ஆய்வகத்தில் மெத்திலீன் புளூவை அடையாளம் காணுதல்: அகச்சிவப்பு நிறமாலைகளும் துணை முறைகளும்

மூன்று ஆய்வகங்களுக்கு ஒரே நீலப் பொடி கிடைப்பதாகக் கற்பனை செய்யுங்கள். முதல் ஆய்வகம் அகச்சிவப்பு நிறமாலையைப் பதிவு செய்து, அது மெத்திலீன் புளூ என அறிவிக்கிறது. இரண்டாவது ஆய்வகம் குரோமடோகிராஃபி செய்து, 0.4% Azure B இருப்பதாகத் தெரிவிக்கிறது. மூன்றாவது ஆய்வகம் படிகங்களின் மீது எக்ஸ்-கதிர்களைச் செலுத்தி விளிம்புவிலகலை ஆய்வு செய்து, ஒரு நீரேற்ற வடிவத்தை அடையாளம் காண்கிறது. மூன்றுமே சரியானவை; ஆனால் அவற்றில் எதுவும் மற்ற இரண்டு கேள்விகளுக்குப் பதிலளிக்கவில்லை. ஒரு முடிவையே மூன்று கேள்விகளுக்குமான பதிலாகக் கருதும்போதுதான் குழப்பம் தொடங்குகிறது.

இந்தக் கட்டுரை அந்தக் கேள்விகளைத் தனித்தனியாகப் பிரிக்கிறது. அகச்சிவப்பு அடையாளச் சோதனை, குறிப்பு தரநிலையுடன் ஒப்பிட்டு மூலக்கூறு அடையாளத்தை உறுதிப்படுத்துகிறது. குரோமடோகிராஃபி கலவையின் உட்கூறுகளை உறுதிப்படுத்துகிறது. விளிம்புவிலகல் திடநிலை வடிவத்தை உறுதிப்படுத்துகிறது. அடையாளப் பொருத்தச் சோதனையில் தேர்ச்சி பெறுவது தூய்மைச் சான்றிதழுக்குச் சமமல்ல.

அகச்சிவப்பு அடையாளச் சோதனை ஒரு கேள்விக்குச் சிறப்பாகப் பதிலளிக்கிறது

மெத்திலீன் புளூவுக்கான அதிகாரப்பூர்வ மருந்தியல் நூலின் அடையாளச் சோதனை என்பது நிறமாலையைத் தரநிலையுடன் ஒப்பிடுவதாகும்; சிகரங்களின் சரிபார்ப்புப் பட்டியலைப் பயன்படுத்துவதல்ல. USP மெத்திலீன் புளூ தனிவிவரத்தின் முன்னோட்டத்தின்படி, அடையாளச் சோதனை A, ATR ஒளியியல் அமைப்பு அல்லது பொட்டாசியம் புரோமைடு மாத்திரையைப் பயன்படுத்தும் அகச்சிவப்பு நிறமாலையியலைக் குறிப்பிடுகிறது. மாதிரியும் தரநிலையும் சமமான சூழ்நிலைகளில் தயாரிக்கப்பட்டுப் பதிவு செய்யப்பட வேண்டும்; மாதிரியின் நிறமாலை USP குறிப்பு தரநிலையின் நிறமாலையுடன் பொருந்த வேண்டும். அடையாளத்தைக் காட்டும் அலைஎண்களின் நிர்ணயிக்கப்பட்ட பட்டியல் எதுவும் முடிவைத் தீர்மானிப்பதில்லை. நிறமாலைகளை ஒன்றின்மேல் ஒன்றாகப் பொருத்திப் பார்ப்பதே அதைத் தீர்மானிக்கிறது.

இந்த வடிவமைப்புத் தேர்வு, மெத்திலீன் புளூ FTIR நிறமாலைகள் எவ்வாறு செயல்படுகின்றன என்பதைப் பிரதிபலிக்கிறது. மிக வலுவான அம்சங்கள் கைரேகைப் பகுதியில் உள்ளன. வெளியிடப்பட்ட ஆய்வுகளில், முதன்மையான இணைவுற்ற வளையப் பட்டை தொடர்ந்து 1590 முதல் 1600 cm-1 அருகில் அடையாளப்படுத்தப்படுகிறது; இங்கு அரோமாட்டிக் கார்பன்-கார்பன் மற்றும் கார்பன்-நைட்ரஜன் நீட்சி அதிர்வுகள் ஒன்றோடொன்று இணைகின்றன. 1490 மற்றும் 1390 cm-1 அருகிலுள்ள பிற பட்டைகள் வளையம், கார்பன்-நைட்ரஜன், கார்பன்-ஹைட்ரஜன் உருமாற்றப் பண்புகளைக் கொண்டுள்ளன. 1355 மற்றும் 1330 cm-1 அருகிலுள்ள பட்டைகள் டைமெத்தில்அமினோ கார்பன்-நைட்ரஜன் பிணைப்புகள் மற்றும் மெத்தில் உருமாற்றங்களுடன் தொடர்புடையவை. 1225 முதல் 1250 cm-1 அருகிலுள்ள அம்சங்கள் பல்லணுவளையக் கட்டமைப்பைச் சேர்ந்தவை; 1170 முதல் 1130 மற்றும் 1066 cm-1 அருகிலுள்ள பட்டைகள் கார்பன்-சல்பர் பண்புகளைக் கொண்டுள்ளன. அரோமாட்டிக் C-H வளைவு 880 cm-1 அருகில் காணப்படுகிறது. நீட்சி அதிர்வுகள் அதிக அலைஎண்களில் தோன்றுகின்றன: அரோமாட்டிக் C-H சுமார் 3040 cm-1 அருகிலும், N-மெத்தில் C-H தோராயமாக 2900 முதல் 3000 cm-1 வரையிலும் காணப்படுகின்றன. பீனோதையசினியம் அடிப்படைக் கட்டமைப்பு ஒன்றோடொன்று இணைந்த அமைப்பாக அதிர்வதால், வெளியிடப்பட்ட பட்டை ஒதுக்கீடுகளின் விவரங்கள் வேறுபடுகின்றன. எனவே, எந்த ஒரு ஒதுக்கீட்டு அட்டவணையையும் ஒரே சாத்தியமான விளக்கமாக அல்லாமல், அந்த ஆய்வில் தெரிவிக்கப்பட்ட விளக்கமாகக் கருதுங்கள்.

தயாரிப்பின்போது ஏற்படும் இரண்டு விளைவுகளைக் கவனிக்க வேண்டும்; அவை சாயத்தை மாற்றாமலேயே மெத்திலீன் புளூ IR நிறமாலைகளை மாற்றுகின்றன. முதலாவதாக, நீரேற்றமடைந்த பொருளில் 3300 முதல் 3500 cm-1 பகுதியில் அகன்ற O-H பட்டையும், 1630 முதல் 1640 cm-1 அருகில் நீரின் வளைவு அதிர்வும் காணப்படுகின்றன. வெவ்வேறு நீரேற்ற வடிவங்கள் கைரேகைப் பட்டைகளை அளவிடக்கூடிய அளவில் இடம்பெயரச் செய்கின்றன. இரண்டாவதாக, KBr மாத்திரையின் ஊடகம் ஈரத்தை உறிஞ்சக்கூடியது: உறிஞ்சப்பட்ட ஈரம் அதே நீருக்கான பகுதிகளில் பட்டைகளை உருவாக்குவதால், மாதிரியின் நீரேற்ற நீராகத் தவறாகத் தோன்றலாம். ATR மாதிரிப் பதிவு KBr ஊடகத்தைத் தவிர்க்கிறது. ஆனால் ATR தீவிரங்கள் அலைஎண்ணைச் சார்ந்த ஊடுருவல் ஆழத்துக்கு ஏற்ப மாறுவதால், அதே பொடியின் ATR நிறமாலையையும் ஊடுகதிர் நிறமாலையையும் நேரடியாக ஒன்றின்மேல் ஒன்றாகப் பொருத்த முடியாது. அதிகாரப்பூர்வ மருந்தியல் நூலின் தேவையிலிருந்து நடைமுறை விதி தெளிவாகிறது: ஒரே தொழில்நுட்பத்தில் பதிவு செய்யப்பட்ட மாதிரியையும் குறிப்பு தரநிலையையும் ஒப்பிட்டு, பயன்படுத்தப்பட்ட தொழில்நுட்பத்தை ஆவணப்படுத்துங்கள். இந்த நிறமாலைகளுக்குப் பின்னுள்ள நேர்மின் அயனி, உப்பு மற்றும் நீரேற்ற வடிவங்களின் அடிப்படை வேதியியலுக்கு, மெத்திலீன் புளூ கட்டமைப்பு மற்றும் பண்புகள் குறிப்பு வழிகாட்டியைப் பார்க்கவும்.

பகுப்பாய்வு முறையைத் தேர்ந்தெடுப்பதற்கான அட்டவணை

இந்த அட்டவணை முறையைத் தேர்ந்தெடுப்பதற்கான கருவியாகும். ஒரு வரிசையை முழுவதும் படித்து, அந்த முறை எந்தக் கேள்விக்குப் பதிலளிக்கிறது, தேர்ச்சி முடிவு எதை உறுதிப்படுத்துகிறது, எது இன்னும் நிரூபிக்கப்படவில்லை என்பதை அறியுங்கள்.

அகச்சிவப்பு நிறமாலைப் பொருத்தம் ஏன் தூய்மைச் சான்றிதழ் அல்ல

அடையாளப் பொருத்தம், தவறான சாயமாக இருப்பதை நிராகரிக்கிறது. அது மாதிரியில் உள்ள அனைத்தையும் பட்டியலிடுவதில்லை. மூன்று வரம்புகள் மிகவும் முக்கியமானவை.

முதலாவதாக, நெருங்கிய வேதியியல் உறவுள்ள பொருட்கள் அகச்சிவப்பில் ஒத்த தோற்றமளிக்கின்றன. மெத்திலீன் புளூவுக்கும் Azure B-க்கும் உள்ள வேறுபாடு ஒரு மெத்தில் தொகுதி மட்டுமே; எனவே அதன் நிறமாலை மெத்திலீன் புளூவின் நிறமாலையை மிகவும் ஒத்திருக்கிறது. சில சதவீதம் Azure B உள்ள கலவையும் மெத்திலீன் புளூ குறிப்பு நிறமாலையுடன் நன்றாகப் பொருந்தும். அந்த மாசுப்பொருளைக் கண்டறிவது குரோமடோகிராஃபியின் பணியாகும்; இது மெத்திலீன் புளூ மாசுப்பொருட்கள் மற்றும் சோதனை முறைகள் வழிகாட்டியில் விளக்கப்பட்டுள்ளது.

இரண்டாவதாக, அகச்சிவப்பு நிறமாலையியல் என்பது மாதிரியை மொத்தமாக ஆய்வு செய்யும் தொழில்நுட்பம்; சிறிய அளவில் உள்ள உட்கூறுகளைக் கண்டறியும் அதன் உணர்திறன் வரையறுக்கப்பட்டது. குறைந்த அளவிலுள்ள தொடர்புடைய சாயங்கள், எஞ்சிய கரைப்பான்கள் அல்லது கனிம எச்சங்கள் முக்கியப் பட்டைகளுக்குள் மறைந்துவிடுகின்றன. கூடுதல் சிகரங்கள் இல்லாதது, மாசுப்பொருட்கள் இல்லை என்பதற்கான பலவீனமான ஆதாரமே.

மூன்றாவதாக, முழு ஒப்பீட்டையும் குறிப்பு தரநிலையே நிர்ணயிக்கிறது. சிதைவடைந்த, நீரேற்றத்தால் நிறமாலை இடம்பெயர்ந்த, அல்லது தவறாகக் கையாளப்பட்ட தரநிலை ஒப்பீட்டின் அளவுகோலை மாற்றிவிடுகிறது. ATR மாதிரி நிறமாலையை KBr குறிப்பு நிறமாலையுடன் மதிப்பிடுவது போன்ற பொருந்தாத தொழில்நுட்ப இணைப்பும் அதையே செய்கிறது. ஒவ்வொரு முடிவுடனும் தரநிலையின் தொகுதி, தொழில்நுட்பம், தயாரிப்பு முறை ஆகியவற்றைப் பதிவு செய்யுங்கள்.

கலவைகள் இன்னொரு இறுதி எச்சரிக்கையையும் தருகின்றன. பெருமளவு பொருந்தினாலும், சிகர ஓரங்களில் தோள்போன்ற அம்சங்கள் அல்லது தீவிரத்தில் இயல்புக்கு மாறான வேறுபாடுகள் உள்ள நிறமாலையை, சில குறிப்புகளுடன் தேர்ச்சி பெற்றதாகக் கருதக்கூடாது. அடையாளம் காண்பதற்கு முன் மாதிரியின் உட்கூறுகளைப் பிரிக்க வேண்டும் என்பதற்கான அறிகுறி அது.

நடைமுறையில் துணை முறைகள்

அகச்சிவப்பு முறையால் வழங்க முடியாத உட்கூறு விவரத்தை மெத்திலீன் புளூ HPLC வழங்குகிறது. தற்போதைய அதிகாரப்பூர்வ மருந்தியல் நூல் முறை, டிரைஃபுளோரோஅசிட்டிக் அமிலம் கொண்ட நீர்-அசிட்டோநைட்ரைல் படிப்படியான கலவை விகித மாற்றத்துடன் பீனைல் வகை நெடுவரிசையைப் பயன்படுத்துகிறது. கண்டறிதல் 246 nm-இல் நடைபெறுகிறது; கட்புல ஒளிப் பகுதியில் அல்ல. குறிப்பு தரநிலையுடன் தக்கவைப்பு நேரம் பொருந்துவதன் மூலம் அடையாளம் உறுதிப்படுத்தப்படுகிறது; அதே ஒப்பீடு உள்ளடக்க அளவீட்டையும் வழங்குகிறது. கரிம மாசுப்பொருள் சோதனை, Azure B-க்கான தனிக் குறிப்பு பொருளைப் பயன்படுத்தி அதை அடையாளம் காண்கிறது. மெத்திலீன் புளூவின் சார்பு தக்கவைப்பு 1.0 ஆக இருக்கும்போது, Azure B-யின் சார்பு தக்கவைப்பு சுமார் 0.8 ஆக உள்ளது; மேலும் இரு சிகரங்களுக்கும் இடையே உயர் பிரித்திறன் தேவைப்படுகிறது. அலைநீளத் தேர்வைக் கவனியுங்கள்: மெத்தில் நீக்கத் தொடரில், சுமார் 600 nm-இல் உறிஞ்சும் தையோனினிலிருந்து Azure C, Azure A, Azure B வழியாகச் சுமார் 670 nm-இல் உறிஞ்சும் மெத்திலீன் புளூ வரை, உறிஞ்சல் படிப்படியாகச் சிவப்புப் பகுதியை நோக்கி நகர்கிறது. எனவே, சுமார் 660 nm-இல் நிலையாக அமைக்கப்பட்ட கண்டறிவி இந்தத் தொடரிலுள்ள பொருட்களுக்கு ஒரே அளவில் பதிலளிக்காது; சில ஒத்த தொடர் உறுப்புகளின் அளவைக் குறைத்துக் காட்டும். தேவைப்படும்போது, முழுத் தொடரின் விரிவான பகுப்பாய்வு ஒவ்வொரு பகுப்பாய்வுப் பொருளுக்கும் தகுதிச் சரிபார்க்கப்பட்ட தரநிலைகளைப் பயன்படுத்தும் C18 LC-MS/MS முறையில் செய்யப்பட வேண்டும்.

மேலுள்ள இரண்டு முறைகளும் அழித்துவிடும் அல்லது கவனிக்காமல் விடும் திடநிலைத் தகவலைப் பொடி விளிம்புவிலகல் வழங்குகிறது: குரோமடோகிராஃபிக்காகப் பொடியைக் கரைப்பது படிகத் தகவலை அழிக்கிறது; மூலக்கூறு அதிர்வுகள் நீண்ட தூரக் கட்டமைப்பு அடுக்கமைவை அல்ல, பிணைப்புகளையே காட்டுகின்றன. விளிம்புவிலகல் வடிவங்கள் நீரேற்றக் கட்டங்களையும் படிகத்தன்மையையும் வேறுபடுத்துகின்றன. பெரும்பாலான பொருட்களைவிட மெத்திலீன் புளூவுக்கு இந்த ஆய்வு அதிகம் தேவைப்படுகிறது. Rager மற்றும் அவரது சக ஆய்வாளர்களின் திடநிலை ஆய்வு, ஐந்து தனித்துவமான நீரேற்றக் கட்டமைப்புகளை அடையாளம் கண்டது: ஒரு பென்டாஹைட்ரேட், இரண்டு டைஹைட்ரேட்டுகள், ஒரு மோனோஹைட்ரேட், ஒரு இடைநிலை நீரேற்ற வடிவம் ஆகியவை அவற்றில் அடங்கும். வகைப்படுத்தப்பட்ட வடிவங்களில் உண்மையான டிரைஹைட்ரேட் எதுவும் கண்டறியப்படவில்லை. இங்கு ஆய்வகக் கையாளுதல் முக்கியமானது: ஈரப்பதமும் வெப்பநிலையும் நீரேற்ற வடிவத்தின் நிலைத்தன்மையை மாற்றுகின்றன. கடுமையாக அரைப்பது கட்டத்தை மாற்றலாம் அல்லது படிகத்தன்மையைக் குறைக்கலாம். எனவே சார்பு ஈரப்பதத்தையும் வெப்பநிலையையும் கட்டுப்படுத்தி ஆவணப்படுத்துங்கள்; அரைப்பதைக் குறைந்தபட்சமாக வைத்திருங்கள். நீரேற்ற வடிவத்தின் பெயரிடல் மற்றும் எடையிடப்படும் நிறையில் அதன் விளைவு குறித்து மெத்திலீன் புளூ நீரேற்ற வடிவங்கள் மற்றும் பெயரிடலில் மேலும் விவாதிக்கப்பட்டுள்ளது.

UV-Vis உறிஞ்சல் ஒரு துணைப் பங்கை வகிக்கிறது. வழக்கமாகக் காணப்படும் உறிஞ்சல் உச்சங்கள், எதிர்பார்க்கப்படும் கரைசல் நடத்தையை உறுதிப்படுத்தி, செறிவு அளவீட்டுக்கு உதவுகின்றன. ஆனால் எதிர்பார்க்கப்படும் அலைநீளத்தில் உறிஞ்சும் நீலக் கரைசல் மெத்திலீன் புளூவுடன் பொருந்துவதாக மட்டுமே இருக்கிறது; அதை நிரூபிப்பதில்லை. ஏனெனில் தொடர்புடைய சாயங்களும் அருகிலுள்ள அலைநீளங்களில் உறிஞ்சுகின்றன.

வாங்குவதற்கு முன் என்ன கேட்க வேண்டும்

இந்த வேறுபாடுகளை வாங்கும்போது கேட்க வேண்டிய கேள்விகளாக மாற்றுங்கள். எந்தத் தொகுதி சோதிக்கப்பட்டது, எந்தத் தொழில்நுட்பம் அடையாளத்தை உறுதிப்படுத்தியது, HPLC மாசுப்பொருள் சோதனையில் Azure B குறிப்பு பொருள் பயன்படுத்தப்பட்டதா, நீரேற்ற வடிவம் ஆய்வு செய்து உறுதிப்படுத்தப்பட்டதா அல்லது அனுமானிக்கப்பட்டதா என்று கேளுங்கள். எல்லாவற்றுக்கும் மேலாக, சான்றிதழ் முழு விவரக்குறிப்பையும் உள்ளடக்குகிறதா அல்லது தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட சோதனைகளை மட்டுமே உள்ளடக்குகிறதா என்று கேளுங்கள். அதிகாரப்பூர்வ மருந்தியல் நூலுக்கு இணங்குவதாகக் கூறும் பல விற்பனையாளர்கள் கன உலோகங்களை மட்டுமே சோதிக்கின்றனர். இதனால் அடையாளம், உள்ளடக்க அளவீடு, கரிம மாசுப்பொருள், கரைப்பான் மற்றும் நுண்ணுயிர் தொடர்பான கேள்விகளுக்குப் பதில் கிடைப்பதில்லை.

மெத்திலீன் புளூ தயாரிக்கும் ஒரு மருந்துத் துறை உற்பத்தியாளருடன் இணைந்து, Blupreme முழு USP விவரக்குறிப்பின்படி சோதிக்கிறது. இதில் அடையாளம், தூய்மை, கரிம மாசுப்பொருட்கள், எஞ்சிய கரைப்பான்கள், தனிம மாசுப்பொருட்கள், எரித்த பின் எஞ்சும் பொருள், நுண்ணுயிர் வரம்புகள் மற்றும் பாக்டீரியா அகநச்சுகள் ஆகியவை அடங்கும். ஒவ்வொரு தொகுதிக்குமான பொதுவில் கிடைக்கும் பகுப்பாய்வுச் சான்றிதழ் Blupreme தரச் சோதனைப் பக்கத்தில் வெளியிடப்படுகிறது. எனவே உள்ளடக்க அளவீட்டின் அடிப்படையையும் மாசுப்பொருள் முடிவுகளையும் ஊகிப்பதற்குப் பதிலாக நேரடியாகப் படிக்கலாம். 100%-க்கு அருகிலுள்ள முடிவுகளுக்கும் அவற்றின் கணக்கீட்டு அடிப்படை குறிப்பிடப்பட வேண்டும்; இதை 100 சதவீதத்துக்கு மேலான உள்ளடக்க அளவீட்டு வழிகாட்டி விளக்குகிறது. அடையாளப் பொருத்தம் ஆய்வைத் தொடங்குகிறது. முழுமையான பதிவே அதை நிறைவு செய்கிறது.