Upakaji rangi kwa bluu ya methilini: mbinu za hadubini na atlasi ya picha halisi

Upakaji rangi kwa bluu ya methilini hurahisisha kutofautisha vipengele vya seli ambavyo vingekuwa hafifu katika hadubini ya uga angavu. Unaweza kuwasaidia wanafunzi kutambua kiini cha seli ya shavu au kuchunguza mipaka na mpangilio wa vijiumbe. Hata hivyo, kitu cha bluu ni kile kilichoonekana tu. Kutaja kiumbe, kukipima, na kuamua kama kinaashiria ugonjwa ni kazi tofauti.

Picha ya jalada inaonyesha kanuni ya utofauti wa mwonekano. Atlasi iliyo hapa chini ina picha halisi za sampuli zilizorekodiwa kwa kujitegemea, pamoja na taarifa za vyanzo vyake vya awali.

Bluu ya methilini huonyesha nini?

Bluu ya methilini ni rangi ya besi: ioni yake yenye rangi ina chaji chanya. Kama OpenStax inavyoeleza katika mada yake kuhusu upakaji rangi wa sampuli, rangi za besi huingiliana na vitu vya seli vyenye chaji hasi na zinaweza kufanya seli zionekane wazi dhidi ya mandharinyuma mepesi zaidi. Katika sampuli zilizoandaliwa ipasavyo, bluu ya methilini huangazia maeneo yenye asidi nyingi za nukleiki na miundo mingine inayofungamana na rangi.

Katika upakaji rangi rahisi, rangi moja hutoa utofauti wa mwonekano. Kwa hiyo, viumbe kadhaa vinaweza kuonekana vya bluu bila kuwa kiumbe kilekile. Mwanzoni, maswali yenye manufaa ni ya kueleza mwonekano: je, vitu hivyo ni vya duara au vimerefuka, vimetengana au vimekusanyika, vimepakwa rangi sawasawa au sehemu zake za ndani zinatofautiana? Angalia tofauti kati ya upakaji rangi rahisi na upakaji rangi wa Gram kabla ya kutafsiri rangi kama matokeo ya uainishaji.

Utofauti wa mwonekano na uwezo wa kutenganisha maelezo madogo ni mambo tofauti. Utofauti wa mwonekano husaidia kutofautisha kitu na mazingira yake; uwezo wa kutenganisha maelezo madogo hufanya vipengele vilivyo karibu vionekane tofauti. Picha yenye giza zaidi haihakikishi kuwa miundo mingi zaidi itatofautishwa. Wala si kila chembe yenye giza inayostahili kuitwa organeli.

Sampuli za asili, sampuli za majimaji zilizopakwa rangi, na mipako

Sampuli ya majimaji isiyopakwa rangi, au ya asili, huhifadhi mwonekano bila rangi iliyoongezwa, ingawa kuitoa katika mazingira yake ya awali bado hubadilisha sampuli. Sampuli ya majimaji iliyopakwa rangi huongezewa kitendanishi huku vitu vinavyochunguzwa vikiwa katika kimiminika chini ya kioo cha kufunika. Mpako uliofiksishwa hutandaza vitu vinavyochunguzwa kwenye slaidi na kutumia mbinu maalumu ya ufiksishaji kabla ya hatua zinazofuata za uchakataji. Muhtasari wa OpenStax kuhusu uandaaji wa sampuli hutofautisha sampuli za majimaji na ufiksishaji na kueleza kwa nini viumbe vilivyofiksishwa havionyeshi tena mwendo au metaboli ya kawaida.

Maandalizi haya hujibu maswali tofauti:

Kwa ulinganisho darasani, rekodi sampuli isiyopakwa rangi kabla ya kuchunguza sampuli tofauti iliyopakwa rangi na kuandaliwa kulingana na utaratibu wa kufundishia. Weka mipangilio ya mwangaza na upigaji picha katika hali zinazolingana. Ikiwa seli mbili tofauti zimepigwa picha, zieleze kama mifano, si kama rekodi ya seli moja kabla na baada ya kupakwa rangi.

Atlasi ya hadubini: sampuli tatu halisi zilizopakwa rangi

Atlasi hii ni uteuzi na tafsiri yetu wenyewe ya picha tatu za hadubini zenye leseni huria. Waandishi wa vyanzo wanatambua sampuli na rangi zilizotumika. Hatujathibitisha uhalisi wa sampuli zao kwa kujitegemea. Picha zimenakiliwa bila kukatwa, kwa kuzibadilisha kuwa WebP bila kupoteza data, bila kuongeza vipengele au kubadilisha rangi.

Picha 1: seli za shavu la binadamu

Sampuli: seli za shavu la binadamu. Rangi: bluu ya methilini. Ukuzaji: 400×, kama ulivyoripotiwa na mpiga picha. Upau wa kipimo: haupatikani; chanzo hakitoi ukubwa wa pikseli uliokalibishwa. Picha ya Fritzmann2002, 2017, kutoka Seli za Shavu la Binadamu (Upakaji Rangi kwa Bluu ya Methilini), yenye leseni ya CC BY-SA 4.0. Nakala hii inabaki chini ya leseni hiyo.

Anza na seli iliyojitenga: kiini chake chenye giza zaidi ni rahisi kukitofautisha na saitoplazimu ya bluu inayokizunguka. Kisha chunguza seli zinazopishana zilizo chini yake. Kupishana hufanya mpaka kuwa mgumu zaidi kufuatilia na kunaweza kuunda eneo lenye giza zaidi katika sehemu hiyo. Tumia picha hii kufanya mazoezi ya kufuatilia mipaka, si kuhesabu kila doa lenye giza kama kiini. Mwongozo wa uchunguzi wa seli za shavu unafafanua zoezi mahususi kwa sampuli hiyo.

Picha 2: seli za kitunguu

Sampuli: seli za kitunguu, kama zilivyotambuliwa na chanzo. Rangi: bluu ya methilini. Ukuzaji: “200x” inaonekana katika jina la faili la awali; haijathibitishwa kwa kujitegemea. Upau wa kipimo: haupatikani; hakuna taarifa za ukalibishaji zilizotolewa. Picha ya Alvy16, 2019, kutoka Seli ya kitunguu 200x, yenye leseni ya CC BY 4.0.

Sehemu zilizorefuka huunda tabaka lenye mpangilio. Linganisha mipaka yake mirefu ya pamoja na mipaka isiyo na umbo la kawaida katika Picha 1. Pia tambua vitu vyenye giza vinavyoonekana wazi na mwangaza usio sawa katika uga wa picha. Picha haithibitishi utambulisho wa kila mkusanyiko wenye giza. Inaonyesha kwa nini rekodi nzuri ya uchunguzi hujumuisha athari za maandalizi au upigaji picha na mambo yasiyo na uhakika, badala ya kutaja kila kitu kinachopokea rangi.

Picha 3: chachu iliyotambuliwa na chanzo kama Candida spp.

Sampuli: Candida spp., kulingana na mpiga picha. Rangi: upakaji rangi chanya rahisi kwa bluu ya methilini. Ukuzaji: haupatikani. Upau wa kipimo: haupatikani; hakuna ukubwa wa pikseli uliokalibishwa uliotolewa. Picha ya Marta, mtumiaji wa Wikimedia Martunia.g, 2021, kutoka Upakaji rangi chanya kwa bluu ya methilini 2, yenye leseni ya CC BY 4.0.

Linganisha mikusanyiko minene ya bluu na kingo zenye msongamano mdogo. Mipaka ya kitu kimoja kimoja ni rahisi zaidi kufuatilia mahali ambapo vitu havipishani sana. Jina Candida linatokana na rekodi ya chanzo, si utambuzi wa spishi uliofanywa kwa kutumia picha hii. Picha hii pia haitoi matokeo yoyote kuhusu uwezo wa chachu kuendelea kuishi. Majaribio ya uwezo wa chachu kuendelea kuishi na upumuaji wake yanahitaji hali, vidhibiti, na tafsiri zake yenyewe.

Kusoma kipimo kwa usahihi

Picha hizi zinafaa kwa ulinganisho wa mwonekano, si kwa vipimo katika mikromita au ulinganisho wa ukubwa halisi wa seli kati ya picha. Ukuzaji ulioripotiwa hauwezi kufidia taarifa za ukalibishaji wa kamera zinazokosekana. Kubadilisha ukubwa wa picha inapoonyeshwa hubadilisha kiwango cha ukuzaji kinachoonekana.

Kwa picha zako mwenyewe, weka ukalibishaji wa vipimo kwa kutumia kipimo sanifu kinachojulikana na mpangilio husika wa vifaa vya macho. Mwongozo wa Nikon kuhusu upimaji kwa hadubini unaeleza jinsi mikromita ya jukwaa la hadubini inavyobadilisha migawanyo ya picha au gridi ya kipimo isiyo na vitengo kuwa urefu halisi. Rekodi lenzi ya objektivu, usanidi wa kamera, na ukalibishaji, kisha ongeza upau wa kipimo kutokana na data hizo. Usikadirie upau kwa kutumia wastani wa ukubwa wa seli uliotajwa katika kitabu cha kiada.

Je, chupa inalingana na mbinu?

Chupa iliyoandikwa bluu ya methilini si maelezo kamili ya kiufundi ya matumizi ya maabara. Kagua mkusanyiko wake na vitengo, kiyeyusho, viambato vya ziada, matumizi yaliyokusudiwa, nyaraka za kundi la uzalishaji, na maelekezo. Karatasi ya data ya usalama ya kitendanishi hueleza hatari; maelekezo ya mbinu hubainisha jinsi ya kukitumia kwa maandalizi yaliyokusudiwa.

Mfano halisi ni myeyusho wa bluu ya methilini wa Löffler kutoka Merck. Mtengenezaji anautambua kama kitendanishi cha hadubini na kueleza kazi yake kama rangi saidizi katika upakaji rangi wa bakteria wanaohifadhi rangi licha ya kutibiwa kwa asidi. Uwezo wake wa kuwaka uliotajwa pia unaonyesha kwa nini “kimiminika cha bluu” si taarifa ya kutosha kupanga ushughulikiaji au upashaji joto. Sifa hizo zinahusu mchanganyiko huo, si moja kwa moja kila myeyusho wa bluu ya methilini wenye maji.

Vivyo hivyo, aga ya eosini na bluu ya methilini ni kioteshi kilichoundwa kwa mchanganyiko maalumu. Si rangi ya slaidi inayotengenezwa kwa kuongeza bluu ya methilini pekee kwenye sampuli. Kwa lengo tofauti la upigaji picha, linganisha mbadala wa bluu ya methilini kwa matumizi ya hadubini.

Kwa seti ya hadubini ya anayeanza, anza na mbinu yake ya kielimu iliyoandikwa, slaidi zilizoandaliwa zinazojulikana, na kitendanishi kilichobainishwa. Ikiwa chupa imepoteza lebo yake au viambato vyake haviwezi kubainishwa, ibadilishe kwa kitendanishi kinachofaa chenye nyaraka. Tumia kinga ya macho na maelekezo ya ushughulikiaji yaliyotolewa kwa mchanganyiko halisi. Vitu vinavyotokana na binadamu na sampuli zisizojulikana za mazingira vinahitaji taratibu za maabara ya kufundishia za kushughulikia na kutupa sampuli; upakaji rangi hauchukui nafasi ya taratibu hizo.

Andika uchunguzi kabla ya hitimisho

“Vitu vya bluu vyenye umbo la yai vilivyo katika mikusanyiko” ni maelezo ya picha yanayoweza kutetewa. “Maambukizi fulani” yanahitaji ushahidi ambao picha haijatoa. Katika daftari, weka asili ya sampuli, maandalizi, mwitikio wa upakaji rangi, na mbinu ya utambuzi kama mambo tofauti. Tofauti hiyo hufanya picha rahisi ya darasani iwe yenye manufaa na kuzuia picha ya hadubini inayovutia kutumiwa kuunga mkono dai ambalo haiwezi kuthibitisha.