Adnabod glas methylen yn y labordy: sbectra isgoch a dulliau cyflenwol

Dychmygwch fod tri labordy yn derbyn yr un powdr glas. Mae'r cyntaf yn cofnodi sbectrwm isgoch ac yn datgan mai glas methylen ydyw. Mae'r ail yn cynnal cromatograffaeth ac yn adrodd 0.4% Azure B. Mae'r trydydd yn diffreithio pelydrau-X oddi ar y crisialau ac yn enwi ffurf hydrad. Mae'r tri yn gywir, ac nid oes yr un ohonynt wedi ateb y ddau gwestiwn arall. Mae dryswch yn dechrau pan ddehonglir un canlyniad fel pe bai'n ateb y tri.

Mae'r erthygl hon yn gwahanu'r cwestiynau hynny. Mae adnabod drwy isgoch yn cadarnhau hunaniaeth foleciwlaidd yn erbyn safon gyfeirio. Mae cromatograffaeth yn cadarnhau cyfansoddiad. Mae diffreithiant yn cadarnhau ffurf y cyflwr solid. Nid yw cyfatebiaeth sy'n pasio prawf adnabod yn dystysgrif purdeb.

Mae adnabod drwy isgoch yn ateb un cwestiwn yn dda

Mae prawf adnabod glas methylen yn y ffarmacopoea yn gymhariaeth rhwng sbectrwm a safon, nid yn rhestr wirio o frigau. Yn ôl rhagolwg monograff USP ar las methylen, mae Identification A yn cyfeirio at sbectrosgopeg isgoch gan ddefnyddio naill ai opteg ATR neu belen potasiwm bromid. Rhaid i sbectrwm y sampl gyfateb i sbectrwm safon gyfeirio USP, gyda'r sampl a'r safon wedi'u paratoi a'u cofnodi o dan amodau cyfatebol. Nid oes rhestr sefydlog o rifau ton diagnostig yn pennu'r dyfarniad. Arosodiad y sbectra sy'n gwneud hynny.

Mae'r dewis hwn wrth lunio'r prawf yn adlewyrchu sut mae sbectra FTIR glas methylen yn ymddwyn. Mae'r nodweddion cryfaf yn y rhanbarth ôl bys. Mae aseiniadau yn y llenyddiaeth yn gosod y prif fand cylch cyfunedig yn gyson ger 1590 i 1600 cm-1, lle mae moddau ymestyn aromatig carbon-carbon a charbon-nitrogen yn cyplysu. Mae bandiau eraill ger 1490 a 1390 cm-1 yn cynnwys nodweddion anffurfio cylchoedd, carbon-nitrogen a charbon-hydrogen. Mae bandiau ger 1355 a 1330 cm-1 yn ymwneud â bondiau carbon-nitrogen dimethylamino ac anffurfiadau methyl. Mae nodweddion ger 1225 i 1250 cm-1 yn perthyn i'r fframwaith heterocylchol, tra bo bandiau ger 1170 i 1130 a 1066 cm-1 yn cynnwys nodweddion carbon-sylffwr, gyda phlygu C-H aromatig ger 880 cm-1. Mae moddau ymestyn yn ymddangos yn uwch: C-H aromatig ger 3040 cm-1 a N-methyl C-H rhwng tua 2900 a 3000 cm-1. Mae aseiniadau cyhoeddedig yn amrywio yn eu manylion oherwydd bod y sgerbwd ffenothiasiniwm yn dirgrynu fel system gypledig, felly dylid trin unrhyw dabl aseiniadau unigol fel yr hyn a adroddwyd, nid fel yr unig ddehongliad posibl.

Mae dwy effaith paratoi yn haeddu sylw oherwydd eu bod yn newid sbectra IR glas methylen heb newid y llifyn. Yn gyntaf, mae deunydd hydradedig yn dangos amlen O-H eang tua 3300 i 3500 cm-1 ynghyd â phlygu dŵr ger 1630 i 1640 cm-1, ac mae gwahanol ffurfiau hydrad yn symud bandiau ôl bys i raddau mesuradwy. Yn ail, mae matrics y belen KBr yn hygrosgopig: mae lleithder a amsugnir yn cynhyrchu bandiau yn yr union ranbarthau dŵr hynny a gall ymddangos fel dŵr hydrad o'r sampl. Mae samplu ATR yn osgoi'r matrics KBr, ond mae dwyseddau ATR yn graddio yn ôl dyfnder treiddio sy'n dibynnu ar rif ton, felly ni ellir arosod sbectrwm ATR a sbectrwm trawsyrru o'r un powdr yn uniongyrchol. Mae'r rheol ymarferol yn dilyn gofyniad y ffarmacopoea: cymharwch sampl a safon gyfeirio a gofnodwyd gan ddefnyddio'r un dechneg, a dogfennwch pa un a ddefnyddiwyd. Am gemeg sylfaenol y catïon, yr halen a'r hydradau y tu ôl i'r sbectra hyn, gweler y cyfeirnod ar strwythur a phriodweddau glas methylen.

Tabl dewis dull dadansoddol

Mae'r tabl hwn yn offeryn dewis. Darllenwch ar draws rhes i weld pa gwestiwn y mae dull yn ei ateb, beth mae canlyniad sy'n pasio yn ei gadarnhau, a beth sy'n parhau heb ei brofi.

Pam nad yw cyfatebiaeth isgoch yn dystysgrif purdeb

Mae cyfatebiaeth adnabod yn diystyru'r llifyn anghywir. Nid yw'n rhestru cynnwys y sampl. Tri chyfyngiad sydd bwysicaf.

Yn gyntaf, mae cyfansoddion sy'n perthyn yn agos yn edrych yn debyg yn yr isgoch. Mae Azure B yn wahanol i las methylen o un grŵp methyl yn unig, felly mae ei sbectrwm yn debyg iawn i sbectrwm glas methylen. Mae cymysgedd sy'n cynnwys ychydig y cant o Azure B yn dal i arosod yn dda ar safon gyfeirio glas methylen. Gwaith cromatograffaeth yw canfod yr amhuredd hwnnw, fel yr eglurir yn y canllaw ar amhureddau glas methylen a dulliau profi.

Yn ail, mae sbectrosgopeg isgoch yn dechneg sy'n mesur y sampl yn ei chyfanrwydd, gyda sensitifrwydd cyfyngedig i fân gydrannau. Mae symiau bach o liwiau cysylltiedig, toddyddion gweddilliol neu weddillion anorganig yn cuddio o dan y prif fandiau. Mae absenoldeb brigau ychwanegol yn dystiolaeth wan o absenoldeb amhureddau.

Yn drydydd, y safon gyfeirio sy'n rheoli'r gymhariaeth gyfan. Mae safon sydd wedi diraddio, y mae ei sbectrwm wedi symud oherwydd hydradiad, neu sydd wedi'i thrin yn amhriodol yn newid sail y prawf. Mae paru technegau anghyfatebol yn gwneud yr un peth, er enghraifft barnu sbectrwm sampl ATR yn erbyn safon gyfeirio KBr. Cofnodwch lot y safon, y dechneg a'r dull paratoi ochr yn ochr â phob dyfarniad.

Mae cymysgeddau yn ychwanegu rhybudd olaf. Nid yw sbectrwm sy'n cyfateb yn bennaf, ond sydd ag ysgwyddau neu anghysondebau dwysedd, yn ganlyniad sy'n pasio gyda throednodiadau. Mae'n arwydd bod angen gwahanu'r sampl cyn ei adnabod.

Dulliau cyflenwol yn ymarferol

Mae HPLC glas methylen yn rhoi'r ateb am gyfansoddiad na all isgoch ei roi. Mae dull presennol y ffarmacopoea yn defnyddio colofn o'r math ffenyl gyda graddiant dŵr-asetonitril sy'n cynnwys asid trifflworoasetig, ac yn canfod ar 246 nm, nid yn y band gweladwy. Daw'r adnabod o gyfatebiaeth amser cadw â'r safon gyfeirio; mae'r un gymhariaeth yn darparu'r prawf cynnwys. Mae'r prawf amhureddau organig yn aseinio Azure B gan ddefnyddio ei ddeunydd cyfeirio ei hun, gyda chadw cymharol ger 0.8 yn erbyn glas methylen ar 1.0, ac yn mynnu cydraniad uchel rhwng y ddau frig. Sylwch ar y dewis o donfedd: mae'r gyfres dadfethyleiddio yn amsugno'n gynyddol ymhellach tuag at y coch, o thionin ger 600 nm drwy Azure C, Azure A ac Azure B hyd at las methylen ger 670 nm. Felly mae canfodydd sydd wedi'i osod ger 660 nm yn ymateb yn anghyfartal ar draws y gyfres ac yn tanamcangyfrif rhai homologau. Pan fo angen proffilio'r gyfres gyfan yn llawn, dylid defnyddio dull C18 LC-MS/MS gyda safonau cymwysedig ar gyfer pob analytyn.

Mae diffreithiant powdr yn ateb y cwestiwn am y cyflwr solid y mae'r ddau ddull uchod naill ai'n dinistrio'r wybodaeth amdano neu'n ei anwybyddu: mae hydoddi'r powdr ar gyfer cromatograffaeth yn dileu gwybodaeth am y crisialau, ac mae dirgryniadau moleciwlaidd yn adrodd am fondiau yn hytrach na phacio ystod hir. Mae patrymau diffreithiant yn gwahaniaethu rhwng cyfnodau hydrad a chrisialogrwydd, ac mae angen y craffu hwn ar las methylen yn fwy nag ar y rhan fwyaf o ddeunyddiau. Nododd gwaith ar y cyflwr solid gan Rager a chydweithwyr bum strwythur hydrad gwahanol, gan gynnwys pentahydrad, dau ddeuhydrad, monohydrad a hydrad canolraddol, ac ni chanfuwyd unrhyw drihydrad gwirioneddol ymhlith y ffurfiau a nodweddwyd. Mae trin yn y labordy yn bwysig yma: mae lleithder a thymheredd yn newid sefydlogrwydd hydradau, a gall malu'n ymosodol newid y cyfnod neu ddiraddio crisialogrwydd, felly rheolwch a dogfennwch y lleithder cymharol a'r tymheredd, a chadwch falu i'r lleiafswm. Trafodir labelu hydradau a'i effaith ar y màs a bwysir ymhellach yn ffurfiau hydrad glas methylen a labelu.

Mae amsugniad UV-Vis yn chwarae rôl ategol. Mae'r uchafbwyntiau cyfarwydd yn cadarnhau ymddygiad disgwyliedig yr hydoddiant ac yn galluogi gwaith ar grynodiad, ond mae hydoddiant glas sy'n amsugno ar y donfedd ddisgwyliedig yn gyson â glas methylen heb brofi mai dyna ydyw, gan fod llifynnau cysylltiedig yn amsugno gerllaw.

Beth i'w ofyn cyn prynu

Trowch y gwahaniaethau hyn yn gwestiynau prynu. Gofynnwch pa lot a brofwyd, pa dechneg a gadarnhaodd hunaniaeth, a ddefnyddiodd y prawf amhureddau HPLC ddeunydd cyfeirio Azure B, ac a nodweddwyd ffurf yr hydrad neu a gymerwyd hi'n ganiataol. Yn anad dim, gofynnwch a yw'r dystysgrif yn cwmpasu'r fanyleb lawn neu ddim ond profion dethol. Mae llawer o werthwyr sy'n honni cydymffurfiaeth â'r ffarmacopoea yn profi metelau trwm yn unig, sy'n gadael y cwestiynau am hunaniaeth, cynnwys, amhureddau organig, toddyddion a microbau heb eu hateb.

Mae Blupreme yn profi'r fanyleb USP lawn, gan gwmpasu hunaniaeth, purdeb, amhureddau organig, toddyddion gweddilliol, amhureddau elfennol, gweddillion ar ôl tanio, terfynau microbaidd ac endotocsinau bacteriol, mewn partneriaeth â gwneuthurwr fferyllol glas methylen. Cyhoeddir y dystysgrif ddadansoddi gyhoeddus ar gyfer pob swp ar brofion ansawdd Blupreme, fel y gellir darllen sail y prawf cynnwys a chanlyniadau'r amhureddau yn uniongyrchol yn hytrach na'u casglu drwy ddyfalu. Mae angen nodi sail cyfrifo canlyniadau ger 100% o hyd, fel yr eglura'r canllaw ar ganlyniadau prawf cynnwys uwchlaw 100 y cant. Mae cyfatebiaeth adnabod yn agor yr ymchwiliad. Mae'r cofnod llawn yn ei gau.