuak ezabatu zirenik. Redox eta mitokondrioei buruzko hipotesiak normalean nola planteatzen diren ezagutzen duenak mekanismoak babesa duela ulertu behar du, baina ez dagoela behin betiko argituta.

Tratamendua hasteko unea izan zen xehetasunik argigarriena. Egileek helduaroko 5. egunera arte itxaron zutenean tratamendua hasteko, 12. eguneko paralisi-tasa ehuneko 55 ingurukoa izan zen, eklosiotik tratatutakoen ehuneko 10 ingurukoaren aldean. Farmako bera, zizare bera, mutazio bera, baina askoz eragin txikiagoa. Itxurazko onuraren zati handi bat esposizio profilaktiko goiztiarrari zegokion.

Emaitza nulua: SOD1 saguen ikerketak erakutsi zuena

2011ko saguen ikerketak galdera zailago bat planteatu zuen sistema zorrotzago batean. SOD1 G93A sagu kongenikoen gaixotasunak atzeko gorputz-adarretako dardaratik aurrera egiten du, ibileraren narriadura eta zuzentze-erreflexuaren galera igarota, aurrez definitutako azken ebaluazio-puntu batera iritsi arte. Tratamendua sintomak agertu aurretik hasi zen, 45. egunean, eta egunero jarraitu zuen; behatzaileek egoera neurologikoa 0 eta 6 arteko eskalan puntuatu zuten. Gaixotasunaren bilakaera osoa aztertzen duen esperimentua da; horregatik, paziente bati axola litzaiokeenetik hurbilago dago zizare baten edozein paralisi-kurba baino.

Emaitza nagusiak nuluak izan ziren. Sintomen agerpen orokorra 121 egunetan gertatu zen kontrol-taldean eta 124 egunetan metileno urdinarekin; aldea ez zen esanguratsua. Azken faserainoko biziraupena 167 egunekoa izan zen, eta 170 egunekoa, hurrenez hurren; alde hori ere ez zen esanguratsua. Bigarren mailako analisi batzuek tratamenduaren alde egin zuten: emeetan sintomen agerpena 7 egun inguru atzeratu zen, eta tratatutako animaliek denbora zertxobait gehiago eman zuten fase arinetan eta gutxiago fase larrietan. Sexuaren araberako azpitaldeak txikiak zirenez eta faseen arteko alderaketak ugariak zirenez, emaitza horiek hipotesiak sortzeko balio dute, ez froga gisa. Ez zen neuronen zenbaketarik, SOD1 agregazio-saiakuntzarik, ezta oxidazio- edo hantura-markatzailerik neurtu ere; beraz, ikerketak ezin du argitu farmakoa bere jomugetara iritsi eta huts egin zuen, edo dosi horretan jomugetan eraginik izan ez zuen. Dosi bakarra probatu zen.

Egileek berek nabarmendu zuten mugarik sakonena, bi norabideetan aplikatzen dena. SOD1 G93A-ren kopia kopuru handiko ereduak ondo irudikatzen du SOD1 toxikoak eragindako gaixotasuna, baina SOD1 gaixotasuna ALS familiarraren zati txiki bat da, eta haren biologia kasu esporadiko gehienenaz bestelakoa da. Farmako hautagaiak TDP-43-n oinarritutako ugaztun-ereduetan berriro probatzea proposatu zuten. Proposamen hori konplexuagoa bihurtu da ordutik, zizareen eta arrainen ikerketaren egileek aipatzen baitute metileno urdinari buruzko beste TDP-43 sagu-ikerketa batek ere ez zuela emaitza motorrik hobetu. Beraz, konposatu batek eragin handia erakuts dezake TDP-43 sistema batean, eta batere ez beste TDP-43 sistema batean. Sistemak geneak bezainbesteko garrantzia du.

Zergatik zizare edo arrain batean hobetzeak ezin duen pazienteentzako onura frogatu

Ulertu eredu bakoitza galdera desberdin bati erantzuten dion sistema gisa.

Lehenik, biologia desberdina da. TDP-43 eta FUS azido nukleikoak lotzen dituzten proteinak dira, eta elkarrekintza genetiko batzuk partekatzen dituzte sistema sinple horietan; SOD1-ren toxikotasunak, berriz, neurri batean desberdinak diren hurbileko mekanismoen bidez jarduten du. Estres proteotoxiko bat arintzen duen farmakoak ez du zertan bestea arindu, eta enbrioiaren gainadierazpenaren aurkako arrakastak ez du zertan helduen neuroendekapen motelaren aurkako arrakasta aurreikusi, hantura, gliaren parte-hartzea eta narriadura sistemikoa tartean direnean.

Bigarrenik, esposizioa desberdina da. Kontzentrazio mikromolarretan bainu bidezko etengabeko esposizioa ez da ahozko administrazioaren baliokidea. Hesteetako xurgapena, lehen igarotzeko metabolismoa, plasmako proteinei lotzea, garunera sartzea eta eliminazioa: prozesu horiek guztiak daude irentsitako dosiaren eta bizkarrezur-muineko neurona motor baten artean. Bi ikerketetako batek ere ez zuen farmakoaren mailarik neurtu nerbio-sisteman; beraz, ezin dute batean erabilitako kontzentrazioa bestearekin lotu.

Hirugarrenik, tratamenduaren unea desberdina da. Zizare eta arrainetan ikusitako onurak patologia metatu aurretik tratamendua hastearen mende zeuden neurri handi batean. Saguen tratamendua ere sintomak agertu aurretik hasi zen, eta hori indargune bat da; gizakien tratamendua, ordea, ia beti sintomak agertu ondoren hasiko litzateke, are beranduago, beraz. Bi eguneko enbrioien saiakuntza batean ikusitako seinale profilaktikoa ikerketarako abiapuntua da, ez erabilera klinikoaren eredua.

Laugarrenik, ebaluazio-irizpideak desberdinak dira. 12 eguneko paralisia, aldikarbari sentikortasuna, axoiaren luzera mikrometrotan eta igerian egindako distantzia fenotipo proximalak dira. Ugaztun batean sintomen agerpenak eta biziraupenak gorputzeko konpentsazio- eta konplikazio-prozesu guztiak barne hartzen dituzte. Farmakoek maiz aldatzen dituzte neurketa proximalak biziraupena aldatu gabe; horregatik erabiltzen dira ugaztunetan gertaera bat gertatu arteko denboran oinarritutako ebaluazio-irizpideak.

Hurrengo albiste nabarmena aztertzeko kontrol-zerrenda bat nahi duten irakurleek ikerketa preklinikoak nola irakurri artikulukoa erabil dezakete: galdetu zer espezie eta transgene erabili ziren, zer dosi eta administrazio-bide, farmakoaren mailak neurtu ote ziren, tratamendua noiz hasi zen patologiaren garapenarekiko, ebaluazio-irizpidea epe laburreko fenotipo bat ala gaixotasunaren bilakaera zen, eta eragina bigarren laborategi batean erreproduzitu ote zen. Metileno urdinari buruzko gizakien ebidentzia-multzo zabalagoa da oraindik seinale goiztiar horietakoren bat datu kliniko bihurtu den egiaztatzeko erreferentzia.

Zer esan nahi duen horrek pazienteentzat eta familientzat

Artikulu horietatik ez da eratortzen ALSrako metileno urdinaren protokolo finkaturik. Ikerketa positiboak TDP-43 eta FUS biologian mekanismo oxidatibo eta sinaptikoak gehiago ikertzea babesten du. Emaitza nuluko ikerketak, berriz, SOD1 motako gaixotasunean esposizio horretako ahozko administrazio kronikoak gaixotasunaren bilakaera aldatuko duelako itxaropenaren aurka egiten du. Biek batera ereduen arteko koherentziarik eza deskribatzen dute, ez tratamendu-gomendio bat.

Segurtasunak eraginkortasunak bezain ikuspegi zuhurra merezi du. Saguetan egindako ALS ikerketek ez dute ezer esaten gizakientzako dosi seguruei buruz, eta metileno urdinak benetako arriskuak ditu: hemolisia G6PD gabeziaren kasuan, eta serotoninaren toxikotasuna farmako serotonergikoekin konbinatzen denean. G6PD gabeziaren susmoa, antidepresiboen egungo erabilera eta medikazioan aurreikusitako edozein aldaketa osasun-profesional batekin eztabaidatu behar dira; era berean, metileno urdinaren segurtasunari buruzko datu orokorrak berrikusi behar dira laborategiko emaitzei buruzko albisteetan oinarrituta ezer egin aurretik.

Ondorio nagusia esaldi bakarrean laburbil daiteke. Metileno urdinak esposizio goiztiarrarekin berreskurapen handia eragin zuen TDP-43 eta FUS zizareen eta arrain-larben fenotipoetan, eta ia ez zuen onurarik ekarri sintomen agerpenean edo biziraupenean ahozko administrazio kronikoko SOD1 sagu-ikerketa batean; beraz, interpretazio zintzoa da ebidentzia ereduaren araberakoa dela eta ez duela pazienteengan erabiltzea babesten.