Pewarnaan biru métilén: métode mikroskopi jeung atlas gambar asli

Pewarnaan biru métilén ngajadikeun ciri sél anu biasana samar leuwih gampang dibédakeun dina mikroskopi médan caang. Ieu bisa mantuan murid manggihan inti sél pipi atawa nalungtik wangun luar jeung susunan mikroorganisme. Tapi, objék biru téh mangrupa hasil panitén. Nangtukeun ngaran organisme, ngukur éta organisme, sarta nangtukeun naha éta nunjukkeun panyakit mangrupa pancén anu misah.

Gambar sampul ngagambarkeun prinsip kontras. Atlas di handap ngandung poto asli tina spésimén anu didokumentasikeun sacara mandiri, dibarengan ku katerangan sumber aslina.

Naon anu ditampakkan ku biru métilén?

Biru métilén nyaéta zat warna basa: ionna anu boga warna mawa muatan positif. Sakumaha diterangkeun ku OpenStax dina pedaran ngeunaan pewarnaan spésimén, zat warna basa berinteraksi jeung bahan sél anu boga muatan négatif sarta bisa ngajadikeun sél leuwih écés dina latar tukang anu leuwih caang. Dina preparat anu merenah, biru métilén negeskeun wewengkon anu beunghar ku asam nukléat jeung struktur séjén anu ngabeungkeut zat warna.

Dina pewarnaan basajan, hiji zat warna nyadiakeun kontras. Ku kituna, sababaraha organisme bisa sarua katémbong biru sanajan lain organisme anu sarua. Patarosan anu mangpaat mimitina sipatna déskriptif: naha objékna buleud atawa manjang, nyorangan atawa ngagugulung, diwarnaan sacara rata atawa némbongkeun béda dina bagian jerona? Tingali bédana antara pewarnaan basajan jeung pewarnaan Gram saméméh nafsirkeun warna minangka hasil klasifikasi.

Kontras jeung résolusi téh béda. Kontras mantuan ngabédakeun objék tina sabudeureunana; résolusi misahkeun rincian anu padeukeut. Gambar anu leuwih poék henteu ngajamin leuwih loba struktur bisa dibédakeun. Kitu deui, henteu unggal butiran poék pantes disebut organél.

Preparat alami, preparat baseuh anu diwarnaan, jeung hapusan

Preparat baseuh tanpa zat warna, atawa preparat alami, ngajaga tampilan tanpa zat warna tambahan, sanajan nyokot spésimén tina lingkungan aslina tetep ngarobah éta spésimén. Preparat baseuh anu diwarnaan nambahan réagen bari bahanna tetep aya dina cairan handapeun kaca panutup. Hapusan anu difiksasi nyebarkeun bahan dina kaca objék sarta ngagunakeun métode fiksasi anu geus ditangtukeun saméméh pangolahan salajengna. Tinjauan OpenStax ngeunaan nyieun preparat ngabédakeun preparat baseuh jeung fiksasi sarta ngajelaskeun naha organisme anu difiksasi henteu deui némbongkeun gerak atawa métabolisme normal.

Preparat-preparat ieu ngajawab patarosan anu béda:

Pikeun babandingan di kelas, catet preparat tanpa zat warna saméméh nalungtik preparat séjén anu diwarnaan nurutkeun protokol pangajaran. Jaga sangkan cahaya jeung setélan nyokot gambar bisa dibandingkeun. Lamun dua sél anu béda dipoto, jéntrékeun duanana minangka conto, lain minangka rékaman saméméh jeung sanggeus perlakuan kana hiji sél.

Atlas mikroskopi: tilu spésimén asli anu diwarnaan

Atlas ieu mangrupa pilihan jeung interpretasi asli tina tilu mikrograf anu boga lisénsi kabuka. Nu nyieun gambar sumber nangtukeun spésimén jeung zat warnana. Kami henteu sacara mandiri mastikeun kaaslian spésimén maranéhna. Gambar direproduksi tanpa dipotong minangka konvérsi WebP tanpa leungitna data, tanpa nambahan ciri atawa ngarobah warna.

Gambar 1: sél pipi manusa

Spésimén: sél pipi manusa. Zat warna: biru métilén. Pembesaran: 400×, sakumaha dilaporkeun ku nu motrét. Garis skala: henteu aya; sumber henteu nyadiakeun ukuran piksel anu dikalibrasi. Poto ku Fritzmann2002, 2017, tina Sél Pipi Manusa (Pewarnaan Biru Métilén), kalayan lisénsi CC BY-SA 4.0. Réproduksi ieu tetep maké éta lisénsi.

Mimitian ku hiji sél anu nyorangan: intina anu leuwih poék leuwih gampang dibédakeun tina sitoplasma biru di sabudeureunana. Tuluy talungtik sél anu tumpang tindih di handapna. Tumpang tindih ngajadikeun wates sél leuwih hésé dituturkeun sarta bisa nyieun wewengkon anu leuwih poék di hiji tempat. Paké gambar ieu pikeun latihan nuturkeun wangun luar, lain pikeun ngitung unggal bercak poék minangka inti. Pituduh niténan sél pipi ngajentrekeun latihan anu husus pikeun éta sampel.

Gambar 2: sél bawang

Spésimén: sél bawang, sakumaha diidéntifikasi ku sumberna. Zat warna: biru métilén. Pembesaran: “200x” aya dina ngaran berkas asli; ieu henteu divalidasi sacara mandiri. Garis skala: henteu aya; euweuh kalibrasi anu disadiakeun. Poto ku Alvy16, 2019, tina Sél bawang 200x, kalayan lisénsi CC BY 4.0.

Rohangan anu manjang ngawangun hiji lapisan anu teratur. Bandingkeun wates panjang anu dipaké babarengan jeung wangun luar anu henteu teratur dina Gambar 1. Perhatikeun ogé bahan poék anu kacida écésna jeung kacaangan médan anu henteu rata. Poto ieu henteu mastikeun idéntitas unggal endapan poék. Ieu némbongkeun naha catetan panitén anu mangpaat ngawengku artéfak jeung kateupastian, lain méré labél ka sagala hal anu nyerep warna.

Gambar 3: khamir anu diidéntifikasi ku sumber minangka Candida spp.

Spésimén: Candida spp., nurutkeun nu motrét. Zat warna: pewarnaan positif basajan ku biru métilén. Pembesaran: henteu aya katerangan. Garis skala: henteu aya; euweuh ukuran piksel anu dikalibrasi anu disadiakeun. Poto ku Marta, pamaké Wikimedia Martunia.g, 2021, tina Pewarnaan positif ku biru métilén 2, kalayan lisénsi CC BY 4.0.

Bandingkeun gugulungan biru anu pageuh jeung bagian sisi anu henteu pati pinuh. Wangun luar unggal objék leuwih gampang dituturkeun di tempat anu objékna henteu loba tumpang tindih. Ngaran Candida asalna tina catetan sumber, lain tina idéntifikasi spésiés anu dilakukeun kana poto ieu. Gambar ieu ogé henteu nyadiakeun hasil ngeunaan viabilitas. Uji viabilitas jeung réspirasi khamir merlukeun kaayaan, kontrol, jeung interpretasi sorangan.

Maca skala kalayan bener

Gambar-gambar ieu ngarojong babandingan visual, lain pangukuran dina mikrométer atawa babandingan ukuran sél mutlak antara gambar. Pembesaran anu dilaporkeun henteu bisa ngagantikeun kalibrasi kaméra anu henteu aya. Ngarobah ukuran tampilan gambar ngarobah pembesaran anu katémbong.

Pikeun gambar anjeun sorangan, tangtukeun kalibrasi pangukuran ku ngagunakeun standar anu dipikanyaho jeung susunan optik anu luyu. Pituduh Nikon ngeunaan mikrométri ngajelaskeun kumaha mikrométer méja ngarobah pembagian gambar atawa rétikel anu arbitrér jadi panjang fisik. Catet lénsa objéktif, konfigurasi kaméra, jeung kalibrasi, sarta tambahkeun garis skala tina éta data. Ulah nyieun garis skala dumasar kana ukuran rata-rata sél dina buku pangajaran.

Naha eusi botol cocog jeung métodena?

Botol anu dilabélan biru métilén lain spésifikasi laboratorium anu lengkep. Pariksa konséntrasi jeung satuanna, pangleyur, bahan tambahan, tujuan pamakéan, dokuméntasi angkatan produksi, jeung parentahna. Lambaran data kaamanan réagen ngajelaskeun bahaya; parentah métode nangtukeun cara ngagunakeunana pikeun preparat anu dimaksud.

Conto anu nyata nyaéta larutan biru métilén Löffler ti Merck. Produsén ngaidéntifikasi éta minangka réagen mikroskopi sarta ngajelaskeun peranna minangka zat warna tandingan dina pewarnaan tahan asam. Sipat gampang kaduruk anu kacatet ogé némbongkeun naha katerangan “cairan biru” henteu cekap pikeun ngarencanakeun penanganan atawa pemanasan. Sipat-sipat éta lumaku pikeun éta formulasi, henteu otomatis pikeun unggal larutan biru métilén dina cai.

Kitu deui, agar éosin biru métilén mangrupa médium kultur anu diformulasikeun. Éta lain zat warna preparat kaca objék anu dijieun ku nambahan biru métilén biasa kana spésimén. Pikeun tujuan pencitraan anu béda, bandingkeun pilihan gaganti biru métilén pikeun mikroskopi.

Pikeun pakét mikroskop pamula, mimitian ku métode pangajaran anu didokumentasikeun, preparat siap paké anu dipikanyaho, jeung réagen anu ditangtukeun. Lamun labél botol geus leungit atawa komposisina henteu bisa dipastikeun, ganti ku réagen anu merenah sarta boga dokuméntasi. Paké panyalindungan panon jeung parentah penanganan anu disadiakeun pikeun formulasi anu sabenerna. Bahan tina manusa jeung sampel lingkungan anu henteu dipikanyaho merlukeun prosedur penanganan jeung pembuangan sampel ti laboratorium pangajaran; pewarnaan lain gaganti pikeun éta prosedur.

Tulis panitén saméméh kacindekan

“Objék biru lonjong dina gugulungan” mangrupa pedaran gambar anu bisa dipertanggungjawabkeun. “Hiji inféksi anu tangtu” merlukeun bukti anu henteu disadiakeun ku gambar. Catet asal-usul spésimén, cara nyieun preparat, réaksi pewarnaan, jeung métode idéntifikasi sacara misah dina buku catetan. Éta pangbédana ngajadikeun gambar basajan di kelas mangpaat sarta nyegah mikrograf anu pikaresepeun dipaké pikeun ngadukung klaim anu henteu bisa dirojong ku éta gambar.