Муайян кардани кабуди метилен дар озмоишгоҳ: спектрҳои инфрасурх ва усулҳои иловагӣ

Тасаввур кунед, ки се озмоишгоҳ ҳамон як хокаи кабудро мегиранд. Аввалӣ спектри инфрасурхро сабт карда, онро кабуди метилен эълон мекунад. Дуюмӣ хроматографияро анҷом дода, мавҷудияти 0.4% Azure B-ро гузориш медиҳад. Сеюмӣ дифраксияи нурҳои рентгениро аз кристаллҳо сабт карда, шакли гидратиро муайян мекунад. Ҳар се дуруст мегӯянд, аммо ҳеҷ кадом ба ду саволи дигар ҷавоб надодааст. Нофаҳмӣ вақте оғоз мешавад, ки як натиҷа ҳамчун ҷавоб ба ҳар се савол қабул гардад.

Ин мақола он саволҳоро аз ҳам ҷудо мекунад. Муайянкунӣ бо спектроскопияи инфрасурх айнияти молекулавиро дар муқоиса бо стандарти истинодӣ тасдиқ мекунад. Хроматография таркибро муайян мекунад. Дифраксия шакли ҳолати сахтро муайян мекунад. Мувофиқати айният шаҳодатномаи тозагӣ нест.

Муайянкунӣ бо спектроскопияи инфрасурх ба як савол ҷавоби хуб медиҳад

Санҷиши фармакопеявии айнияти кабуди метилен муқоисаи спектр бо стандарт аст, на рӯйхати қуллаҳо барои санҷиш. Дар пешнамоиши монографияи USP оид ба кабуди метилен, бахши Identification A спектроскопияи инфрасурхро бо оптикаи ATR ё ҳабчаи бромиди калий пешбинӣ мекунад. Спектри намуна бояд ба спектри стандарти истинодии USP мувофиқат кунад ва намунаву стандарт бояд дар шароити баробар омода ва сабт шаванд. Ҳеҷ рӯйхати собити ададҳои мавҷии ташхисӣ асоси ҳукм нест. Ҳукмро рӯйҳамгузории спектрҳо муайян мекунад.

Ин интихоби тарҳ хусусияти спектрҳои FTIR-и кабуди метиленро инъикос мекунад. Нишонаҳои қавитарин дар минтақаи «изи ангушт» ҷойгиранд. Таъйиноти дар адабиёт овардашуда пайваста банди асосии ҳалқаи конъюгатсияшударо дар наздикии 1590 то 1600 cm-1 ҷойгир мекунанд; дар ин минтақа модҳои кашиши пайвандҳои ароматии карбон-карбон ва карбон-нитроген бо ҳам пайвастанд. Бандҳои дигар дар наздикии 1490 ва 1390 cm-1 хусусияти деформатсияи ҳалқа, карбон-нитроген ва карбон-гидроген доранд. Бандҳои наздики 1355 ва 1330 cm-1 ба пайвандҳои карбон-нитрогени гурӯҳи диметиламино ва деформатсияҳои метил вобастаанд. Нишонаҳои наздики 1225 то 1250 cm-1 ба сохтори гетеросиклӣ тааллуқ доранд, дар ҳоле ки бандҳои наздики 1170 то 1130 ва 1066 cm-1 хусусияти карбон-сулфур доранд ва хамиши ароматии C-H дар наздикии 880 cm-1 ҷойгир аст. Модҳои кашиш дар ададҳои мавҷии баландтар пайдо мешаванд: C-H-и ароматӣ дар наздикии 3040 cm-1 ва C-H-и N-метил тақрибан байни 2900 ва 3000 cm-1. Таъйиноти нашршуда дар ҷузъиёт фарқ мекунанд, зеро скелети фенотиазиний ҳамчун низоми ба ҳам пайваст меларзад; бинобар ин, ҳар ҷадвали алоҳидаи таъйинотро ҳамчун маълумоти гузоришшуда қабул кунед, на ҳамчун ягона таъйиноти имконпазир.

Ду таъсири омодасозӣ сазовори диққатанд, зеро онҳо спектрҳои IR-и кабуди метиленро бе тағйир додани худи рангкунанда дигар мекунанд. Якум, маводи гидратшуда банди васеи O-H-ро тақрибан дар 3300 то 3500 cm-1 ва хамиши обро дар наздикии 1630 то 1640 cm-1 нишон медиҳад; шаклҳои гуногуни гидратӣ бандҳои минтақаи «изи ангушт»-ро ба андозаи ченшаванда ҷойиваз мекунанд. Дуюм, матритсаи ҳабчаи KBr гигроскопӣ аст: намии ҷаббидашуда маҳз дар ҳамин минтақаҳои об бандҳо ба вуҷуд меорад ва метавонад бо оби гидратии намуна иштибоҳ шавад. Сабти намуна бо ATR матритсаи KBr-ро истифода намекунад, аммо шиддатҳои ATR вобаста ба умқи нуфуз, ки аз адади мавҷӣ вобаста аст, тағйир меёбанд. Аз ин рӯ, спектри ATR ва спектри гузариши ҳамон хока мустақиман рӯйи ҳам гузошта намешаванд. Қоидаи амалӣ аз талаботи фармакопеявӣ бармеояд: намуна ва стандарти истинодиро, ки бо як усул сабт шудаанд, муқоиса кунед ва усули истифодашударо ҳуҷҷатгузорӣ намоед. Барои маълумот дар бораи химияи катион, намак ва гидратҳое, ки асоси ин спектрҳоро ташкил медиҳанд, ба маълумотномаи сохтор ва хосиятҳои кабуди метилен нигаред.

Ҷадвали интихоби усули таҳлилӣ

Ин ҷадвал воситаи интихоб аст. Ҳар сатрро аз чап ба рост хонед, то бифаҳмед, ки усул ба кадом савол ҷавоб медиҳад, натиҷаи қонеъкунанда чиро тасдиқ мекунад ва чӣ исботнашуда мемонад.

Чаро мувофиқати спектри инфрасурх шаҳодатномаи тозагӣ нест

Мувофиқати айният эҳтимоли рангкунандаи нодурустро истисно мекунад. Он рӯйхати пурраи таркиби намунаро намедиҳад. Се маҳдудият бештар аҳамият доранд.

Якум, моддаҳои сохторашон наздик дар спектри инфрасурх ба ҳам монанданд. Azure B аз кабуди метилен бо танҳо як гурӯҳи метил фарқ мекунад, бинобар ин спектри он ба спектри кабуди метилен хеле монанд аст. Омехтае, ки чанд фоиз Azure B дорад, ҳанӯз ҳам бо спектри истинодии кабуди метилен хуб рӯйи ҳам меафтад. Ошкор кардани ин омехта вазифаи хроматография аст, ки дар дастури омехтаҳо ва усулҳои санҷиши кабуди метилен шарҳ дода шудааст.

Дуюм, спектроскопияи инфрасурх усули таҳлили умумии намуна буда, нисбат ба ҷузъҳои каммиқдор ҳассосияти маҳдуд дорад. Миқдори ками рангкунандаҳои ҳамсохтор, ҳалкунандаҳои боқимонда ё бақияҳои ғайриорганикӣ зери бандҳои асосӣ пинҳон мешаванд. Набудани қуллаҳои иловагӣ далели заифи набудани омехтаҳост.

Сеюм, стандарти истинодӣ тамоми муқоисаро муайян мекунад. Стандарти таҷзияшуда, спектраш бар асари гидратшавӣ ҷойивазшуда ё нодуруст нигоҳубиншуда меъёри муқоисаро тағйир медиҳад. Ҷуфт кардани усулҳои номувофиқ, масалан арзёбии спектри ATR-и намуна нисбат ба спектри истинодии KBr, низ ҳамин таъсирро дорад. Дар баробари ҳар хулоса партияи стандарт, усул ва тарзи омодасозиро сабт кунед.

Омехтаҳо як огоҳии дигарро талаб мекунанд. Спектре, ки асосан мувофиқ аст, вале китфҳои қулла ё ғайримуқаррарии шиддат дорад, натиҷаи қонеъкунанда бо эзоҳ нест. Ин аломати он аст, ки намуна бояд пеш аз муайянкунӣ ҷудо карда шавад.

Усулҳои иловагӣ дар амал

HPLC-и кабуди метилен ба саволи таркиб ҷавоб медиҳад, ки спектроскопияи инфрасурх дода наметавонад. Усули ҷории фармакопеявӣ сутуни навъи фенилиро бо градиенти об-атсетонитрил, ки кислотаи трифторастетат дорад, истифода мебарад ва ошкорсозиро дар 246 nm анҷом медиҳад, на дар минтақаи намоён. Айният аз мувофиқати вақти нигоҳдорӣ бо стандарти истинодӣ муайян мешавад; ҳамин муқоиса барои муайянкунии миқдорӣ низ истифода мегардад. Санҷиши омехтаҳои органикӣ Azure B-ро бо маводи истинодии худаш дар вақти нигоҳдории нисбии наздики 0.8, нисбат ба кабуди метилен дар 1.0, муайян мекунад ва ҷудошавии баланди ду қулларо талаб менамояд. Ба интихоби дарозии мавҷ диққат диҳед: қатори деметилшавӣ тадриҷан дар самти қисми сурхи спектр нурро фурӯ мебарад — аз тионин дар наздикии 600 nm, тавассути Azure C, Azure A ва Azure B, то кабуди метилен дар наздикии 670 nm. Бинобар ин, детекторе, ки дар наздикии 660 nm танзим шудааст, ба моддаҳои ин қатор яксон ҷавоб намедиҳад ва миқдори баъзе гомологҳоро камтар нишон медиҳад. Таҳлили пурраи тамоми қатор, агар лозим бошад, бояд бо усули C18 LC-MS/MS ва стандартҳои мувофиқати тасдиқшуда барои ҳар моддаи таҳлилшаванда анҷом дода шавад.

Дифраксияи хока ба саволи ҳолати сахт ҷавоб медиҳад, ки ду усули боло маълумоти онро аз байн мебаранд ё ба назар намегиранд: ҳал кардани хока барои хроматография маълумоти кристаллиро нест мекунад ва ларзишҳои молекулавӣ дар бораи пайвандҳо маълумот медиҳанд, на дар бораи тартиби дурмасофаи ҷойгиршавӣ. Тасвирҳои дифраксионӣ фазаҳои гидратӣ ва дараҷаи кристаллнокиро аз ҳам фарқ мекунанд ва кабуди метилен нисбат ба аксари мавод ба чунин санҷиши дақиқ бештар ниёз дорад. Таҳқиқоти ҳолати сахт аз ҷониби Рагер ва ҳамкоронаш панҷ сохтори алоҳидаи гидратиро муайян кард: як пентагидрат, ду дигидрат, як моногидрат ва як гидрати мобайнӣ. Дар байни шаклҳои тавсифшуда тригидрати ҳақиқӣ ёфт нашуд. Дар ин ҷо коркарди озмоишгоҳӣ аҳамият дорад: намӣ ва ҳарорат устувории гидратҳоро тағйир медиҳанд, майдакунии шадид бошад метавонад фазаро дигар кунад ё дараҷаи кристаллнокиро коҳиш диҳад. Аз ин рӯ, намии нисбӣ ва ҳароратро назорат ва ҳуҷҷатгузорӣ кунед ва майдакуниро ба ҳадди ақал расонед. Нишонгузории гидратҳо ва таъсири он ба массаи баркашидашуда дар шаклҳои гидратии кабуди метилен ва нишонгузорӣ муфассалтар баррасӣ шудааст.

Фурӯбарии UV-Vis нақши ёрирасон дорад. Максимумҳои шинос рафтори интизоршавандаи маҳлулро тасдиқ мекунанд ва барои муайян кардани консентратсия имкон медиҳанд. Аммо маҳлули кабуде, ки дар дарозии мавҷи интизоршаванда нурро фурӯ мебарад, бо кабуди метилен мувофиқ аст, вале айнияти онро исбот намекунад, зеро рангкунандаҳои ҳамсохтор дар наздикии ҳамин минтақа нурро фурӯ мебаранд.

Пеш аз харид чӣ бояд пурсид

Ин фарқиятҳоро ба саволҳои харидорӣ табдил диҳед. Пурсед, ки кадом партия санҷида шудааст, кадом усул айниятро тасдиқ кардааст, оё дар санҷиши омехтаҳо бо HPLC маводи истинодии Azure B истифода шудааст ва оё шакли гидратӣ таҳқиқ шудааст ё танҳо тахмин гардидааст. Пеш аз ҳама, пурсед, ки оё шаҳодатнома тамоми мушаххасотро фаро мегирад ё танҳо санҷишҳои интихобшударо. Бисёр фурӯшандагоне, ки мутобиқат ба фармакопеяро иддао мекунанд, танҳо металлҳои вазнинро месанҷанд. Дар натиҷа, саволҳои айният, миқдори моддаи асосӣ, омехтаҳои органикӣ, ҳалкунандаҳо ва нишондиҳандаҳои микробиологӣ беҷавоб мемонанд.

Blupreme дар ҳамкорӣ бо истеҳсолкунандаи фармасевтии кабуди метилен тамоми мушаххасоти USP-ро месанҷад. Ин санҷишҳо айният, тозагӣ, омехтаҳои органикӣ, ҳалкунандаҳои боқимонда, омехтаҳои элементӣ, бақияи баъди сӯзондан, ҳудудҳои микробиологӣ ва эндотоксинҳои бактериявиро фаро мегиранд. Шаҳодатномаи таҳлили дастраси умум барои ҳар партия дар санҷиши сифати Blupreme нашр мешавад, то асоси муайянкунии миқдорӣ ва натиҷаҳои омехтаҳоро мустақиман хондан мумкин бошад, на аз рӯйи тахмин хулоса баровардан. Барои натиҷаҳои наздик ба 100% низ бояд асоси ҳисоб нишон дода шавад, чунон ки дастури натиҷаи муайянкунии миқдорӣ болотар аз 100 фоиз шарҳ медиҳад. Мувофиқати айният таҳқиқро оғоз мекунад. Маҷмӯи пурраи ҳуҷҷатҳо онро ба анҷом мерасонад.