Метиленово синьо за намаляване на патогените в плазмата: как протича процесът

Метиленовото синьо може да помогне за намаляване на патогените в дарената плазма, когато е част от контролирана система за обработка. Обработката се извършва извън тялото, преди плазмата да бъде освободена за кръвопреливане. Тя съчетава определено оборудване, контакт с багрилото, осветяване, филтрация и проверки на получения кръвен компонент.

Това разграничение определя значението на доказателствата. Проучване, което показва, че дадена система за обработка намалява инфекциозния вирус в сак с плазма, установява резултат за този материал и процес. То не установява, че приемът на метиленово синьо лекува инфекция при човек.

Клинично значимият въпрос също има две страни: какво намаляване на патогените постига процесът и каква част от полезната функция на плазмата се запазва?

Започнете с плазмата, а не с неопределен кръвен продукт

Плазмата е течният кръвен компонент, който съдържа белтъци, включително фактори на кръвосъсирването. Не бива да се приема, че система за обработка на плазма е подходяща за цяла кръв, еритроцитни концентрати или тромбоцитни компоненти. Тези материали имат различен състав и различни функции, които трябва да се запазят.

Като конкретен пример, системата THERAFLEX MB-Plasma на Macopharma обработва единици плазма от отделни донори. Документираната ѝ последователност включва намаляване на клетките, добавяне на метиленово синьо, осветяване, отстраняване на багрилото и съхранение. Производителят описва различни конфигурации за плазма, получена от цяла кръв, и за по-големи количества, събрани чрез афереза. Следователно изходният материал и комплектът за еднократна употреба имат значение още преди началото на осветяването.

„Плазма с метиленово синьо“ е описание на обработен компонент, а не пълна спецификация. За полезно сравнение трябва да се посочат системата, конфигурацията, източникът на плазмата и версията на инструкциите за работа.

Проследете материала през обработката и оценката

Илюстрацията по-горе разграничава етапите. Тази съпътстваща таблица обяснява приноса на всеки етап и какво той не може да установи самостоятелно.

Таблицата е ръководство за разбиране на валидиран процес, а не заместител на работна процедура. По-специално, филтърът за отстраняване и светлинният източник изпълняват различни задачи. Macopharma описва Blueflex като средство за намаляване на метиленовото синьо и неговите производни, включително азурни съединения и тионин. Твърдението за отстраняване на химични вещества трябва да се разбира като измерено намаляване, а не като обещание, че не остава нито една молекула.

Защо светлинният източник е част от интервенцията

Метиленовото синьо е фотоактивно. Осветяването може да причини химично увреждане на биологични мишени, поради което комбинацията е изследвана за инактивиране на вируси. В проучването на Mohr и колеги върху фенотиазинови багрила и светлина промяната на светлинния източник повлиява както инактивирането на вирусите, така и увреждането на плазмените белтъци.

Това изключва една честа прибързана преценка: името на багрилото да се приема като описание на цялата интервенция. Различна лампа, сак, оптичен път или материал могат да променят експозицията. По-общото ръководство за начина, по който се изследва фотодинамичната обработка с метиленово синьо, обяснява защо съставът и осветяването трябва да бъдат включени в едно и също описание.

Температурата е особено показателен пример. Проучване от 2018 г. за обработка с THERAFLEX при различни температури сравнява плазма при приблизително 5°C, 22°C и 30°C. При най-ниската температура изследователите наблюдават по-лошо разтваряне на таблетката и по-слабо инактивиране на трите изследвани вируса. По-високите температури увеличават промените във времето на съсирване и загубата на активност на факторите на кръвосъсирването.

Тези резултати не определят нов работен диапазон. Те обясняват защо кръвният център трябва да използва посочените условия: подобряването на един резултат чрез промяна на даден параметър може да влоши друг.

Коя част от системата е намалила микроорганизма?

Намаляването на патогените, измерено след целия процес, не може автоматично да се припише само на активираното от светлина багрило.

В проучване от 2015 г. с умишлено замърсена плазма изследователите вземат проби от материала след отделните етапи на обработка. Филтрацията за отстраняване на клетки допринася за голяма част от намаляването на бактериите. За малката бактерия Brevundimonas diminuta този първи етап постига намаляване с 1.7 логаритмични единици; последващата светлинна обработка и филтрацията за отстраняване на багрилото довеждат общото намаляване до най-малко 3.7 логаритмични единици, под границата на откриване на анализа.

Това е резултат за комбинирана система. Той не показва, че обикновен разтвор на метиленово синьо води до същото намаляване на бактериите. Разграничението важи и при разглеждане на по-широкия кръг изследвания на антимикробното действие на метиленовото синьо.

Логаритмичното намаляване описва съотношението между измереното начално и оставащо количество инфекциозен материал. Намаляване с три логаритмични единици означава хилядократно намаляване. „Под границата на откриване“ означава, че анализът не е могъл да определи количествено остатъка при своите условия на изпитване. Това не е доказателство за абсолютна стерилност или универсална активност срещу неизследвани микроорганизми. Видът на вируса, началният товар, матрицата на пробата и чувствителността на анализа остават необходими части от твърдението.

Запазете функцията, за която ще се използва плазмата

Един процес може да намали инфекциозността, като същевременно променя белтъци с клинично значение. Затова измерването само на намаляването на патогените оставя оценката непълна.

В сравнение от 2014 г. на източници на плазма и времена на обработка степента на запазване на фактор VIII след обработка с метиленово синьо варира от 78% до 89% в различните серии на проучването. Запазването зависи от източника на плазмата, а изследователите оценяват и фибриногена. Това са лабораторни измервания върху обработения компонент. Те не са проценти на клинична ефективност при пациенти.

Да разгледаме две единици плазма с различни начални нива на факторите. Дори ако по време на обработката запазят една и съща част от активността си, крайните им нива ще се различават. Обратно, по-високият процент на запазване не означава непременно по-висока крайна концентрация. Разглеждайте както измерванията преди и след обработката, така и приложимата спецификация за освобождаване.

Резултатите при пациенти изискват друг вид доказателства. Проучване на качеството на компонента не може само по себе си да установи равностоен контрол на кървенето, нужда от кръвопреливане или честота на нежеланите събития в определена популация пациенти.

Разграничавайте данните за обработката от твърденията за лечение

Сакът с плазма позволява контролирана експозиция: той има определен обем, геометрия, последователност на обработка и измерим краен резултат. Човекът има тъкани, кръвообращение, метаболизъм и места на инфекция, които този експеримент не възпроизвежда.

По тази причина твърденията за лечение на ХИВ спрямо данните за инактивиране в плазма и доказателствата за метиленовото синьо при COVID-19 и продължителен COVID изискват собствена клинична оценка. Нито един от тези въпроси не получава отговор чрез демонстриране на намалена инфекциозност в дарен материал.

За употреба в кръвни центрове оценявайте точния компонент и разрешената на местно ниво система, валидирането ѝ за конкретни микроорганизми, запазената функция на белтъците, остатъчните химични вещества и контролните проверки преди освобождаване. Както посочва производителят, наличността на продукта се различава според държавата. Употребата в миналото или успешен експеримент не означават, че понастоящем има разрешение навсякъде. Полезната единица за оценка на доказателствата е целият валидиран процес, приложен към определения за него плазмен компонент.