Artikkel
Metüleensinine ja herpesviiruseid puudutavad väited: ohatis, EBV ja viiruste inaktiveerimine
Selles arutelus tähistab üks sõna kahte mõistet, mis vajavad eraldi nimetusi. Esimene on virioni inaktiveerimine: värvaine, hapnik ja valgus puutuvad vedelikus kokku viirusosakesega ning kahjustavad seda nii, et see ei saa paljuneda. Teine on inimesel esineva nakkuse ravi: vähem ohatisi, kiirem paranemine, väiksem viiruse eritumine või madalam Epsteini-Barri viiruse koormus. Esimest on herpes simplex’i viiruse puhul laboris korduvalt näidatud. Teist ei ole suukaudse metüleensinise puhul näidatud ei herpes simplex’i ega Epsteini-Barri viiruse vastu. Kui see erinevus on selge, on kirjandust lihtne liigitada.
Sellega kaasneb teinegi segadus. HSV ja EBV kuuluvad samasse suurde viiruste sugukonda, kuid põhjustavad eri kudedes erinevaid haigusi. Ohatis on pindmine kahjustus, milles toimub kohalik lüütiline replikatsioon: sellele saab kanda värvainet ja sama kohta valgustada. EBV püsib latentsena veres ja lümfoidkoes hajusalt paiknevates B-rakkude reservuaarides, millele ei pääse tervikuna ligi ükski paikne värvaine ega punase valguse lamp. Ühes keskkonnas saadud tulemus ei kandu üle teise. Lugejad, kes soovivad tutvuda selle liigitamise üldise meetodiga, leiavad selle metüleensinise uuringute lugemise juhendist.
Laboratoorne fotoinaktiveerimine: rakuväline HSV, valgus on vajalik
Varaseimas otseses katses kasutati ühe laboritüve asemel värskeid kliinilisi isolaate. 1975. aasta herpesvirus hominis’e fotodünaamilise inaktiveerimise uuringus segati 37 genitaal- ja suupiirkonna kahjustustest saadud isolaati metüleensinisega kontsentratsioonil 10 mikromolaari, hoiti üks tund pimedas ning jagati seejärel pimedusse jäävaks ja valgustatavaks osaks. Valgustatavat osa hoiti viis minutit kahe 15-vatise luminofoortoru all 15 cm kaugusel. 37 isolaadist 27 kaotasid tuvastatava nakkusvõime ainult valguses ning 4 puhul vähenes nakkusvõime enam kui 100 korda. Pimedas hoitud kontrollproovid säilitasid nakkusvõime: ilma valguseta ei steriliseerinud see kontsentratsioon proovi.
Hilisem uuring näitas, kui tagasihoidlik võib mõnes olukorras olla üksnes värvaine ja valguse toime. 1979. aasta katsetes metüleensinise, valguse ja elektriga HSV-1 ja HSV-2 puhul vähendas 10 mikromolaarne värvaine koos hõõglambi valgusega 180 sekundi jooksul nakkusvõimelise HSV-1 hulka umbes 60 protsenti ehk ligikaudu 0.4 log. Alles nõrga alalisvoolu lisamine suurendas samas süsteemis vähenemise üle 99.99 protsendi. Valgus üksi, vool üksi ning valgus koos vooluga ilma värvaineta avaldasid vähe mõju. Suur toime eeldas elektriseadet, mistõttu ei tohiks seda artiklit tsiteerida tõendina, et tavaline värvaine ja lamp annavad tavapäraselt nelja log ühiku suuruse inaktiveerimise.
Seejärel uuriti mehhanismi käsitlevates töödes, mida töödeldud osakesed veel teha suutsid. 1980. aasta ajakirjas Journal of Clinical Investigation avaldatud uuring HSV fotodünaamilise inaktiveerimise mehhanismidest leidis viiruse DNA-s üheahelalisi katkeid, ilma et kaheahelalised katkestused oleksid olnud ülekaalus: töödeldud virionid kinnitusid endiselt rakkudele ja sisenesid neisse, kuid küpsemine peatus. 1997. aasta uuring nakkustsüklist pärast metüleensinise ja valgusega töötlemist kinnitas seda 1 mikromolaarse värvaine ja punase valgusega: ulatuslikku ümbrise hävimist ei täheldatud, rakku sisenemine ja DNA vabanemine säilisid, kuid replikatsioon lakkas ning DNA lagunemine sõltus valgustamisest. 1995. aasta singletse hapniku võrdlusuuring osutas singletse hapniku rollile koos tõenäoliselt lisanduvate radikaalreaktsioonidega. Selgitus selle kohta, kuidas metüleensinine neelab valgust ja tekitab reaktiivseid hapnikuühendeid, aitab mõista, miks värvaine, hapnik ja footonid peavad sihtmärgil korraga kokku saama.
Kõige selgem kvantitatiivne tõendus pärineb vereproduktide uuringutest, mis annavad ühtlasi kõige selgema hoiatuse liigse üldistamise eest. 2013. aasta uuringus plasma patogeenide vähendamise kohta 627 nm punaste LED-idega vähenes plasmasse lisatud HSV hulk 60 minuti järel ligikaudu 5.2 log võrra 1 mikromolaarse ja 6.0 log võrra 10 mikromolaarse kontsentratsiooni korral. See on valgustatud vedeliku saastest puhastamine, mitte neuronites püsiva latentse nakkuse ravi, ning see ei ennusta, mida teeb allaneelatud lahus pimedas organismis.
Kahjustuste paikne ravi: väikesed ja vanad uuringud, vastuolulised tulemused
Paikse ravi kirjeldustes kantakse kahjustusele värvainet ja valgustatakse seda, mis vähemalt säilitab laborikatse ruumilise ülesehituse. Varaseim neist on haigusjuhu kirjeldus herpeetilisest ekseemist ehk ekseemile lisandunud ulatuslikust HSV-nakkusest. 1975. aasta kirjeldus metüleensinise ja valguse kasutamisest herpeetilise ekseemi korral teatas kiirest paranemisest pärast paikse värvaine ja valguse kasutamist; 10 mikromolaarne värvaine oli viiruseid inaktiveeriv valguses, kuid mitte pimedas. Kommentaaris täpsustati, et patsiendisisese võrdluse jaoks kasutati poolel kahjustatud alal 0.1-protsendilist lahust. Ohatise ravi tõendina on see tolleaegne ühe patsiendi vaatlus, mille dosimeetria oli puudulik.
Suurem ajalooline juhtude sari käsitles genitaalpiirkonna kahjustusi. 1975. aasta genitaalherpese uuringus 56 patsiendiga said 36 metüleensinist, kuid ainult esimesed 35 jaotati juhuslikult kolme värvaine vahel, mistõttu ei olnud kogu kohort korrektselt randomiseeritud uuring. Ligikaudu 70 protsendil ravitud korduvatest juhtudest teatati paranemisest umbes 48 tunni jooksul, kuid taastekete sagedus oluliselt ei vähenenud. Kodune valgustamine luminofoorvalguse või päikesevalgusega oli kontrollimata. Ägeda episoodi paranemine ilma taastekete vähenemiseta sobib kokku paikse protseduuriga, mis mõjutab olemasolevat kahjustust, kuid mitte latentset reservuaari. Sama ettevaatus kehtib metüleensinist kasutavate fotodünaamilise ravi protokollide puhul.
Tänapäevased ohatise uuringud on väikesed ega anna ühtseid tulemusi. 2009. aasta nelja huuleherpesega patsiendi juhtude sarjas kasutati 0.01-protsendilist värvainet koos 660 nm laseriga energiatihedusel 120 J ruutsentimeetri kohta ning teatati kiirest paranemisest, kuid kontrollrühm puudus ja sellele järgnes fotobiomodulatsioon, nagu kirjeldab 2009. aasta huuleherpese fotodünaamilise ravi juhtude sari. 75 patsiendi juhuslikul jaotamisel fotodünaamilise ravi, paikse atsükloviiri või mõlema rühma ei leitud erinevust paranemisajas ega valus, nagu näitab 2021. aasta fotodünaamilise ravi ja atsükloviiri uuring. 24 patsiendiga randomiseeritud uuringus, kus kasutati HSV-1 qPCR-i, ei leitud erinevust kahjustuste taandumises ega taastekkes ühe aasta jooksul; seda kirjeldab 2025. aasta randomiseeritud uuring antimikroobse fotodünaamilise ravi kohta herpes simplex’i korral. 2025. aasta 60 patsiendiga uuringus, kus kombineeriti värvainega fotodünaamilist ravi, fotobiomodulatsiooni ja villide tühjendamist, teatati kiiremast valu leevenemisest, mida ei saa omistada värvainele, nagu selgub 2025. aasta kombineeritud fotodünaamilise ravi ja fotobiomodulatsiooni aruandest.
Kõrvaltoimete kajastus on siin napp. 1975. aasta artiklites puudub tänapäevane süstemaatiline kõrvaltoimete tuvastamine. Hilisemates väikestes uuringutes teatati vähestest ägedatest kõrvaltoimetest või ei teatatud neist üldse, kuid siniseks värvumine on vältimatu ning paikne fototoksiline ärritus on endiselt võimalik. Värvumine koos lambi kasutamisega erineb värvaine allaneelamisest, mistõttu käsitleb metüleensinise ohutusülevaade manustamisviise eraldi.
EBV: otsesed tõendid metüleensinise kohta puuduvad
EBV puhul otsing otseseid tõendeid ei anna. Ükski selle ülevaate jaoks leitud eelretsenseeritud katse ega kontrollitud uuring ei näita, et metüleensinine koos valgusega või ilma selleta vähendaks EBV nakkusvõimet, pärsiks taasaktiveerumist või langetaks inimestel viiruskoormust. EBV-positiivseid ninaneelukartsinoomi rakke käsitlevates töödes kasutatakse teisi fotosensibilisaatoreid ja mõõdetakse kasvajarakkude eluvõimelisust, mitte viiruse kõrvaldamist metüleensinisega. Ülevaadetes loetletakse EBV nende viiruste hulgas, mille puhul on vaja tulevasi uuringuid, mitte kinnitatud näidustuste seas.
Bioloogia selgitab, miks ei saa HSV katseklaasitulemust üle kanda. Ohatise ravi viib kõik kolm vajalikku komponenti — värvaine, hapniku ja footonid — ühele ligipääsetavale pinnale. Latentne EBV paikneb peamiselt veres ja lümfoidkoes hajusalt asuvates B-rakkudes. Paikne punane valgus ei saa seda hajusat reservuaari tervikuna valgustada ning allaneelatud värvaine ei taga neis kohtades suunatud valgust. EBV-positiivse kasvajaraku hävitamine teise fotosensibilisaatoriga tähendab raku hävitamist, mitte tõendit viirusevastase toime kohta. See erinevus on oluline, kui lugeda, kuidas viiruskoormust ja taasaktiveerumise markereid tegelikult mõõdetakse.
Suukaudne ravi ja taastekketa ajavahemiku eksijäreldus
Ükski selle ülevaate jaoks leitud kontrollitud inimuuring ei näita, et süsteemne või suukaudne metüleensinine vähendaks ohatise taasteket, kiirendaks paranemist, vähendaks viiruse eritumist või muudaks mõnd EBV tulemusnäitajat, näiteks DNA koopiate hulka veres või süljes või määratletud lüütilisi markereid. Inimeste herpesnakkusi käsitlevas kirjanduses kasutatakse paikset värvainet koos kohaliku valgusega. Süsteemne manustamine ilma suunatud valgustamiseta on teine sekkumine ja vajab oma uuringut: randomiseeritud, pimendatud ja platseebokontrolliga, kinnitatud korduvate juhtudega, eelperioodiga algse esinemissageduse määramiseks, eelnevalt määratletud sekkumisega kokkupuute kontrollidega, kuue kuni kaheteistkümne kuu pikkuse jälgimisega, korduvate tampooniproovide ja qPCR-iga, vallandavate tegurite registreerimisega ning ohutuse jälgimisega. Metüleensinise suukaudse manustamise ja imendumise üldpõhimõtted ei asenda neid tulemusnäitajaid.
Siin ei pea paika üks levinud lugu. Keegi alustab korraga mitut sekkumist, teatab, et ohatisi pole olnud kuid, ning omistab selle ühele neist. HSV episoodid esinevad sageli kobaratena ja kaovad siis kuudeks, ilma et viirus sensoorsetest ganglionidest kõrvaldataks. Vallandavad tegurid muutuvad, ootused mõjutavad sümptomitest teatamist ning juhus üksi tekitab vaheaegu. Mitme samaaegse muutuse korral puudub võrdlusolukord, mis lubaks omistada selle vaheaja ühele komponendile. 1975. aasta genitaalherpese juhtude sari näitas vastupidist mustrit: ägeda episoodi paranemine koos muutumatu taastekete sagedusega. Praeguse ägenemise paranemine ei ole sama mis järgmise ennetamine.
Tõendite tabel viiruse ja uuringukeskkonna järgi
| Viirus ja uuringukeskkond | Sekkumine | Peamine tulemus | Mida see ei saa näidata |
|---|---|---|---|
| HSV isolaadid, rakuvaba keskkond, 1975, n=37 | 10 mikromolaarne värvaine, luminofoorlamp 5 min | 27 inaktiveeriti valguses täielikult, 4 puhul vähenemine üle 100 korra, pimedas kontrollproovid muutuseta | Kliiniline paranemine, latentse nakkuse kõrvaldamine, inimeste annustamine |
| HSV-1 ja HSV-2 virionid, 1979 | 10 mikromolaarne värvaine, hõõglambi valgus 180 s, elektrivooluga ja ilma | Värvaine ja valgus üksi andsid umbes 60-protsendilise vähenemise; üle 99.99 protsendi ainult lisatud vooluga | Et tavaline värvaine ja lamp annavad maksimaalse inaktiveerimise |
| HSV genoomi kahjustamise mehhanism, 1980 ja 1997 | Madal mikromolaarne värvainekontsentratsioon koos valgusega | Rakku sisenemine säilis, üheahelaline DNA kahjustus, replikatsioon blokeeritud, lagunemine sõltus valgustamisajast | Juba nakatunud rakkude otsene hävitamine |
| HSV inimese plasmas, 2013 | 1 ja 10 mikromolaarne värvaine, 627 nm LED-id, 60 min | Ligikaudu 5.2 ja 6.0 log vähenemine | Suukaudne ravi või mõju neuronites püsivale latentsele nakkusele |
| Herpeetiline ekseem, 1975, haigusjuhu kirjeldus | Paikne 0.1-protsendiline lahus poolele alale koos valgusega | Teatati kiirest kliinilisest ja viroloogilisest paranemisest | Üldine tõhusus ohatise korral; valgustusdoosi ei saa taastada |
| Genitaalherpes, 1975, 56 patsienti | Paikne 0.1-protsendiline lahus, luminofoorvalgus või päikesevalgus kodus | Ligikaudu 70 protsendil ägeda episoodi paranemine; taastekked oluliselt ei vähenenud | Taastekke ennetamine |
| Huuleherpes, 2009, n=4 | 0.01 protsenti, 660 nm, 120 J ruutsentimeetri kohta, seejärel fotobiomodulatsioon | Teatati kiirest paranemisest | Värvaine põhjuslik toime; taastekete kohta puudub tõlgendus |
| Korduv huuleherpes, 2021, n=75 | 0.005-protsendiline fotodünaamiline ravi vs atsükloviir vs mõlemad | Paranemisajas ega valus erinevust ei olnud | Viirusevastane virionide inaktiveerimine |
| Suupiirkonna herpes simplex, 2025, n=24 | Antimikroobne fotodünaamiline ravi vs atsükloviir, koos qPCR-iga | Kahjustuste taandumises ega taastekkes ühe aasta jooksul erinevust ei olnud | Süsteemne kasu või kasu EBV puhul |
| Korduv huuleherpes, 2025, n=60 | Kombineeritud fotodünaamiline ravi, fotobiomodulatsioon, villide tühjendamine | Valu kiirem leevenemine kombineeritud ravi rühmas | Metüleensinise toime eraldi |
| EBV, mis tahes inimesi hõlmav uuringukeskkond | Metüleensinise mis tahes manustamisviis | Otsest uuringut ei leitud; mõju viiruskoormusele ega taasaktiveerumisele pole näidatud | HSV fotoinaktiveerimise ülekandmine EBV tõendiks |
| Süsteemne või suukaudne kasutamine HSV või EBV puhul | Suukaudne või süsteemne värvaine ilma suunatud valguseta | Kontrollitud viirusevastase toime uuringut ei leitud | Kliiniline või viroloogiline kasu |
Kuidas neid tõendeid kasutada
Esitage iga viidatud uuringu kohta neli küsimust. Valgus või pimedus, sest fotodünaamiline inaktiveerimine ei ennusta süsteemset inaktiveerimist. Vabad virionid, olemasolev kahjustus või latentne reservuaar, sest väitele vastab ainult sellega sobiv sihtmärk. Nakkusvõime, paranemine, taasteke või viiruskoormus, sest nakkusvõime näitaja ei saa vastata taasteket puudutavale küsimusele. HSV või EBV, sest ligipääsetav kahjustus ja hajus B-rakkude reservuaar on erinevad probleemid. Tõendid toetavad üht kitsast väidet: metüleensinine võib HSV-d tõhusalt fotoinaktiveerida, kui rakuväline viirus puutub kokku värvaine, hapniku ja sobiva valgusega. Tõendid korduvate kahjustuste kliiniliselt olulise ravi kohta on piiratud ja vastuolulised, tõendid suukaudse ennetuse kohta puuduvad ning otsesed tõendid EBV-vastase toime kohta puuduvad. Ohatisteta rahulik ajavahemik mitme ravi samaaegse kasutamise ajal ei muuda sellest midagi.