Thử nghiệm xâm nhập chất màu bằng xanh methylen: lọ không có màu chứng minh điều gì

Thử nghiệm xâm nhập chất màu bằng xanh methylen xác định liệu dung dịch chất màu bên ngoài có thể đi vào bao bì đã đóng kín trong các điều kiện thử thách xác định hay không. Chất màu xanh bên trong ống thuốc hoặc lọ có thể chỉ ra vị trí mất kín. Không phát hiện chất màu có nghĩa là thử nghiệm không phát hiện sự xâm nhập trong các điều kiện đó. Chỉ riêng kết quả này không xác lập rằng sản phẩm vô trùng.

Sự phân biệt này quyết định cách thiết kế thử nghiệm. Một màn minh họa thuyết phục về mặt thị giác với lọ bị vỡ là điều dễ thực hiện. Việc chứng minh một phương pháp có thể phát hiện đáng tin cậy các khuyết tật liên quan đến một sản phẩm cụ thể đòi hỏi nhiều công sức hơn đáng kể.

Theo dõi đường đi của chất màu qua bao bì

Trong thử nghiệm ngâm điển hình, các vật chứa đã đóng kín được đặt trong bể dung dịch chất màu và chịu một chuỗi thay đổi áp suất được quy định. Giảm áp suất bên ngoài có thể cho phép khí thoát khỏi vật chứa bị rò rỉ. Khôi phục áp suất trong khi vật chứa vẫn ngập trong dung dịch có thể đẩy dung dịch chất màu vào bên trong. Sau đó, bề mặt bên ngoài được làm sạch, còn phần chứa bên trong được kiểm tra bằng mắt hoặc phân tích để tìm chất chỉ thị.

Toàn bộ đường đi đều quan trọng: tác động thử thách phải đến được vị trí rò rỉ, chất lỏng phải đi qua vị trí đó, và lượng chất màu còn lại bên trong phải đủ để phát hiện. Thử nghiệm có thể thất bại ở bất kỳ giai đoạn nào trong số này. Một kênh nhỏ bị sản phẩm hoặc khí mắc kẹt chặn lại không nhất thiết hoạt động giống một lỗ hở có cùng đường kính danh nghĩa.

Đối với ống thuốc thủy tinh được hàn kín, khuyết tật liên quan có thể là vết nứt hoặc mối hàn không kín hoàn toàn. Đối với lọ có nút, hệ thống còn bao gồm phần miệng cổ lọ thủy tinh, vật liệu đàn hồi và cách cố định bộ phận đóng kín. Thử nghiệm khả năng tự kín lại của nút sau khi bị đâm xuyên giải quyết thêm một câu hỏi về quá trình sử dụng. Đây là những vấn đề bao bì có liên quan, nhưng các mẫu thử không thể thay thế cho nhau.

Nồng độ là một phần của phương pháp, không phải toàn bộ phương pháp

Không có câu trả lời duy nhất cho câu hỏi “Nồng độ xanh methylen nào được dùng để thử rò rỉ?” nếu chưa xác định quy trình. Nồng độ chất màu, công thức dung dịch, thời gian tiếp xúc, áp suất, thể tích nạp và phương pháp phát hiện cùng phối hợp tạo nên kết quả.

Một tài liệu USP Pharmacopeial Forum năm 2008 được lưu trữ mô tả dung dịch 0.1%, được biểu thị là 1 g/L, cho một thử nghiệm cụ thể về khả năng tự kín lại của bộ phận đóng kín bằng vật liệu đàn hồi. Ví dụ lịch sử đó không phải là công thức chung cho ống thuốc, bơm tiêm nạp sẵn hoặc mọi hệ thống lọ hiện nay.

Để lựa chọn phương pháp hiện nay, chương 1207 của USP cung cấp khung đánh giá tính toàn vẹn bao bì cho sản phẩm vô trùng, còn chương 1207.2 đề cập đến các công nghệ thử rò rỉ. Phần giới thiệu của chương này nhắc rõ người đọc cần kiểm tra phạm vi và phiên bản mới nhất của các tiêu chuẩn được viện dẫn. Chương 382 của USP đề cập đến tính phù hợp về chức năng của các hệ thống bao bì thuốc dùng đường tiêm có thành phần bằng vật liệu đàn hồi. Một bản dự thảo hội thảo cũ không thể thay thế văn bản chính thức áp dụng và một quy trình đã được thẩm định.

Vì vậy, câu hỏi thực tế là: toàn bộ phương pháp này có phát hiện được sự rò rỉ liên quan đến sản phẩm và bao bì này hay không? Chọn một bể dung dịch màu đậm hơn không trả lời được câu hỏi đó. Hãy ghi lại thành phần và nồng độ dung dịch một cách rõ ràng, bao gồm các chất phụ gia và cơ sở biểu thị của mọi giá trị phần trăm.

Đối chứng giúp phân biệt kết quả hữu ích với thử nghiệm thất bại

Hãy sử dụng quy trình diễn giải này khi xem xét một phương pháp hoặc báo cáo thử nghiệm. Loại đối chứng và tiêu chí chấp nhận phải được xác lập trước khi diễn giải các mẫu chưa biết.

Mẫu được bổ sung chất màu và bao bì cố ý tạo khuyết tật trả lời những câu hỏi khác nhau. Mẫu bổ sung chất màu kiểm tra liệu chất màu đã ở bên trong có thể được phát hiện hay không. Bao bì có khuyết tật kiểm tra liệu chất màu có thể đi vào rồi được phát hiện qua toàn bộ quy trình hay không. Một nghiên cứu chặt chẽ cần phân biệt những khả năng này.

Hai giới hạn phát hiện dễ bị nhầm lẫn

Giới hạn phát hiện phân tích liên quan đến lượng chất màu mà phép đọc kết quả có thể phân biệt với tín hiệu nền. Khả năng phát hiện của thử nghiệm bao bì liên quan đến những khuyết tật mà toàn bộ phương pháp phát hiện được và mức độ nhất quán khi phát hiện. Một giới hạn phân tích rất tốt không thể khắc phục điều kiện thử thách không đưa được chất màu qua vị trí rò rỉ liên quan.

Đó là lý do kết quả thử nghiệm xâm nhập chất màu mang tính xác suất: khuyết tật tồn tại không bảo đảm chất chỉ thị sẽ đi qua ở mức quan sát được trong mọi lần thử thách. Cần thử nghiệm lặp lại và sử dụng các khuyết tật được xác định đặc tính phù hợp để xác lập hiệu năng, thay vì ấn định một kích thước lỗ tối thiểu chung.

Nghiên cứu gốc cho thấy sự phụ thuộc vào hệ thống. Trong một nghiên cứu năm 2016 về bơm tiêm nạp sẵn, Lu và cộng sự báo cáo rằng xanh methylen không phù hợp để phát hiện đáng tin cậy các vị trí mất kín nhỏ trong những bơm tiêm chứa thuốc mà họ khảo sát. Họ phát triển một cách tiếp cận sử dụng chất màu huỳnh quang và phát hiện bằng quang phổ. Phát hiện đó ủng hộ việc đánh giá chất chỉ thị và phép đọc kết quả cùng nhau; nó không xác lập một phương pháp thay thế duy nhất cho mọi loại bao bì.

Một nghiên cứu khác về sự xâm nhập của chất màu, công bố năm 2000, sử dụng FD&C Red No. 40, không phải xanh methylen, và so sánh sự xâm nhập của chất màu với sự xâm nhập của vi sinh vật bằng các lọ bị mất kín có gắn vi ống. Độ nhạy tương tự trong hệ thống thực nghiệm đó không khiến mọi quy trình dùng chất màu xanh đều tương đương với thử thách bằng vi sinh vật.

Tách biệt bốn câu hỏi về chất lượng

Rò rỉ bao bì: Vật chất có thể đi qua ranh giới bao bì trong các điều kiện thử nghiệm hay không? Sự xâm nhập của chất màu cung cấp bằng chứng cho câu hỏi này.

Tính toàn vẹn của hàng rào vi sinh: Bao bì có thể duy trì hàng rào ngăn vi sinh vật trong các điều kiện bảo quản và sử dụng liên quan hay không? Việc liên kết một thử nghiệm vật lý với khẳng định này đòi hỏi cơ sở thẩm định phù hợp. Hướng dẫn của FDA về thử nghiệm tính toàn vẹn trong các đề cương nghiên cứu độ ổn định ủng hộ các cách tiếp cận đã được thẩm định để chứng minh tính toàn vẹn bao bì được duy trì. Hướng dẫn này nêu rõ không được thay thế thử nghiệm vô trùng ban đầu của sản phẩm: một bao bì nguyên vẹn vẫn có thể đã được nạp vật liệu nhiễm bẩn.

Chất gây sốt và nội độc tố: Thử nghiệm rò rỉ không đo các chất nhiễm bẩn này. Hướng dẫn về kiểm soát sản xuất và quy trình của FDA xem việc kiểm soát nhiễm vi sinh vật và thử nghiệm chất gây sốt hoặc nội độc tố vi khuẩn là những yêu cầu chất lượng riêng biệt. Kết quả không phát hiện chất màu không thể cung cấp bất kỳ phép đo nào trong số đó.

Độ bền bề mặt thủy tinh: Một vật chứa có thể chống rò rỉ trong khi bề mặt bên trong hình thành các hạt hoặc bị tách lớp. Chương 1660 của USP đề cập đến độ bền bề mặt bên trong và sự hình thành hạt thủy tinh. Việc nhuộm bề mặt hoặc quan sát bằng kính hiển vi để khảo sát thủy tinh không phải là cùng một hiện tượng quan sát với việc chất màu đi vào lọ đã đóng kín.

Cuối cùng, các thử nghiệm chất màu trong lâm sàng để khảo sát đường rò và rò rỉ tại các cấu trúc giải phẫu có đối tượng, mục đích và cách diễn giải khác. Thử nghiệm bao bì dược phẩm không cung cấp một quy trình lâm sàng. Trong các ứng dụng phân tích của xanh methylen, chất màu ở đây đóng vai trò chất chỉ thị: kết luận phụ thuộc vào đường xâm nhập được thử nghiệm và các đối chứng của nó, chứ không đơn thuần vào sự hiện diện hay vắng mặt của màu xanh.