เมทิลีนบลูในการลดเชื้อก่อโรคในพลาสมา: กระบวนการทำงานอย่างไร

เมทิลีนบลูสามารถช่วยลดเชื้อก่อโรคในพลาสมาที่ได้รับบริจาคได้ เมื่อใช้เป็นส่วนหนึ่งของระบบกระบวนการที่มีการควบคุม กระบวนการนี้เกิดขึ้น ภายนอกร่างกาย ก่อนอนุมัติปล่อยพลาสมาเพื่อนำไปให้แก่ผู้รับ โดยใช้ทั้งอุปกรณ์ที่ระบุไว้ การสัมผัสสีย้อม การฉายแสง การกรอง และการตรวจสอบส่วนประกอบของเลือดที่ได้

ความแตกต่างนี้เป็นตัวกำหนดความหมายของหลักฐาน การศึกษาที่แสดงว่าระบบกระบวนการหนึ่งลดไวรัสที่มีความสามารถในการติดเชื้อในถุงพลาสมาได้ เป็นการยืนยันผลสำหรับวัสดุและกระบวนการนั้น ไม่ได้ยืนยันว่าการรับเมทิลีนบลูสามารถรักษาการติดเชื้อในคนได้

คำถามที่เกี่ยวข้องทางคลินิกมีสองด้านเช่นกัน: กระบวนการนี้ลดเชื้อก่อโรคได้มากเพียงใด และพลาสมายังคงหน้าที่ที่เป็นประโยชน์ไว้ได้มากเพียงใด?

เริ่มจากพลาสมา ไม่ใช่ผลิตภัณฑ์เลือดที่ไม่ได้ระบุชนิด

พลาสมาคือส่วนประกอบที่เป็นของเหลวของเลือด ซึ่งมีโปรตีนรวมถึงปัจจัยการแข็งตัวของเลือด ไม่ควรสันนิษฐานว่าระบบจัดการพลาสมาจะเหมาะกับเลือดครบส่วน เม็ดเลือดแดงเข้มข้น หรือส่วนประกอบเกล็ดเลือดด้วย วัสดุเหล่านี้มีองค์ประกอบและหน้าที่ที่ต้องรักษาไว้แตกต่างกัน

ตัวอย่างที่ชัดเจนคือ ระบบ THERAFLEX MB-Plasma ของ Macopharma ซึ่งใช้กับพลาสมาแต่ละหน่วยที่มาจากผู้บริจาครายเดียว ลำดับขั้นตอนตามเอกสารประกอบด้วยการลดเซลล์ การเติมเมทิลีนบลู การฉายแสง การกำจัดสีย้อม และการเก็บรักษา ผู้ผลิตอธิบายรูปแบบการจัดระบบที่แตกต่างกันสำหรับพลาสมาที่แยกจากเลือดครบส่วนและสำหรับการเก็บด้วยวิธีอะเฟอรีซิสที่มีปริมาตรมากกว่า ดังนั้น วัสดุตั้งต้นและชุดอุปกรณ์ใช้แล้วทิ้งจึงมีความสำคัญตั้งแต่ก่อนเริ่มฉายแสง

“พลาสมาที่ผ่านกระบวนการด้วยเมทิลีนบลู” เป็นคำบรรยายส่วนประกอบที่ผ่านกระบวนการแล้ว ไม่ใช่ข้อกำหนดที่ครบถ้วน การเปรียบเทียบที่มีประโยชน์ควรระบุระบบ รูปแบบการจัดระบบ แหล่งที่มาของพลาสมา และรุ่นของคำแนะนำการปฏิบัติงาน

ติดตามวัสดุตลอดกระบวนการและการประเมิน

ภาพประกอบข้างต้นแยกขั้นตอนต่าง ๆ ออกจากกัน ตารางประกอบนี้อธิบายว่าแต่ละขั้นตอนมีบทบาทอะไร และไม่สามารถยืนยันอะไรได้ด้วยตัวเอง

ตารางนี้เป็นแนวทางในการอ่านทำความเข้าใจกระบวนการที่ผ่านการตรวจสอบความใช้ได้แล้ว ไม่ใช่ขั้นตอนปฏิบัติงานที่ใช้แทนกันได้ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ตัวกรองสำหรับกำจัดสารและแหล่งกำเนิดแสงทำหน้าที่ต่างกัน Macopharma อธิบายว่า Blueflex ลดเมทิลีนบลูและอนุพันธ์ของเมทิลีนบลู รวมถึงสารประกอบอะซูร์และไทโอนีน ข้อกล่าวอ้างเรื่องการกำจัดสารเคมีควรเข้าใจว่าเป็นการลดลงที่วัดได้ ไม่ใช่คำรับรองว่าจะไม่มีโมเลกุลใดเหลืออยู่เลย

เหตุใดแหล่งกำเนิดแสงจึงเป็นส่วนหนึ่งของกระบวนการ

เมทิลีนบลูเป็นสารที่ตอบสนองต่อแสง การฉายแสงสามารถทำให้เป้าหมายทางชีวภาพเกิดความเสียหายทางเคมีได้ จึงมีการศึกษาการใช้เมทิลีนบลูร่วมกับแสงเพื่อทำให้ไวรัสหมดความสามารถในการติดเชื้อ ใน การศึกษาสีย้อมกลุ่มฟีโนไทอะซีนและแสงของ Mohr และคณะ การเปลี่ยนแหล่งกำเนิดแสงทำให้ทั้งการทำให้ไวรัสหมดความสามารถในการติดเชื้อและความเสียหายต่อโปรตีนในพลาสมาเปลี่ยนไป

เรื่องนี้ช่วยป้องกันการตีความแบบรวบรัดที่พบบ่อย คือการถือว่าชื่อสีย้อมอธิบายกระบวนการทั้งหมดแล้ว หลอดไฟ ถุง เส้นทางแสง หรือวัสดุที่แตกต่างกันอาจเปลี่ยนการได้รับแสงได้ คู่มือภาพรวมเกี่ยวกับ วิธีศึกษาการบำบัดแบบโฟโตไดนามิกด้วยเมทิลีนบลู อธิบายว่าทำไมจึงต้องระบุสูตรตำรับและการฉายแสงไว้ในคำอธิบายเดียวกัน

อุณหภูมิเป็นตัวอย่างที่มีประโยชน์อย่างยิ่ง การศึกษากระบวนการ THERAFLEX ที่อุณหภูมิต่างกันในปี 2018 เปรียบเทียบพลาสมาที่อุณหภูมิใกล้ 5°C, 22°C และ 30°C ที่อุณหภูมิต่ำที่สุด ผู้วิจัยพบว่าเม็ดยาละลายได้ไม่ดีเท่า และการทำให้ไวรัสทั้งสามชนิดที่ศึกษาหมดความสามารถในการติดเชื้อทำได้ลดลง อุณหภูมิที่สูงขึ้นเพิ่มการเปลี่ยนแปลงของระยะเวลาการแข็งตัวของเลือดและการสูญเสียการทำงานของปัจจัยการแข็งตัวของเลือด

ผลการศึกษาเหล่านี้ไม่ได้กำหนดช่วงอุณหภูมิการปฏิบัติงานใหม่ แต่ช่วยอธิบายว่าทำไมหน่วยบริการโลหิตต้องใช้เงื่อนไขที่ระบุไว้: การเปลี่ยนพารามิเตอร์เพื่อให้ผลลัพธ์ด้านหนึ่งดีขึ้นอาจทำให้ผลลัพธ์อีกด้านแย่ลง

ส่วนใดของระบบที่ลดจุลชีพ?

การลดเชื้อก่อโรคที่วัดได้หลังจบกระบวนการทั้งหมด ไม่อาจถือได้โดยอัตโนมัติว่าเกิดจากสีย้อมที่ถูกกระตุ้นด้วยแสงเพียงอย่างเดียว

ใน การศึกษาทดสอบระบบด้วยพลาสมาที่จงใจทำให้ปนเปื้อนในปี 2015 ผู้วิจัยเก็บตัวอย่างวัสดุหลังแต่ละขั้นตอนของกระบวนการ การกรองเซลล์เป็นส่วนสำคัญที่ทำให้แบคทีเรียลดลง สำหรับแบคทีเรียขนาดเล็ก Brevundimonas diminuta ขั้นตอนแรกนั้นทำให้ลดลงได้ 1.7-log; การฉายแสงและการกรองสีย้อมในขั้นตอนถัดมาทำให้การลดลงโดยรวมเป็นอย่างน้อย 3.7 logs ซึ่งต่ำกว่าขีดจำกัดการตรวจพบของวิธีทดสอบ

นี่คือผลของระบบที่มีหลายขั้นตอนร่วมกัน ไม่ได้แสดงว่าสารละลายเมทิลีนบลูทั่วไปจะลดแบคทีเรียได้เท่ากัน ความแตกต่างนี้ใช้กับการอ่าน งานวิจัยด้านการต้านจุลชีพของเมทิลีนบลู ในภาพรวมด้วยเช่นกัน

การลดลงแบบ log อธิบายอัตราส่วนระหว่างปริมาณวัสดุที่มีความสามารถในการติดเชื้อที่วัดได้ตอนเริ่มต้นกับปริมาณที่เหลืออยู่ การลดลงสาม log คือการลดลงหนึ่งพันเท่า “ต่ำกว่าขีดจำกัดการตรวจพบ” หมายความว่าวิธีทดสอบไม่สามารถวัดปริมาณที่เหลืออยู่ภายใต้เงื่อนไขการทดสอบนั้นได้ ไม่ใช่หลักฐานยืนยันว่าปราศจากเชื้ออย่างสมบูรณ์ หรือใช้ได้กับจุลชีพทุกชนิดที่ยังไม่ได้ทดสอบ ชนิดของไวรัส ปริมาณเชื้อตั้งต้น องค์ประกอบพื้นฐานของตัวอย่าง และความไวของวิธีทดสอบยังคงเป็นส่วนจำเป็นของข้อกล่าวอ้าง

รักษาหน้าที่ที่พลาสมาจะถูกนำไปใช้

กระบวนการหนึ่งอาจลดความสามารถในการก่อการติดเชื้อไปพร้อมกับเปลี่ยนแปลงโปรตีนที่มีความสำคัญทางคลินิก ดังนั้น การวัดเฉพาะการลดเชื้อก่อโรคจึงทำให้การประเมินยังไม่ครบถ้วน

ใน การเปรียบเทียบแหล่งที่มาของพลาสมาและระยะเวลากระบวนการในปี 2014 สัดส่วนแฟกเตอร์ VIII ที่คงเหลือหลังผ่านกระบวนการด้วยเมทิลีนบลูอยู่ระหว่าง 78% ถึง 89% ในชุดการศึกษาต่าง ๆ สัดส่วนที่คงเหลือขึ้นอยู่กับแหล่งที่มาของพลาสมา และผู้วิจัยยังประเมินไฟบริโนเจนด้วย ตัวเลขเหล่านี้เป็นผลการวัดทางห้องปฏิบัติการของส่วนประกอบที่ผ่านกระบวนการแล้ว ไม่ใช่ร้อยละของประสิทธิผลทางคลินิกในผู้ป่วย

ลองพิจารณาพลาสมาสองหน่วยที่มีระดับปัจจัยการแข็งตัวของเลือดตั้งต้นต่างกัน แม้จะคงสัดส่วนการทำงานไว้ได้เท่ากันระหว่างกระบวนการ ระดับสุดท้ายก็จะต่างกัน ในทางกลับกัน สัดส่วนที่คงเหลือสูงกว่าไม่ได้หมายความว่าความเข้มข้นสุดท้ายจะสูงกว่าเสมอไป ควรอ่านทั้งผลการวัดก่อนและหลังกระบวนการ รวมถึงข้อกำหนดการอนุมัติปล่อยที่เกี่ยวข้อง

ผลลัพธ์ในผู้ป่วยต้องอาศัยหลักฐานอีกประเภทหนึ่ง การศึกษาคุณภาพส่วนประกอบเพียงอย่างเดียวไม่สามารถยืนยันได้ว่า การควบคุมภาวะเลือดออก ความต้องการรับเลือด หรืออัตราเหตุการณ์ไม่พึงประสงค์จะเทียบเท่ากันในประชากรผู้ป่วยกลุ่มใดกลุ่มหนึ่ง

แยกหลักฐานของกระบวนการออกจากข้อกล่าวอ้างเรื่องการรักษา

ถุงพลาสมาทำให้สามารถควบคุมการสัมผัสได้ เพราะมีปริมาตร รูปทรง ลำดับขั้นตอนกระบวนการ และผลลัพธ์ที่วัดได้ซึ่งกำหนดไว้ชัดเจน ส่วนคนมีเนื้อเยื่อ ระบบไหลเวียนเลือด กระบวนการเมแทบอลิซึม และตำแหน่งที่ติดเชื้อ ซึ่งการทดลองนี้ไม่ได้จำลองขึ้นมา

ด้วยเหตุนี้ ข้อกล่าวอ้างเรื่องการรักษา HIV เทียบกับหลักฐานการทำให้ไวรัสหมดความสามารถในการติดเชื้อในพลาสมา และ หลักฐานเกี่ยวกับเมทิลีนบลูสำหรับ COVID-19 และภาวะลองโควิด จึงต้องได้รับการประเมินทางคลินิกแยกต่างหาก การแสดงว่าลดความสามารถในการก่อการติดเชื้อในวัสดุที่ได้รับบริจาคได้ ไม่ได้ตอบคำถามใดในสองเรื่องนี้

สำหรับการใช้งานในหน่วยบริการโลหิต ควรประเมินส่วนประกอบที่ใช้จริงและระบบที่ได้รับอนุญาตในพื้นที่ การตรวจสอบความใช้ได้เฉพาะสำหรับจุลชีพแต่ละชนิด การคงหน้าที่ของโปรตีน สารเคมีตกค้าง และมาตรการควบคุมการอนุมัติปล่อย ตามที่ผู้ผลิตระบุ ความพร้อมในการจัดหาผลิตภัณฑ์แตกต่างกันไปในแต่ละประเทศ การเคยใช้งานในอดีตหรือการทดลองที่ประสบผลสำเร็จไม่ได้ยืนยันว่าปัจจุบันได้รับอนุญาตในทุกแห่ง หน่วยของหลักฐานที่มีประโยชน์คือกระบวนการทั้งหมดที่ผ่านการตรวจสอบความใช้ได้แล้ว ซึ่งนำไปใช้กับส่วนประกอบพลาสมาตามที่ระบุไว้