Кабуди метилен ва иддаоҳо дар бораи герпесвирусҳо: табхоли лаб, EBV ва ғайрифаъолсозии вирус

Дар ин баҳс як калима ду мафҳумро дар бар мегирад ва онҳо ба номҳои алоҳида ниёз доранд. Мафҳуми якум ғайрифаъолсозии вирион аст: ранг, оксиген ва рӯшноӣ бо зарраи вирус дар моеъ рӯ ба рӯ мешаванд ва онро чунон осеб медиҳанд, ки дигар такрор шуда наметавонад. Мафҳуми дуюм табобати сироят дар инсон аст: камтар шудани табхоли лаб, зудтар шифо ёфтан, камтар хориҷ шудани вирус ё паст шудани сарбории вируси Эпштейн–Барр. Якум барои вируси герпеси одӣ борҳо дар озмоишгоҳ нишон дода шудааст. Дуюм барои кабуди метилени даҳонӣ бар зидди вируси герпеси одӣ ё вируси Эпштейн–Барр нишон дода нашудааст. Вақте ин фарқ равшан мешавад, ҷудо кардани адабиёти илмӣ осон аст.

Дар баробари ин, иштибоҳи дуюм низ вуҷуд дорад. HSV ва EBV ба як оилаи бузурги вирусҳо мансубанд, аммо дар бофтаҳои гуногун бемориҳои гуногунро ба вуҷуд меоранд. Табхоли лаб осеби сатҳӣ бо такроршавии маҳаллии литикии вирус аст: ба он ранг молидан ва ҳамон ҷойро равшан кардан мумкин аст. EBV ба таври ниҳонӣ дар захираҳои ҳуҷайраҳои B, ки дар хун ва бофтаи лимфоидӣ паҳн шудаанд, боқӣ мемонад; на ранги маҳаллӣ ва на чароғи сурх ба тамоми ин захира расида метавонанд. Натиҷа дар як шароит ба шароити дигар интиқол намеёбад. Хонандагоне, ки мехоҳанд усули умумии чунин ҷудокуниро бидонанд, онро дар дастури хондани таҳқиқоти кабуди метилен меёбанд.

Фотоинактиватсия дар озмоишгоҳ: HSV-и берун аз ҳуҷайра, бо зарурати рӯшноӣ

Қадимтарин санҷиши мустақим ба ҷойи як штамми озмоишгоҳӣ изолятҳои нави клиникиро истифода бурд. Дар таҳқиқоти ғайрифаъолсозии фотодинамикии herpesvirus hominis дар соли 1975, 37 изолят аз осебҳои узвҳои таносул ва даҳон бо кабуди метилен дар консентратсияи 10 микромоляр омехта карда шуданд, як соат дар торикӣ нигоҳ дошта шуданд ва сипас ба ду қисм тақсим шуданд: яке дар торикӣ монд ва дигаре панҷ дақиқа бо ду найчаи флуоресцентии 15 ваттӣ аз масофаи 15 cm равшан карда шуд. Аз 37 изолят, 27-то танҳо дар рӯшноӣ қобилияти сироятнокии ошкоршавандаро аз даст доданд ва дар 4-то он зиёда аз 100 маротиба кам шуд. Намунаҳои назоратии торик қобилияти сироятнокиро нигоҳ доштанд: бе рӯшноӣ ин консентратсия намунаро безарар накард.

Таҳқиқоти баъдӣ нишон дод, ки таъсири танҳо ранг бо рӯшноӣ дар баъзе шароит то чӣ андоза маҳдуд буда метавонад. Дар озмоишҳои соли 1979 бо кабуди метилен, рӯшноӣ ва барқ бар HSV-1 ва HSV-2, ранги 10 микромолярӣ бо рӯшноии лампаи тафсон дар давоми 180 сония миқдори HSV-1-и сирояткунандаро тақрибан 60 фоиз, яъне қариб 0.4 log кам кард. Танҳо илова кардани ҷараёни хурди доимии барқ коҳишро дар ҳамон система аз 99.99 фоиз бештар кард. Танҳо рӯшноӣ, танҳо ҷараён ва рӯшноӣ бо ҷараён бе ранг таъсири кам доштанд. Таъсири бузург таҷҳизоти барқиро талаб мекард, бинобар ин ин мақоларо набояд ҳамчун далели он овард, ки ранг бо чароғи одӣ мунтазам нобудсозии чор log медиҳад.

Сипас таҳқиқоти механизмҳо санҷиданд, ки зарраҳои коркардшуда ҳанӯз чӣ кор карда метавонанд. Таҳқиқоти соли 1980 дар Journal of Clinical Investigation оид ба механизмҳои фотодинамикӣ дар HSV кандашавиҳои якзанҷираро дар ДНК-и вирус бе бартарии кандашавиҳои дузанҷира ошкор кард: вирионҳои коркардшуда ҳанӯз ба ҳуҷайраҳо мечаспиданд ва ба онҳо ворид мешуданд, аммо раванди бакамолрасӣ бозмемонд. Таҳқиқоти давраи сироят пас аз кабуди метилен ва рӯшноӣ дар соли 1997 инро бо ранги 1 микромолярӣ ва рӯшноии сурх тасдиқ кард: вайроншавии шадиди парда набуд, воридшавӣ ва озодшавии ДНК бетағйир монданд, аммо такроршавӣ бо таҷзияи ДНК-и вобаста ба равшанкунӣ қатъ шуд. Муқоисаи оксигени синглетӣ дар соли 1995 нақши оксигени синглетиро бо иштироки эҳтимолии иловагии реаксияҳои радикалӣ нишон дод. Тафсилот дар бораи чӣ гуна кабуди метилен рӯшноиро ҷаббида, шаклҳои фаъоли оксигенро ҳосил мекунад шарҳ медиҳанд, ки чаро ранг, оксиген ва фотонҳо бояд дар нуқтаи ҳадаф якҷо ҳозир бошанд.

Равшантарин далели миқдорӣ аз таҳқиқоти маҳсулоти хун бармеояд, ки ҳамзамон равшантарин ҳушдор аз тафсири аз ҳад зиёд аст. Дар таҳқиқоти соли 2013 оид ба кам кардани патогенҳо дар плазма бо LED-ҳои сурхи 627 nm, HSV-и ба плазма иловашуда пас аз 60 дақиқа дар консентратсияи 1 микромоляр тақрибан 5.2 log ва дар консентратсияи 10 микромоляр 6.0 log кам шуд. Ин безараргардонии моеъи равшаншуда аст, на табобати ҳолати ниҳонии вирус дар нейронҳо, ва он пешгӯӣ намекунад, ки маҳлули фурӯбурдашуда дар дохили торики бадан чӣ мекунад.

Табобати маҳаллии осебҳо: таҳқиқоти хурд, кӯҳна ва натиҷаҳои гуногун

Дар гузоришҳои истифодаи маҳаллӣ рангро ба осеб мемоланд ва онро равшан мекунанд, ки ҳадди ақал тартиби ҷойгиршавии озмоишгоҳиро нигоҳ медорад. Қадимтарини онҳо гузориши як ҳолати экземаи герпетикӣ — суперинфексияи паҳншудаи HSV дар заминаи экзема — аст. Гузориши соли 1975 оид ба экземаи герпетикӣ, кабуди метилен ва рӯшноӣ беҳбудии зудро пас аз истифодаи маҳаллии ранг бо рӯшноӣ тавсиф кард; ранги 10 микромолярӣ дар рӯшноӣ вирускуш буд, аммо дар торикӣ не. Дар шарҳи он истифодаи маҳлули 0.1-фоиза дар нисфи минтақа ҳамчун муқоиса дар доираи як бемор зикр шудааст. Ҳамчун далел барои табхоли лаб, ин мушоҳидаи як бемор аз он давра бо дозиметрияи нокифоя аст.

Силсилаи бузургтари таърихӣ ба осебҳои узвҳои таносул дахл дошт. Дар силсилаи соли 1975 оид ба герпеси узвҳои таносул дар 56 бемор, 36 нафар кабуди метилен гирифтанд, аммо танҳо 35 нафари аввал ба таври тасодуфӣ байни се ранг тақсим шуданд, бинобар ин ин гурӯҳ озмоиши бенуқсон набуд. Гузориш шуд, ки тақрибан 70 фоизи ҳолатҳои такроршавандаи табобатшуда дар давоми қариб 48 соат беҳтар шуданд, вале басомади бозгаштҳо ба таври назаррас кам нашуд. Равшанкунӣ дар хона бо чароғи флуоресцентӣ ё нури офтоб назорат намешуд. Беҳбудии шадид бе кам шудани бозгаштҳо ба амали маҳаллӣ мувофиқ аст, ки ба осеби мавҷуда таъсир мекунад, аммо на ба захираи ниҳонии вирус. Ҳамин эҳтиёт ба протоколҳои табобати фотодинамикӣ бо истифодаи кабуди метилен низ дахл дорад.

Озмоишҳои муосири табхоли лаб хурданд ва ба натиҷаи ягона намерасанд. Дар силсилаи соли 2009 бо чор бемори герпеси лаб ранги 0.01-фоиза бо лазери 660 nm ва 120 J ба ҳар cm-и мураббаъ истифода шуд ва шифоёбии зуд гузориш гардид, аммо гурӯҳи назоратӣ набуд ва баъдан фотобиомодулятсия гузаронида шуд, чунон ки дар силсилаи ҳолатҳои фотодинамикии герпеси лаб дар соли 2009 тавсиф шудааст. Тақсимоти тасодуфии 75 бемор ба фотодинамика, ацикловири маҳаллӣ ё ҳар ду, тибқи озмоиши табобати фотодинамикӣ ва ацикловир дар соли 2021, дар вақти шифоёбӣ ё дард фарқе нишон надод. Озмоиши тасодуфии 24 бемор бо qPCR барои HSV-1 дар бартарафшавии осеб ё бозгашт дар давоми як сол фарқе наёфт; он дар озмоиши тасодуфии табобати фотодинамикии зиддимикробӣ барои герпеси одӣ дар соли 2025 тавсиф шудааст. Озмоиши соли 2025 бо 60 бемор як маҷмуа — фотодинамикаи ранг, фотобиомодулятсия ва дренажи обилаҳо — ро санҷид ва сабукии зудтари дардро гузориш кард, ки онро ба ранг нисбат додан мумкин нест; ин дар гузориши соли 2025 оид ба фотодинамика ва фотобиомодулятсияи якҷоя оварда шудааст.

Гузоришдиҳӣ оид ба таъсирҳои номатлуб дар ин ҷо маҳдуд аст. Мақолаҳои соли 1975 усулҳои муосири ошкоркунии онҳоро надоранд. Таҳқиқоти хурди баъдӣ таъсирҳои шадиди кам ё набудани онҳоро гузориш карданд, аммо ранг гирифтани кабуд хоси ин усул аст ва озурдагии маҳаллии фототоксикӣ ҳамоно имконпазир мебошад. Рангмолӣ бо чароғ аз фурӯ бурдани ранг фарқ мекунад, аз ин рӯ маълумот оид ба бехатарии кабуди метилен роҳҳои истифодаро алоҳида баррасӣ мекунад.

EBV: далели мустақим барои кабуди метилен вуҷуд надорад

Барои EBV ҷустуҷӯ набудани далелро нишон медиҳад. Ҳеҷ озмоиш ё таҳқиқоти назоратшавандаи тақризшудае, ки барои ин баррасӣ пайдо шуд, нишон намедиҳад, ки кабуди метилен бо рӯшноӣ ё бе он қобилияти сироятнокии EBV-ро кам мекунад, фаъолшавии дубораи онро пахш мекунад ё сарбории вирусиро дар одамон паст мекунад. Таҳқиқоти ҳуҷайраҳои саратони носу ҳалқи EBV-мусбат ҳассоскунандаҳои дигарро истифода мебаранд ва қобилияти зиндамонии омосро месанҷанд, на поксозии вирус бо кабуди метиленро. Баррасиҳо EBV-ро дар қатори вирусҳое меоранд, ки ба озмоишҳои оянда ниёз доранд, на дар қатори нишондодҳои тасдиқшуда.

Биология мефаҳмонад, ки чаро натиҷаи HSV дар найчаи озмоиширо ба ин ҷо татбиқ кардан мумкин нест. Табобати табхоли лаб ҳар се шарти зарурӣ — ранг, оксиген ва фотонҳо — ро дар як сатҳи дастрас ҷой медиҳад. EBV дар ҳолати ниҳонӣ асосан дар ҳуҷайраҳои B-и дар хун ва бофтаи лимфоидӣ паҳншуда боқӣ мемонад. Рӯшноии сурхи маҳаллӣ ин захираи паҳншударо фаро гирифта наметавонад ва ранги фурӯбурдашуда дар он ҷойҳо рӯшноии ҳадафманд фароҳам намеорад. Нобуд кардани ҳуҷайраи омоси EBV-мусбат бо ҳассоскунандаи дигар нобудсозии ҳуҷайра аст, на далели фаъолияти зиддивирусӣ. Ҳангоми хондан дар бораи он ки сарбории вирусӣ ва нишондиҳандаҳои фаъолшавии дубора воқеан чӣ гуна чен карда мешаванд, ин холигӣ муҳим аст.

Табобати даҳонӣ ва иштибоҳи фосилаи бебозгашт

Ҳеҷ озмоиши назоратшаванда дар одамон, ки барои ин баррасӣ пайдо шуд, нишон намедиҳад, ки кабуди метилени системавӣ ё даҳонӣ бозгашти табхоли лабро кам мекунад, шифоёбиро кӯтоҳ мекунад, хориҷшавии вирусро паст мекунад ё ягон нишондиҳандаи натиҷавии EBV, ба монанди шумораи нусхаҳои ДНК дар хун ё оби даҳон ё нишондиҳандаҳои муайяни литикиро тағйир медиҳад. Адабиёти илмӣ оид ба герпес дар одамон ранги маҳаллиро бо рӯшноии маҳаллӣ истифода мебарад. Истифодаи вояҳои системавӣ бе равшанкунии ҳадафманд дахолати дигар аст ва ба озмоиши худ ниёз дорад: тасодуфӣ, кӯр ва бо назорати плацебо, бо ҳолатҳои тасдиқшудаи такроршаванда, давраи муқаддимавӣ барои муайян кардани басомади ибтидоӣ, санҷишҳои пешакӣ муайяншудаи таъсири дахолат, шаш то дувоздаҳ моҳи пайгирӣ, гирифтани намунаҳои пайдарпай бо тампон барои qPCR, сабти омилҳои ангезанда ва назорати бехатарӣ. Принсипҳои умумии воябандии даҳонӣ ва ҷаббиши кабуди метилен ҷойи ин нишондиҳандаҳои натиҷавиро намегиранд.

Маҳз дар ин ҷо як қиссаи маъмул беасос мемонад. Касе якбора чанд дахолатро оғоз мекунад, гузориш медиҳад, ки моҳҳо табхоли лаб надошт ва инро ба яке аз онҳо нисбат медиҳад. Хуруҷҳои HSV гурӯҳ-гурӯҳ пайдо мешаванд ва баъд моҳҳо нопадид мегарданд, бе он ки вирус аз ганглияҳои ҳиссӣ бартараф шавад. Омилҳои ангезанда тағйир меёбанд, интизорӣ ба гузоришдиҳӣ таъсир мерасонад ва худи тасодуф фосилаҳоро ба вуҷуд меорад. Бо чанд тағйироти ҳамзамон муқоисаи муқобилфактӣ вуҷуд надорад, ки ин фосиларо ба як ҷузъ нисбат диҳад. Силсилаи соли 1975 оид ба герпеси узвҳои таносул намунаи баръаксро нишон дод: беҳбудии шадид дар баробари басомади бетағйири бозгашт. Шифо додани ин хуруҷ ҳамон мафҳуми пешгирии хуруҷи навбатӣ нест.

Ҷадвали далелҳо аз рӯйи вирус ва шароит

Чӣ гуна ин далелҳоро истифода бурдан лозим аст

Дар бораи ҳар истинод чор савол диҳед. Рӯшноӣ ё торикӣ, зеро нобудсозии фотодинамикӣ нобудсозии системавиро пешгӯӣ намекунад. Вирионҳои озод, осеби мавҷуда ё захираи ниҳонӣ, зеро танҳо ҳадафи мувофиқ ба иддао ҷавоб медиҳад. Қобилияти сироятнокӣ, шифоёбӣ, бозгашт ё сарбории вирусӣ, зеро рақами сироятнокӣ ба савол дар бораи бозгашт ҷавоб дода наметавонад. HSV ё EBV, зеро осеби дастрас ва захираи паҳншудаи ҳуҷайраҳои B мушкилоти гуногунанд. Далелҳои мавҷуда як изҳороти маҳдудро дастгирӣ мекунанд: кабуди метилен метавонад HSV-ро бо қувваи зиёд фотоинактиватсия кунад, вақте вируси берун аз ҳуҷайра бо ранг, оксиген ва рӯшноии мувофиқ рӯ ба рӯ мешавад. Далелҳо барои табобати аз ҷиҳати клиникӣ муҳими осебҳои такроршаванда маҳдуд ва гуногунанд, далелҳо барои пешгирӣ бо роҳи даҳонӣ вуҷуд надоранд ва далели мустақими таъсири зидди EBV вуҷуд надорад. Фосилаи ороми бе табхоли лаб ҳангоми истифодаи чанд табобат ҳеҷ яке аз инҳоро тағйир намедиҳад.