آرٽيڪل

ميٿيلين بلو سان رنگڻ: خوردبيني طريقا ۽ حقيقي تصويرن جو ائٽلس

ميٿيلين بلو سان رنگڻ: خوردبيني طريقا ۽ حقيقي تصويرن جو ائٽلس

ميٿيلين بلو سان رنگڻ، روشن ميدان واري خوردبيني مشاهدي ۾ خلين جون اهي خاصيتون وڌيڪ آسانيءَ سان سڃاڻڻ ۾ مدد ڪري ٿو، جيڪي ٻي صورت ۾ ڌنڌليون هونديون آهن. اهو شاگردن کي ڳل جي خلي جو مرڪز ڳولڻ يا خوردبيني جاندارن جي ٻاهرين خاڪي ۽ ترتيب جو جائزو وٺڻ ۾ مدد ڪري سگهي ٿو. پر نيري شيءِ ڏسڻ رڳو هڪ مشاهدو آهي. جاندار جو نالو طئي ڪرڻ، ان جي ماپ وٺڻ، ۽ اهو فيصلو ڪرڻ ته ڇا اها بيماريءَ جي نشاندهي ڪري ٿي، الڳ ڪم آهن.

سرورق جي تصوير بصري تضاد جو اصول ڏيکاري ٿي. هيٺ ڏنل ائٽلس ۾ اهڙن نمونن جون حقيقي تصويرون آهن، جن بابت آزاد طور دستاويزي معلومات موجود آهي، ۽ انهن سان سندن اصل ماخذ جي معلومات ڏنل آهي.

ميٿيلين بلو ڇا نمايان ڪري ٿو؟

ميٿيلين بلو هڪ بنيادي رنگ آهي: ان جي رنگين آئن تي مثبت چارج هوندي آهي. جيئن OpenStax نمونن کي رنگڻ بابت پنهنجي وضاحت ۾ ٻڌائي ٿو، بنيادي رنگ منفي چارج واري خلوي مادي سان تعامل ڪن ٿا ۽ هلڪي پسمنظر تي خلين کي نمايان ڪري سگهن ٿا. مناسب تيارين ۾، ميٿيلين بلو نيوڪليڪ تيزاب سان مالا مال حصن ۽ رنگ کي پاڻ سان ٻڌندڙ ٻين بناوتن کي نمايان ڪري ٿو.

سادي رنگڻ ۾، هڪ ئي رنگ بصري تضاد پيدا ڪري ٿو. ان ڪري ڪيترائي مختلف جاندار نيرا نظر اچي سگهن ٿا، جيتوڻيڪ اهي هڪجهڙا جاندار نه هجن. شروعات ۾ ڪارائتا سوال وضاحتي هوندا آهن: ڇا شيون گول آهن يا ڊگهيون، اڪيليون آهن يا ميڙن ۾، هڪجهڙيون رنگيل آهن يا سندن اندروني حصن ۾ فرق نظر اچي ٿو؟ رنگ کي درجابنديءَ جو نتيجو سمجهڻ کان اڳ سادي رنگڻ ۽ گرام رنگڻ جي وچ ۾ فرق ڏسو.

بصري تضاد ۽ ويجهن تفصيلن کي الڳ سڃاڻڻ جي صلاحيت مختلف شيون آهن. بصري تضاد ڪنهن شيءِ کي ان جي چوڌاري موجود شين کان الڳ سڃاڻڻ ۾ مدد ڪري ٿو؛ تفصيلن کي الڳ سڃاڻڻ جي صلاحيت ويجهن جزن کي هڪ ٻئي کان ڌار ڏيکاري ٿي. وڌيڪ اونداهي تصوير وڌيڪ بناوتون الڳ نظر اچڻ جي ضمانت نٿي ڏئي. نه ئي هر اونداهي داڻي کي خلوي عضوي جو نالو ڏيڻ مناسب آهي.

اصل حالت واريون تياريون، رنگيل آليون تياريون، ۽ سمير

اڻ رنگيل، يا اصل حالت واري، آلي تياري ۾ شامل ڪيل رنگ کان سواءِ منظر ڏسي سگهجي ٿو، جيتوڻيڪ اصل ماحول مان ڪڍڻ سان به نمونو بدلجي ٿو. رنگيل آلي تياري ۾ رياجينٽ شامل ڪيو وڃي ٿو، جڏهن مادو ڍڪ واري شيشي هيٺ اڃا به سيال ۾ هجي. تثبيت ڪيل سمير ۾ مادو سلائيڊ تي پکيڙيو وڃي ٿو ۽ پوءِ جي عملن کان اڳ هڪ مقرر تثبيت جو طريقو استعمال ڪيو وڃي ٿو. OpenStax جو تياريءَ بابت جائزو آلي تياري ۽ تثبيت ۾ فرق ٻڌائي ٿو ۽ وضاحت ڪري ٿو ته تثبيت ڪيل جاندار هاڻي معمول جي حرڪت يا ميٽابولزم جو منظر ڇو نٿا ڏيکارين.

اهي تياريون مختلف سوالن جا جواب ڏين ٿيون:

تياريڪارائتو مشاهدوتصوير اڪيلي ڇا ثابت نٿي ڪري سگهي
اصل حالت واري آلي تياريحرڪت، ٻاهريان خاڪا، قدرتي طور نظر ايندڙ مادورڳو حرڪت يا شڪل مان سڃاڻپ
رنگيل آلي تياريرنگ کي پاڻ سان ٻڌندڙ بناوتن ۽ سندن چوڌاري موجود مادي جي وچ ۾ بصري تضادڇا رياجينٽ معمول جي جسماني ڪارڪردگيءَ کي اڻبدليل ڇڏيو
تثبيت ڪيل، رنگيل سميرمقرر تياريءَ کان پوءِ برقرار رهيل شڪلي بناوتاصل زنده نمونو ڪيئن عمل ڪندو هو
نالي سان مقرر فرق ڪندڙ طريقومناسب ڪنٽرولن سان هڪ مقرر رنگڻ وارو ردعملطريقي جي وڌيڪ وسيع ثبوتن کان سواءِ نوع جي سڃاڻپ يا تشخيص

ڪلاس ۾ ڀيٽ لاءِ، تدريسي طريقيڪار موجب الڳ تيار ڪيل رنگيل نموني جو جائزو وٺڻ کان اڳ اڻ رنگيل تياريءَ جو رڪارڊ ٺاهيو. روشنيءَ ۽ تصوير وٺڻ جون سيٽنگون ڀيٽڻ جهڙيون رکو. جيڪڏهن ٻن مختلف خلين جون تصويرون ورتيون وڃن، ته انهن کي مثال طور بيان ڪريو، نه هڪ ئي خلي جي اڳ ۽ پوءِ واري رڪارڊ طور.

خوردبيني ائٽلس: ٽي حقيقي رنگيل نمونا

هي ائٽلس کليل لائسنس هيٺ موجود ٽن خوردبيني تصويرن جي هڪ اصل چونڊ ۽ تشريح آهي. ماخذ جا ليکڪ نمونن ۽ رنگن جي سڃاڻپ ٻڌائين ٿا. اسان سندن نمونن جي آزاد تصديق نه ڪئي آهي. تصويرون بنا ڪٽڻ جي، معيار وڃائڻ کان سواءِ WebP ۾ تبديل ڪري ٻيهر پيش ڪيون ويون آهن؛ انهن ۾ ڪا خاصيت شامل نه ڪئي وئي آهي ۽ نه رنگ بدلايا ويا آهن.

تصوير 1: انساني ڳل جا خليا

ميٿيلين بلو سان رنگيل ڳل جي حقيقي خلين ۾ وڌيڪ اوندها مرڪز ۽ هڪ ٻئي مٿان آيل خلين جا خاڪا.

نمونو: انساني ڳل جا خليا. رنگ: ميٿيلين بلو. وڏائي: 400×، تصوير وٺندڙ جي ڄاڻ موجب. پيماني جي پٽي: موجود ناهي؛ ماخذ ۾ حساب سان مقرر ڪيل پڪسل جي ماپ ڏنل ناهي. تصوير Fritzmann2002، 2017، انساني ڳل جا خليا (ميٿيلين بلو سان رنگيل) مان، CC BY-SA 4.0 لائسنس هيٺ. هن ٻيهر پيش ڪيل تصوير تي به اهو ئي لائسنس برقرار آهي.

هڪ الڳ بيٺل خلي کان شروع ڪريو: ان جو وڌيڪ اونداهو مرڪز چوڌاري موجود نيري سائٽوپلازم کان آسانيءَ سان سڃاڻي سگهجي ٿو. پوءِ ان جي هيٺان هڪ ٻئي مٿان آيل خلين جو جائزو وٺو. هڪ ٻئي مٿان اچڻ سان حد جي پيروي ڪرڻ ڏکيو ٿي پوي ٿو ۽ ڪنهن هنڌ وڌيڪ اونداهو حصو ٺهي سگهي ٿو. هن تصوير کي خاڪا چٽي سڃاڻڻ جي مشق لاءِ استعمال ڪريو، نه هر اونداهي داغ کي مرڪز ڳڻڻ لاءِ. ڳل جي خلين جي مشاهدي واري رهنمائي هن نموني سان لاڳاپيل مشق کي وڌيڪ تفصيل سان پيش ڪري ٿي.

تصوير 2: بصر جا خليا

بصر جا حقيقي رنگيل خليا، جن ۾ ڊگها خانا، اڻبرابر روشني، ۽ اونداهو ذرڙن وارو مادو نظر اچي ٿو.

نمونو: بصر جا خليا، ماخذ جي سڃاڻپ موجب. رنگ: ميٿيلين بلو. وڏائي: اصل فائل جي نالي ۾ “200x” لکيل آهي؛ ان جي آزاد تصديق ٿيل ناهي. پيماني جي پٽي: موجود ناهي؛ ڪا ماپي هم آهنگيءَ جي معلومات ڏنل ناهي. تصوير Alvy16، 2019، بصر جو خلو 200x مان، CC BY 4.0 لائسنس هيٺ.

ڊگها خانا هڪ منظم تهه ٺاهين ٿا. انهن جي ڊگهين گڏيل حدن کي تصوير 1 جي بيقاعده خاڪن سان ڀيٽيو. نمايان اونداهي مادي ۽ ڏيک واري ميدان جي اڻبرابر روشنيءَ تي به ڌيان ڏيو. تصوير هر اونداهي گڏ ٿيل مادي جي سڃاڻپ ثابت نٿي ڪري. اها ڏيکاري ٿي ته ڪارائتي مشاهدي جي رڪارڊ ۾ تياري يا تصويرڪشيءَ سبب پيدا ٿيل نشان ۽ غيريقيني ڳالهيون ڇو شامل ٿيڻ گهرجن، بجاءِ هر رنگ وٺندڙ شيءِ کي نالو ڏيڻ جي.

تصوير 3: خمير، جنهن کي ماخذ Candida spp. طور سڃاتو آهي

ميٿيلين بلو سان رنگيل خمير جي حقيقي تياري، جنهن ۾ بيضوي نيرين شين جا گهاٽا ميڙ آهن.

نمونو: Candida spp.، تصوير وٺندڙ موجب. رنگ: ميٿيلين بلو سان سادي مثبت رنگڻ. وڏائي: موجود ناهي. پيماني جي پٽي: موجود ناهي؛ حساب سان مقرر ڪيل پڪسل جي ماپ ڏنل ناهي. تصوير Marta، وڪيميڊيا استعمال ڪندڙ Martunia.g، 2021، ميٿيلين بلو سان مثبت رنگڻ 2 مان، CC BY 4.0 لائسنس هيٺ.

گهاٽن نيرن ميڙن کي ڪنارن جي گهٽ ڀريل حصن سان ڀيٽيو. جتي شيون گهٽ هڪ ٻئي مٿان اچن ٿيون، اتي سندن الڳ خاڪا وڌيڪ آسانيءَ سان ڏسي سگهجن ٿا. Candida جو نالو ماخذ جي رڪارڊ مان آيو آهي، نه هن تصوير تي ڪيل نوع جي سڃاڻپ مان. هي تصوير زنده رهڻ جي صلاحيت جو ڪو نتيجو به نٿي ڏئي. خمير جي زنده رهڻ جي صلاحيت ۽ تنفس جون جاچون پنهنجين مخصوص حالتن، ڪنٽرولن، ۽ تشريح جون گهرجون رکن ٿيون.

پيمانو صحيح طرح پڙهڻ

اهي تصويرون بصري ڀيٽ لاءِ آهن، نه مائڪروميٽرن ۾ ماپ وٺڻ يا تصويرن جي وچ ۾ خلين جي حقيقي ماپ ڀيٽڻ لاءِ. ڄاڻايل وڏائي، ڪئميرا جي گم ٿيل ماپي هم آهنگيءَ کي بحال نٿي ڪري. تصوير کي ڏيکارڻ واري ماپ بدلائڻ سان ان جي ظاهري وڏائي بدلجي ٿي.

پنهنجين تصويرن لاءِ، ڄاتل معياري ماپ ۽ لاڳاپيل بصري بندوبست استعمال ڪري ماپن جي هم آهنگي قائم ڪريو. ماپگيري بابت Nikon جي رهنمائي وضاحت ڪري ٿي ته اسٽيج مائڪروميٽر تصوير يا ريٽيڪل جي غيرمعياري ڀاڱن کي حقيقي ڊيگهن ۾ ڪيئن بدلائي ٿو. آبجيڪٽو عدسي، ڪئميرا جي ترتيب، ۽ ماپي هم آهنگيءَ جو رڪارڊ رکو، ۽ انهن انگن اکرن مان پيماني جي پٽي شامل ڪريو. درسي ڪتاب ۾ ڏنل خلي جي سراسري ماپ مان پٽي جو اندازو نه لڳايو.

ڇا بوتل طريقي سان ٺهڪي اچي ٿي؟

ميٿيلين بلو جو ليبل لڳل بوتل ليبارٽريءَ جي مڪمل وضاحت ناهي. ان جي ڪنسنٽريشن ۽ يونٽن، محلل، اضافي جزن، مقرر استعمال، بيچ جي دستاويزن، ۽ هدايتن کي جاچيو. رياجينٽ جي حفاظتي معلومات واري شيٽ خطرن کي بيان ڪري ٿي؛ طريقي جون هدايتون طئي ڪن ٿيون ته ان کي مقرر تياريءَ لاءِ ڪيئن استعمال ڪجي.

هڪ واضح مثال Merck جو Löffler وارو ميٿيلين بلو محلول آهي. ٺاهيندڙ ان کي خوردبيني ڪم لاءِ رياجينٽ طور سڃاڻي ٿو ۽ تيزاب برداشت ڪندڙ جاندارن جي رنگڻ ۾ ان جي ثانوي رنگ طور ڪردار جي وضاحت ڪري ٿو. ان جي ڄاڻايل باهه وٺڻ جي خاصيت به ڏيکاري ٿي ته سنڀالڻ يا گرم ڪرڻ جي رٿابندي لاءِ “هڪ نيرو سيال” چوڻ ڪافي معلومات ناهي. اهي خاصيتون ان مخصوص ترڪيب تي لاڳو ٿين ٿيون، پاڻمرادو هر پاڻيءَ ۾ ٺهيل ميٿيلين بلو محلول تي نه.

ساڳيءَ طرح، ايوسن ميٿيلين بلو آگر هڪ مخصوص ترڪيب وارو پرورش جو وچولو آهي. اهو نموني ۾ سادو ميٿيلين بلو شامل ڪري ٺاهيل سلائيڊ رنگ ناهي. تصويرڪشيءَ جي ڪنهن مختلف مقصد لاءِ، خوردبيني ڪم ۾ ميٿيلين بلو جا متبادل ڀيٽيو.

شروعات ڪندڙن جي خوردبيني ڪٽ لاءِ، ان جي دستاويز ڪيل تعليمي طريقي، ڄاتل تيار ٿيل سلائيڊن، ۽ مقرر رياجينٽ کان شروع ڪريو. جيڪڏهن بوتل جو ليبل گم ٿي ويو هجي يا ان جي بناوت معلوم نه ڪري سگهجي، ته ان جي جاءِ تي مناسب دستاويز ڪيل رياجينٽ آڻيو. اکين جي حفاظت استعمال ڪريو ۽ اصل ترڪيب لاءِ ڏنل سنڀالڻ جي هدايتن تي عمل ڪريو. انساني مادي ۽ اڻڄاتل ماحولياتي نمونن لاءِ تدريسي ليبارٽريءَ جا نمونا سنڀالڻ ۽ نيڪال ڪرڻ وارا طريقا ضروري آهن؛ رنگڻ انهن طريقن جو متبادل ناهي.

نتيجي کان اڳ مشاهدو لکو

“ميڙن ۾ نيريون بيضوي شيون” تصوير جو هڪ قابلِ دفاع بيان آهي. “هڪ مخصوص انفيڪشن” لاءِ اهڙو ثبوت گهربل آهي، جيڪو تصوير نه ڏنو آهي. نوٽ بڪ ۾ نموني جي اصل، تياري، رنگڻ واري ردعمل، ۽ سڃاڻپ جي طريقي کي الڳ رکو. اهو فرق هڪ سادي ڪلاس واري تصوير کي ڪارائتو بڻائي ٿو ۽ هڪ پرڪشش خوردبيني تصوير سان اهڙي دعويٰ ڳنڍڻ کان روڪي ٿو، جنهن جي اها حمايت نٿي ڪري سگهي.