Albastrul de metilen pentru boala Lyme: rezultate de laborator și dovezi clinice

Un vas de cultură nu este un pacient. Această distincție explică aproape toate afirmațiile despre albastrul de metilen și boala Lyme.

Să presupunem că doi cititori văd aceeași propoziție: cercetătorii au „eradicat” bacteriile care provoacă boala Lyme cu o combinație de medicamente. Un cititor înțelege că un vas de sticlă a rămas fără bacterii detectabile timp de două săptămâni. Celălalt înțelege că pacienții obosiți s-au recuperat. Ambele interpretări par firești. Doar prima corespunde cu ceea ce a măsurat experimentul de laborator.

Acest articol păstrează separate cele două concepte. El analizează efectele albastrului de metilen asupra Borrelia burgdorferi în culturi de laborator, ce s-a întâmplat când acesta a fost inclus în scheme complexe de tratament pentru pacienți și de ce niciunul dintre aceste rezultate nu răspunde la întrebarea cât timp trebuie luat albastrul de metilen pentru Lyme.

Lyme este o boală bacteriană, deci dovezile privind paraziții nu se transferă

Boala Lyme este cauzată de Borrelia burgdorferi, o bacterie în formă de spirală transmisă de căpușe. Tratamentul standard folosește medicamente antibacteriene precum doxiciclina, amoxicilina sau cefuroxima, conform ghidului din 2020 pentru boala Lyme al IDSA, AAN și ACR.

Această natură bacteriană contează deoarece albastrul de metilen are un istoric separat de utilizare împotriva paraziților. A fost studiat împotriva paraziților malariei și este uneori discutat în contextul Babesia, un parazit transmis de căpușe care poate coexista cu infecția Lyme. Un rezultat împotriva unui parazit nu demonstrează același mecanism împotriva Borrelia. Organismele diferă prin structură, metabolism, țintele medicamentelor și partea corpului pe care o infectează. Prezentarea noastră generală a modului în care albastrul de metilen acționează în celule subliniază aceeași idee în termeni generali: activitatea redox este largă, dar rezultatul biologic depinde în continuare de organism și de context.

Așadar, păstrați separate două întrebări. Mai întâi, ce efect are albastrul de metilen asupra Borrelia într-o cultură controlată. Apoi, ce se întâmplă la persoanele cu boala Lyme. Restul articolului urmează această ordine.

Celulele persistente reprezintă o stare, nu o tulpină mai puternică

Antibioticele ucid adesea rapid majoritatea bacteriilor Borrelia și lasă în urmă o populație mai mică, tolerantă. Când cercetătorii au cultivat din nou aceste celule supraviețuitoare, descendenții lor erau de obicei din nou sensibili. Acest tipar indică o stare fiziologică reversibilă, nu o rezistență ereditară. O demonstrație clară apare în cercetarea realizată de Sharma și colegii săi privind distrugerea bifazică și reluarea creșterii celulelor persistente.

În practică, culturile tinere, aflate în faza logaritmică, conțin în principal spirochete mobile și răspund mai ușor la medicamentele standard. Culturile mai vechi, aflate în faza staționară, conțin mai multe forme rotunde și forme agregate în microcolonii și tolerează mai bine aceleași medicamente. Acești termeni descriu forme și condiții de creștere într-un vas de cultură. Ei nu dovedesc că aceleași forme explică simptomele care persistă după tratarea bolii Lyme.

Un model conceptual util este simplu. Creșterea activă expune ținte precum sinteza peretelui celular. Creșterea lentă sau modificată ascunde aceste ținte. Un compus care ajută împotriva celei de-a doua stări poate fi lipsit de importanță împotriva primei, iar inversul este de asemenea valabil.

Ce a constatat de fapt studiul de screening din 2015

Referința citată cel mai des pentru acest subiect este un screening din 2015 al unei biblioteci de compuși FDA, realizat de Feng și colegii săi. Acesta a testat compuși pe culturi de Borrelia în fază staționară, vechi de șapte zile, timp de încă șapte zile, fiecare compus testat având o concentrație de 50 micromoli pe litru.

Albastrul de metilen a fost suficient de activ pentru a atrage atenția, dar nu a avut un efect sterilizant. La examinarea microscopică, aproximativ 40 la sută dintre celule au rămas viabile după albastrul de metilen, comparativ cu 93 la sută în proba martor netratată, 75 la sută după doxiciclină, 76 la sută după amoxicilină, 49 la sută după cefuroximă și 35 la sută după daptomicina folosită drept comparator. Rezultatul cititorului de microplăci pentru albastrul de metilen nu a putut fi utilizat deoarece culoarea sa intensă a interferat cu testul de fluorescență, astfel încât concluzia s-a bazat pe examinarea microscopică directă.

Acesta este un semnal de screening, nu o eradicare. Nu s-a demonstrat că aceste culturi tratate cu albastru de metilen au rămas sterile pe parcursul unei subcultivări prelungite fără medicament. Autorii au cerut cercetări ulterioare cu combinații și pe animale, ceea ce reprezintă interpretarea corectă a unui screening al unei biblioteci de compuși.

De ce rezultatele combinațiilor sunt ușor de interpretat greșit

Un studiu conex din 2015 este adesea inclus în aceeași afirmație. În studiul lui Feng, Auwaerter și Zhang privind combinațiile de medicamente împotriva Borrelia în faza staționară, cel mai puternic rezultat de laborator a provenit din asocierea daptomicinei cu doxiciclina și cefoperazona, fiecare la 10 micrograme pe mililitru, timp de șapte zile. După tratament, medicamentele au fost diluate în mediu proaspăt, iar culturile au fost urmărite pentru a detecta reluarea creșterii.

Doar această combinație triplă a rămas fără organisme detectabile după 15 zile de subcultivare. Limita de detecție microscopică declarată era sub 100,000 de organisme, astfel încât „eradicarea” însemna absența unei reluări a creșterii detectabile microscopic în condițiile acelui protocol. Nu însemna sterilitate demonstrată până la nivelul unui singur organism, pătrundere în țesuturile unui animal sau vindecare la o persoană. Articolul însuși avertiza împotriva extrapolării directe la tratament.

Datele ulterioare privind combinațiile cu albastru de metilen au provenit dintr-un nivel diferit și mai slab al dovezilor. O teză de master din 2016 la Johns Hopkins, realizată de Megan Weitner, a testat albastrul de metilen la 4 micrograme pe mililitru, concentrație aleasă ținând cont de expunerea plasmatică, în asociere cu medicamente precum cefuroxima, doxiciclina, azitromicina, rifabutina, rifaximina, nitrofurantoina și pirimetamina. Culturile au fost expuse timp de șapte zile și evaluate prin colorare și microscopie. Combinațiile cu o viabilitate reziduală normalizată sub 0.90 au fost considerate active. De exemplu, albastrul de metilen asociat cu azitromicina a atins 0.88, valoare care s-a îmbunătățit la 0.64 când a fost adăugată cefuroxima, în timp ce alte câteva combinații triple au atins aproximativ 0.69 până la 0.82.

Acestea sunt reduceri ale semnalului de colorare, nu sterilizarea culturii. Teza nu a demonstrat menținerea îndelungată a culturilor negative pentru combinațiile cu albastru de metilen, comparabilă cu rezultatul combinației triple cu daptomicină. De asemenea, este o teză, nu un articol de revistă evaluat de specialiști. Poate genera ipoteze. Nu poate avea aceeași greutate ca dovezile clinice controlate.

De aceea, un „protocol cu albastru de metilen pentru Lyme” nu poate fi preluat din aceste lucrări. O expunere de laborator în care organismele sunt scăldate continuu într-o soluție timp de șapte zile nu stabilește o doză pentru oameni, o cale de administrare, o durată, o concentrație tisulară sau o toxicitate acceptabilă. De asemenea, nu testează albastrul de metilen administrat singur în raport cu criteriile clinice care contează pentru pacienți, precum durerea, oboseala, umflarea articulațiilor, semnele neurologice sau recidiva. Pentru ajutor în diferențierea acestor niveluri de dovezi, consultați ghidul nostru de interpretare a afirmațiilor din cercetările despre albastrul de metilen.

De la vase de cultură la pacienți: etapa clinică lipsă

La data redactării acestui articol, nu există niciun studiu randomizat sau prospectiv controlat care să arate că albastrul de metilen tratează boala Lyme. La oameni există rapoarte necontrolate în care albastrul de metilen a fost o componentă a unei scheme cu mai multe medicamente.

Cel mai clar exemplu este cercetarea retrospectivă privind terapia combinată cu dapsonă realizată de Horowitz, Fallon și colegii lor, inclusiv un raport din 2023 privind 25 de pacienți care primiseră numeroase tratamente anterior. La opt dintre cei 25 s-a raportat dispariția simptomelor active de Lyme timp de cel puțin trei luni. Însă pacienții au primit și dapsonă, tetracicline, rifampicină sau rifabutină, macrolide și uneori agenți suplimentari. Nu a existat un grup tratat doar cu albastru de metilen și nici un grup de control randomizat. Rapoartele de caz ulterioare, de mici dimensiuni, au aceeași structură.

Acest tip de studiu poate descrie rezultate. Nu poate atribui meritul albastrului de metilen. Ameliorarea poate reflecta efectul altui medicament, al combinației, evoluția naturală, efectele placebo, monitorizarea mai atentă sau selectarea unor pacienți cu probabilitate mai mare de ameliorare. Tabelul de mai jos evidențiază această lacună.

Prin urmare, tabloul dovezilor constă într-un screening, combinații studiate într-o teză și rapoarte necontrolate cu mai multe medicamente. Această succesiune este mai slabă decât un efect terapeutic demonstrat într-un studiu clinic.

Nu există un răspuns bazat pe dovezi privind durata administrării

Interesul pentru căutarea „cât timp să iei albastru de metilen pentru Lyme” este de înțeles. Simptomele persistente creează presiunea de a acționa. Dar durata presupune existența unei doze eficace stabilite, iar niciun studiu nu a stabilit o astfel de doză pentru Lyme.

Albastrul de metilen este un medicament cu acțiune sistemică și cu restricții reale. Informațiile de prescriere din SUA pentru methemoglobinemia dobândită descriu administrarea a 1 mg per kg intravenos în decurs de 5 până la 30 de minute, pentru o altă boală, pe o altă cale de administrare și cu un alt scop, doză care nu poate fi reutilizată pentru Lyme. Informațiile de prescriere includ un avertisment încadrat privind sindromul serotoninergic atunci când albastrul de metilen este combinat cu medicamente serotoninergice, în special SSRI, SNRI și inhibitori MAO, și contraindică utilizarea în deficitul de G6PD din cauza riscului de anemie hemolitică. Oricine ia în considerare utilizarea lui are nevoie de evaluarea de către un clinician a medicamentelor administrate, a statusului G6PD, a sarcinii, a funcției renale și a interacțiunilor medicamentoase. Rezumatul nostru privind siguranța și manipularea explică de ce puritatea și supravegherea medicală contează înaintea oricărei utilizări sistemice.

Pentru simptomele persistente după tratamentul recomandat pentru Lyme, în absența unor dovezi obiective de reinfectare sau de eșec al tratamentului, ghidul IDSA recomandă să nu se administreze terapie antimicrobiană suplimentară și precizează că nu există dovezi clinice care să susțină schemele îndreptate în mod specific împotriva celulelor persistente sau a variantelor morfologice. Aceasta nu neagă existența celulelor tolerante în vasele de cultură. Spune că legătura cu practica clinică nu a fost încă demonstrată.

O modalitate practică de a interpreta următoarea afirmație pe care o întâlniți este să puneți trei întrebări. Rezultatul a fost obținut într-o cultură în mediu lichid, la un animal sau la pacienți? Albastrul de metilen a fost testat singur sau doar într-un amestec de mai multe medicamente? Criteriul de evaluare a măsurat reluarea creșterii într-un vas de cultură sau recuperarea oamenilor? Dacă răspunsurile sunt vas de cultură, amestec și reluarea creșterii, atunci studiul generează ipoteze. Nu este un protocol.