Metilen mavisi və herpesvirusla bağlı iddialar: uçuqlar, EBV və virusun inaktivasiyası

Bu müzakirədə bir söz iki anlayışı ifadə edir və onları ayrı adlandırmaq lazımdır. Birinci anlayış virionun inaktivasiyasıdır: boya, oksigen və işıq mayedəki virus hissəciyi ilə təmas edir və onu çoxala bilməyəcəyi şəkildə zədələyir. İkinci anlayış insanda infeksiyanın müalicəsidir: daha az uçuq, daha sürətli sağalma, virusun daha az ifraz olunması və ya daha aşağı Epstein-Barr virus yükü. Birinci nəticə herpes simplex virusu üçün laboratoriyada dəfələrlə göstərilib. İkinci nəticə isə nə herpes simplex, nə də Epstein-Barr virusuna qarşı ağızdan qəbul edilən metilen mavisi üçün göstərilib. Bu fərq aydınlaşdırıldıqdan sonra elmi ədəbiyyatı təsnif etmək asanlaşır.

Bununla yanaşı, ikinci bir qarışıqlıq da mövcuddur. HSV və EBV eyni böyük virus ailəsinə daxildir, lakin müxtəlif toxumalarda fərqli xəstəliklərə səbəb olur. Uçuq yerli litik çoxalma ilə müşayiət olunan səthi zədələnmədir: üzərinə boya çəkilə və həmin yer işıqlandırıla bilər. EBV isə qan və limfoid toxuma boyunca yayılmış B hüceyrə rezervuarlarında latent vəziyyətdə qalır; nə yerli tətbiq edilən boya, nə də qırmızı lampa bütün rezervuara çata bilər. Bir şəraitdə əldə edilən nəticə digərinə şamil edilmir. Bu təsnifatın arxasındakı ümumi üsulla maraqlanan oxucular onu metilen mavisi tədqiqatlarını oxumaq üçün təlimatda tapa bilərlər.

Laboratoriya fotoinaktivasiyası: hüceyrədənkənar HSV, işıq tələb olunur

Ən erkən birbaşa sınaqda tək bir laboratoriya ştammı deyil, yeni əldə edilmiş klinik izolyatlar istifadə olunub. Herpesvirus hominis-in fotodinamik inaktivasiyasına dair 1975-ci il tədqiqatında genital və ağız nahiyəsindəki zədələnmələrdən alınmış 37 izolyat 10 mikromolyar metilen mavisi ilə qarışdırılıb, bir saat qaranlıqda saxlanılıb, sonra qaranlıqda saxlanan və işıqlandırılan iki hissəyə ayrılıb; işıqlandırılan hissə 15 cm məsafədəki iki 15 vattlıq flüoresan borunun işığına beş dəqiqə məruz qoyulub. 37 izolyatdan 27-si yalnız işıqda aşkarlana bilən yoluxduruculuğunu itirib, 4-də isə yoluxduruculuq 100 dəfədən çox azalıb. Qaranlıqda saxlanan nəzarət nümunələri yoluxduruculuğunu qoruyub: işıq olmadıqda bu konsentrasiya nümunəni steril etməyib.

Sonrakı bir tədqiqat bəzi şəraitlərdə sadəcə boya və işığın təsirinin nə qədər məhdud ola biləcəyini göstərib. 1979-cu ildə HSV-1 və HSV-2 üzərində metilen mavisi, işıq və elektriklə aparılan təcrübələrdə 10 mikromolyar boya və 180 saniyəlik közərmə lampası işığı yoluxdurucu HSV-1 miqdarını təxminən 60 faiz, yəni təxminən 0.4 log azaldıb. Yalnız kiçik sabit cərəyanın əlavə edilməsi eyni sistemdə itkini 99.99 faizdən yuxarı qaldırıb. Tək işıq, tək cərəyan və boyasız işıqla cərəyan birlikdə cüzi təsir göstərib. Güclü təsir üçün elektrik qurğusu lazım olduğuna görə bu məqalə adi boya və lampanın müntəzəm olaraq dörd log səviyyəsində məhvetmə verdiyinin sübutu kimi göstərilməməlidir.

Daha sonra mexanizmi araşdıran tədqiqatlar təsirə məruz qalmış hissəciklərin hansı funksiyaları hələ yerinə yetirə bildiyini öyrənib. HSV-nin fotodinamik mexanizmləri haqqında Journal of Clinical Investigation jurnalında dərc edilmiş 1980-ci il tədqiqatı virus DNT-sində əsasən iki zəncirli qırılmalar olmadan tək zəncirli qırılmalar aşkar edib: təsirə məruz qalmış virionlar hələ də hüceyrələrə bağlanır və daxil olurdu, lakin yetişmə prosesi dayanırdı. Metilen mavisi və işıqdan sonra infeksiya dövrünə dair 1997-ci il tədqiqatı 1 mikromolyar boya və qırmızı işıqla bunu təsdiqləyib: qişanın kobud dağılması müşahidə olunmayıb, hüceyrəyə daxilolma və DNT-nin sərbəstləşməsi pozulmayıb, lakin işıqlandırmadan asılı DNT parçalanması ilə çoxalma tam dayanıb. 1995-ci ildə sinqlet oksigenin müqayisəsinə dair tədqiqat prosesdə sinqlet oksigenin, ehtimal ki, əlavə radikal reaksiyalarla birlikdə rol oynadığını göstərib. Metilen mavisinin işığı necə udması və reaktiv oksigen yaratması haqqında təfərrüatlar boya, oksigen və fotonların niyə hədəfdə eyni vaxtda mövcud olmalı olduğunu izah edir.

Ən aydın kəmiyyət göstəriciləri qan məhsulları üzərində aparılan işlərdən gəlir; bu işlər nəticələri həddən artıq geniş şərh etməmək üçün də ən aydın xəbərdarlıqdır. 627 nm qırmızı LED-lərlə plazmada patogenlərin azaldılmasına dair 2013-cü il tədqiqatında plazmaya əlavə edilmiş HSV 60 dəqiqədən sonra 1 mikromolyar konsentrasiyada təxminən 5.2 log, 10 mikromolyar konsentrasiyada isə 6.0 log azalıb. Bu, işıqlandırılan mayenin zərərsizləşdirilməsidir, neyronlarda latent infeksiyanın müalicəsi deyil və udulan məhlulun bədənin qaranlıq daxilində nə edəcəyini proqnozlaşdırmır.

Zədələnmələrin yerli müalicəsi: kiçik, köhnə və qarışıq nəticəli tədqiqatlar

Yerli tətbiq haqqında hesabatlarda boya zədələnmənin üzərinə çəkilir və həmin yer işıqlandırılır; bu, ən azı laboratoriyadakı yerləşmə şəraitini qoruyur. Ən erkən hesabat ekzema üzərində geniş yayılmış HSV superinfeksiyası olan eczema herpeticum hadisəsinə aiddir. Metilen mavisi və işıqla eczema herpeticum haqqında 1975-ci il hesabatı yerli boya və işıq tətbiqindən sonra sürətli yaxşılaşmanı təsvir edib; 10 mikromolyar boya işıqda virusu inaktivləşdirib, qaranlıqda isə belə təsir göstərməyib. Şərhdə eyni pasiyent daxilində müqayisə üçün sahənin yarısına 0.1 faizli məhlul tətbiq edildiyi qeyd olunub. Uçuqlara dair sübut kimi bu, dozimetriyanın zəif olduğu bir dövrdən tək pasiyentlik müşahidədir.

Daha böyük tarixi seriya genital zədələnmələrə aid olub. 56 pasiyentin daxil olduğu 1975-ci il genital herpes seriyasında 36 nəfər metilen mavisi alıb, lakin yalnız ilk 35 nəfər üç boya arasında təsadüfi bölüşdürülüb; buna görə kohort metodoloji baxımdan tam düzgün sınaq olmayıb. Müalicə olunan təkrarlanan halların təxminən 70 faizində təxminən 48 saat ərzində yaxşılaşma bildirilib, lakin təkrarlanma tezliyi əhəmiyyətli dərəcədə azalmayıb. Evdə flüoresan işıq və ya günəş işığı ilə işıqlandırmaya nəzarət edilməyib. Təkrarlanmanın azalmaması ilə yanaşı kəskin mərhələdə yaxşılaşma latent rezervuara deyil, mövcud zədələnməyə təsir edən yerli prosedurla uyğun gəlir. Eyni ehtiyatlı yanaşma metilen mavisindən istifadə edən fotodinamik terapiya protokollarına da aiddir.

Uçuqlara dair müasir sınaqlar kiçikdir və nəticələri bir-biri ilə uyğun gəlmir. Dodaq herpesi olan dörd pasiyentin daxil olduğu 2009-cu il seriyasında 0.01 faizli boya və hər kvadrat cm üçün 120 J enerji ilə 660 nm lazer istifadə olunub, sürətli sağalma bildirilib; lakin nəzarət qrupu olmayıb və daha sonra fotobiomodulyasiya tətbiq edilib. Bu, 2009-cu il dodaq herpesinin fotodinamik müalicəsinə dair hallar seriyasında təsvir olunur. Fotodinamik terapiya və asiklovirin 2021-ci il sınağına görə, 75 pasiyentin fotodinamik terapiya, yerli asiklovir və ya hər ikisini alan qruplara təsadüfi bölüşdürülməsi sağalma müddətində və ya ağrıda fərq göstərməyib. HSV-1 qPCR ölçmələrinin aparıldığı 24 pasiyentlik randomizə edilmiş sınaqda zədələnmələrin aradan qalxması və ya bir il ərzində təkrarlanma baxımından fərq aşkar edilməyib; bu, herpes simplex üçün antimikrob fotodinamik terapiyanın 2025-ci il randomizə edilmiş sınağında təsvir olunur. Birləşdirilmiş fotodinamik terapiya və fotobiomodulyasiyaya dair 2025-ci il hesabatına görə, boyalı fotodinamik terapiya, fotobiomodulyasiya və qovuqcuqların drenajını birləşdirən 60 pasiyentlik 2025-ci il sınağında ağrının daha tez azalması bildirilib, lakin bunu boyanın təsirinə aid etmək mümkün deyil.

Burada arzuolunmaz təsirlər barədə məlumatlar məhduddur. 1975-ci il məqalələrində müasir aşkarlama və qeydəalma üsulları yoxdur. Sonrakı kiçik tədqiqatlarda az sayda kəskin təsir bildirilib və ya heç bildirilməyib, lakin mavi rənglənmə tətbiqin ayrılmaz nəticəsidir və yerli fototoksik qıcıqlanma ehtimalı qalır. Boya ilə rənglənmə və lampa tətbiqi boyanı udmaqdan fərqlənir; buna görə metilen mavisinin təhlükəsizlik məlumatları tətbiq yollarını ayrı-ayrılıqda nəzərdən keçirir.

EBV: metilen mavisinə dair birbaşa sübut yoxdur

EBV üçün axtarış belə sübutun olmadığını göstərir. Bu icmal üçün tapılan heç bir elmi rəyli təcrübə və ya nəzarətli sınaq metilen mavisinin işıqla və ya işıqsız EBV-nin yoluxduruculuğunu azaltdığını, reaktivasiyanı basdırdığını və ya insanlarda virus yükünü aşağı saldığını göstərmir. EBV-müsbət nazofaringeal karsinoma hüceyrələri üzərində aparılan işlər başqa fotosensibilizatorlardan istifadə edir və metilen mavisinin virusu təmizləməsini deyil, şiş hüceyrələrinin yaşama qabiliyyətini ölçür. İcmallarda EBV təsdiqlənmiş göstərişlər arasında deyil, gələcək sınaqlara ehtiyac olan viruslar arasında göstərilir.

Biologiya HSV-nin sınaq borusunda əldə edilmiş nəticəsinin niyə EBV-yə şamil edilə bilməyəcəyini izah edir. Uçuğun müalicəsində tələb olunan hər üç komponent — boya, oksigen və fotonlar — əlçatan bir səthdə yerləşdirilir. EBV-nin latent rezervuarı əsasən qan və limfoid toxuma boyunca yayılmış B hüceyrələrindədir. Yerli qırmızı işıq bu yayılmış rezervuarın hamısını işıqlandıra bilməz, udulan boya isə həmin yerlərdə hədəflənmiş işıq təmin etmir. EBV-müsbət şiş hüceyrəsinin başqa fotosensibilizatorla məhv edilməsi hüceyrənin məhv edilməsidir, antiviral aktivliyin sübutu deyil. Virus yükünün və reaktivasiya markerlərinin əslində necə ölçüldüyünü oxuyarkən bu fərq əhəmiyyətlidir.

Ağızdan müalicə və təkrarlanmasız interval yanılğısı

Bu icmal üçün tapılan heç bir nəzarətli insan sınağı sistemik və ya ağızdan qəbul edilən metilen mavisinin uçuqların təkrarlanmasını azaltdığını, sağalmanı sürətləndirdiyini, virus ifrazını azaltdığını və ya qanda və tüpürcəkdə DNT nüsxələrinin sayı, yaxud müəyyən edilmiş litik markerlər kimi hər hansı EBV sonlanma göstəricisini dəyişdirdiyini göstərmir. İnsanlarda herpeslə bağlı ədəbiyyatda yerli boya və yerli işıq istifadə olunur. Hədəflənmiş işıqlandırma olmadan sistemik dozalanma fərqli müdaxilədir və ayrıca sınaq tələb edir: randomizə edilmiş, korlaşdırılmış və plasebo ilə nəzarət olunan; təkrarlanan halların təsdiqləndiyi, başlanğıc tezliyini müəyyən etmək üçün ilkin müşahidə dövrünün olduğu, faktiki məruzqalma səviyyəsinin yoxlanmasının əvvəlcədən planlaşdırıldığı, altı ilə on iki ay arasında izləmənin, qPCR ilə ardıcıl yaxma analizlərinin, tətikləyici amillərin qeydinin və təhlükəsizlik monitorinqinin aparıldığı sınaq. Metilen mavisinin ağızdan dozalanması və sorulmasına dair ümumi prinsiplər bu sonlanma göstəricilərini əvəz etmir.

Geniş yayılmış bir hekayə məhz burada əsassız qalır. Kimsə eyni vaxtda bir neçə müdaxiləyə başlayır, aylarla uçuğunun olmadığını bildirir və bunu onlardan birinə bağlayır. HSV epizodları dalbadal baş verə, sonra isə virus hissi qanqlionlardan tam aradan qaldırılmadan aylarla yoxa çıxa bilər. Tətikləyici amillər dəyişir, gözləntilər simptomların bildirilməsinə təsir edir və təkcə təsadüf də fasilələr yaradır. Eyni vaxtda bir neçə dəyişiklik olduqda fasiləni tək bir komponentə aid etmək üçün həmin komponent olmadan nə baş verəcəyini göstərən müqayisə yoxdur. 1975-ci il genital herpes seriyasında əks mənzərə görünürdü: təkrarlanma tezliyi dəyişmədiyi halda kəskin mərhələdə yaxşılaşma. Bu alovlanmanı sağaltmaq növbəti alovlanmanın qarşısını almaqla eyni anlayış deyil.

Virus və şərait üzrə sübutlar cədvəli

Bu sübutlardan necə istifadə etməli

Hər istinadla bağlı dörd sual verin. İşıqda, yoxsa qaranlıqda — çünki fotodinamik məhvetmə sistemik məhvetməni proqnozlaşdırmır. Sərbəst virionlar, mövcud zədələnmə, yoxsa latent rezervuar — çünki iddianı yalnız ona uyğun hədəf üzrə nəticə cavablandırır. Yoluxduruculuq, sağalma, təkrarlanma, yoxsa virus yükü — çünki yoluxduruculuq göstəricisi təkrarlanma sualına cavab verə bilməz. HSV, yoxsa EBV — çünki əlçatan zədələnmə və yayılmış B hüceyrə rezervuarı fərqli problemlərdir. Mövcud məlumatlar bir məhdud fikri dəstəkləyir: hüceyrədənkənar virus boya, oksigen və uyğun işıqla təmas etdikdə metilen mavisi HSV-ni güclü şəkildə fotoinaktivləşdirə bilər. Təkrarlanan zədələnmələrin klinik baxımdan əhəmiyyətli müalicəsinə dair sübutlar məhduddur və qarışıqdır, ağızdan qəbulla profilaktikaya dair sübut yoxdur, EBV-yə qarşı təsirə dair birbaşa sübut da yoxdur. Bir neçə müalicənin birlikdə tətbiq edildiyi rejim zamanı uçuqsuz keçən sakit interval bunların heç birini dəyişmir.