ਕੀ ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਮਾਇਟੋਕੌਂਡਰੀਆ ਦੇ ਕੰਪਲੈਕਸ III ਨੂੰ ਬਾਈਪਾਸ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ? ਅਧਿਐਨਾਂ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵੱਖਰੇ ਕਿਉਂ ਹਨ

ਦੋ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾਵਾਂ ਨੇ ਪੁੱਛਿਆ ਕਿ ਕੀ ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਅਵਰੁੱਧ ਮਾਇਟੋਕੌਂਡਰੀਅਲ ਕੰਪਲੈਕਸ III ਨੂੰ ਬਾਈਪਾਸ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਇੱਕ ਨੇ ਨਹੀਂ ਕਿਹਾ। ਦੂਜੀ ਨੇ ਹਾਂ ਕਿਹਾ। ਦੋਵਾਂ ਕੋਲ ਅੰਕੜੇ ਸਨ।

ਪਹਿਲੇ ਅਧਿਐਨ ਨੇ, ਚੂਹੇ ਦੇ ਦਿਮਾਗ ਦੇ ਮਾਇਟੋਕੌਂਡਰੀਆ ਵਿੱਚ, ਪਾਇਆ ਕਿ ਇਹ ਰੰਗਕ ਬਾਈਪਾਸ ਨਹੀਂ ਕਰ ਸਕਦਾ। ਦੂਜੇ ਨੇ, ਕੁਤਰਣ ਵਾਲੇ ਜੀਵਾਂ ਦੀਆਂ ਤਿੰਨ ਪ੍ਰਜਾਤੀਆਂ ਦੇ ਦਿਮਾਗ ਦੇ ਮਾਇਟੋਕੌਂਡਰੀਆ ਵਿੱਚ, ਪਾਇਆ ਕਿ ਇਹ ਅੰਸ਼ਿਕ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਚੂਹੇ ਦੇ ਜਿਗਰ ਉੱਤੇ ਹੋਇਆ ਤੀਜਾ ਅਧਿਐਨ ਅਕਸਰ ਇਸੇ ਸੰਦਰਭ ਵਿੱਚ ਹਵਾਲੇ ਵਜੋਂ ਦਿੱਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਪਰ ਉਸ ਨੇ ਕੁਝ ਹੋਰ ਪਰਖਿਆ ਸੀ। ਉਸ ਨੂੰ ਉਸ ਦੇ ਸਹੀ ਸੰਦਰਭ ਵਿੱਚ ਰੱਖੋ ਤਾਂ ਅੱਧੀ ਉਲਝਣ ਦੂਰ ਹੋ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।

ਇੱਥੇ ਕਿਸੇ ਸਰਬਵਿਆਪੀ ਕਾਰਜ-ਵਿਧੀ ਦਾ ਐਲਾਨ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ। ਤਿੰਨ ਪ੍ਰਯੋਗ ਹਨ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਦੇ ਅਵਰੋਧਕ, ਮਾਤਰਾਵਾਂ ਅਤੇ ਮਾਪ ਵੱਖਰੇ ਹਨ। ਪਹਿਲਾਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਪੜ੍ਹੋ। ਨਤੀਜੇ ਉਨ੍ਹਾਂ ਤੋਂ ਹੀ ਨਿਕਲਦੇ ਹਨ।

ਇੱਥੇ ਬਾਈਪਾਸ ਦਾ ਕੀ ਅਰਥ ਹੈ

ਇਲੈਕਟ੍ਰੌਨ ਕੰਪਲੈਕਸ I ਰਾਹੀਂ (NADH ਤੋਂ) ਜਾਂ ਕੰਪਲੈਕਸ II ਰਾਹੀਂ (ਸਕਸੀਨੇਟ ਤੋਂ) ਲੜੀ ਵਿੱਚ ਦਾਖ਼ਲ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਕੰਪਲੈਕਸ III ਵਿੱਚੋਂ ਲੰਘ ਕੇ ਸਾਇਟੋਕ੍ਰੋਮ c ਤੱਕ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਫਿਰ ਕੰਪਲੈਕਸ IV ਰਾਹੀਂ ਆਕਸੀਜਨ ਤੱਕ ਪਹੁੰਚਦੇ ਹਨ। ਇਸ ਰਸਤੇ ਵਿੱਚ ਬਣਨ ਵਾਲੀ ਪ੍ਰਵਣਤਾ ਨੂੰ ਹੀ ਕੋਸ਼ਿਕਾ ATP ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਵਰਤਦੀ ਹੈ।

ਬਾਈਪਾਸ ਦੇ ਦਾਅਵੇ ਦਾ ਅਰਥ ਹੈ ਕਿ ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਰੁਕਾਵਟ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਇਲੈਕਟ੍ਰੌਨ ਲੈਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਰੁਕਾਵਟ ਤੋਂ ਅੱਗੇ ਉਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਛੱਡਦਾ ਹੈ। ਆਕਸੀਕ੍ਰਿਤ ਰੰਗਕ NADH ਜਾਂ ਲੜੀ ਦੇ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਘਟਕਾਂ ਤੋਂ ਇਲੈਕਟ੍ਰੌਨ ਲੈ ਕੇ ਲਿਊਕੋਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਬਣ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਹ ਅਪਚਯਿਤ ਰੂਪ ਉਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਸਾਇਟੋਕ੍ਰੋਮ c ਨੂੰ ਸੌਂਪਦਾ ਹੈ ਜਾਂ ਮੁੜ ਲੜੀ ਵਿੱਚ ਦੇ ਦਿੰਦਾ ਹੈ। ਜੇ ਇਹ ਹਵਾਲਗੀ ਰੁਕਾਵਟ ਤੋਂ ਅੱਗੇ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਤਾਂ ਸ਼ਵਸਨ ਅਤੇ ਝਿੱਲੀ ਵਿਭਵ ਅੰਸ਼ਿਕ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਬਹਾਲ ਹੋ ਜਾਂਦੇ ਹਨ। ਜੇ ਇਹ ਰੁਕਾਵਟ ਉੱਤੇ ਜਾਂ ਉਸ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਤਾਂ ਕੋਈ ਬਹਾਲੀ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦੀ।

ਕੰਪਲੈਕਸ III ਦਾ ਇੱਕ ਵੇਰਵਾ ਇਸ ਵਿਵਾਦ ਦੇ ਵੱਡੇ ਹਿੱਸੇ ਨੂੰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਕੰਪਲੈਕਸ ਦੋ ਅਵਰੋਧਕ-ਬੰਧਨ ਸਥਾਨਾਂ ਵਾਲਾ Q ਚੱਕਰ ਚਲਾਉਂਦਾ ਹੈ। ਐਂਟੀਮਾਇਸਿਨ Qi ਸਥਾਨ ਨਾਲ ਬੰਨ੍ਹਦਾ ਹੈ। ਮਾਇਕਸੋਥਾਇਜ਼ੋਲ Qo ਸਥਾਨ ਨਾਲ ਬੰਨ੍ਹਦਾ ਹੈ। ਇਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਸਿਰਫ਼ ਇੱਕ ਵਰਤਣ ਵਾਲੇ ਅਧਿਐਨ ਨੇ ਕੰਪਲੈਕਸ ਦੇ ਸਿਰਫ਼ ਅੱਧੇ ਹਿੱਸੇ ਨੂੰ ਪਰਖਿਆ ਹੈ।

ਪਹਿਲਾ ਅਧਿਐਨ: ਚੂਹੇ ਦੇ ਦਿਮਾਗ ਦੇ ਮਾਇਟੋਕੌਂਡਰੀਆ ਵਿੱਚ ਕੋਈ ਬਾਈਪਾਸ ਨਹੀਂ

Gureev ਅਤੇ ਸਹਿਕਰਮੀਆਂ ਨੇ C57BL/6 ਚੂਹਿਆਂ ਦੇ ਦਿਮਾਗੀ ਕਾਰਟੈਕਸ ਤੋਂ ਮਾਇਟੋਕੌਂਡਰੀਆ ਵਰਤੇ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਡਿਜਿਟੋਨਿਨ ਨਾਲ ਅਲੱਗ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਅਤੇ 0.1 mg ਪ੍ਰੋਟੀਨ per ml ਉੱਤੇ ਪਰਖਿਆ ਗਿਆ। ਸਬਸਟ੍ਰੇਟਾਂ ਦੀਆਂ ਤਿੰਨ ਵਿਵਸਥਾਵਾਂ ਸਨ: ਪਾਇਰੂਵੇਟ ਅਤੇ ਮੈਲੇਟ, ਹਰੇਕ 5 mM; ਸਕਸੀਨੇਟ 10 mM ਨਾਲ ਗਲੂਟਾਮੇਟ 2 mM; ਅਤੇ L-ਪ੍ਰੋਲੀਨ 10 mM। ਅਵਰੋਧਕ ਰੋਟੇਨੋਨ 1 micromolar (ਕੰਪਲੈਕਸ I) ਅਤੇ ਐਂਟੀਮਾਇਸਿਨ 1 microgram per ml (ਕੰਪਲੈਕਸ III) ਸਨ। ਰੰਗਕ ਦੀਆਂ ਮਾਤਰਾਵਾਂ 0.5, 1, ਅਤੇ 2 micromolar ਸਨ, ਅਤੇ ਮੁੱਖ ਸੰਘਣਤਾ 1 micromolar ਸੀ। ਵਿਧੀਆਂ ਅਤੇ ਮਾਪ-ਵਕਰ FEBS Letters ਦੇ ਸੰਖੇਪ ਖੋਜ ਲੇਖ ਵਿੱਚ ਹਨ।

ਕੰਪਲੈਕਸ I ਦਾ ਬਾਈਪਾਸ ਕੰਮ ਕਰਦਾ ਸੀ। ਰੋਟੇਨੋਨ ਨੇ ADP ਨਾਲ ਉਤੇਜਿਤ ਸ਼ਵਸਨ ਨੂੰ ਲਗਭਗ 121 ਤੋਂ ਲਗਭਗ 2 nmol per minute per mg ਤੱਕ ਘਟਾ ਦਿੱਤਾ, ਅਤੇ 1 micromolar ਰੰਗਕ ਨੇ ਇਸ ਨੂੰ ਲਗਭਗ 21 ਤੱਕ ਬਹਾਲ ਕੀਤਾ। ਪਾਇਰੂਵੇਟ ਅਤੇ ਮੈਲੇਟ ਨਾਲ, ਅਤੇ L-ਪ੍ਰੋਲੀਨ ਨਾਲ, ਝਿੱਲੀ ਵਿਭਵ ਬਹਾਲ ਹੋਇਆ।

ਕੰਪਲੈਕਸ III ਦਾ ਬਾਈਪਾਸ ਕੰਮ ਨਹੀਂ ਕਰਦਾ ਸੀ। ਐਂਟੀਮਾਇਸਿਨ ਨੇ ਸ਼ਵਸਨ ਨੂੰ ਲਗਭਗ 16 ਤੱਕ ਘਟਾਇਆ, ਅਤੇ ਰੰਗਕ ਨੇ ਇਸ ਨੂੰ ਸਿਰਫ਼ ਲਗਭਗ 20 ਤੱਕ ਵਧਾਇਆ। ਕਿਸੇ ਵੀ ਸਬਸਟ੍ਰੇਟ ਨਾਲ ਝਿੱਲੀ ਵਿਭਵ ਬਹਾਲ ਨਹੀਂ ਹੋਇਆ, ਭਾਵੇਂ ਰੰਗਕ ਦੀ ਮਾਤਰਾ 5 micromolar ਤੱਕ ਸੀ। ਪੈਰੌਕਸਾਈਡ ਦੇ ਅੰਕੜਿਆਂ ਨੇ ਵੀ ਇਹੀ ਸੰਕੇਤ ਦਿੱਤਾ: ਇਕੱਲੇ ਰੰਗਕ ਨੇ ਪੈਰੌਕਸਾਈਡ ਦੇ ਨਿਕਾਸ ਨੂੰ ਲਗਭਗ 76 pmol per minute per mg ਦੀ ਬੁਨਿਆਦੀ ਦਰ ਤੋਂ ਤਿੰਨ ਮਾਤਰਾਵਾਂ ਉੱਤੇ ਲਗਭਗ 1170, 1460, ਅਤੇ 1945 ਤੱਕ ਵਧਾਇਆ, ਪਰ ਐਂਟੀਮਾਇਸਿਨ ਨੇ ਰੰਗਕ ਕਾਰਨ ਬਣੇ ਇਸ ਸੰਕੇਤ ਨੂੰ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਲਗਭਗ 25, 88, ਅਤੇ 96 ਫ਼ੀਸਦੀ ਘਟਾ ਦਿੱਤਾ। ਜੇ ਅਪਚਯਿਤ ਰੰਗਕ ਸਿੱਧਾ ਆਕਸੀਜਨ ਨਾਲ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਕਰਦਾ, ਤਾਂ ਕੰਪਲੈਕਸ III ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਨਾਲ ਇਹ ਸੰਕੇਤ ਦਬਣਾ ਨਹੀਂ ਚਾਹੀਦਾ ਸੀ। ਲੇਖਕਾਂ ਨੇ ਨਿਸ਼ਕਰਸ਼ ਕੱਢਿਆ ਕਿ ਅਪਚਯਿਤ ਰੰਗਕ ਕੰਪਲੈਕਸ III ਦੇ Qo ਸਥਾਨ ਉੱਤੇ ਆਕਸੀਕ੍ਰਿਤ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਐਂਟੀਮਾਇਸਿਨ ਦੀ ਰੁਕਾਵਟ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਹੈ। ਸ਼ਬਦਾਂ ਵਿੱਚ ਇਹ ਛੋਟਾ ਚੱਕਰ ਹੈ: ਇਲੈਕਟ੍ਰੌਨ-ਦਾਤਿਆਂ ਤੋਂ ਰੰਗਕ ਤੱਕ, ਰੰਗਕ ਤੋਂ Qo ਤੱਕ, ਫਿਰ ਅੱਗੇ ਆਮ ਰਸਤਾ। ਰੋਟੇਨੋਨ ਦੀ ਰੁਕਾਵਟ ਬਾਈਪਾਸ ਹੁੰਦੀ ਹੈ। ਐਂਟੀਮਾਇਸਿਨ ਦੀ ਨਹੀਂ।

ਦੂਜਾ ਅਧਿਐਨ: ਤਿੰਨ ਪ੍ਰਜਾਤੀਆਂ ਵਿੱਚ, ਦੋਵਾਂ ਅਵਰੋਧਕ ਸਥਾਨਾਂ ਉੱਤੇ ਅੰਸ਼ਿਕ ਬਾਈਪਾਸ

Svab ਅਤੇ ਸਹਿਕਰਮੀਆਂ ਨੇ ਪ੍ਰਯੋਗ ਦੀ ਰੂਪਰੇਖਾ ਹੋਰ ਵਿਸ਼ਾਲ ਕੀਤੀ। ਚੂਹਿਆਂ, ਰੈਟਾਂ ਅਤੇ ਗਿਨੀ ਪਿਗਾਂ ਦੇ ਦਿਮਾਗ ਦੇ ਮਾਇਟੋਕੌਂਡਰੀਆ ਨੂੰ Percoll ਨਾਲ ਅਲੱਗ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਅਤੇ ਉਸੇ 0.1 mg per ml ਉੱਤੇ ਪਰਖਿਆ ਗਿਆ। ਸਬਸਟ੍ਰੇਟ ਪਾਇਰੂਵੇਟ ਅਤੇ ਮੈਲੇਟ, ਜਾਂ ਗਲੂਟਾਮੇਟ ਅਤੇ ਮੈਲੇਟ ਸਨ, ਹਰੇਕ 5 mM ਉੱਤੇ। ਉਨ੍ਹਾਂ ਨੇ ਕੰਪਲੈਕਸ III ਦੇ ਦੋ ਅਵਰੋਧਕ ਵਰਤੇ: ਐਂਟੀਮਾਇਸਿਨ A 0.3 micromolar ਅਤੇ ਮਾਇਕਸੋਥਾਇਜ਼ੋਲ 1 micromolar। ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਪਰਖਾਂ ਵਿੱਚ ਰੰਗਕ 2 micromolar ਸੀ, ਅਤੇ ਸਾਇਟੋਕ੍ਰੋਮ c ਵਾਲੇ ਕੰਮ ਵਿੱਚ 0.5 ਸੀ। ਇੱਕੋ ਜਿਹੀਆਂ ਪ੍ਰਯੋਗ-ਵਿਧੀਆਂ ਨਾਲ ਪਰਖੀਆਂ ਤਿੰਨੋਂ ਪ੍ਰਜਾਤੀਆਂ ਦੇ ਵੇਰਵੇ ਖੁੱਲ੍ਹੀ ਪਹੁੰਚ ਵਾਲੇ ਖੋਜ ਲੇਖ ਵਿੱਚ ਹਨ।

ਤਿੰਨੋਂ ਪ੍ਰਜਾਤੀਆਂ ਵਿੱਚ ਦੋਵੇਂ ਰੁਕਾਵਟਾਂ ਅੰਸ਼ਿਕ ਤੌਰ ਉੱਤੇ ਬਾਈਪਾਸ ਹੋਈਆਂ। ਚੂਹੇ ਦੇ ਮਾਇਟੋਕੌਂਡਰੀਆ ਵਿੱਚ ਐਂਟੀਮਾਇਸਿਨ ਨੇ ਸ਼ਵਸਨ ਦਬਾਇਆ, ਅਤੇ ਰੰਗਕ ਨੇ ਇਸ ਨੂੰ ਲਗਭਗ 60 ਫ਼ੀਸਦੀ ਵਧਾ ਕੇ ਕਰੀਬ 37 ਤੋਂ 59 nmol per minute per mg ਕਰ ਦਿੱਤਾ। ਮਾਇਕਸੋਥਾਇਜ਼ੋਲ ਨੇ ਇਸ ਨੂੰ 88 ਫ਼ੀਸਦੀ ਘਟਾ ਕੇ ਲਗਭਗ 4.5 ਕਰ ਦਿੱਤਾ, ਅਤੇ ਰੰਗਕ ਨੇ ਇਸ ਨੂੰ ਪੰਜ ਗੁਣਾ ਵਧਾ ਕੇ ਲਗਭਗ 23 ਕਰ ਦਿੱਤਾ। ਕਿਸੇ ਵੀ ਅਵਰੋਧਕ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਵਿੱਚ ਝਿੱਲੀ ਵਿਭਵ ਦਾ ਅੰਸ਼ਿਕ ਮੁੜ ਧਰੁਵੀਕਰਨ ਹੋਇਆ। ਪ੍ਰਕਾਸ਼ਕੀ ਮਾਪ-ਵਿਕ੍ਰਿਤੀਆਂ ਨੂੰ ਖਾਰਜ ਕਰਨ ਲਈ ਇਸ ਨੂੰ ਦੋ ਰੰਗਕਾਂ (ਸੈਫਰਾਨਿਨ O ਅਤੇ ਅਨੁਪਾਤ-ਆਧਾਰਿਤ TMRM) ਨਾਲ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ।

ਇਸ ਲੇਖ ਵਿੱਚ ਇਲੈਕਟ੍ਰੌਨ ਦੀ ਹਵਾਲਗੀ ਨੂੰ ਸਿੱਧਾ ਵੀ ਪਰਖਿਆ ਗਿਆ, ਜੋ ਪਹਿਲੇ ਅਧਿਐਨ ਨੇ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਸੀ। ਬਾਹਰੋਂ ਦਿੱਤਾ ਗਿਆ ਐਸੀਟੀਲੇਟਿਡ ਸਾਇਟੋਕ੍ਰੋਮ c, 25 micromolar ਉੱਤੇ, ਊਰਜਿਤ ਮਾਇਟੋਕੌਂਡਰੀਆ ਦੁਆਰਾ ਅਪਚਯਿਤ ਨਹੀਂ ਹੋਇਆ, ਭਾਵੇਂ ਅਵਰੋਧਕ ਮੌਜੂਦ ਸਨ ਜਾਂ ਨਹੀਂ। ਪਰ ਰੰਗਕ ਜੋੜਨ ਨਾਲ ਦੋਵਾਂ ਹਾਲਤਾਂ ਵਿੱਚ ਅਪਚਯਨ ਹੋਇਆ। ਕੋਸ਼ਿਕਾ-ਰਹਿਤ ਬਫ਼ਰ ਵਿੱਚ NADH ਅਤੇ ਰੰਗਕ ਨੇ ਸਾਇਟੋਕ੍ਰੋਮ c ਨੂੰ NADH ਦੇ ਅਨੁਪਾਤ ਵਿੱਚ ਦਰ ਨਾਲ ਅਪਚਯਿਤ ਕੀਤਾ। ਸ਼ਬਦਾਂ ਵਿੱਚ ਇਹ ਲੰਮੀ ਛਾਲ ਹੈ: ਅਪਚਯਕ ਸਮਤੁੱਲਾਂ ਤੋਂ ਰੰਗਕ ਤੱਕ, ਰੰਗਕ ਤੋਂ ਸਿੱਧਾ ਸਾਇਟੋਕ੍ਰੋਮ c ਤੱਕ, ਕੰਪਲੈਕਸ IV ਤੋਂ ਆਕਸੀਜਨ ਤੱਕ। ਇਹ ਰਸਤਾ ਕੰਪਲੈਕਸ III ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਛੱਡ ਦਿੰਦਾ ਹੈ, ਇਸ ਲਈ ਦੋਵੇਂ ਅਵਰੋਧਕਾਂ ਦੀਆਂ ਰੁਕਾਵਟਾਂ ਬਾਈਪਾਸ ਹੋ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ।

ਦੋ ਹੋਰ ਮਾਪ ਇਸ ਵਿਆਖਿਆ ਦਾ ਸਮਰਥਨ ਕਰਦੇ ਹਨ। ਮਾਇਕਸੋਥਾਇਜ਼ੋਲ ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕੀਤੇ ਮਾਇਟੋਕੌਂਡਰੀਆ ਵਿੱਚ ਰੰਗਕ ਜੋੜਨ ਉੱਤੇ NAD(P)H ਦੀ ਪ੍ਰਤੀਦੀਪਤਾ ਘਟੀ, ਜਿਸ ਦਾ ਅਰਥ ਹੈ ਕਿ ਅਪਚਯਕ ਸਮਤੁੱਲ ਨਵੇਂ ਰਸਤੇ ਰਾਹੀਂ ਨਿਕਲ ਰਹੇ ਸਨ। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, 660 nm ਉੱਤੇ ਰੰਗਕ ਦਾ ਪ੍ਰਕਾਸ਼-ਅਵਸ਼ੋਸ਼ਣ ਹਰ ਜੋੜ ਦੇ ਨਾਲ ਬਦਲਿਆ, ਜਦਕਿ ਸੈਂਟ੍ਰਿਫਿਊਜ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਦੇ ਉੱਪਰਲੇ ਤਰਲ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ ਆਕਸੀਕ੍ਰਿਤ ਰੰਗਕ ਊਰਜਿਤ ਮਾਇਟੋਕੌਂਡਰੀਆ ਦੇ ਅੰਦਰ ਸੌ ਗੁਣੇ ਤੋਂ ਵੱਧ ਸੰਕੇਂਦ੍ਰਿਤ ਹੋਇਆ ਅਤੇ ਵਿਭਵ ਢਹਿ ਜਾਣ ਉੱਤੇ ਬਾਹਰ ਨਿਕਲ ਗਿਆ। ਪ੍ਰੋਟੌਨਾਂ ਦਾ ਹਿਸਾਬ ਵੀ ਮੇਲ ਖਾਂਦਾ ਹੈ: ਪੰਪ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਪੜਾਅ ਛੱਡਣ ਨਾਲ ਹਰ ਇਲੈਕਟ੍ਰੌਨ ਜੋੜੇ ਲਈ 10 ਦੀ ਥਾਂ ਲਗਭਗ 2 ਪ੍ਰੋਟੌਨ ਰਹਿ ਜਾਂਦੇ ਹਨ। ਇਸ ਲਈ ਸਿਰਫ਼ ਅੰਸ਼ਿਕ ਮੁੜ ਧਰੁਵੀਕਰਨ ਦੇ ਨਾਲ ਆਕਸੀਜਨ ਦੀ ਤੇਜ਼ ਵਰਤੋਂ ਅਸਲ ਬਾਈਪਾਸ ਦੀ ਨਿਸ਼ਾਨੀ ਹੈ, ਉਸ ਦੇ ਵਿਰੁੱਧ ਸਬੂਤ ਨਹੀਂ।

ਉਸੇ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਨਮੂਨੇ ਨੇ ਅਜਿਹੀਆਂ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆਵਾਂ ਦਿਖਾਈਆਂ ਜੋ ਸਰਸਰੀ ਪੜ੍ਹਨ ਨੂੰ ਭੁਲੇਖੇ ਵਿੱਚ ਪਾ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ। ਅਵਰੋਧਕ ਅਤੇ ਰੰਗਕ ਇਕੱਠੇ ਹੋਣ ਉੱਤੇ ADP ਨੇ ਸ਼ਵਸਨ ਵਧਾਉਣ ਦੀ ਥਾਂ ਘਟਾਇਆ, ਅਤੇ ਪਰਿਵਹਨ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਨਾਲ ਇਹ ਹੌਲੀ ਹੋਣ ਦੀ ਥਾਂ ਉਤੇਜਿਤ ਹੋਇਆ, ਜਦਕਿ ਝਿੱਲੀ ਵਿਭਵ ਫਿਰ ਵੀ ਆਮ ਦਿਸ਼ਾਵਾਂ ਵਿੱਚ ਬਦਲਿਆ। ਇਸ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਵਿੱਚ ਇਕੱਲੀ ਆਕਸੀਜਨ ਦੀ ਖਪਤ ਗੁੰਮਰਾਹ ਕਰਦੀ ਹੈ।

ਤੀਜਾ ਅਧਿਐਨ: ਜਿਗਰ ਵਾਲਾ ਅਧਿਐਨ ਜਿਸ ਨੇ ਕੰਪਲੈਕਸ I ਅਤੇ II ਪਰਖੇ, III ਨਹੀਂ

Lee ਅਤੇ Boelsterli ਨੇ ਚੂਹੇ ਦੇ ਜਿਗਰ ਦੇ ਮਾਇਟੋਕੌਂਡਰੀਆ ਅਤੇ ਸੰਵਰਧਿਤ ਜਿਗਰ-ਕੋਸ਼ਿਕਾਵਾਂ ਵਰਤੀਆਂ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਐਫਾਵਿਰੈਂਜ਼ (ਕੰਪਲੈਕਸ I, IC50 ਲਗਭਗ 30 micromolar) ਅਤੇ ਆਈਸੋਨਿਆਜ਼ਿਡ ਦੇ ਮੈਟਾਬੋਲਾਈਟ ਹਾਈਡ੍ਰਾਜ਼ੀਨ (ਕੰਪਲੈਕਸ II, IC50 ਲਗਭਗ 30 micromolar) ਨਾਲ ਨੁਕਸਾਨ ਪਹੁੰਚਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਲਗਭਗ 30 micromolar ਰੰਗਕ ਨੇ NADH ਦਾ ਆਕਸੀਕਰਨ, ਝਿੱਲੀ ਵਿਭਵ ਅਤੇ ATP ਬਹਾਲ ਕੀਤੇ, ਨਾਲ ਹੀ ਆਕਸੀਕਾਰਕਾਂ ਅਤੇ ਨੈਕਰੋਸਿਸ ਰਾਹੀਂ ਕੋਸ਼ਿਕਾ-ਮੌਤ ਨੂੰ ਘਟਾਇਆ। Redox Biology ਦਾ ਖੋਜ ਲੇਖ ਇਸ ਦੀ ਵਿਆਖਿਆ ਅਜਿਹੇ ਮਾਡਲ ਨਾਲ ਕਰਦਾ ਹੈ ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਰੰਗਕ ਇਲੈਕਟ੍ਰੌਨਾਂ ਨੂੰ ਨੁਕਸਾਨੇ ਹੋਏ ਕੰਪਲੈਕਸ I ਅਤੇ II ਤੋਂ ਬਚਾ ਕੇ ਲੈ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।

ਇਹ ਨਤੀਜਾ ਲੜੀ ਦੇ ਪਹਿਲੇ ਹਿੱਸੇ ਲਈ ਸਥਾਪਿਤ ਸੰਦਰਭ ਹੈ, ਅਤੇ ਕੰਪਲੈਕਸ III ਬਾਰੇ ਕੁਝ ਨਹੀਂ ਦੱਸਦਾ, ਕਿਉਂਕਿ ਉਸ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ ਉੱਥੇ ਕੁਝ ਵੀ ਅਵਰੁੱਧ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਇਹ ਦਿਮਾਗ ਵਾਲੇ ਕਿਸੇ ਵੀ ਅਧਿਐਨ ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਜਾਂ ਖੰਡਨ ਨਹੀਂ ਕਰ ਸਕਦਾ।

ਸਥਿਤੀਆਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ-ਸਾਰਣੀ

ਚਾਰ ਕਾਰਨ ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਕਰਕੇ ਕੰਪਲੈਕਸ III ਦੇ ਦੋਵੇਂ ਅਧਿਐਨ ਆਪਣੇ ਪ੍ਰਯੋਗ-ਪ੍ਰਬੰਧ ਬਾਰੇ ਸਹੀ ਹੋ ਸਕਦੇ ਹਨ

1. ਅਵਰੋਧਕ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਇੱਕੋ ਜਿਹੀ ਦਖ਼ਲਅੰਦਾਜ਼ੀ ਨਹੀਂ ਸੀ। ਇੱਕ ਪਾਸੇ ਇਕੱਲਾ ਐਂਟੀਮਾਇਸਿਨ 1 microgram per ml ਉੱਤੇ ਸੀ; ਦੂਜੇ ਪਾਸੇ ਐਂਟੀਮਾਇਸਿਨ 0.3 micromolar ਉੱਤੇ ਅਤੇ ਨਾਲ ਵੱਖਰਾ Qo ਸਥਾਨ ਅਵਰੋਧਕ ਸੀ। ਰੰਗਕ ਦਾ Qo ਸਥਾਨ ਨੂੰ ਇਲੈਕਟ੍ਰੌਨ ਦੇਣ ਵਾਲਾ ਰਸਤਾ ਠੀਕ ਉੱਥੇ ਅਸਫਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ ਜਿੱਥੇ ਸਿੱਧਾ ਸਾਇਟੋਕ੍ਰੋਮ c ਤੱਕ ਜਾਣ ਵਾਲਾ ਰਸਤਾ ਸਫਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਇੱਕ ਸਥਾਨ ਦੋਵਾਂ ਦੀ ਨੁਮਾਇੰਦਗੀ ਨਹੀਂ ਕਰ ਸਕਦਾ।

2. ਰੰਗਕ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਅਤੇ ਸਮਾਂ ਵੱਖਰੇ ਸਨ। ਮੁੱਖ ਸੰਘਣਤਾਵਾਂ 1 ਅਤੇ 2 micromolar ਸਨ। ਇਹ ਰੰਗਕ ਰੀਡੌਕਸ ਚੱਕਰ ਵਿੱਚ ਭਾਗ ਲੈਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਸ ਦਾ ਅੰਦਰ ਜਾਣਾ ਤੇ ਸਾਇਟੋਕ੍ਰੋਮ c ਦਾ ਸਿੱਧਾ ਅਪਚਯਨ ਸੰਘਣਤਾ ਅਤੇ ਸਮੇਂ ਉੱਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦੇ ਹਨ। ਮਾਤਰਾ ਵਿੱਚ ਛੋਟੇ ਫ਼ਰਕ ਅਤੇ ਮਾਪ ਲੈਣ ਦੇ ਵੱਖਰੇ ਸਮੇਂ ਇੱਕੋ ਨੈੱਟਵਰਕ ਦੀਆਂ ਵੱਖਰੀਆਂ ਸ਼ਾਖਾਵਾਂ ਨੂੰ ਸਾਹਮਣੇ ਲਿਆ ਸਕਦੇ ਹਨ।

3. ਨਮੂਨੇ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਦੀਆਂ ਵਿਧੀਆਂ ਵੱਖਰੀਆਂ ਸਨ। ਡਿਜਿਟੋਨਿਨ ਨਾਲ ਅਲੱਗ ਕਰਨ ਅਤੇ Percoll ਗ੍ਰੇਡੀਐਂਟ ਨਾਲ ਅਲੱਗ ਕਰਨ ਦੀਆਂ ਵਿਧੀਆਂ ਮਾਇਟੋਕੌਂਡਰੀਆ ਦੀਆਂ ਅਜਿਹੀਆਂ ਆਬਾਦੀਆਂ ਚੁਣਦੀਆਂ ਹਨ ਜੋ ਕੁਝ ਹੱਦ ਤੱਕ ਇੱਕੋ ਜਿਹੀਆਂ ਹਨ, ਪਰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਇੱਕੋ ਨਹੀਂ। ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੀ ਸੰਘਣਤਾ 0.1 mg per ml ਉੱਤੇ ਇੱਕੋ ਸੀ, ਇਸ ਲਈ ਇਹ ਚਰ ਫ਼ਰਕ ਦਾ ਕਾਰਨ ਨਹੀਂ ਰਹਿੰਦਾ, ਪਰ ਉਪ-ਆਬਾਦੀ ਅਤੇ ਸੰਰਚਨਾਤਮਕ ਅਖੰਡਤਾ ਰਹਿੰਦੇ ਹਨ। ਪ੍ਰਜਾਤੀ ਬਾਰੇ ਸ਼ੱਕ ਵੀ ਦੂਰ ਹੋ ਗਿਆ: ਦੂਜੇ ਸਮੂਹ ਨੇ ਚੂਹੇ ਵਿੱਚ ਵੀ ਉਹੀ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਦੁਹਰਾਈ।

4. ਸਬਸਟ੍ਰੇਟ ਦੀ ਸਥਿਤੀ ਤੈਅ ਕਰਦੀ ਹੈ ਕਿ ਰੰਗਕ ਕੀ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਇੱਕ ਪਾਸੇ ਸਬਸਟ੍ਰੇਟਾਂ ਦੀਆਂ ਤਿੰਨ ਵਿਵਸਥਾਵਾਂ ਸਨ, ਦੂਜੇ ਪਾਸੇ NADH ਨਾਲ ਜੁੜੇ ਜੋੜੇ। NADH ਦੀ ਸਪਲਾਈ ਅਤੇ ਝਿੱਲੀ ਵਿਭਵ ਮਿਲ ਕੇ ਤੈਅ ਕਰਦੇ ਹਨ ਕਿ ਰੰਗਕ ਕਿੰਨੀ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਅਪਚਯਿਤ ਹੁੰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਕਿੱਥੇ ਵੰਡਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਜਿਹੜੇ ਰਸਤੇ ਨੂੰ ਆਕਸੀਕ੍ਰਿਤ ਸਾਇਟੋਕ੍ਰੋਮ c ਦੇ ਨੇੜੇ ਅਪਚਯਿਤ ਰੰਗਕ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਉਹ ਇਸ ਚੋਣ ਉੱਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦਾ ਹੈ।

ਅਗਲੇ ਬਾਈਪਾਸ ਦਾਅਵੇ ਨੂੰ ਕਿਵੇਂ ਪੜ੍ਹਨਾ ਹੈ

ਪੁੱਛੋ ਕਿ ਕਿਹੜਾ ਕੰਪਲੈਕਸ ਰੋਕਿਆ ਗਿਆ ਸੀ, ਕਿਹੜੇ ਅਵਰੋਧਕ ਨਾਲ, ਕਿਹੜੇ ਸਥਾਨ ਉੱਤੇ ਅਤੇ ਕਿੰਨੀ ਮਾਤਰਾ ਨਾਲ। ਰੰਗਕ ਦੀ ਸੰਘਣਤਾ ਅਤੇ ਮਾਪ ਲੈਣ ਦਾ ਸਮਾਂ ਪੁੱਛੋ। ਟਿਸ਼ੂ, ਪ੍ਰਜਾਤੀ, ਅਲੱਗ ਕਰਨ ਦੀ ਵਿਧੀ, ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੀ ਸੰਘਣਤਾ ਅਤੇ ਸਬਸਟ੍ਰੇਟ ਪੁੱਛੋ। ਇਹ ਵੀ ਪੁੱਛੋ ਕਿ ਕੀ ਵਿਭਵ, ਸ਼ਵਸਨ, ਰੀਡੌਕਸ ਸਥਿਤੀ ਅਤੇ ਸਿੱਧੀ ਹਵਾਲਗੀ ਦੀ ਪਰਖ ਆਪਸ ਵਿੱਚ ਮੇਲ ਖਾਂਦੇ ਹਨ, ਕਿਉਂਕਿ ਇੱਥੇ ਇਕੱਲੀ ਆਕਸੀਜਨ ਦੀ ਖਪਤ ਨੇ ਇੱਕ ਤੋਂ ਵੱਧ ਵਾਰ ਗ਼ਲਤ ਦਿਸ਼ਾ ਵੱਲ ਸੰਕੇਤ ਕੀਤਾ।

ਸੀਮਿਤ ਸਾਰ ਇਹੀ ਹੈ। ਕੰਪਲੈਕਸ I ਨੂੰ ਰੰਗਕ ਰਾਹੀਂ ਬਾਈਪਾਸ ਕਰਨ ਬਾਰੇ ਸਹਿਮਤੀ ਹੈ। ਕੰਪਲੈਕਸ III ਲਈ, ਚੂਹੇ ਦੇ ਮਾਇਟੋਕੌਂਡਰੀਆ ਵਿੱਚ ਐਂਟੀਮਾਇਸਿਨ 1 microgram per ml ਅਤੇ ਰੰਗਕ 1 micromolar ਹੋਣ ਉੱਤੇ ਕੋਈ ਕਾਰਜਸ਼ੀਲ ਬਾਈਪਾਸ ਨਹੀਂ ਦਿਸਦਾ। ਦੂਜੇ ਪਾਸੇ, ਤਿੰਨ ਪ੍ਰਜਾਤੀਆਂ ਵਿੱਚ ਐਂਟੀਮਾਇਸਿਨ 0.3 micromolar ਜਾਂ ਮਾਇਕਸੋਥਾਇਜ਼ੋਲ 1 micromolar ਅਤੇ ਰੰਗਕ 2 micromolar ਹੋਣ ਉੱਤੇ ਰੰਗਕ ਤੋਂ ਸਾਇਟੋਕ੍ਰੋਮ c ਤੱਕ ਸਿੱਧੀ ਹਵਾਲਗੀ ਦੇ ਨਾਲ ਅੰਸ਼ਿਕ ਬਾਈਪਾਸ ਦਿਸਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਦੋਵੇਂ ਗੱਲਾਂ ਇਕੱਠੇ ਸਹੀ ਹੋ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ। ਇਸ ਤੋਂ ਵੱਧ ਵਿਸ਼ਾਲ ਦਾਅਵਾ ਉਪਲਬਧ ਨਤੀਜਿਆਂ ਤੋਂ ਅੱਗੇ ਦਾ ਅਨੁਮਾਨ ਹੈ।

ਸੰਬੰਧਿਤ ਪਾਠ ਇਸ ਵਿਵਾਦਿਤ ਦਾਅਵੇ ਨੂੰ ਨਿਰਵਿਵਾਦ ਰਸਾਇਣ ਵਿਗਿਆਨ ਦੇ ਸੰਦਰਭ ਵਿੱਚ ਰੱਖਦੇ ਹਨ: ਇਲੈਕਟ੍ਰੌਨਾਂ ਦੀ ਰੀਲੇਅ ਲਈ ਮਿਥੀਲੀਨ ਬਲੂ ਇਲੈਕਟ੍ਰੌਨਾਂ ਨੂੰ ਕਿਵੇਂ ਅੱਗੇ ਪਹੁੰਚਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਲੜੀ ਦੇ ਪਹਿਲੇ ਹਿੱਸੇ ਦੇ ਸਥਾਪਿਤ ਮਾਮਲੇ ਲਈ ਕੰਪਲੈਕਸ I ਦੇ ਬਾਈਪਾਸ ਵਾਲੇ ਪ੍ਰਯੋਗ, ਦੋ ਰੰਗਕਾਂ ਦੀ ਲੋੜ ਕਿਉਂ ਪਈ ਇਹ ਸਮਝਣ ਲਈ ਝਿੱਲੀ ਵਿਭਵ ਦੇ ਮਾਪ ਅਤੇ ਉਨ੍ਹਾਂ ਦੀਆਂ ਮਾਪ-ਵਿਕ੍ਰਿਤੀਆਂ, ਅਤੇ ਮਾਤਰਾ ਤੇ ਸਮੇਂ ਨਾਲ ਜੁੜੀਆਂ ਉਲਝਣਾਂ ਲਈ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਵਿੱਚ ਰੀਡੌਕਸ ਚੱਕਰ ਵਿੱਚ ਭਾਗ ਲੈਣ ਵਾਲੇ ਪਦਾਰਥਾਂ ਦਾ ਸੰਭਾਲਣਾ।