መቲሊን ብሉ ኣብ ላቦራቶሪ ምልላይ፦ ኢንፍራሬድ ስፔክትራን መመላእታ ሜላታትን

ሰለስተ ላቦራቶሪታት እቲ ሓደ ዓይነት ሰማያዊ ዱቄት ከም ዝተቐበላ ሕሰብ። እታ ቀዳመይቲ ኢንፍራሬድ ስፔክትረም ትምዝግብ እሞ መቲሊን ብሉ ምዃኑ ትገልጽ። እታ ካልኣይቲ ክሮማቶግራፊ ትገብር እሞ 0.4% Azure B ከም ዘለዎ ትሕብር። እታ ሳልሰይቲ ካብቶም ክሪስታላት ናይ ኤክስ ጨረር ዲፍራክሽን ትዕቅን እሞ ቅርጺ ሃይድሬት ትሰይም። ሰለስቲአን ቅኑዓት እየን፣ እንተኾነ ካብኣተን ሓንቲ እኳ ነቶም ካልኦት ክልተ ሕቶታት ኣይመለሰትን። ምድንጋር ዝጅምር፣ ሓደ ውጽኢት ንሰለስቲኦም ከም ዝምልስ ክንበብ ከሎ እዩ።

እዚ ዓንቀጽ ነቶም ሕቶታት ይፈላልዮም። ብኢንፍራሬድ ምልላይ፣ ምስ መወከሲ ስታንዳርድ ብምንጽጻር ሞለኪዩላዊ መንነት የረጋግጽ። ክሮማቶግራፊ ኣቃውማ ይውስን። ዲፍራክሽን ድማ ቅርጺ ጽኑዕ ኩነት ይውስን። ፈተና መንነት ዝሓለፈ ምስምማዕ፣ ምስክር ወረቐት ንጽህና ኣይኮነን።

ብኢንፍራሬድ ምልላይ ንሓደ ሕቶ ብጽቡቕ ይምልስ

እቲ ኣብ ፋርማኮፒያ ዝተወሰነ ፈተና መንነት መቲሊን ብሉ፣ ስፔክትረም ምስ ስታንዳርድ ምንጽጻር እዩ፣ ዝርዝር ጫፋት በብሓደ ምርግጋጽ ኣይኮነን። ኣብ ቅድመ-ትርኢት ሞኖግራፍ USP ናይ መቲሊን ብሉ፣ ክፍሊ ምልላይ A፣ ብኦፕቲክስ ATR ወይ ብጽቑጥ ጽላት ፖታስየም ብሮማይድ ዝግበር ኢንፍራሬድ ስፔክትሮስኮፒ ይጠቅስ። ናይቲ ናሙና ስፔክትረም ምስ ስፔክትረም ናይ መወከሲ ስታንዳርድ USP ክሰማማዕ ኣለዎ፤ እቲ ናሙናን እቲ ስታንዳርድን ድማ ኣብ ተመጣጣኒ ኩነታት ክዳለዉን ክምዝገቡን ኣለዎም። ነቲ ውሳነ ዝውስን ቀዋሚ ዝርዝር መለለዪ ቁጽርታት ማዕበል የለን። እቲ ስፔክትራ ሓደ ኣብ ልዕሊ እቲ ካልእ ኣንቢርካ ዝግበር ምንጽጻር እዩ ዝውስኖ።

እዚ ኣሰራርሓ እዚ፣ FTIR ስፔክትራ ናይ መቲሊን ብሉ ዘርእይዎ ባህሪ የንጸባርቕ። እቶም ዝበርትዑ መለለዪታት ኣብ ዞባ ኣሰር ኣጻብዕቲ ይርከቡ። ኣብ ስነ-ጽሑፍ ዝተዋህቡ ትርጉማት፣ እቲ ቀንዲ ናይ ኮንጁጌትድ ቀለቤት ባንድ ብቐጻሊ ኣብ ከባቢ 1590 ክሳብ 1600 cm-1 የቐምጥዎ፤ ኣብዚ ናይ ኣሮማቲክ ካርቦን-ካርቦንን ካርቦን-ናይትሮጅንን ናይ ምዝርጋሕ ንዝረታት ተጣሚሮም ይንቀሳቐሱ። ኣብ ከባቢ 1490ን 1390 cm-1ን ዘለዉ ተወሰኽቲ ባንድታት፣ ባህሪ ለውጢ ቅርጺ ናይ ቀለቤት፣ ካርቦን-ናይትሮጅንን ካርቦን-ሃይድሮጅንን ኣለዎም። ኣብ ከባቢ 1355ን 1330 cm-1ን ዘለዉ ባንድታት፣ ናይ ዳይሜቲልኣሚኖ ካርቦን-ናይትሮጅን ማእሰርታትን ናይ ሜቲል ለውጢ ቅርጽን የጠቓልሉ። ኣብ ከባቢ 1225 ክሳብ 1250 cm-1 ዘለዉ መለለዪታት ናይቲ ሄተሮሳይክሊክ መዋቕር እዮም፤ ኣብ ከባቢ 1170 ክሳብ 1130ን 1066 cm-1ን ዘለዉ ባንድታት ድማ ባህሪ ካርቦን-ሰልፈር ኣለዎም፣ ናይ ኣሮማቲክ C-H ምጥዋይ ኣብ ከባቢ 880 cm-1 ይርከብ። ናይ ምዝርጋሕ ንዝረታት ኣብ ዝለዓለ ቁጽሪ ማዕበል ይርከቡ፦ ኣሮማቲክ C-H ኣብ ከባቢ 3040 cm-1፣ N-methyl C-H ድማ ብግምት ኣብ መንጎ 2900ን 3000 cm-1ን። እቲ መሰረታዊ መዋቕር ፌኖታያዚንየም ከም ዝተጣመረ ስርዓት ስለ ዝንዝር፣ እቶም ዝተሓትሙ ትርጉማት ኣብ ዝርዝር ይፈላለዩ። ስለዚ ንዝኾነ ሓደ ሰሌዳ ትርጉም ባንድታት፣ ከም ዝተጸብጸበ ትርጉም እምበር ከም እንኮ ትርጉም ኣይትውሰዶ።

ነቲ ቀለም ከይቀየሩ IR ስፔክትራ ናይ መቲሊን ብሉ ዝቕይሩ ክልተ ናይ ምድላው ጽልዋታት ኣቓልቦ ይግብኦም። ቀዳማይ፣ ማይ ኣብ መዋቕሩ ዝሓዘ ንጥረ ነገር፣ ኣብ ከባቢ 3300 ክሳብ 3500 cm-1 ሰፊሕ O-H ባንድ፣ ከምኡውን ኣብ ከባቢ 1630 ክሳብ 1640 cm-1 ናይ ማይ ምጥዋይ የርኢ። ዝተፈላለዩ ቅርጽታት ሃይድሬት ድማ ነቶም ናይ ኣሰር ኣጻብዕቲ ባንድታት ብዝዕቀን መጠን የንቀሳቕስዎም። ካልኣይ፣ እቲ ናይ KBr ጽቑጥ ጽላት መሰረታዊ ንጥረ ነገር ርጥበት ይስሕብ፤ ዝተመጠጠ ርጥበት ኣብቶም ልክዕ ናይ ማይ ዞባታት ባንድታት ይፈጥር፣ ካብቲ ናሙና ዝመጸ ናይ ሃይድሬት ማይ ክመስል ድማ ይኽእል። ብATR ምዕቃን ነቲ KBr መሰረታዊ ንጥረ ነገር የወግዶ፣ ግን ጽዓት ናይ ATR ባንድታት ምስቲ ብቁጽሪ ማዕበል ዝለዋወጥ ዕምቆት ምእታው ይለዋወጥ። ስለዚ ናይቲ ሓደ ዱቄት ATR ስፔክትረምን ብምሕላፍ ጨረር ዝተወስደ ስፔክትረምን ብቐጥታ ሓደ ኣብ ልዕሊ እቲ ካልእ ክንበሩ ኣይክእሉን። እቲ ተግባራዊ መምርሒ ካብቲ ናይ ፋርማኮፒያ ጠለብ ይስዕብ፦ በቲ ሓደ ቴክኒክ ዝተመዝገቡ ናሙናን መወከስን ኣነጻጽር፣ ኣየናይ ቴክኒክ ከም ዝተጠቐምካ ድማ ሰንድ። ብዛዕባ ኣብ ድሕሪ እዞም ስፔክትራ ዘሎ መሰረታዊ ኬሚስትሪ ናይ ካትዮን፣ ጨውን ሃይድሬታትን፣ መወከሲ መዋቕርን ባህርያትን መቲሊን ብሉ ርአ።

ሰሌዳ ምርጫ ሜላ ትንተና

እዚ ሰሌዳ ናይ ምርጫ መሳርሒ እዩ። ሓደ መስርዕ ብኣግማድ ኣንብብ፣ ሓደ ሜላ ኣየናይ ሕቶ ከም ዝምልስ፣ ዝሓለፈ ውጽኢት እንታይ ከም ዘረጋግጽን እንታይ ገና ከይተረጋገጸ ከም ዝተርፍን ንምፍላጥ።

ስለምንታይ ናይ ኢንፍራሬድ ምስምማዕ ምስክር ወረቐት ንጽህና ዘይኮነ

ምስምማዕ መንነት፣ እቲ ናሙና ዘይተደልየ ካልእ ቀለም ምዃኑ የወግድ። ኣብቲ ናሙና ዘሎ ኩሉ ግን ኣይዝርዝርን። ሰለስተ ገደባት ብፍላይ ኣገደስቲ እዮም።

ቀዳማይ፣ ብመዋቕር ቀረባ ዝኾኑ ንጥረ ነገራት ኣብ ኢንፍራሬድ ይመሳሰሉ። Azure B ካብ መቲሊን ብሉ ብሓደ ጉጅለ ሜቲል ጥራይ ስለ ዝፍለ፣ ስፔክትረሙ ምስ ናይ መቲሊን ብሉ ኣዝዩ ይመሳሰል። ውሑድ ሚእታዊ Azure B ዝሓዘ ሕውስዋስ፣ ምስ መወከሲ መቲሊን ብሉ ገና ብጽቡቕ ይደራረብ። ነቲ ርኽሰት ምርካብ ናይ ክሮማቶግራፊ ስራሕ እዩ፣ ኣብ መምርሒ ርኽሰታትን ሜላታት ፈተናን መቲሊን ብሉ ድማ ተገሊጹ ኣሎ።

ካልኣይ፣ ኢንፍራሬድ ስፔክትሮስኮፒ ነቲ ናሙና ብጠቕላላ ዝዕቅን ቴክኒክ እዩ፣ ንኣብ ንእሽቶ መጠን ዘለዉ ክፍለ ነገራት ድማ ውሱን ተነቃፍነት ኣለዎ። ንኣሽቱ መጠናት ተዛመድቲ ቀለማት፣ ዝተረፉ መፍትሒታት ወይ ዘይኦርጋኒክ ተረፋት፣ ኣብ ትሕቲ እቶም ዓበይቲ ባንድታት ይሕብኡ። ተወሰኽቲ ጫፋት ዘይምርኣይ፣ ርኽሰታት ከም ዘየለዉ ዝሕብር ድኹም መርትዖ እዩ።

ሳልሳይ፣ እቲ መወከሲ ስታንዳርድ ነቲ ምሉእ ምንጽጻር ይቆጻጸሮ። ዝተበላሸወ፣ ብሃይድሬት ምፍጣር ስፔክትረሙ ዝተቐየረ፣ ወይ ብዘይግቡእ ዝተታሕዘ ስታንዳርድ፣ ነቲ መለክዒ ውሳነ ይቕይሮ። ዘይተመጣጠኑ ቴክኒካት ምጽማድ፣ ንኣብነት ናይ ATR ናሙና ስፔክትረም ምስ ናይ KBr መወከሲ ምንጽጻር፣ እውን ከምኡ ይገብር። ምስ ነፍሲ ወከፍ ውሳነ፣ ቁጽሪ ሎት ናይቲ ስታንዳርድ፣ እቲ ቴክኒክን ኣገባብ ምድላውን መዝግብ።

ሕውስዋሳት ድማ ናይ መወዳእታ መጠንቀቕታ ይውስኹ። መብዛሕትኡ ዝሰማማዕ፣ ግን ጎናዊ ጫፋት ወይ ዘይንቡር ጽዓት ዘለዎ ስፔክትረም፣ መብርሂ ምስ ተወሰኾ ዝሓለፈ ውጽኢት ኣይኮነን። ነቲ ናሙና ቅድሚ ምልላዩ፣ ክፍለ ነገራቱ ክፍለዩ ከም ዘለዎም ዝሕብር ምልክት እዩ።

መመላእታ ሜላታት ኣብ ተግባር

HPLC ናይ መቲሊን ብሉ፣ ኢንፍራሬድ ክህቦ ዘይክእል መልሲ ብዛዕባ ኣቃውማ ይህብ። እቲ ሕጂ ኣብ ፋርማኮፒያ ዘሎ ሜላ፣ ትራይፍሎሮኣሰቲክ ኣሲድ ዝሓዘ፣ ብደረጃ ዝለዋወጥ ሕውስዋስ ማይን ኣሰቶናይትራይልን ምስ ዓምዲ ዓይነት ፌኒል ይጥቀም። ምርካብ ድማ ኣብ 246 nm እዩ ዝግበር፣ ኣብ ዞባ ዝርአ ብርሃን ኣይኮነን። መንነት ብምስምማዕ ግዜ ምጽናሕ ምስ መወከሲ ስታንዳርድ ይውሰን፤ እቲ ሓደ ምንጽጻር ድማ ነቲ መጠናዊ ትንተና ይህብ። እቲ ፈተና ኦርጋኒክ ርኽሰታት፣ Azure B ብናቱ መወከሲ ንጥረ ነገር የለልዮ፤ ናይ መቲሊን ብሉ ኣንጻራዊ ግዜ ምጽናሕ 1.0 ክኸውን ከሎ፣ ናይ Azure B ኣብ ከባቢ 0.8 እዩ። ኣብ መንጎ እቶም ክልተ ጫፋት ልዑል መጠን ምፍልላይ እውን ይጠልብ። ነቲ ምርጫ ንውሓት ማዕበል ኣቕልበሉ፦ እቲ ናይ ሜቲል ምእላይ መስርዕ፣ ካብ ታዮኒን ኣብ ከባቢ 600 nm፣ ብAzure C፣ Azure Aን Azure Bን ኣቢሉ፣ ክሳብ መቲሊን ብሉ ኣብ ከባቢ 670 nm፣ እናተራሓቐ ናብ ቀይሕ ወገን ይመጥጥ። ስለዚ ኣብ ከባቢ 660 nm ዝተወሰነ መርከቢ፣ ንኣባላት እቲ መስርዕ ብዘይማዕረ ይምልስ፣ ንገሊኦም ሆሞሎጋት ድማ ካብ ዘለዎም መጠን ዝወሓደ ከም ዘለዎም የርኢ። ምሉእ መገለጺ ናይቲ መስርዕ ኩሉ ኣድላዪ ምስ ዝኸውን፣ ንነፍሲ ወከፍ ዝትንተን ንጥረ ነገር ብቑዕነቱ ዝተረጋገጸ ስታንዳርድ ዘለዎ ናይ C18 LC-MS/MS ሜላ ክጥቀም ይግባእ።

ናይ ዱቄት ዲፍራክሽን፣ እቶም ኣብ ላዕሊ ዘለዉ ክልተ ሜላታት ዘጥፍእዎ ወይ ዕሽሽ ዝብልዎ ሕቶ ጽኑዕ ኩነት ይምልስ፦ ነቲ ዱቄት ንክሮማቶግራፊ ኢልካ ምፍታሕ፣ ሓበሬታ ክሪስታል የጥፍእ፤ ሞለኪዩላዊ ንዝረታት ድማ ብዛዕባ ማእሰርታት እምበር ብዛዕባ ናይ ርሑቕ ርሕቀት ስርዓታዊ ኣደላድላ ኣይሕብሩን። ቅዲታት ዲፍራክሽን፣ ፌዛት ሃይድሬትን ክሪስታላዊነትን ይፈላልዩ። መቲሊን ብሉ ድማ ካብ መብዛሕትኦም ንጥረ ነገራት ንላዕሊ እዚ ዓይነት ጥንቃቐ የድልዮ። ብራገርን መሳርሕቱን ዝተገብረ መጽናዕቲ ጽኑዕ ኩነት፣ ሓሙሽተ ዝተፈላለዩ መዋቕራት ሃይድሬት ኣለልዩ፤ እዚኦም ፔንታሃይድሬት፣ ክልተ ዳይሃይድሬታት፣ ሞኖሃይድሬትን ማእከላይ ሃይድሬትን የጠቓልሉ። ኣብቶም ባህርያቶም ዝተወሰኑ ቅርጽታት ግን ናይ ሓቂ ትራይሃይድሬት ኣይረኸበን። ኣብዚ ኣተሓሕዛ ላቦራቶሪ ኣገዳሲ እዩ፦ ርጥበትን ሙቐትን ንርግኣት ሃይድሬት ይቕይሩ፣ ሓያል ምጥሓን ድማ ነቲ ፌዝ ክቕይሮ ወይ ክሪስታላዊነቱ ከዳኽሞ ይኽእል። ስለዚ ኣንጻራዊ ርጥበትን ሙቐትን ተቖጻጸርን ሰንድን፣ ምጥሓን ድማ ኣብ ዝተሓተ መጠን ኣቐምጦ። መለለዪ ጽሑፍ ሃይድሬትን ኣብ ዝምዘን ክብደት ዘለዎ ጽልዋን፣ ኣብ ቅርጽታት ሃይድሬት መቲሊን ብሉን መለለዪ ጽሑፎምን ብተወሳኺ ተገሊጹ ኣሎ።

UV-Vis ምምጣጥ መደገፊ ተራ ይጻወት። እቶም ዝተፈልጡ ዝለዓሉ ነጥብታት ምምጣጥ፣ ዝተጸበናዮ ባህሪ መፍትሒ የረጋግጹን ክምችት ንምውሳን የኽእሉን። እንተኾነ፣ ኣብቲ ዝተጸበናዮ ንውሓት ማዕበል ዝመጥጥ ሰማያዊ መፍትሒ፣ ምስ መቲሊን ብሉ ይሰማማዕ እምበር መቲሊን ብሉ ምዃኑ ኣየረጋግጽን፤ ምኽንያቱ ተዛመድቲ ቀለማት እውን ኣብ ቀረባ ንውሓት ማዕበል ይመጥጡ።

ቅድሚ ምዕዳግ እንታይ ክትሓትት ኣለካ

ነዞም ፍልልያት ናብ ሕቶታት ዕድጊ ቀይሮም። ኣየናይ ሎት ከም ዝተፈተነ፣ መንነት በየናይ ቴክኒክ ከም ዝተረጋገጸ፣ እቲ ናይ HPLC ፈተና ርኽሰት መወከሲ ንጥረ ነገር Azure B እንተተጠቒሙ፣ ከምኡውን ቅርጺ ሃይድሬት ብፈተና እንተተወሲኑ ወይ ግምት ጥራይ እንተኾይኑ ሕተት። ልዕሊ ኩሉ፣ እቲ ምስክር ወረቐት ንምሉእ ዝርዝር መስፈርታት ድዩ ዝሽፍን ወይስ ንዝተመርጹ ፈተናታት ጥራይ፣ ሕተት። ብዙሓት ምስ ፋርማኮፒያ ከም ዝሰማምዑ ዝገልጹ ሸየጥቲ፣ ከበድቲ ብረታት ጥራይ እዮም ዝፍትኑ። እዚ ድማ ሕቶታት መንነት፣ መጠናዊ ትንተና፣ ኦርጋኒክ ርኽሰት፣ መፍትሒታትን ማይክሮባትን ከይተመለሱ ይገድፎም።

Blupreme፣ ምስ ፋርማሱቲካላዊ ኣፍራዪ መቲሊን ብሉ ብምትሕብባር፣ ነቲ ምሉእ ዝርዝር መስፈርታት USP ይፍትን። እዚ መንነት፣ ንጽህና፣ ኦርጋኒክ ርኽሰታት፣ ዝተረፉ መፍትሒታት፣ ናይ ባእታታት ርኽሰታት፣ ድሕሪ ምቅጻል ዝተርፍ ተረፍ፣ ገደባት ማይክሮባትን ባክተርያዊ ኤንዶቶክሲናትን ይሽፍን። ናይ ነፍሲ ወከፍ ባች ንህዝቢ ክፉት ምስክር ወረቐት ትንተና፣ ኣብ መርመራ ጽሬት Blupreme ይሕተም። ስለዚ መሰረት እቲ መጠናዊ ትንተናን ውጽኢታት ርኽሰትን፣ ብግምት ኣብ ክንዲ ምውሳን ብቐጥታ ክንበቡ ይኽእሉ። ኣብ ከባቢ 100% ዘለዉ ውጽኢታት እውን መሰረት ስሌቶም ክግለጽ የድሊ፣ ከምቲ መምርሒ መጠናዊ ትንተና ልዕሊ 100 ሚእታዊ ዝገልጾ። ምስምማዕ መንነት ነቲ ምርመራ ይኸፍቶ። እቲ ምሉእ መዝገብ ድማ ይዛዝሞ።