Metylenblått ved patogenreduksjon i plasma: slik fungerer prosessen

Metylenblått kan bidra til å redusere patogener i donert plasma når det inngår i et kontrollert behandlingssystem. Behandlingen skjer utenfor kroppen, før plasmaet frigis til transfusjon. Den kombinerer spesifisert utstyr, eksponering for fargestoff, belysning, filtrering og kontroller av den ferdige blodkomponenten.

Dette skillet avgjør hva dokumentasjonen betyr. En studie som viser at et behandlingssystem reduserer mengden infeksiøst virus i en plasmapose, dokumenterer et resultat for dette materialet og denne prosessen. Den dokumenterer ikke at inntak av metylenblått behandler en infeksjon hos en person.

Det klinisk relevante spørsmålet er også todelt: Hvor stor patogenreduksjon oppnår prosessen, og hvor mye av plasmaets nyttige funksjon bevares?

Ta utgangspunkt i plasma, ikke et uspesifisert blodprodukt

Plasma er den flytende blodkomponenten som inneholder proteiner, blant annet koagulasjonsfaktorer. Man bør ikke anta at et system for plasmabehandling er egnet for fullblod, erytrocyttkonsentrater eller trombocyttkomponenter. Disse materialene har ulik sammensetning og ulike funksjoner som må bevares.

Som et konkret eksempel behandler Macopharmas THERAFLEX MB-Plasma-system plasmaenheter fra enkeltgivere. Den dokumenterte prosessen omfatter cellereduksjon, tilsetning av metylenblått, belysning, fjerning av fargestoff og oppbevaring. Produsenten beskriver ulike konfigurasjoner for plasma fremstilt fra fullblod og for større afereseuttak. Utgangsmaterialet og engangssettet har derfor betydning allerede før belysningen begynner.

«Metylenblåttbehandlet plasma» er en beskrivelse av en behandlet komponent, ikke en fullstendig spesifikasjon. En nyttig sammenligning oppgir systemet, konfigurasjonen, plasmakilden og versjonen av bruksanvisningen.

Følg materialet gjennom behandling og vurdering

Illustrasjonen ovenfor skiller mellom trinnene. Denne tilhørende tabellen forklarer hva hvert trinn bidrar med, og hva det ikke kan dokumentere alene.

Tabellen er en veiledning til å forstå en validert prosess, ikke en erstatning for en arbeidsprosedyre. Særlig har filteret for fjerning av fargestoff og lyskilden ulike oppgaver. Macopharma beskriver Blueflex som et filter som reduserer metylenblått og dets derivater, inkludert azurforbindelser og tionin. En påstand om fjerning av kjemikalier bør forstås som en målt reduksjon, ikke som et løfte om at ingen molekyler er igjen.

Hvorfor lyskilden er en del av behandlingen

Metylenblått er fotoaktivt. Belysning kan forårsake kjemisk skade på biologiske målstrukturer, og derfor er kombinasjonen undersøkt for virusinaktivering. I Mohr og kollegers studie av fenotiazinfargestoffer og lys påvirket endringer i lyskilden både virusinaktivering og skade på plasmaproteiner.

Dette viser hvorfor en vanlig forenkling blir feil: å behandle navnet på fargestoffet som om det beskrev hele behandlingen. En annen lampe, pose, optisk bane eller et annet materiale kan endre eksponeringen. Den mer overordnede veiledningen om hvordan fotodynamisk behandling med metylenblått studeres forklarer hvorfor formulering og belysning hører hjemme i samme beskrivelse.

Temperatur er et særlig nyttig eksempel. En studie fra 2018 av THERAFLEX-behandling ved ulike temperaturer sammenlignet plasma ved omtrent 5°C, 22°C og 30°C. Ved den laveste temperaturen observerte forskerne dårligere oppløsning av tabletten og lavere inaktivering av de tre virusene som ble undersøkt. Høyere temperaturer ga større endringer i koagulasjonstid og større tap av koagulasjonsfaktoraktivitet.

Disse funnene angir ikke et nytt driftsområde. De forklarer hvorfor en blodbank må bruke de spesifiserte betingelsene: Å forbedre ett resultat ved å endre en parameter kan svekke et annet.

Hvilken del av systemet reduserte organismen?

Patogenreduksjon målt etter hele prosessen kan ikke automatisk tilskrives lysaktivert fargestoff alene.

I en belastningsstudie fra 2015 med bevisst kontaminert plasma tok forskerne prøver av materialet etter de enkelte behandlingstrinnene. Cellefiltreringen sto for mye av bakteriereduksjonen. For den lille bakterien Brevundimonas diminuta ga det første trinnet en reduksjon på 1.7 log; etterfølgende lysbehandling og fargestofffiltrering økte den samlede reduksjonen til minst 3.7 log, under analysemetodens deteksjonsgrense.

Dette er et resultat for et kombinert system. Det viser ikke at en vanlig metylenblåttløsning gir samme bakteriereduksjon. Skillet gjelder også når man leser mer generell forskning på metylenblått og antimikrobiell aktivitet.

En log-reduksjon beskriver forholdet mellom den målte mengden infeksiøst materiale ved start og mengden som gjenstår. En reduksjon på tre log er en tusenfoldig reduksjon. «Under deteksjonsgrensen» betyr at analysemetoden ikke kunne kvantifisere det som gjensto under testbetingelsene. Det er ikke bevis på absolutt sterilitet eller universell aktivitet mot organismer som ikke er testet. Virusart, utgangsmengde, prøvematriks og analysemetodens følsomhet er fortsatt nødvendige deler av påstanden.

Bevar funksjonen plasmaet skal brukes til

En prosess kan redusere infektivitet samtidig som den endrer proteiner som har klinisk betydning. Å måle patogenreduksjon alene gir derfor en ufullstendig vurdering.

I en sammenligning fra 2014 av plasmakilder og behandlingstider varierte andelen bevart faktor VIII etter metylenblåttbehandling fra 78% til 89% i studieseriene. Den bevarte andelen var avhengig av plasmakilden, og forskerne vurderte også fibrinogen. Dette er laboratoriemålinger av den behandlede komponenten. De er ikke prosenttall for klinisk effekt hos pasienter.

Tenk på to plasmaenheter med ulike faktornivåer ved start. Selv om de beholder samme andel av aktiviteten under behandlingen, vil sluttnivåene være forskjellige. Omvendt trenger ikke en høyere prosentandel bevart faktor å bety en høyere sluttkonsentrasjon. Les både målingene før og etter behandlingen og den gjeldende spesifikasjonen for frigivelse.

Pasientutfall krever en annen type dokumentasjon. En studie av komponentkvalitet kan ikke alene dokumentere tilsvarende blødningskontroll, transfusjonsbehov eller forekomst av uønskede hendelser i en bestemt pasientgruppe.

Hold dokumentasjon om plasmabehandling atskilt fra påstander om pasientbehandling

Plasmaposen gjør kontrollert eksponering mulig: Den har et definert volum, en definert geometri, en fast behandlingssekvens og et målbart sluttresultat. En person har vev, blodsirkulasjon, stoffskifte og infeksjonssteder som dette forsøket ikke gjenskaper.

Derfor krever påstander om HIV-behandling sammenlignet med dokumentasjon av inaktivering i plasma og dokumentasjon om metylenblått ved COVID-19 og senfølger etter COVID-19 egne kliniske vurderinger. Ingen av spørsmålene besvares ved å påvise redusert infektivitet i donert materiale.

Ved bruk i blodbanker må man vurdere den konkrete komponenten og systemet som er tillatt lokalt, systemets organismespecifikke validering, bevart proteinfunksjon, kjemikalierester og kontroller før frigivelse. Produkttilgjengeligheten varierer mellom land, slik produsenten opplyser. Historisk bruk eller et vellykket forsøk dokumenterer ikke at systemet er godkjent overalt i dag. Dokumentasjonen må vurderes for den fullstendige, validerte prosessen anvendt på den spesifiserte plasmakomponenten.