L-Artikolu
Il-blu tal-metilen fit-tnaqqis tal-patoġeni fil-plażma: kif jaħdem il-proċess
Il-blu tal-metilen jista’ jgħin biex inaqqas il-patoġeni fil-plażma mogħtija b’donazzjoni meta jkun parti minn sistema ta’ pproċessar ikkontrollata. It-trattament isir barra mill-ġisem, qabel ma l-plażma tiġi rilaxxata għat-trasfużjoni. Jgħaqqad tagħmir speċifikat, espożizzjoni għaż-żebgħa, illuminazzjoni, filtrazzjoni u kontrolli fuq il-komponent tad-demm li jirriżulta.
Din id-distinzjoni tiddetermina xi tfisser l-evidenza. Studju li juri li sistema ta’ pproċessar tnaqqas il-virus infettiv f’borża tal-plażma jistabbilixxi riżultat għal dak il-materjal u dak il-proċess. Ma jistabbilixxix li t-teħid tal-blu tal-metilen jittratta infezzjoni f’persuna.
Il-mistoqsija klinikament rilevanti għandha wkoll żewġ aspetti: kemm inaqqas il-patoġeni l-proċess, u kemm mill-funzjoni utli tal-plażma tibqa’?
Ibda bil-plażma, mhux bi prodott tad-demm mhux speċifikat
Il-plażma hija l-komponent likwidu tad-demm li fih proteini, inklużi fatturi tal-koagulazzjoni. Ma għandux jiġi preżunt li sistema għall-ipproċessar tal-plażma hija adattata għal demm sħiħ, konċentrati taċ-ċelloli ħomor jew komponenti tal-plejtlits. Dawn il-materjali għandhom kompożizzjonijiet u funzjonijiet differenti li jridu jiġu ppreservati.
Bħala eżempju konkret, is-sistema THERAFLEX MB-Plasma ta’ Macopharma tittratta unitajiet ta’ plażma minn donatur wieħed. Is-sekwenza dokumentata tagħha tinkludi t-tnaqqis taċ-ċelloli, iż-żieda tal-blu tal-metilen, l-illuminazzjoni, it-tneħħija taż-żebgħa u l-ħażna. Il-manifattur jiddeskrivi konfigurazzjonijiet differenti għall-plażma miksuba minn demm sħiħ u għal ġabriet akbar permezz tal-afereżi. Għalhekk, il-materjal tal-bidu u s-sett li jintuża darba biss huma importanti qabel ma tibda l-illuminazzjoni.
“Plażma bil-blu tal-metilen” hija deskrizzjoni ta’ komponent ipproċessat, mhux speċifikazzjoni kompluta. Paragun utli jidentifika s-sistema, il-konfigurazzjoni, is-sors tal-plażma u l-verżjoni tal-istruzzjonijiet operattivi.
Segwi l-materjal matul l-ipproċessar u l-valutazzjoni
L-illustrazzjoni ta’ hawn fuq tifred l-istadji. Din it-tabella li takkumpanjaha tispjega x’jikkontribwixxi kull stadju u x’ma jistax jistabbilixxi waħdu.
| Stadju tal-ipproċessar | Skop ewlieni | Mistoqsija separata li għandha tiġi vverifikata |
|---|---|---|
| Tnaqqis taċ-ċelloli qabel l-espożizzjoni | Jitneħħew ċelloli tad-demm residwi u aggregati mill-plażma | Il-materjal tal-bidu kien adattat għal din il-konfigurazzjoni? |
| Espożizzjoni għaż-żebgħa | Il-fotosensitizzatur jinġieb f’kuntatt mal-materjal li għandu jiġi ttrattat | L-espożizzjoni nkisbet fil-kundizzjonijiet speċifikati tal-proċess? |
| Illuminazzjoni kkontrollata | Jitqanqlu reazzjonijiet fotokimiċi li jnaqqsu l-patoġeni suxxettibbli | Inkisbu l-kundizzjonijiet ivvalidati tad-dawl u tat-temperatura? |
| Tneħħija taż-żebgħa u tal-fotoprodotti | Jitnaqqsu s-sustanzi kimiċi residwi tal-ipproċessar qabel il-ħażna | L-istadju tat-tneħħija ssodisfa r-rekwiżiti tas-sistema? |
| Valutazzjoni u rilaxx tal-prodott | Jiġu vvalutati r-rekords tal-ipproċessar u l-kwalità tal-komponent skont il-proċeduri tas-servizz tad-demm | Il-komponent lest jissodisfa l-ispeċifikazzjoni applikabbli tiegħu? |
It-tabella hija gwida għall-qari ta’ proċess ivvalidat, mhux proċedura operattiva sostituttiva. B’mod partikolari, il-filtru tat-tneħħija u s-sors tad-dawl jagħmlu xogħol differenti. Macopharma tiddeskrivi Blueflex bħala mezz li jnaqqas il-blu tal-metilen u d-derivattivi tiegħu, inklużi komposti azure u t-tijonina. Stqarrija dwar it-tneħħija kimika għandha tinftiehem bħala tnaqqis imkejjel, mhux bħala wegħda li ma tibqa’ ebda molekula.
Għaliex is-sors tad-dawl huwa parti mill-intervent
Il-blu tal-metilen huwa fotoattiv. L-illuminazzjoni tista’ tikkawża ħsara kimika lil miri bijoloġiċi, u għalhekk il-kombinazzjoni ġiet investigata għall-inattivazzjoni tal-viruses. Fl-istudju ta’ Mohr u l-kollegi tiegħu dwar iż-żebgħat tal-fenotijażina u d-dawl, il-bidla fis-sors tal-illuminazzjoni biddlet kemm l-inattivazzjoni tal-viruses kif ukoll il-ħsara lill-proteini tal-plażma.
Dan jeskludi simplifikazzjoni komuni: li l-isem taż-żebgħa jitqies bħallikieku jiddeskrivi l-intervent kollu. Lampa, borża, mogħdija ottika jew materjal differenti jistgħu jibdlu l-espożizzjoni. Il-gwida usa’ dwar kif jiġi studjat it-trattament fotodinamiku bil-blu tal-metilen tispjega għaliex il-formulazzjoni u l-illuminazzjoni għandhom ikunu fl-istess deskrizzjoni.
It-temperatura tipprovdi eżempju partikolarment utli. Studju tal-2018 dwar l-ipproċessar THERAFLEX f’temperaturi differenti qabbel plażma f’temperaturi qrib 5°C, 22°C u 30°C. Fl-inqas temperatura, ir-riċerkaturi osservaw li l-pillola nħallet inqas tajjeb u li l-inattivazzjoni tat-tliet viruses studjati kienet aktar baxxa. Temperaturi ogħla żiedu l-bidliet fil-ħin tat-tagħqid u t-telf tal-attività tal-fatturi tal-koagulazzjoni.
Dawn is-sejbiet ma jipprovdux medda operattiva ġdida. Jispjegaw għaliex servizz tad-demm għandu juża l-kundizzjonijiet speċifikati: it-titjib ta’ riżultat wieħed billi jinbidel parametru jista’ jaggrava riżultat ieħor.
Liema parti tas-sistema naqqset l-organiżmu?
It-tnaqqis tal-patoġeni mkejjel wara l-proċess komplut ma jistax jiġi attribwit awtomatikament għaż-żebgħa attivata bid-dawl biss.
Fi studju tal-2015 ta’ prova b’kontaminazzjoni intenzjonata tal-plażma, ir-riċerkaturi ħadu kampjuni tal-materjal wara stadji individwali tal-ipproċessar. Il-filtrazzjoni taċ-ċelloli kienet responsabbli għal parti kbira mit-tnaqqis tal-batterji. Għall-batterju żgħir Brevundimonas diminuta, dak l-ewwel stadju kiseb tnaqqis ta’ 1.7-log; it-trattament sussegwenti bid-dawl u l-filtrazzjoni taż-żebgħa wasslu t-tnaqqis totali għal mill-inqas 3.7 logs, taħt il-limitu ta’ detezzjoni tal-analiżi.
Dan huwa riżultat għal sistema kkombinata. Ma jurix li soluzzjoni ordinarja tal-blu tal-metilen tipproduċi l-istess tnaqqis tal-batterji. Id-distinzjoni tapplika wkoll meta tinqara riċerka antimikrobika usa’ dwar il-blu tal-metilen.
Tnaqqis logaritmiku jiddeskrivi l-proporzjon bejn il-materjal infettiv imkejjel fil-bidu u dak li jifdal. Tnaqqis ta’ tliet logs huwa tnaqqis b’fattur ta’ elf. “Taħt il-limitu ta’ detezzjoni” tfisser li l-analiżi ma setgħetx tikkwantifika dak li baqa’ fil-kundizzjonijiet tat-test tagħha. Mhijiex prova ta’ sterilità assoluta jew ta’ attività universali kontra organiżmi mhux ittestjati. L-ispeċi tal-virus, il-piż infettiv inizjali, il-matriċi tal-kampjun u s-sensittività tal-analiżi jibqgħu partijiet meħtieġa tal-istqarrija.
Ippreserva l-funzjoni li għaliha se tintuża l-plażma
Proċess jista’ jnaqqas l-infettività filwaqt li jibdel proteini li huma importanti klinikament. Għalhekk, il-kejl tat-tnaqqis tal-patoġeni waħdu jħalli l-valutazzjoni mhux kompluta.
F’paragun tal-2014 bejn sorsi tal-plażma u ħinijiet tal-ipproċessar, l-irkupru tal-fattur VIII wara t-trattament bil-blu tal-metilen varja minn 78% sa 89% fis-serje tal-istudju. L-irkupru kien jiddependi mis-sors tal-plażma, u r-riċerkaturi vvalutaw ukoll il-fibrinoġenu. Dawn huma kejlijiet tal-laboratorju fuq il-komponent ipproċessat. Mhumiex perċentwali tal-effettività klinika fil-pazjenti.
Ikkunsidra żewġ unitajiet tal-plażma b’livelli inizjali differenti tal-fatturi. Anki jekk iżommu l-istess frazzjoni tal-attività matul it-trattament, il-livelli finali tagħhom ikunu differenti. Min-naħa l-oħra, perċentwal ogħla ta’ rkupru mhux bilfors ifisser konċentrazzjoni finali ogħla. Aqra kemm il-kejl qabel u wara kif ukoll l-ispeċifikazzjoni applikabbli għar-rilaxx.
Ir-riżultati fil-pazjenti jeħtieġu tip ieħor ta’ evidenza. Studju dwar il-kwalità tal-komponent ma jistax, waħdu, jistabbilixxi kontroll ekwivalenti tal-fsada, ħtiġijiet ekwivalenti ta’ trasfużjoni jew rati ekwivalenti ta’ avvenimenti avversi f’popolazzjoni partikolari ta’ pazjenti.
Żomm l-evidenza dwar l-ipproċessar separata mill-istqarrijiet dwar it-trattament
Il-borża tal-plażma tagħmel l-espożizzjoni kkontrollata possibbli: għandha volum, ġeometrija u sekwenza tal-ipproċessar definiti, u riżultat li jista’ jitkejjel. Persuna għandha tessuti, ċirkolazzjoni, metaboliżmu u siti ta’ infezzjoni li dan l-esperiment ma jirriproduċix.
Għal din ir-raġuni, l-istqarrijiet dwar it-trattament tal-HIV meta mqabbla mal-evidenza dwar l-inattivazzjoni fil-plażma u l-evidenza dwar il-blu tal-metilen għall-COVID-19 u l-COVID fit-tul jeħtieġu l-valutazzjoni klinika tagħhom stess. L-ebda waħda minn dawn il-mistoqsijiet ma titwieġeb billi jintwera tnaqqis fl-infettività f’materjal mogħti b’donazzjoni.
Għall-użu mis-servizzi tad-demm, evalwa l-komponent eżatt u s-sistema permessa lokalment, il-validazzjoni tagħha speċifika għall-organiżmu, il-funzjoni tal-proteini li tinżamm, is-sustanzi kimiċi residwi u l-kontrolli tar-rilaxx. Id-disponibbiltà tal-prodott tvarja minn pajjiż għal ieħor, kif jiddikjara l-manifattur. L-użu fil-passat jew esperiment li rnexxa ma jistabbilixxix awtorizzazzjoni attwali kullimkien. L-unità utli ta’ evidenza hija l-proċess ivvalidat komplut applikat għall-komponent tal-plażma speċifikat tiegħu.