Il-blu tal-metilen u l-mikrobijoma intestinali: evidenza mill-ġrieden

Il-blu tal-metilen jista’ jibdel il-profil batteriku mkejjel fil-ħmieġ tal-ġrieden. Din is-sejba ma tistabbilixxix li jtejjeb is-saħħa intestinali tal-bniedem, jelimina selettivament batterji li jagħmlu l-ħsara, jew jittratta d-disbijożi. Id-distinzjoni kruċjali hija bejn il-bidla ta’ komunità mikrobika u t-titjib tas-saħħa tal-ospitant tagħha.

L-esperiment fil-ġrieden l-aktar direttament rilevanti għal din il-mistoqsija kejjel id-DNA batteriku u l-prestazzjoni f’labirint. Dan il-kejl jista’ jidentifika xejriet li jistħoqqilhom investigazzjoni. Waħdu, ma jistax jistabbilixxi li bidla batterika kkawżat bidla fl-imġiba jew li xi waħda minnhom tbassar serħan mis-sintomi diġestivi.

X’kejlu fil-fatt ir-riċerkaturi

Fl-esperiment ta’ Gureev u l-kollegi tal-2020, ġrieden C57Bl/6 ta’ tliet xhur irċevew il-blu tal-metilen għal erba’ ġimgħat b’15 mg/kg/day (disa’ ġrieden), b’50 mg/kg/day (tmienja), jew ilma bħala kontroll (13). It-taqsima dwar id-disinn sperimentali ma tispeċifikax b’mod ċar ir-rotta ta’ amministrazzjoni tal-mediċina jew is-sess tal-annimali.

Ittieħdu kampjuni tal-ħmieġ qabel it-trattament u kull ġimgħa. L-investigaturi użaw qPCR għal gruppi batteriċi u sekwenzjar addizzjonali ta’ amplikoni tad-DNA 16S. Matul l-aħħar ħamest ijiem, il-ġrieden għamlu jumejn ta’ adattament segwiti minn tlett ijiem ta’ ttestjar f’labirint f’forma ta’ T bi premju, b’għaxar għażliet evalwati kuljum.

Dawn huma espożizzjonijiet sperimentali fil-ġrieden, mhux rakkomandazzjonijiet ta’ dożi għall-bnedmin. Ir-rotta hija importanti meta jiġi interpretat kemm mill-mediċina jasal fl-imsaren, u rotta mhux speċifikata għandha tibqa’ mhux speċifikata. Konverżjoni skont il-piż tal-ġisem ma tistabbilixxix kors ta’ amministrazzjoni sigur jew effettiv għall-bnedmin.

Tabella tal-evidenza mill-istudju tal-mikrobijoma

Din it-tabella oriġinali tifred l-osservazzjonijiet irrappurtati mill-pretensjonijiet ulterjuri li qarrej jista’ jiltaqa’ magħhom. L-ismijiet tal-gruppi batteriċi jsegwu t-terminoloġija tal-artiklu xjentifiku.

Livell tal-evidenza	Osservazzjoni jew kejl	Limitu tal-interpretazzjoni
Profil batteriku b’espożizzjoni aktar baxxa	B’15 mg/kg/day, gruppi magħżula nbidlu; Delta/Gammaproteobacteria żdiedu fil-bidu u ma nstabux fir-raba’ ġimgħa.	Kampjun meħud fl-aħħar jista’ ma jurix bidliet preċedenti. Jekk xi ħaġa ma tinstabx jiddependi mit-test użat.
Profil batteriku b’espożizzjoni ogħla	B’50 mg/kg/day, il-medjana ta’ Proteobacteria fir-raba’ ġimgħa kienet 7.49%, meta mqabbla ma’ 1.61% fil-kontrolli.	Żieda fil-perċentwal ma tistabbilixxix żieda assoluta fiċ-ċelloli ħajjin.
Dettall tassonomiku	Is-sekwenzjar identifika bidliet fi ħdan gruppi batteriċi wesgħin.	Total stabbli għal phylum jista’ jaħbi bidliet fost il-membri tiegħu.
Imġiba tal-ospitant	L-espożizzjoni aktar baxxa tejbet il-punteġġi kkombinati fil-labirint f’forma ta’ T; l-espożizzjoni ogħla ma għamlitx dan.	Din hija prestazzjoni f’kompitu partikolari, mhux valutazzjoni komprensiva tal-konjizzjoni.
Assoċjazzjoni	Deferribacteres kellhom korrelazzjoni negattiva mal-punteġġi tat-tieni jum.	Il-korrelazzjoni ma tidentifikax organiżmu jew mekkaniżmu kawżali.
Funzjoni intestinali	Ebda kejl dirett tal-barriera intestinali jew tal-metaboliti bħala riżultat.	L-istudju ma jistax jistabbilixxi li l-permeabbiltà ġiet irrestawrata jew li l-funzjoni mikrobika tjiebet.
Ittestjar tal-kawżalità	Ebda esperiment ta’ trasferiment jew tnaqqis tal-mikrobijota.	Għadu mhux ċar jekk il-mikrobi medjawx l-effett fuq l-imġiba.

It-tabella hija maqsuma apposta skont dak li tkejjel. Tweġiba favorevoli f’ringiela waħda ma tistax timla n-nuqqas ta’ tweġiba f’oħra. Pereżempju, prestazzjoni aħjar fil-labirint ma tipprovdix l-evidenza nieqsa dwar l-infjammazzjoni intestinali.

Għaliex il-perċentwali batteriċi ma jurux x’inqatel

It-terminu abbundanza relattiva jiddeskrivi s-sehem ta’ grupp mill-komunità mkejla. Dan huwa differenti mill-għadd ta’ ċelloli batteriċi għal kull gramma ta’ ħmieġ. Fl-istudju tagħhom dwar it-tfassil kwantitattiv tal-profil tal-mikrobijoma, Vandeputte u l-kollegi wrew għaliex it-tagħbija mikrobika hija importanti meta jiġu interpretati d-differenzi bejn il-komunitajiet.

Ikkunsidra kampjun illustrattiv li fih għaxar unitajiet tal-organiżmu A u 90 ta’ organiżmi oħra. A jammonta għal 10%. Jekk A jibqa’ għaxra filwaqt li l-oħrajn jonqsu għal 40, A issa jammonta għal 20%. Is-sehem tiegħu rdoppja mingħajr ebda żieda fl-ammont assolut tiegħu. Dan l-eżempju aritmetiku mhuwiex riżultat mill-esperiment tal-blu tal-metilen.

L-istess distinzjoni tillimita l-pretensjonijiet dwar il-qtil tal-batterji. Proporzjon ibbażat fuq id-DNA mhuwiex test dirett tas-sopravivenza. Biex jistabbilixxi telf ta’ batterji vijabbli, esperiment jeħtieġ kejl li jeżamina l-vijabbiltà u jqis il-popolazzjoni totali. Biex jistabbilixxi bidla funzjonali, jeħtieġ kejl funzjonali rilevanti, bħal metabolit imkejjel minflok tbassir ibbażat biss fuq ismijiet ta’ batterji.

Tikketti wesgħin jaħbu wkoll il-varjazzjoni bijoloġika. Meta phylum sħiħ jitqies bħala ta’ benefiċċju jew ta’ ħsara, jiġu injorati l-organiżmi u l-attivitajiet responsabbli għal riżultat partikolari. Għalhekk, bidla fi proporzjon mhijiex, waħedha, dijanjosi ta’ disbijożi jew evidenza li d-disbijożi ġiet imfejqa.

Il-mikrobijoma spjega r-riżultat fil-labirint?

L-esperiment inkluda l-espożizzjoni għall-mediċina, il-profil batteriku u l-imġiba fl-istess studju. Dan huwa utli biex tiġi ġġenerata ipoteżi. L-interpretazzjoni tagħna hija li d-disinn ma jiddistingwix bejn diversi spjegazzjonijiet possibbli: effett dirett tal-mediċina fuq l-imġiba, effett mikrobiku indirett, jew risponsi separati tal-imġiba u tal-batterji għall-istess espożizzjoni.

Esperiment aktar b’saħħtu dwar il-medjazzjoni jibdel il-medjatur mikrobiku propost indipendentement mill-mediċina. Ir-riċerkaturi jistgħu jittestjaw jekk it-trasferiment ta’ komunità definita jittrasferixxix effett, jew jekk it-tneħħija ta’ mogħdija mikrobika proposta tipprevjenihx. Esperimenti bħal dawn jeħtieġu wkoll kontrolli għal dak li jiġi ttrasferit jew mibdul flimkien magħhom.

Ir-riżultat tal-imġiba jeħtieġ interpretazzjoni daqstant bir-reqqa. Labirint bi premju jitlob lil annimal jagħmel għażliet taħt kundizzjonijiet speċifiċi. Bħala prinċipju ta’ valutazzjoni, il-prestazzjoni tista’ tiddependi fuq ir-rieda li jesplora, il-moviment, il-motivazzjoni għall-premju u t-tagħlim. Meta riżultat jissejjaħ “konjizzjoni aħjar”, dawn id-distinzjonijiet jiġu ssimplifikati żżejjed. Il-kompitu mkejjel direttament jibqa’ d-deskrizzjoni l-aktar informattiva.

Il-blu tal-metilen joqtol il-batterji intestinali?

Il-blu tal-metilen jista’ jikkontribwixxi għal attività antimikrobika taħt kundizzjonijiet definiti fil-laboratorju. Dan ma jispeċifikax x’jiġri mill-komunità intestinali kollha wara espożizzjoni orali.

Pereżempju, studju fil-laboratorju dwar l-inattivazzjoni fotodinamika tal-batterji ittestja E. coli u S. aureus b’fotosensibilizzaturi u illuminazzjoni kkontrollata. Evalwa l-formazzjoni tal-kolonji u l-ħsara lill-membrani, u inkluda kontrolli korrispondenti fid-dlam. Id-dawl jew il-fotosensibilizzatur waħdu ma kellu ebda effett taħt dawk il-kundizzjonijiet ittestjati.

Dawk il-kontrolli jwieġbu mistoqsija kawżali importanti fi ħdan dak l-esperiment: x’kontribut għamlet il-kombinazzjoni? Meta tinbela’ sustanza, dan ma jirriproduċix l-illuminazzjoni ta’ sospensjoni batterika. Min-naħa l-oħra, riżultat negattiv f’kontroll fid-dlam f’konċentrazzjoni waħda u għal tul ta’ żmien wieħed ma jipprovax li kull espożizzjoni mingħajr illuminazzjoni hija bijoloġikament inattiva. Il-ħarsa ġenerali lejn ir-riċerka antimikrobika tispjega dawn id-distinzjonijiet li jiddependu mill-kundizzjonijiet.

Studju tal-komunità intestinali lanqas ma jista’ jistabbilixxi trattament għal infezzjoni partikolari. L-identifikazzjoni tal-organiżmu u d-dimostrazzjoni ta’ riżultat kliniku xieraq huma kompiti separati, anki meta jiġu evalwati pretensjonijiet dwar it-trattament tal-parassiti.

Xi jfisser dan għall-pretensjonijiet dwar is-saħħa intestinali tal-bniedem

It-tfittxija mmirata fil-letteratura għal dan l-artiklu ma identifikatx prova kkontrollata fuq il-mikrobijoma intestinali tal-bniedem li tistabbilixxi benefiċċju tal-blu tal-metilen għas-saħħa intestinali. Din hija stqarrija dwar l-evidenza li nstabet, mhux prova li ma jeżisti ebda studju rilevanti. Ir-riċerka fuq il-bnedmin dwar it-trattament fotodinamiku lokali fil-ħalq hija kwistjoni differenti: pereżempju, prova dwar l-alitożi b’45 persuna ħadet kampjuni tal-kisja tal-ilsien u kejlet il-gassijiet fin-nifs, mhux is-saħħa intestinali.

Biex tappoġġa pretensjoni dwar is-saħħa intestinali tal-bniedem, riċerka teħtieġ popolazzjoni definita, formulazzjoni u rotta ta’ amministrazzjoni riproduċibbli, komparatur xieraq, u riżultat li jkun importanti għal dik il-popolazzjoni. Profil mikrobiku jista’ jgħin biex jiġi spjegat ir-riżultat, iżda t-titjib tas-sintomi, il-kontroll tal-mard u l-effetti avversi xorta jkunu jeħtieġu valutazzjoni.

Erba’ ġimgħat f’mudell wieħed tal-ġrieden lanqas ma jistgħu jistabbilixxu l-konsegwenzi ta’ xhur jew snin ta’ użu. Ir-reviżjoni tal-espożizzjoni ta’ kuljum u fit-tul għall-blu tal-metilen tifred it-tul tat-trattament mill-osservazzjoni u mill-kejl tas-sigurtà. Għall-kuntest kliniku usa’, ikkonsulta x’tappoġġa r-riċerka fuq il-bnedmin.